專利名稱：含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的保健酒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于保健品領(lǐng)域。
文獻(xiàn)Walter Karrerr，Birkhauser Verlag，Bassel undstuttgart(1958)，P.652，NO1640公開了二氫楊梅素的結(jié)構(gòu)式， 但是沒有對(duì)二氫楊梅素的活性進(jìn)行研究。楊梅素是一種已知的化合物，其結(jié)構(gòu)式是 。迄今為止沒有人公開過含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物及其用途。
本發(fā)明的目的是提供一種新的組合物，其含有二氫楊梅素和楊梅素，其中二氫楊梅素含量是20％至98％重量比，楊梅素含量是2％至80％重量比。本發(fā)明組合物中還可以含有一種或幾種選自下面的成分楊梅甙，沒食子酸和/或茶多酚。楊梅甙的含量優(yōu)選占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，沒食子酸的含量優(yōu)選是占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％，茶多酚的含量優(yōu)選是占二氫楊梅素和楊梅素總重量的0-50wt％。
本申請(qǐng)人令人驚奇地發(fā)現(xiàn)含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物保健品領(lǐng)域具有廣泛的用途。
本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物具有降血糖和降血脂作用，具有預(yù)防和/或恢復(fù)酒精性肝損傷的功能，可以作為添加劑加到各種類型的酒中，其與酒相匹配，能夠不改變酒的原來的色度和清澈度和味覺。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的方法。本發(fā)明的組合物可以通過將所述組分單體按比例混合制備，也可以從蛇葡萄屬植物中提取。所述蛇葡萄屬植物包括粵蛇葡萄，棟葉玉葡萄，顯齒蛇葡萄，大葉蛇葡萄，白蘞，東北蛇葡萄和山葡萄。所述提取方法可以是通過各種溶劑(水和/或有機(jī)溶劑)煎煮葡萄科植物，煎煮一次或多次，煎煮液經(jīng)濃縮冷卻，靜置過夜，檢測(cè)沉淀與上清的藥效成分，取具有活性的沉淀和/或經(jīng)進(jìn)一步硅膠吸附后得到本發(fā)明組合物。煎煮所用的溶劑優(yōu)選水，醇類，酯類，酮類，醚類和強(qiáng)極性有機(jī)溶劑.更優(yōu)選低級(jí)鏈烷醇，低級(jí)脂肪酸酯，具有3-12個(gè)碳原子的酮和醚和/或水，最優(yōu)選甲醇，乙醇，丙醇，異丙醇，正丁醇，異丁醇，仲丁醇，叔丁醇，乙酸乙酯，乙酸甲酯，甲酸乙酯，丙酮，甲基乙基酮，乙醚，甲基乙基醚，甲基叔丁基醚，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，二甲亞砜，N，N-二甲基甲酰胺和/或水等等。分離使用的吸附劑可以是硅膠。
試驗(yàn)證明本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物具有降血糖和降血脂作用，具有預(yù)防和/或恢復(fù)酒精性肝損傷的功能，具有保肝護(hù)肝，增強(qiáng)免疫系統(tǒng)免疫力的功能。本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物可以作為添加劑加到各種類型的酒中，制成保健酒。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑的酒及其制備方法。酒包括酒精酒和果汁酒。酒中含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的含量可以是0.1-53％w/v(重量體積百分比(克/升)，下文相同)，優(yōu)選是2％w/v至含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在各種酒中的溶解飽和度的量?？梢灾苯訉⑺隽康暮卸錀蠲匪睾蜅蠲匪氐慕M合物加到酒中攪拌均勻，制得含有含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑的酒。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑在制備各種酒中的用途。
通過下面的實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明。但是應(yīng)該理解這些實(shí)施例只是說明本發(fā)明，而不是在任何方面限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素80g，楊梅素20g，上述組分在混合機(jī)中混合后得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?8g，楊梅素2g，上述組分在混合機(jī)中混合后得混合物。或者取二氫楊梅素20g，楊梅素80g，上述組分在混合機(jī)中混合后得混合物。
實(shí)施例2從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素20g，楊梅素80g，楊梅甙2.5g，沒食子酸2.5g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機(jī)中混合得混合物。或者取二氫楊梅素98g，楊梅素2g，楊梅甙2.5g，沒食子酸2.5g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機(jī)中混合得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?5g，楊梅素15g，楊梅甙25g，沒食子酸2g，上述組分在混合機(jī)中混合得混合物?；蛘呷《錀蠲匪?0g，楊梅素50g，楊梅甙25g，茶多酚2.5g，上述組分在混合機(jī)中混合得混合物。或者取二氫楊梅素70g，楊梅素30g，楊梅甙5g，上述組分在混合機(jī)中混合得混合物。
實(shí)施例3從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物分別取實(shí)施例1的第一種組合物(或?qū)嵤├?的第三種組合物)30g，乳糖53g，羧甲基纖維素鈉1.5g，硬脂酸鎂0.5g，50％乙醇5ml，上述組分在混合機(jī)中混合后壓制成片。
實(shí)施例4從二氫楊梅素和楊梅素晶體制備本發(fā)明組合物取二氫楊梅素115g，楊梅素15g，糖粉345g，糊精145g，乙醇5ml，上述組分混合后干燥，得到?jīng)_劑。
實(shí)施例5從顯齒蛇葡萄植物制備本發(fā)明組合物取顯齒蛇葡萄干燥嫩莖葉2kg，用95％乙醇(醫(yī)用乙醇)回流提取兩次，每次2小時(shí)，過濾，合并濾液，蒸發(fā)至干，加入1200毫升85℃熱水，使浸膏充分溶解，濾去黑色不溶物，濾液中加入硅膠(100目)200g，將濾液加熱至60℃，乘熱過濾，將濾液冷卻至室溫，沉淀，靜置過夜，得到黃色沉淀，產(chǎn)率11.2％。其中二氫楊梅素含量74.8％重量比，楊梅素含量21.1％重量比，楊梅甙的含量是2.8％重量比，沒食子酸的含量是1.3％重量比。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.72，Rf楊梅甙＝0.54，Rf二氫楊梅素＝0.50，Rf楊梅素＝0.21。
或者取顯齒蛇葡萄干燥嫩莖葉2kg，用95％乙醇(醫(yī)用乙醇)回流提取兩次，每次2小時(shí)，過濾，合并濾液，蒸發(fā)至干，加入1200毫升85℃熱水，使浸膏充分溶解，濾去黑色不溶物，濾液用等體積乙酸乙酯萃取兩次，合并乙酸乙酯溶液，蒸發(fā)至干，得到黃色沉淀，產(chǎn)率10.25％。其中二氫楊梅素含量76％重量比，楊梅素含量18％重量比，楊梅甙的含量是3.0％重量比，沒食子酸的含量是2％重量比，其余為顯齒蛇葡萄植物中Rf5＝0.41的成分。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.72，Rf楊梅甙＝0.54，Rf二氫楊梅素＝0.50，Rf楊梅素＝0.21，Rf5＝0.41。
實(shí)施例6從東北蛇葡萄植物制備本發(fā)明組合物室溫下，將收集來的東北蛇葡萄1000克洗去塵土，加入4000毫升水，超聲提取0.5小時(shí)，過濾，殘?jiān)偌尤?000毫升丙醇，再超聲提取0.5小時(shí)，再過濾，濾液合并，濃縮至2毫升，加入500毫升100℃熱水，冷卻到60℃，靜置，過濾，。濾液用硅膠(100目)100g吸附，將濾液加熱至70℃，乘熱過濾，將濾液冷卻至室溫，沉淀，靜置過夜，得到黃色沉淀，產(chǎn)率10.3％。其中二氫楊梅素含量58％重量比，楊梅素含量14％重量比，楊梅甙的含量是1.4％重量比，沒食子酸的含量是1.7％重量比，其余為東北蛇葡萄植物中Rf5＝0.43的成分。薄層色譜分析用聚酰胺薄層層析，規(guī)格8×8cm，展開劑甲醇，顯色劑4％三氯化鐵-乙醇溶液，Rf沒食子酸＝0.76，Rf楊梅甙＝0.55，Rf 二氫楊梅素＝0.54，Rf楊梅素＝0.22，Rf5＝0.43。
實(shí)例7 本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物降血糖的試驗(yàn)1.材料與方法1.1.受試物實(shí)施例5獲得的第一種組合物1.2.試驗(yàn)動(dòng)物和檢測(cè)條件選用健康清潔級(jí)雌性昆明種小鼠，體重24±2g，動(dòng)物飼料執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)GB14924-94。檢測(cè)環(huán)境條件，溫度范圍20-25℃，相對(duì)濕度范圍40-70％。
1.3.劑量選擇試驗(yàn)分正常動(dòng)物和高血糖模型動(dòng)物兩批進(jìn)行，各設(shè)1個(gè)對(duì)照組(蒸餾水)和澤生牌血純片0.25、0.50、1.50g/kg劑量組，分別相當(dāng)于人推薦攝入量的5、10和30倍，灌胃量均為0.1ml/10g。
1.4.主要儀器與試劑四氧嘧啶(Alloxan)Sigma公司；50％葡萄糖注射液鹽城新曹制藥廠。
SUPER GLUCOCARD II GT-1640型超級(jí)血糖測(cè)定儀日本京者第一科學(xué)株式會(huì)社生產(chǎn)GLUCOCARD血糖試紙日本京者第一科學(xué)株式會(huì)社生產(chǎn)。
1.5.實(shí)驗(yàn)方法1.5.1.正常動(dòng)物禁食5小時(shí)后，取小鼠測(cè)血糖。篩檢空腹血糖在正常范圍內(nèi)的小鼠40只，按血糖水平隨機(jī)分為四組，每組10只，分別為正常對(duì)照組和樣品各劑量組(組間差不大于1.1mmol/L)》1.5.2.高血糖模型動(dòng)物嚴(yán)格禁食24小時(shí)后，小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶50mg/kgBW，6天后禁食5小時(shí)，測(cè)血糖。篩檢空腹血糖值＞10mmol/L的小鼠40辦，按血糖水平隨機(jī)分為四組，每組10只，分別為模型對(duì)照組和樣品各劑量組(組間差不大于1.1mmol/L)。
1.5.3.空腹血糖和糖耐量的測(cè)定按設(shè)計(jì)劑量對(duì)小鼠連續(xù)灌胃給受試物30天，然后禁食5小時(shí)，給予葡萄糖1.5g/kgBW灌胃，于0、0.5、2.0小時(shí)三時(shí)相分別測(cè)定血糖值。
1.6.統(tǒng)計(jì)方法全部實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS/PC軟件包(單因素方差分析)在微機(jī)上處理。
2.結(jié)果2.1.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠體重的影響表1 各組正常小鼠的初始體重、中期體重、結(jié)束體重組別 初始體重 中期體重 結(jié)束體重動(dòng)物數(shù) 體重(g) 動(dòng)物數(shù) 體重(g) 動(dòng)物數(shù) 體重(g)正常對(duì)照 10 23.4±1.0 10 30.5±1.5 10 32.4±1.6受 0.25g/kg 10 23.7±1.0 10 31.3±1.3 10 33.0±1.7試 0.50g/kg 10 23.6±1.1 10 30.8±1.7 10 32.2±1.8物 1.50g/kg 10 23.6±1.3 10 31.0±1.4 10 33.7±1.7F值 0.115 0.475 0.353P值 0.951 0.701 0.787注受試物各劑量組小鼠體重在各試驗(yàn)期和正常對(duì)照組比較，差異均無顯著意義(方差分析，P＞0.05)2.2.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠空腹血糖的影響表2 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠空腹血糖的影響動(dòng)物數(shù)空腹血糖值(mmol/L)組別差值(只) 試驗(yàn)前試驗(yàn)后正常對(duì)照 10 4.7±0.5 4.6±0.7 0.1±06受 0.25g/kg 10 4.4±0.7 4.3±0.8 0.1±1.2試 0.50g/kg 10 4.6±0.9 4.4±0.9 0.2±1.0物 1.50g/kg 10 4.5±0.8 4.5±0.8 0.0±0.5F值 0.3880.302 0.099P值 0.7620.82 0.960注受試物各劑量組空腹血糖值和正常對(duì)照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。
2.3.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠餐后血糖的影響表3 二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠餐后血糖的影響組別 動(dòng)物數(shù) 葡萄糖0h 血糖值(mmol/L)(只)(g/kgBW) 0.5h 2h正常對(duì)照 10 1.5 4.6±0.7 10.4±1.2 5.5±0.7受0.25g/kg10 1.5 4.3±0.8 10.8±1.0 5.2±1.0試0.50g/kg10 1.5 4.4±0.9 10.5±1.6 5.0±1.2物1.50g/kg10 1.5 4.5±0.8 10.5±1.4 5.2±1.9F值 0.302 0.2300.529P值 0.824 0.8750.665注受試物各劑量組餐后血糖值和正常對(duì)照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。
2.4.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠糖耐量的影響表4 二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)正常小鼠糖耐量的影響組別動(dòng)物數(shù)血糖升高及降低幅度(mmol/L)(只) 0.5h-0h 0.5h-2h正常對(duì)照105.8±0.94.8±0.9受0.25g/kg 106.5±0.65.6±1.2試0.50g/kg 106.1±1.05.5±1.0物1.50g/kg 106.0±1.45.3±1.3F值 0.998 1.018P值 0.405 0.396注受試物各劑量組糖耐量值和正常對(duì)照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。
2.5.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)引起的高血糖小鼠體重的影響表5 各組高血糖模型小鼠的初始體重、中期體重、結(jié)束體重組別 初始體重 中期體重結(jié)束體重動(dòng)物數(shù) 體重(g)動(dòng)物數(shù) 體重(g)動(dòng)物數(shù)體重(g)正常對(duì)照 10 24.3±1.3 10 30.7±2.0 1031.2±1.9受 0.25g/kg 10 24.5±2.7 10 31.8±2.2 1032.4±2.8試 0.50g/kg 10 24.0±1.4 10 31.7±2.9 1032.6±2.9物 1.50g/kg 10 23.8±1.5 10 30.9±1.9 1030.8±1.7F值 0.271 0.5761.418P值 0.846 0.6340.253注受試物各劑量組各階段體重和模型對(duì)照組比較，差異均無顯著性意義(方差分析，P＞0.05)。
2.6.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)引起的高血糖小鼠空腹血糖的影響表6 二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)高血糖模型小鼠空腹血糖的影響動(dòng)物數(shù) 空腹血糖值(mmol/L)組別 差值(只) 試驗(yàn)前 試驗(yàn)后正常對(duì)照 1022.9±3.320.4±5.12.5±4.2受 0.25g/kg1022.9±3.013.2±4.1* 9.7±3.7*試 0.50g/kg1022.4±2.515.3±6.47.2±4.7物 1.50g/kg1022.5±3.517.1±6.35.4±6.1F值0.0683.0584.137P值0.9770.0410.0123注與模型對(duì)照組比較，*P＞0.05(q檢驗(yàn))受試物低劑量組試驗(yàn)后空腹血糖值及前后空腹血糖差值與模型對(duì)照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。
2.7.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)引起的高血糖小鼠餐后血糖的影響表7 二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)高血糖型小鼠餐后血糖的影響組別 動(dòng)物數(shù) 葡萄糖 0h血糖值(mmol/L)(只)(g/kgBW) 0.5h2h正常對(duì)照 10 1.5 20.4±5.1 31.2±2.7 24.7±3.7受 0.25g/kg 10 1.5 13.2±4.1*26.4±4.2 16.5±6.6*試 0.50g/kg 10 1.5 15.3±6.4 27.1±5.7 16.9±7.2*物 1.50g/kg 10 1.5 17.1±6.3 28.4±4.3 20.2±7.2F值 3.058 2.393 3.536P值 0.041 0.085 0.024注受試物低劑組餐后0h血糖值和低中劑量組餐后2h血糖值與模型對(duì)照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。
2.8.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)引起的高血糖小鼠糖耐量的影響表8 二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)高血糖模型小鼠糖耐量的影響組別 動(dòng)物數(shù)血糖升高及降低幅度(mmol/L)(只)0.5h-0h 0.5h-2h正常對(duì)照 1010.8±3.2 6.5±2.9受 0.25g/kg 1013.3±1.7 9.9±3.0試 0.50g/kg 1011.8±3.6 10.1±3.7
1.50g/kg 10 11.3±2.9 8.3±4.2F值 1.301 2.255P值 0.289 0.099注受試物各劑量組糖耐量值和模型對(duì)照組比較，差異均有顯著(方差分析，P＞0.05)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，二氫楊梅素和楊梅素的組合物具有調(diào)節(jié)血糖作用。
用實(shí)施例1的第一種組合物、實(shí)施例2的第三種組合物、實(shí)施例5的第二種組合物或?qū)嵤├?的組合物進(jìn)行相同的試驗(yàn)，得到了大致相同的結(jié)果。
實(shí)施例8本發(fā)明的含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物降血脂的試驗(yàn)將動(dòng)物隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組、陽性對(duì)照組、模型對(duì)照組、提取液組。每組10只小鼠，一日一次，連續(xù)給藥10天，正常對(duì)照組不給任何藥。其余各組小鼠均給高脂乳劑0.5ml/只，形成實(shí)驗(yàn)性高血脂，于10天用藥后禁食過夜，次日從小鼠眼眶取靜脈血，按酶法檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。結(jié)果表明，模型對(duì)照組血清TC、TG值明顯升高，HDL-C值下降，與模型對(duì)照比較，實(shí)施例5的第一種組合物組能明顯降低血清TC、TG值，還使HDL-C略有升高，說明此提取物能抑制高脂乳劑引起的小鼠血脂升高，具有降脂作用。用實(shí)施例1的第一種組合物、實(shí)施例2的第三種組合物、實(shí)施例5的第二種組合物或?qū)嵤├?的組合物進(jìn)行相同的試驗(yàn)，得到相同的結(jié)果。
1.材料和方法1.1.受試物實(shí)施例5獲得的第一種組合物，將受試物用蒸餾水配制成所需濃度的渾濁液供試驗(yàn)用。
1.2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)Wistar大鼠，體重170-190g，雌性，共55只(5只備用)。實(shí)驗(yàn)溫度23-25℃，相對(duì)濕度65-70％。
1.3.飼料1.3.1.普通基礎(chǔ)飼料配方略。(湖北省預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心配制的Wistar純鼠料)。
1.4.劑量分組實(shí)驗(yàn)分為五個(gè)組，即正常對(duì)照組、高脂模型對(duì)照組和受試物低、中、高三個(gè)劑量組，劑量分別為0.5、1.0、1.5g/kg.bw，相當(dāng)于生產(chǎn)廠家推薦人體日攝入量3g/60kg.bw的10、20、30倍。
1.5.實(shí)驗(yàn)方法大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后開始實(shí)驗(yàn)。取大鼠尾血，測(cè)定血清總膽固醇(TCO)、甘油三脂(TGO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c0)基礎(chǔ)值。根據(jù)TCO水平，將大鼠隨機(jī)分成五組，每組10只動(dòng)物，即低、中、高劑量組，正常對(duì)照組和高脂模型對(duì)照組。除正常對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料外，其余各組均給予高脂飼料。三個(gè)受試物劑量組按1.0ml/100g.bw的容量經(jīng)口灌胃給予，正常對(duì)照組和高脂模型對(duì)照組自由飲水進(jìn)食。連續(xù)給予30天，于灌胃第30天檢測(cè)TC，TG，HDL-C值。
1.6.主要儀器與試劑SABA-18型全自動(dòng)生化分析儀(意大利產(chǎn))，標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控血清及相應(yīng)試劑盒均由上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司生產(chǎn)。
1.7.數(shù)據(jù)處理采用STATA統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析2.結(jié)果2.1.第一種組合物對(duì)高脂模型動(dòng)物體重的影響從表9可見，與模型對(duì)照組比較，低、中、高劑量組在第四周時(shí)大鼠體重均低于模型對(duì)照組，低、中、高劑量組與模型對(duì)照組比較差異有顯著性(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)。與正常對(duì)照組比較，低、中、高劑量組第四周體重均高于正常對(duì)照組，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異無顯著性。
表9 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)高血脂模型大鼠體重的影響(g，x±s)劑量動(dòng)物數(shù) 體重g/kg.bw (只) 始重第一周 第二周 第三周 終重正常對(duì)照10181.4±2.8 202.2±6.2 219.6±4.7 226.2±3.7 230.7±4.0**模型對(duì)照10181.7±3.5 208.7±2.6 224.5±4.4 231.4±3.5 237.6±3.70.5 10182.4±4.1 208.1±2.6 221.7±43.4 227.9±3.4 233.6±3.0**1.0 10183.1±2.8 207.0±2.5 221.5±2.4 227.7±2.0 233.2±2.1**1.5 10182.3±2.5 208.3±2.8 220.3±3.2 226.2±3.8 232.7±3.1****與模型對(duì)照組比較P＜0.012.2.第一種組合物對(duì)大鼠總膽固醇含量的影響從表10可見，與模型對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)中、高劑量組總膽固醇含量在實(shí)驗(yàn)期間下降明顯，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有顯著性(p＜0.05、P＜0.01)。
表10 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)大鼠總膽固醇含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動(dòng)物數(shù) 總膽固醇g/kg.bw(只) 試驗(yàn)前P值 試驗(yàn)后 P值正常對(duì)照 101.80±0.070.786 1.81±0.16 0.000模型對(duì)照 101.81±0.11- 3.72±0.34 -
0.5101.83±0.10 0.803 3.35±0.55 0.2691.0101.82±0.10 0.928 3.10±0.54* 0.0101.5101.84±0.11 0.634 2.86±0.57**0.001*與模型對(duì)照組比較P＜0.05，**與模型對(duì)照組比較P＜0.012.3.第一種組合物對(duì)大鼠甘油三酯含量的影響從表11可見，與模型對(duì)照組比較，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)低、中、高劑量組甘油三酯含量下降明顯，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有顯著性(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)。
表11含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)大鼠甘油三酯含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動(dòng)物數(shù)總膽固醇g/kg.bw(只) 試驗(yàn)前P值 試驗(yàn)后 P值正常對(duì)照 10 1.24±0.250.828 1.29±0.11 0.000模型對(duì)照 10 1.26±0.27- 2.30±0.47 -0.510 1.23±0.190.788 1.90±0.29*0.0111.010 1.24±0.180.820 1.89±0.24** 0.0091.510 1.21±0.150.584 1.86±0.12** 0.008*與模型對(duì)照組比較P＜0.05，**與模型對(duì)照組比較P＜0.012.4.一種組合物對(duì)大鼠高密度脂蛋白膽固醇含量的影響從表12可見，與模型對(duì)照組比較，低、中、高劑量組對(duì)高密度脂蛋白膽固醇有升高作用，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有顯著性(P＜0.05)。
表12 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)大鼠高密度脂蛋白膽固醇含量的影響(mmol/L，x±s)劑量 動(dòng)物數(shù) 高密度脂蛋白膽固醇g/kg.bw (只) 試驗(yàn)前 P值 試驗(yàn)后 P值正常對(duì)照 101.13±0.12 0.872 1.06±0.11 0.000模型對(duì)照 101.12±0.18 - 0.84±0.11 -0.5 101.10±0.08 0.644 0.94±0.10* 0.0271.0 101.13±0.09 0.841 0.93±0.07* 0.0421.5 101.14±0.05 0.733 0.95±0.08* 0.015*與模型對(duì)照組比較P＜0.052.5.第一種組合物對(duì)大鼠血脂水平的影響本實(shí)驗(yàn)方法為高脂飼料與受試物同時(shí)給予，屬預(yù)防性，故TG、TC下降及HDL-c上升值均與高脂模型對(duì)照組比較。由表13可見，中、高劑量組總膽固醇含量下降幅度分別為16.7％、23.1％，低、中、高劑量組甘油三酯含量下降幅度分別為17.4％、17.8％、19.1％，低、中、高劑量組高密度脂蛋白膽固醇含量升高值為4.64、5.03、4.26mg/dl。
表13 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)大鼠血脂水平的影響劑量 動(dòng)物數(shù)TC TG HDL-Cg/kg.bw (只) (％) (％) (mg/dl)0.5 1010.3 17.4 4.641.0 1016.7 17.8 5.031.5 1023.1 19.1 4.26判斷標(biāo)準(zhǔn) 下降＞10％ 下降＞15％ 升高4mg/dl注HDL-c升高值(mg/dl)是mmol/L×38.7＝mg/dl換算結(jié)果用實(shí)施例1的第一種組合物、實(shí)施例2的第三種組合物、實(shí)施例5的第二種組合物或?qū)嵤├?的組合物進(jìn)行相同的試驗(yàn)，得到了大致相同的結(jié)果。實(shí)施例9本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物預(yù)防和/或恢復(fù)酒精性肝損傷的功能1、材料與方法1.1試品本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物，見實(shí)施例5的第一種組合物。
1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年雄性小鼠(18-22克)，每組10只。
1.3實(shí)驗(yàn)方法和步驟1.3.1劑量分組及受試樣品給予時(shí)間實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照組、模型對(duì)照組和受試品三個(gè)劑量組(分別為10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg，分別用無水乙醇配制，濃度分別為0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml)，用無水乙醇(分析純)造成肝損傷模型，無水乙醇濃度為50％(以蒸餾水稀釋)，小鼠灌胃12-14ml/kgBW(折合乙醇的劑量為6000-7000mg/kgBW)。受試樣品給予時(shí)間為30天。
1.3.2給予受試樣品的途徑經(jīng)口灌胃給予受試樣品，并記錄每只動(dòng)物的飼料攝入量或飲水量。
1.3.3實(shí)驗(yàn)步驟受試品三個(gè)劑量組每日經(jīng)口灌胃給予受試樣品的乙醇溶液0.2ml，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水。動(dòng)物每周稱重兩次。給予受試樣品結(jié)束時(shí)將模型對(duì)照組及各樣品組一次灌胃給予50％乙醇12ml/kgBW，空白對(duì)照組給蒸餾水，禁食15小時(shí)處死動(dòng)物，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)及病理組織學(xué)檢查。
1.3.4檢測(cè)指標(biāo)肝組織中丙二醛(MDA) 還原型谷胱甘肽(GSH)甘油三酯(TG)的含量
1.4肝勻漿中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)測(cè)定方法1.4.1原理MDA(malondiadehycle)是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的終產(chǎn)物之一，檢測(cè)其含量可間接估計(jì)脂質(zhì)過氧化的程度，MDA與硫代巴比妥酸在酸性條件下共熱，形成粉紅色復(fù)合物，吸收峰在535nm，具此可測(cè)得MDA的含量。
1.4.2儀器與試劑儀品721分光光度計(jì)、微量加樣品、恒溫水浴鍋、普通離心機(jī)、混旋器、具塞離心管、組織勻漿器試劑0.2M乙酸鹽緩沖液PH3.50.2M乙酸溶液 185ml0.2M乙酸鈉溶液15ml1mmol/L四乙氧基丙烷(貯備液，4℃保存3個(gè)月)，臨用前用水稀釋成40nmol/ml8.1％十二烷基硫酸鈉SDS0.8％硫代巴比妥酸TBA0.2M磷酸鹽緩沖液PH7.40.2M磷酸氫二鈉1920ml0.2M磷酸二氫鉀480ml1.4.3實(shí)驗(yàn)步驟1.4.3.1樣品制備組織勻漿樣品取一定量的所需臟器，生理鹽水沖洗、拭干、稱重、剪碎，置勻漿器中，加入0.2M磷酸鹽緩沖液，以2000r/min勻?qū)?0s，間歇30s，反復(fù)進(jìn)行3次，制成5％組織勻?qū)?W/V)，3000r/min離心5~10min，取上清液待測(cè)。
1.4.3.2樣品測(cè)定表14試劑 空白管 樣品管標(biāo)準(zhǔn)管5％組織勻漿 0.1ml40nmol/ml四乙氧基丙烷 0.1ml8.1％SDS 0.2ml0.2ml 0.2ml0.2M乙酸鹽緩沖液 1.5ml1.5ml 1.5ml0.8％TBA 1.5ml1.5ml 1.5mlH2O 0.8ml0.7ml 0.7ml混勻，避光沸水浴60min，流水冷卻，于532nm比色1.4.3.3計(jì)算 A空白管吸光度
B樣品熒吸光度F四乙氧基丙烷吸光度C四乙氧基丙烷濃度K稀釋倍數(shù)1.4.3.4數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定數(shù)據(jù)采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值/F0.05，結(jié)論各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果判定在模型成立的前提下，受試樣品組的MDA含量與模型對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定該指標(biāo)結(jié)果陽性。
1.5.肝勻漿還原型谷胱甘肽(GSH)測(cè)定方法1.5.1原理GSH和5，5′-二硫?qū)ο趸姿?DTNB)反應(yīng)在GSH-Px催化下可生成黃色的5-硫代2-硝基甲酸陽離子，于423nm波長有最大吸收峰，測(cè)定該離子濃度，即可計(jì)算GSH的含量。
1.5.2試劑0.9％生理鹽水4％磺基水楊酸溶液0.1mol/L PBS溶液(pH＝8.0)Na2HPO413.452gKH2PO40.722g加蒸餾水至1000ml0.004％DTNB溶液稱取DTNB 40mg溶于1000ml的0.1mol/L PBS溶液(pH＝8.0)中。
疊氮納緩沖液NaN316.25mgEDTA-NA27.44mgNa2HPO41.732gNaH2PO41.076g加蒸餾水至1000ml，用少量HCl、NaOH調(diào)pH7.0，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取還原型GSH15.4mg，加疊氮納緩沖液至50ml，終濃度為1mmol/L1.5.3方法1.5.3.1樣品測(cè)定取肝臟0.5g加生理鹽水5ml充分研磨成細(xì)漿(10％肝勻漿)，混勻后取漿液0.5ml加4％磺基水楊酸0.5ml混勻，室溫下3000rpm離心10分鐘，取上清液即為樣品。
表15測(cè)定管 空白管樣品0.5ml -4％磺基水楊酸 - 0.5mlDTNB4.5ml 4.5ml混勻，室溫放置10分鐘后，412nm處測(cè)定吸光度。
1.5.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線表161 23 4 5 6Immol/L(ml) 0 0.05 0.100.150.20 0.25生理鹽水(ml)0.50 0.45 0.400.350.20 0.25DTNB(ml)4.50 4.50 4.504.504.50 4.50GSH量(μmol/L) 0 100 200 300 4005001.5.3.3計(jì)算樣品GSH含量(μmol/g肝組織)＝對(duì)應(yīng)曲線濃度值((μmol/L)÷50g/L1.5.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定數(shù)據(jù)采用方差分析，但需方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值＜F0.05，結(jié)論各組均數(shù)間差異無顯著性；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果判定在模型成立的前提下，受試樣品組的還原型GSH含量與模型對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定該指標(biāo)結(jié)果陽性。
1.6肝勻漿中甘油三脂(TG)測(cè)定方法1.6.1測(cè)定方法采用甘油三脂測(cè)定試劑盒(甘油磷酸氧化酶過氧化物酶法)測(cè)定10％肝勻漿中的甘油三脂含量。與血清甘油三脂測(cè)定方法相同，以等量10％肝勻漿替代血清按操作說明進(jìn)行操作，測(cè)定結(jié)果以mmol/g肝重表示。
1.6.2數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定數(shù)據(jù)采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值＜F0.05，結(jié)論各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≥0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果判定在模型成立的前提下，受試樣品組的TG與模型對(duì)照組比較，差異有顯著性，判定該指標(biāo)結(jié)果陽性。
1.7肝臟病理組織學(xué)變化，診斷標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)果判定1.7.1實(shí)驗(yàn)材料從肝左葉中部做橫切面取材，冰凍切片，蘇丹III染色。
1.7.2鏡檢從肝臟的一端視野開始記錄細(xì)胞的病理變化，用40倍物鏡連續(xù)觀察整個(gè)組織切片。主要觀察脂滴在肝臟的分布、范圍和面積。
1.7.3評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)肝細(xì)胞內(nèi)脂滴散在，稀少0分含脂滴的肝細(xì)胞不超過1/4 1分含脂滴的肝細(xì)胞不超過1/2 2分含脂滴的肝細(xì)胞不超過3/4 3分肝組織幾乎被脂滴代替 4分1.7.4數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差劑性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值＜F0.05，結(jié)論各組均數(shù)間差異無顯著性F值≥F0.05，P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兪寝D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果判定在模型成立的前提下，模型對(duì)照組與受試樣品任何一個(gè)劑量組之間，脂肪變性減輕，有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異，可判斷為陽性結(jié)果。
1.8結(jié)果判定滿足任一條件，可判定受試樣品具有對(duì)酒精性肝扣內(nèi)務(wù)有輔助保護(hù)作用1.8.1肝臟MDA、還原型GSH和TG三項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)結(jié)果陽性。
1.8.2.肝臟MDA、還原型GSH和TG三項(xiàng)指標(biāo)中任兩項(xiàng)指標(biāo)陽性和病理組織學(xué)檢查結(jié)果陽性。
2.結(jié)果2.1肝勻漿中過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)由表17可知，損傷對(duì)照組與陰性對(duì)照組相比，肝組織中MDA含量明顯升高，差異有極顯著性(P＜0.01)；受試物各劑量組MDA含量比損傷對(duì)照組降低，且有極顯著性差異(P＜0.01)。說明受試物可降低肝組織中MDA含量。
2.2肝勻漿還原型谷胱甘肽(GSH)由表17可知，損傷對(duì)照組與陰性組相比GSH含量明顯降低，差異有極顯著性(P＜0.01)。受試物各劑量組GSH含量高于損傷對(duì)照組，差異有顯著性(P＜0.01)。說明受試物可有效阻止GSH的耗竭。
2.3肝勻漿中甘油三脂(TG)由表17可知，損傷對(duì)照組與陰性對(duì)照比較，肝臟TG含量明顯升高，差異有極顯著性(P＜0.01)。受試物各劑量組TG含量明顯低于損傷對(duì)照組，差異有顯著性(P＜0.05)。說明受試物可降低肝臟中TG的含量。
表17 含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)丙二醛、還原型谷胱甘肽和甘油三脂的影響
2.4肝臟病理組織學(xué)檢查取肝臟(左大葉)10％福爾馬林固定，冰凍切片蘇丹III脂肪染色，蘇木精復(fù)染，封片，鏡檢，結(jié)果見表18。
1)陰性對(duì)照組動(dòng)物有3例見肝細(xì)胞出現(xiàn)輕度脂肪變性。
2)損傷對(duì)照組動(dòng)物肝細(xì)胞均出現(xiàn)彌漫性脂肪變性，脂滴分級(jí)為+++~++++級(jí)。
3)中、高劑量組肝細(xì)胞脂肪變性程度明顯低于陽性對(duì)照組，且差異有顯著性(P＜0.05)。低劑量組肝細(xì)胞脂肪變性程度與陽性對(duì)照組比較無顯著性差異。
表18對(duì)肝臟脂滴分布的影響組別 動(dòng)物數(shù) P值總積分(mg/kg) (只)陰性對(duì)照(0) 103損傷對(duì)照(0) 1039## ＜0.01
低劑量(10)10 28中劑量(20)10 28* ＜0.05高劑量(40)10 26* ＜0.05與陰性對(duì)照組比較## P＜0.01；與損傷對(duì)照組比較*P＜0.053..結(jié)論試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)施例5得到的第一種組合物可有效地阻止乙醇導(dǎo)致肝臟肝臟GSH耗竭和MDA升高，減輕肝細(xì)胞脂肪變性，具有預(yù)防乙醇性肝損傷功能。利用實(shí)施例6、實(shí)施例5的第二種組合物、實(shí)施例1的第一種組合物和實(shí)施例2的第三種組合物進(jìn)行上述相同的試驗(yàn)，得到了大致相同的結(jié)果。實(shí)施例10本發(fā)明的含有含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物增強(qiáng)免疫力的功能的試驗(yàn)1.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠吞噬功能的影響。
1.2受試藥物名稱含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物溶劑熱雙蒸水用量0.5ml/20g小鼠1.3對(duì)照樣品聯(lián)苯雙酯；上海天平制藥廠，滬衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1995)第3765號(hào)-0111.4動(dòng)物小鼠，昆明種，雄性，19～21g。
雞紅細(xì)胞5％濃度1.5方法昆明種小鼠，隨機(jī)分為5組，即對(duì)照組、含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物75、150、300mg/kg、聯(lián)苯雙酯150mg/kg，對(duì)照組給予生理鹽水，給藥組均口服給藥，每日1次，共6次，末次給藥同時(shí)腹腔注射0.5％水解乳蛋白1.5ml/只，24小時(shí)后腹腔注射5％雞紅細(xì)胞0.1ml，30分鐘后斷頭放血，用生理鹽水沖洗腹腔，收集腹腔巨噬細(xì)胞37℃孵育半小時(shí)，離心，沉淀物涂片，染色，油鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞，以下列公式計(jì)算，并與對(duì)照組比較。
1.6結(jié)果結(jié)果見表19，含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物低、中、高劑量均能促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞及增加吞噬指數(shù)，聯(lián)苯雙酯150mg/kg劑量組也能促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。
表19.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 (±SD)
**P＜0.01與模型對(duì)照組比較2.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響2.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。
2.2受試藥物名稱含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物溶劑熱雙蒸水用量0.5ml/20g小鼠2.3對(duì)照樣品聯(lián)苯雙酯；上海天平制藥廠，滬衛(wèi)藥準(zhǔn)字(1995)第3765號(hào)-0112.4動(dòng)物小鼠，C57BL/6，♂，19～21g。
2.5其他材料刀豆球蛋白(ConA)Sigma產(chǎn)品，50μg/ml濃度3H-TdR上海原子核研究所，放射性濃度1mci/ml培養(yǎng)基RPMI-1640，內(nèi)含15％小牛血清、巰基乙醇、Hepes等2.6方法C57BL/6小鼠，隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組、含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物75、150、300mg/kg、聯(lián)苯雙酯150mg/kg，每天口服給藥1次，連續(xù)7天，給藥結(jié)束后，處死動(dòng)物無菌條件下取脾，計(jì)數(shù)脾細(xì)胞，并調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107/ml，在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上每孔加細(xì)胞懸液100μl，ConA 50μl，和培養(yǎng)液，各組均設(shè)三復(fù)管，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)48小時(shí)，加入3H-TdR 0.5μci/孔，繼續(xù)培養(yǎng)18小時(shí)，用多頭細(xì)胞收集器收集細(xì)胞，在液閃儀上測(cè)CPM值，并與對(duì)照組比較，結(jié)果見表20。
2.7結(jié)果表20.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響
*P＜0.05**P＜0.01與對(duì)照組比較結(jié)果表明，含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物有明顯的促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的作用，并以低劑量作用較其它兩組強(qiáng)。
用實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例6的組合物進(jìn)行試驗(yàn)，得到了大致相同的試驗(yàn)結(jié)果，說明這些組合物都有增強(qiáng)免疫力的功能。
實(shí)施例11含有實(shí)施例2的組合物作為添加劑的果酒的制備小棗酒1000毫升，實(shí)施例5得到的第一種組合物0.5g，上述組分?jǐn)嚢杈鶆?，得到原小棗酒原色的液體，飲用味覺和未加實(shí)施例5得到的第一種組合物的小棗酒一樣。分別用實(shí)施例1和5的組合物得到相同的結(jié)果。
實(shí)施例12含有實(shí)施例5得到的第一種組合物作為添加劑的白酒的制備茅臺(tái)酒1000毫升，實(shí)施例5得到的第一種組合物10g，上述組分?jǐn)嚢杈鶆?，得到澄清透明的液體，飲用味覺和未加實(shí)施例5得到的第一種組合物的茅臺(tái)酒一樣。分別用實(shí)施例1和2的組合物得到相同的結(jié)果。
實(shí)施例13含有實(shí)施例5得到的第一種組合物作為添加劑的白酒1的制備用醫(yī)用酒精和水配制成56度白酒1000ml，加入實(shí)施例5得到的第一種組合物0.5g，上述組分?jǐn)嚢杈鶆?，得到澄清透明的液體，飲用味覺和未加實(shí)施例5得到的第一種組合物的二鍋頭酒一樣。分別用實(shí)施例1和2的組合物得到相同的結(jié)果。
實(shí)施例14含有實(shí)施例5得到的第一種組合物作為添加劑的白酒2的制備用醫(yī)用酒精和水配制成38度白酒1000ml，加入實(shí)施例5得到的第一種組合物1g，上述組分?jǐn)嚢杈鶆颍玫匠吻逋该鞯囊后w，飲用味覺和未加實(shí)施例5得到的第一種組合物的二鍋頭酒一樣。分別用實(shí)施例1和2的組合物得到相同的結(jié)果。
實(shí)施例15含有實(shí)施例5得到的第一種組合物作為添加劑的白酒3的制備用醫(yī)用酒精和水配制成56度白酒1000ml，加入實(shí)施例5得到的第一種組合物2g，上述組分?jǐn)嚢杈鶆?，得到澄清透明的液體，飲用味覺和未加實(shí)施例5得到的第一種組合物的二鍋頭酒一樣。分別用實(shí)施例1和2的組合物得到相同的結(jié)果。
權(quán)利要求
1.一種添加有含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中二氫楊梅素含量是20％至98％重量比，楊梅素含量是2％至80％重量比。
2.權(quán)利要求1的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中還含有一種或幾種選自下面的成分楊梅甙，沒食子酸和/或茶多酚。
3.權(quán)利要求1或2的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物中楊梅甙的含量是0-50wt％，沒食子酸的含量是0-50wt％，茶多酚的含量是0-50wt％。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物是從蛇葡萄屬植物中提取的。
5.權(quán)利要求4的保健酒，特征在于其中所述蛇葡萄屬植物包括粵蛇葡萄，棟葉玉葡萄，顯齒蛇葡萄，大葉蛇葡萄，白蘞，東北蛇葡萄或山葡萄。
6.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物是將各單體組分按比例混合得到的。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物含量是0.1-53％克/升。
8.權(quán)利要求7的保健酒，特征在于其中所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物含量是2％w/v至所述含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在各種酒中的溶解飽和度的量。
9.權(quán)利要求1的保健酒，特征在于其是一種酒精酒。
10.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑在制備各種酒中的用途。
11.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備預(yù)防和/或治療酒精性肝損傷的保健酒中的用途。
12.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備預(yù)防和/或治療高血糖的保健酒中的用途。
13.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備預(yù)防和/或治療高血脂的保健酒中的用途。
14.含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在制備提高免疫力的保健食品中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供一種含有本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑的保健酒及其制備方法。酒包括酒精酒和果汁酒。酒中本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物含量可以是0.1－53％w/v(重量體積百分比(克/升)，下文相同)，優(yōu)選是2％w/v至本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物在各種酒中的溶解飽和度的量。可以直接將所述量的本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物加到酒中攪拌均勻，制得含有本發(fā)明含有二氫楊梅素和楊梅素的組合物作為添加劑的酒。
文檔編號(hào)A61K31/352GK1483801SQ03123888
公開日2004年3月24日 申請(qǐng)日期2003年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月30日
發(fā)明者任啟生, 宋新榮 申請(qǐng)人:任啟生, 宋新榮