從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法
【專利摘要】從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，它涉及一種非生物堿的提取方法。本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有提取非生物堿的方法提取速度慢、價(jià)格高且需回流高溫，操作復(fù)雜，提取工藝成本高和提取效率低的技術(shù)問題。本方法如下：將延胡索和川楝子混合，研碎，加入乙醇水溶液，超聲處理，然后微波加熱；再超聲處理，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水，調(diào)節(jié)pH值，收集含非生物堿成分的離子交換液；調(diào)pH值至7，減壓濃縮，真空下干燥，制得非生物堿粉末。本方法與水煮、醇沉工藝相比，具有如下突出特點(diǎn)：提取快速、提取率高、價(jià)廉、高效；無需回流高溫；操作簡單易行；提取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著。本發(fā)明屬于非生物堿的提取領(lǐng)域。
【專利說明】從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種非生物堿的提取方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 金鈴子散為治療心腹胃脘諸痛證之名方，療效較佳，且使用安全，而川楝子和延胡 索是中藥金鈴子散的主要兩味藥。研究表明金鈴子散提取的非生物堿成分在治療胃潰瘍上 起主要作用。通常提取非生物堿的方法是水煎，然后加乙醇提取，該方法操作過程復(fù)雜、耗 時(shí)長、提取效率低、非生物堿的提取率也較低，不利于中藥有效成分的現(xiàn)代化研究和應(yīng)用。 超聲波和微波法輔助提取中藥中化學(xué)成分被認(rèn)為是一種高效的方法。但對(duì)于非生物堿的提 取目前采用水煮、醇沉工藝，但是存在提取速度慢、周期長、價(jià)格高且需回流高溫，操作復(fù)雜 的問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有提取非生物堿的方法提取速度慢、周期長、價(jià)格高 且需回流高溫，操作復(fù)雜，提取工藝成本高的技術(shù)問題，提供了一種從川楝子和延胡索中提 取非生物堿的方法。
[0004] 從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0005] -、將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎，加入乙醇水溶液，得混合 物；
[0006] 二、超聲處理步驟一得到的混合物10-20分鐘，溫度控制在20-40°C，超聲波功率 100-200W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱10-20分鐘，微波 功率為260-520W，頻率為2450MHz ;再在20-40°C、超聲波功率為100-200W、超聲波頻率為 40KHz的條件下超聲處理10-20分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL， 加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1-2,然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離 子交換液；
[0007] 三、調(diào)含非生物堿成分的離子交換液的pH值，減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得 非生物堿粉末。
[0008] 步驟一中乙醇水溶液體積份數(shù)為60-80 %。
[0009] 采用本發(fā)明方法獲得非生物堿量為原料質(zhì)量的6-9%，即每克延胡索和川楝子能 提取非生物堿60-90毫克（水煎醇提的方法，每克此延胡索和川楝子混合物最多能提取非 生物堿15毫克，且需要長時(shí)間反復(fù)提?。?。
[0010] 本方法采用先超聲處理，可以有效地迅速破壞川楝子和延胡索堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，使 乙醇溶液與生物組分作用，達(dá)到使提取組份容易溶解的目的；微波是一種能夠快速升溫的 震蕩波，接下來使用微波處理，可以使各組分分子從川楝子和延胡索中快速的釋放。但長時(shí) 間微波加熱會(huì)破壞非生物堿組份分子，從而失去活性。但僅通過超聲和微波處理不能有效 地從川楝子和延胡索提取出非生物堿，得到的非生物堿量很低。因而，為了防止長時(shí)間微波 處理導(dǎo)致破壞非生物堿組份及其活性，本方法采取控制微波時(shí)間而隨后對(duì)混合物再次使用 超聲波處理。這樣，本發(fā)明的方法可以快速高效地提取出川楝子和延胡索中的非生物堿組 份。此方法與水煮、醇沉工藝相比，具有如下突出特點(diǎn)：提取快速、價(jià)廉、高效；無需回流高 溫；操作簡單易行；提取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著；特別是提取取效率高要遠(yuǎn)大于水 煮、醇沉方法，萃取效率能達(dá)到水煮、醇沉方法的4-6倍左右。

【具體實(shí)施方式】
[0011] 本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉【具體實(shí)施方式】，還包括各【具體實(shí)施方式】間的 任意組合。

【具體實(shí)施方式】 [0012] 一：從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0013] 一、將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20-40目的粉末，加入占 延胡索和川楝子總質(zhì)量3-5倍的乙醇水溶液，得混合物；
[0014] 二、超聲處理步驟一得到的混合物10-20分鐘，溫度控制在20-40°C，超聲波功率 100-200W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱10-20分鐘，微波 功率為260-520W，頻率為2450MHz ;再在20-40°C、超聲波功率為100-200W、超聲波頻率為 40KHz的條件下超聲處理10-20分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL， 加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1-2,然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離 子交換液；
[0015] 三、向含非生物堿成分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7,得中性的含非生物堿 成分的離子交換液，在小于60°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得非生物堿粉末。

【具體實(shí)施方式】 [0016] 二：本實(shí)施方式與一不同的是步驟一中乙醇水溶液體 積分?jǐn)?shù)為60-80%。其它與一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0017] 三：本實(shí)施方式與一或二之一不同的是步驟一中乙醇 水溶液的加入量為延胡索和川楝子總質(zhì)量4倍。其它與一或二之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0018] 四：本實(shí)施方式與一至三之一不同的是步驟一中研碎 成30目的粉末。其它與一至三之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0019] 五：本實(shí)施方式與一至四之一不同的是步驟二中超聲 處理步驟一得到的混合物11-19分鐘，溫度控制在22-38°C，超聲波功率120-180W，超聲波 頻率為40KHz。其它與一至四之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0020] 六：本實(shí)施方式與一至五之一不同的是步驟二中超聲 處理步驟一得到的混合物13-17分鐘，溫度控制在25-35°C，超聲波功率130-260W，超聲波 頻率為40KHz。其它與一至五之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0021] 七：本實(shí)施方式與一至六之一不同的是步驟二中超 聲處理步驟一得到的混合物15分鐘，溫度控制在30°C，超聲波功率200W，超聲波頻率為 40KHz。其它與一至六之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0022] 八：本實(shí)施方式與一至七之一不同的是步驟二中然后 轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱11-18分鐘，微波功率為280-500W，頻率為2450MHz。其它 與一至七之一相同。
[0023]

【具體實(shí)施方式】九：本實(shí)施方式與【具體實(shí)施方式】一至八之一不同的是步驟二中然后 轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱12-17分鐘，微波功率為300-450W，頻率為2450MHz。其它 與【具體實(shí)施方式】一至八之一相同。

【具體實(shí)施方式】 [0024] 十：本實(shí)施方式與一至九之一不同的是步驟二中然后 轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱15分鐘，微波功率為400W，頻率為2450MHz。其它與具體 實(shí)施方式一至九之一相同。
[0025] 采用下述實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證本發(fā)明效果：
[0026] 實(shí)驗(yàn)一：
[0027] 水提醇沉法提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0028] -、將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后加入占延胡索和川楝子總質(zhì)量8 倍的蒸餾水煎煮2h，收集煎煮液，再加入占延胡索和川楝子總質(zhì)量6倍的蒸餾水煎煮2h，合 并煎煮液并濃縮，獲得500mL的濃縮液；
[0029] 二、向濃縮液中加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇至混合液中乙醇體積分?jǐn)?shù)為75%，靜 置24h后過濾，然后蒸出濾液中的乙醇，再加水至500mL，加濃鹽酸至溶液中調(diào)節(jié)pH值為1， 然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換液，再向含非生物堿成 分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至中性；50°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥制得非生物 堿粉末。
[0030] 采用本方法每克延胡索和川楝子混合物能提取非生物堿10-15毫克。
[0031] 實(shí)驗(yàn)二：
[0032] 超聲波法提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0033] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20-40目的粉末，加入占延胡 索和川楝子總質(zhì)量3-5倍的質(zhì)量濃度為80%的乙醇水溶液，首先浸泡8-12小時(shí)，然后使用 超聲處理上述混合物10-20分鐘，溫度控制在40度，超聲波功率100-200W，超聲波頻率為 40KHz ;冷卻、過濾，然后蒸出濾液中的乙醇，再加水至500mL，加濃鹽酸至溶液中調(diào)節(jié)pH值 為1，然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換液，再向含非生物 堿成分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至中性；50°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥制得非 生物堿粉末。
[0034] 采用此方法每克延胡索和川楝子混合物能提取非生物堿8-12毫克。
[0035] 實(shí)驗(yàn)三：
[0036] 微波法提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0037] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20-40目的粉末，加入占延胡 索和川楝子總質(zhì)量3-5倍的質(zhì)量濃度為60-80%的乙醇水溶液，放置到微波反應(yīng)器中，使用 微波加熱10-20分鐘，微波功率為260-520W，頻率為2450MHz。上述過程完成后，把混合物 趁熱過濾，收集濾液，然后蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL，加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為 1-2,然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換液，再向含非生物 堿成分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7 ;所得中性的含非生物堿成分的離子交換液，在 小于60°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥制得非生物堿粉末。
[0038] 每克延胡索和川楝子能提取非生物堿8-15毫克。
[0039] 實(shí)驗(yàn)四：
[0040] 超聲波-微波法提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0041] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20-40目的粉末，加入占延胡 索和川楝子總質(zhì)量3-5倍的6質(zhì)量濃度為0-80%的乙醇水溶液，首先使用超聲處理上述混 合物10-20分鐘，溫度控制在20-40度，超聲波功率100-200W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn) 移到微波反應(yīng)器中用微波加熱10-20分鐘，微波功率為260-520W，頻率為2450MHz。上述過 程完成后，把混合物趁熱過濾，收集濾液，然后蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL，加鹽酸 調(diào)節(jié)溶液的PH值為1-2,然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換 液，再向含非生物堿成分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7 ;所得中性的含非生物堿成分 的離子交換液，在小于60°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥制得非生物堿粉末。
[0042] 采用此方法，每克延胡索和川楝子能提取非生物堿22-28毫克。
[0043] 實(shí)驗(yàn)五：
[0044] 微波-超聲法提取非生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行：
[0045] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20-40目的粉末，加入占延胡 索和川楝子總質(zhì)量3-5倍的質(zhì)量濃度為60-80 %的乙醇水溶液，首先使用微波加熱10-20分 鐘，微波功率為260-520W，頻率為2450MHz。然后使用超聲處理上述混合物10-20分鐘，溫 度控制在40度，超聲波功率100-200W，超聲波頻率為40KHz ;冷卻、過濾，然后蒸出濾液中的 乙醇，再加水至500mL，加濃鹽酸至溶液中調(diào)節(jié)pH值為1，然后過731型陽離子交換樹脂柱， 收集含非生物堿成分的離子交換液，再向含非生物堿成分的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值 至中性；50°C下減壓濃縮，然后在真空下干燥制得非生物堿粉末。
[0046] 采用此方法每克延胡索和川楝子混合物能提取非生物堿15-21毫克。
[0047] 實(shí)驗(yàn)六：
[0048] 從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法（超聲-微波-超聲法）：
[0049] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成30目的粉末，加入占延胡索 和川楝子總質(zhì)量5倍的質(zhì)量濃度為80 %的乙醇水溶液，首先使用超聲處理上述混合物20分 鐘，溫度控制在40°C，超聲波功率200W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用 微波加熱15分鐘，微波功率為390W，頻率為2450MHz ;最后，接著把上述混合物再放置到超 聲波儀器中，在溫度為40°C、超聲波功率200W、超聲波頻率為40KHz的超聲條件下超聲處理 20分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL，加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1， 然后過731型陽尚子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的尚子交換液；向含非生物堿成分 的離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7,得中性的含非生物堿成分的離子交換液，在小于60°C 下減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得非生物堿粉末。
[0050] 本方法獲得非生物堿量為原料質(zhì)量的9%，即每克延胡索和川楝子能提取非生物 喊90暈克。
[0051] 實(shí)驗(yàn)七：
[0052] 從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法（超聲-微波-超聲法）：
[0053] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成20目的粉末，加入占延胡索 和川楝子總質(zhì)量3倍的質(zhì)量濃度為60 %的乙醇水溶液，首先使用超聲處理上述混合物10分 鐘，溫度控制在40°C，超聲波功率100W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用 微波加熱10分鐘，微波功率為260W，頻率為2450MHz ;接著把上述混合物再放置到超聲波儀 器中，在溫度控制在40°C，超聲波功率100W，超聲波頻率為40KHz的超聲條件下超聲處理10 分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL，加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1，然 后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換液；向含非生物堿成分的 離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7,得中性的含非生物堿成分的離子交換液，在小于60°C下 減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得非生物堿粉末。
[0054] 本實(shí)驗(yàn)方法獲得非生物堿量為原料質(zhì)量的6%，即每克延胡索和川楝子能提取非 生物喊60暈克。
[0055] 實(shí)驗(yàn)八：
[0056] 從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法（超聲-微波-超聲法）：
[0057] 將IOOg的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎成40目的粉末，加入占延胡索 和川楝子總質(zhì)量4倍的質(zhì)量濃度為70%的乙醇水溶液，首先使用超聲處理上述混合物15分 鐘，溫度控制在30°C，超聲波功率150W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用 微波加熱15分鐘，微波功率為312W，頻率為2450MHz ;最后，接著把上述混合物再放置到超 聲波儀器中，在溫度控制在30°C，超聲波功率150W，超聲波頻率為40KHz條件下超聲處理15 分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL，加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1，然 后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離子交換液；向含非生物堿成分的 離子交換液中加 NaOH調(diào)pH值至7,得中性的含非生物堿成分的離子交換液，在小于60°C下 減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得非生物堿粉末。本實(shí)驗(yàn)方法獲得非生物堿量為原料質(zhì)量 的6. 7%，即每克延胡索和川楝子能提取非生物堿78毫克。
[0058] 采用以上不同提取方法從延胡索和川楝子中提取非生物堿的量的不同見表1。
[0059] 綜上所述，目前采用的水煎醇沉方法只能從每克延胡索和川楝子中提取非生物堿 10-15mg，我們嘗試采用單獨(dú)的超聲波或微波輔助的方法，可以達(dá)到與水煎醇沉方法的提取 效果，非生物堿提取量最多也在15mg/g左右；但可以達(dá)到縮短了提取時(shí)間，使提取工藝變 得簡單；在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行了超聲和微波組合提取延胡索和川楝子中的非生物堿，即先超聲 后微波法（超聲-微波法）和先微波后超聲法（微波-超聲法），這兩種方法都能進(jìn)一步提 高非生物堿的提取量，而且在非生物堿提取量上超聲-微波法要好于微波-超聲法，這與超 聲能夠有效地破壞延胡索和川楝子的細(xì)胞壁有關(guān)。但非生物堿的提取量增加的并不明顯， 實(shí)驗(yàn)表明通過延長微波加熱時(shí)間能夠進(jìn)一步地有效提取非生物堿，但長時(shí)間的微波加熱會(huì) 破壞一些非生物堿的組份和活性。因此，為了更好地提高延胡索和川楝子中非生物堿的提 取量，并保證非生物堿組份不被破壞及其活性不受損失。本發(fā)明提出了先超聲，然后微波， 最后再超聲的方法（超聲-微波-超聲法）。這樣，就可以控制微波時(shí)間來避免破壞非生物 堿的組份和活性，還能大大提高非生物堿的提取量，本方法從延胡索和川楝子中提取非生 物堿量可達(dá)60-90mg/g，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常用的水煎醇沉方法，是其6倍左右。
[0060] 表1不同方法從延胡索和川楝子中提取非生物堿量的對(duì)比
[0061]

【權(quán)利要求】
1. 從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于從川楝子和延胡索中提取非 生物堿的方法按照以下步驟進(jìn)行： 一、 將l〇〇g的延胡索和200g的川楝子混合，然后研碎，加入乙醇水溶液，得混合物； 二、 超聲處理步驟一得到的混合物10-20分鐘，溫度控制在20-40°C，超聲波功率 100-200W，超聲波頻率為40KHz ;然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱10-20分鐘，微波 功率為260-520W，頻率為2450MHz ;再在20-40°C、超聲波功率為100-200W、超聲波頻率為 40KHz的條件下超聲處理10-20分鐘，過濾，收集濾液，蒸出濾液中的乙醇，再加水至200mL， 加鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為1-2,然后過731型陽離子交換樹脂柱，收集含非生物堿成分的離 子交換液； 三、 調(diào)含非生物堿成分的離子交換液的pH值，減壓濃縮，然后在真空下干燥，制得非生 物堿粉末。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于步驟一 中乙醇水溶液質(zhì)量濃度為60-80 %。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于步 驟一中乙醇水溶液的加入量為延胡索和川楝子總質(zhì)量4倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于步 驟一中研碎成30目的粉末。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在 于步驟二中超聲處理步驟一得到的混合物11-19分鐘，溫度控制在22-38°C，超聲波功率 120-180W，超聲波頻率為40KHz。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在 于步驟二中超聲處理步驟一得到的混合物13-17分鐘，溫度控制在25-35°C，超聲波功率 130-260W，超聲波頻率為40KHz。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于步 驟二中超聲處理步驟一得到的混合物15分鐘，溫度控制在30°C，超聲波功率200W，超聲波 頻率為40KHz。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于 步驟二中然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱11-18分鐘，微波功率為280-500W，頻率為 2450MHz。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于 步驟二中然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱12-17分鐘，微波功率為300-450W，頻率為 2450MHz。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從川楝子和延胡索中提取非生物堿的方法，其特征在于步 驟二中然后轉(zhuǎn)移到微波反應(yīng)器中用微波加熱15分鐘，微波功率為400W，頻率為2450MHz。
【文檔編號(hào)】A61K36/66GK104435135SQ201410735034
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月4日
【發(fā)明者】趙雪瑩, 李冀 申請(qǐng)人:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)