專利名稱：制備轉移因子的工藝方法-全濾法的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，涉及生物制品轉移因子的制備工藝的改進技術。
背景技術：
轉移因子發(fā)現(xiàn)于二十世紀四十年代并于二十世紀七十年代應用于臨床，是一種能傳遞遲發(fā)性超敏反應、分子量小于10000的具有生物活性的多肽及核苷酸的混合物，其具有活性不被胰蛋白酶、核糖核酸酶所破壞，耐熱、無種屬界限的特點。目前主要用于對病毒性感染及自身免疫性質病的治療。能雙向調節(jié)機體的免疫功能，對于細胞免疫功能與體液免疫功能的增高和低下具有雙向免疫調節(jié)作用。同時促進T淋巴細胞的增殖，對骨髓造血免疫功能有調節(jié)作用。
轉移因子的一般工藝流程如下(1)對新鮮組織進行預處理，用勻漿搗碎機進行勻漿后進行-20℃-37℃反復凍融1-3次，以破碎細胞。
(2)用高速冷凍離心機離心，取離心液。
(3)用透析技術在4℃條件下透析，取透析外液。
(4)將透析外液進行限分子量超濾，截留分子量6000-10000取超濾液。
(5)將所獲不同分子量的超濾液供制備不同劑型的轉移因子需要<包括凍干粉針、水針、口服液>。
(6)根據制備轉移因子劑型的濃度需要用凍融法適量濃縮。
上述制備轉移因子的工藝流程從原料處理到制備出二級半成品所需時間長約一星期，細胞破碎不完全及原材料浪費多，得率低，成本高而活性容易降低，產品濃縮費時費力，有一定難度。

發(fā)明內容
本發(fā)明解決了以往轉移因子制備工藝中的凍融、透析等步驟而造成了制備的工藝時間長，生物活性受影響，有效成分產出率低，生產成本高等諸多不足之處，本發(fā)明的新制備工藝具有制備時間短、生物活性得以保護，產出率高同時將納濾技術應用到轉移因子半成品原料液濃縮上獲取高濃度原料品等眾多優(yōu)點，適合于制備不同劑型不同規(guī)格需要的轉移因子制劑。
本發(fā)明提出的制備的轉移因子的工藝流程如下(1)在12℃以下用勻漿搗碎機高速搗碎勻漿處理原材料并可根據細胞破碎率，控制溫度及勻漿速率是保證活性和保證高得率的重要步驟。
(2)高速冷凍離心后取離心液采用壓濾技術經壓濾器壓濾為第一步濾過，去除粗蛋白。
(3)采用超濾技術用不同規(guī)格分子量的超濾膜根據不同制劑需要進行分級超濾，獲取分子量為6000-10000的超濾液得到為一級原料液適應制備單位含量較低的不同劑型轉移因子產品的需要。
(4)根據轉移因子生產產品單位含量濃度的需要，應用納濾技術進行濃縮成二級產品為高濃度原料液，以滿足制備高含量濃度制劑的需要。
本制備工藝發(fā)明要點如下(1)在低溫條件下，應用高速勻漿器搗碎脾臟組織并可根據細胞破碎率，或可對對經過勻漿器勻漿的組織進行處理以使脾臟等組織中的細胞破碎更完全，在保證生物活性與溫度條件下，提高了轉移因子的產出率。
(2)高速冷凍離心后取離心液經壓濾器壓濾除掉粗蛋白為第一步濾過，此步驟縮短了生產時間，又進一步增加產出率，保證了制品的生物活性。
(3)采用用不同規(guī)格分子量超濾膜進行梯度分級連續(xù)超濾截流分子量為6000以下或10000以下的轉移因子超濾液供制備不同劑型轉移因子產品的需要。如注射用轉移因子(限分子量6000)口服用轉移因子(限分子量10000)，使產品質量完全符合國家該產品質量標準的要求，保證產品質量。
(4)將納濾濃縮技術應用到轉移因子超濾液的濃縮，可制備出高濃度的轉移因子原料液，以供制備高含量轉移因子制劑的產品需要或根據需要儲存-30℃?zhèn)溆谩?br> 權利要求
制備轉移因子工藝流程采用各種不同的濾過法—壓濾法、梯度超濾法、納濾法完成制備全過程是其主要工藝特征。1、在10-12℃以下用高速組織搗碎機對新鮮脾臟組織進行處理以最大限度破碎細胞，保證了有效成分的高提取率。
2.用高速冷凍離心法對經過粉碎處理的液體進行處理取離心上清液，棄參渣。
3.使用壓濾機對冷凍離心所獲取的離上清液進行壓濾通過壓濾技術以去除粗蛋白縮短了生產時間。
4.應用超濾技術，通過使用超濾器采用不同規(guī)格分子量超濾膜進行的梯度超濾技術對去除了粗蛋白的壓濾液進行分級超濾最后取截留分子量為6000-10000以下超濾液物質。
5.應用鈉濾技術對轉移因子超濾液根據含量濃度需要進行濃縮，獲取高濃度原料液。供轉移因子系列不同劑型產品生產高含量轉移因子制劑需要或可放入零下30℃以下儲存?zhèn)溆谩?br> 6.采用壓濾、分級超濾、納濾、濾違技術手段為其主要工藝特征，提高了產出率，縮短生產工藝時間，降低了成本，保證了制劑的生物活性及質量，可根據需要獲取不同濃度的轉移因子制劑。
7.應用納濾濃縮技術對轉移因子原料藥進行濃縮的這一轉移因子濃縮方法。
全文摘要
本項發(fā)明屬于生物醫(yī)藥高新技術領域，該發(fā)明涉及生物制品轉移因子制備新工藝方法。其主要步驟為采用不同的濾過方法來制備轉移因子，本發(fā)明可明顯縮短制備工藝時間，提高產出率，保證制品的生物活性，大幅降低了生產成本等優(yōu)點。其主要制備步驟對新鮮的脾臟進行預處理后按比例加入預冷的溫度控制在10℃－12℃去熱源無離子液。用高速勻漿搗碎機對脾進行破碎細胞；經高速冷凍離心后取得離心上清液經壓濾機進行壓濾；壓濾后取得的壓濾液根據制備制劑不同劑型的要求經不同規(guī)格超濾器進行梯度分級超濾。制劑制備出分子量為6000－10000的原料藥，可再根據生產不同制劑需要應用納濾技術將超濾液進行濃縮成所需要的制劑。
文檔編號A61K38/02GK1546165SQ200310118439
公開日2004年11月17日 申請日期2003年12月16日 優(yōu)先權日2003年12月16日
發(fā)明者霍保來 申請人:北京世紀昭寶轉移因子研究中心