一種降血糖藥物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，設(shè)及W-類(lèi)黃棉木中pyrocincholicacid型 =祗皂巧或黃棉木=祗皂巧提取物為有效成分的藥物組合物，其制備方法及其在制備降血 糖藥物中的應(yīng)用，W及在制備抗二型糖尿病降血糖的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 二型糖尿病是一種W高血糖為特征的慢性代謝性疾病，目前在全球范圍內(nèi)發(fā)病率 持續(xù)增高，已經(jīng)成為繼屯、腦血管病和惡性腫瘤之后第=大嚴(yán)重威脅人們健康和生命的非傳 染性疾病。據(jù)國(guó)際糖尿病協(xié)會(huì)數(shù)據(jù)顯示，2011年全球糖尿病患者總數(shù)高達(dá)3.66億，預(yù)計(jì)運(yùn) 一數(shù)字到2030年將達(dá)到5. 52億，而糖尿病患者中約有90-95%屬于II型糖尿病。隨著生活 水平提高、人口老齡化W及肥胖發(fā)生率的增加，糖尿病發(fā)病率迅速升高并有年輕化趨勢(shì)。糖 尿病的持續(xù)高血糖與長(zhǎng)期代謝素亂等可導(dǎo)致全身組織器官，特別是眼、腎、屯、血管及神經(jīng)系 統(tǒng)的損害及其功能障礙和衰竭。（Weilletal.，2004)。目前，臨床上使用的抗二型糖尿病 降血糖藥物主要有膜島素增敏類(lèi)（如雙脈類(lèi)及嚷挫燒二酬類(lèi)），促膜島素分泌劑橫脈類(lèi)（如 格列美脈等），a-葡萄糖巧酶抑制劑（如阿卡波糖和伏格列波糖等），腸促膜島素類(lèi)似物 (如艾塞那膚等）、DPP-4抑制劑（如西格列汀等）。運(yùn)些藥物基本都為化學(xué)合成藥物，運(yùn)其 使用雖然取得了較好的療效，都能使血液中葡萄糖濃度明顯下降，但長(zhǎng)期使用后都不能很 好控制血糖濃度。此外，運(yùn)些藥物也有一定的副作用，如肝腎毒性、浮腫、腹瀉等，因此在肝 功能不全的患者中其應(yīng)用受到一定限制，而且部分患者不能長(zhǎng)期耐受其治療。因此，新型降 血糖藥的研發(fā)一直是抗II型糖尿病藥物研究的重點(diǎn)。天然產(chǎn)物是大自然經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期進(jìn)化并選 擇優(yōu)化過(guò)的化合物，也是人類(lèi)防治疾病藥物的主要來(lái)源，具有結(jié)構(gòu)豐富、療效確切、安全低 毒W(wǎng)及無(wú)依耐性等優(yōu)點(diǎn)。在過(guò)去幾十年上市的小分子新化學(xué)實(shí)體（NCE)中，近60%是直接 或間接來(lái)源于天然產(chǎn)物，天然產(chǎn)物仍然是藥物或先導(dǎo)化合物研發(fā)的重要源泉。所W從植物 中發(fā)現(xiàn)更加安全有效的抗二型糖尿病降血糖藥物具有十分重要的學(xué)術(shù)意義和很好的應(yīng)用 前景。
[0003] 2型糖尿病是一種代謝性綜合疾病，其形成與現(xiàn)代人高糖高脂W及運(yùn)動(dòng)不足的生 活方式密切相關(guān)。鏈脈佐菌素（ST幻對(duì)小鼠的膜島P細(xì)胞有選擇性破壞作用，注射低劑量 的STZ可W誘導(dǎo)其產(chǎn)生二型糖尿病。小鼠高熱量飼料飼養(yǎng)一定時(shí)間并禁食，按一定量腹腔 注射STZ，可制備II型糖尿病動(dòng)物模型，且按該法制備出的模型具有超重、糖耐量減低、血脂 升高、血清膜島素升高及膜島素受體結(jié)合力降低伴膜島素抵抗的特點(diǎn)，類(lèi)似于II型糖尿病 病人的臨床特征。STZ誘導(dǎo)的小鼠糖尿病因其周期較短，方法簡(jiǎn)便，是研究人類(lèi)II型糖尿病 治療新藥的理想模型。
[0004] 黃棉木為茜草科黃棉木屬單種屬植物，pyrocincholicacid型立祗皂巧在該植 物中存在種類(lèi)不多，目前僅從中分離得到4個(gè)。該類(lèi)=祗皂巧因其含量較低和無(wú)紫外吸 收等原因較難分離?，F(xiàn)有技術(shù)中，從該植物中分離=祗皂巧成分已公開(kāi)發(fā)表如下方法：黃 棉木干燥粉碎樹(shù)皮9公斤，W甲醇室溫浸提=次，減壓濃縮，得到甲醇浸膏1668克。甲醇 浸膏溶于熱水后分別W石油酸，甲醇和正下醇萃取，得到19克石油酸、85克氯仿、780克 正下醇和884克水分段部位。氯仿分段部位經(jīng)硅膠柱層析（1.7kgSi〇2;CHCl3/MeOH/H2〇 梯度洗脫），得到化.1-8,化.7經(jīng)硅膠柱和RP-C18柱反復(fù)層析（Si〇2:CHCI3/CH3OH/H2O 8:2:0. 2 ;化-18:CH30H/H207. 5:2. 5)得到化合物l(22mg).正下醇經(jīng)硅膠柱層析（3. 5kg Si〇2;CHCl3/MeOH/H2〇梯度洗脫），得到7個(gè)分段部位1-7.分段部位3經(jīng)硅膠柱和RP-C18 柱反復(fù)層析（Si〇2:CHCl3/CH3〇H/H2〇 8:2:0. 2;化-18:CH30H/H207:3)得到化合物 2(36mg) 和3 (29mg)，分段部位4經(jīng)硅膠柱和RP-C18柱反復(fù)層析（Si〇2:CHCI3/CH3OH/H2O7:3:0. 3 ; 化-18:CH3OH/H2O6. 5:3. 5)得到化合物 4 (35mg)。參見(jiàn)：Zhang,Y.M. ;Tan,N.比；Huang,比 Q. ;Zeng,G.Z.，TriterpernoidsaponinsfromMetadinatrichotoma.Z.Naturforsch 2007, 62b，745-748。其缺點(diǎn)是本方法使用的是黃棉木樹(shù)皮部分，對(duì)資源的破壞較大，化合物 (1)、（2)、（3)、（4)的含量低，分離純化步驟較多，且分離中多次用到有機(jī)溶劑和水的混合溶 劑系統(tǒng)，該混合溶劑回收溫度高，不利于溶劑的回收利用，不利于工業(yè)化大量生產(chǎn)。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)有黃棉木中pyrocincholicacid型S祗皂巧、黃棉木S祗皂巧提 取物作為抗二型糖尿病降血糖藥物的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足之處，本發(fā)明的目的在于提供一類(lèi)pyrocincholic acid型=祗皂巧，W及=祗皂巧類(lèi)化合物及其藥理學(xué)上容許的鹽，或黃棉木=祗皂巧提取 物為活性成分的抗二型糖尿病降血糖的藥物組合物，它們的制備方法，及其在制備抗二型 糖尿病降血糖藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明設(shè)及的具有抗二型糖尿病降血糖作用的=祗皂巧類(lèi)化 合物為首次發(fā)現(xiàn)其降血糖活性，制備該類(lèi)化合物的方法可控性和重現(xiàn)性好，樣品損失少，成 本較低，操作方便，可較易分離得到本類(lèi)pyrocincholicacids祗皂巧，溶劑可W反復(fù)回收 利用，也適用于工業(yè)生產(chǎn)。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：
[0008] 藥物組合物，其中含有治療有效量的Pyrocincholicacid型S祗皂巧類(lèi)化合物， 或其藥理學(xué)上容許的鹽和藥學(xué)上可接受的載體，所述的Pyrocincholicacid型S祗皂巧 類(lèi)化合物是指骨架含有一個(gè)pyrocincholicacid,pyrocincholicacid的C-3位與一個(gè) 0 -D-雞納糖基的r位通過(guò)氧原子相連接，且C-28位簇基與一個(gè)P-D-葡萄糖基的1"位 通過(guò)氧原子相連接的=祗皂巧和其它=個(gè)同骨架結(jié)構(gòu)的衍生物。
[0009] 藥物組合物，其中含有治療有效量的pyrocincholicacidS祗皂巧化合物1-4， 或其藥理學(xué)上容許的鹽和藥學(xué)上可接受的載體，所述的pyrocincholicacidS祗皂巧化 合物1-4為具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物pyrocincholicacid36-〇-P-D-quinovopyrano syl-28-0-P-D-邑lucopyranoside(1),pyrocincholicacid3P-0-P-D-quinovopyranos yl-28-O-P-D-邑lucopyranosyl-(l一 6) -P-D-邑lucopyranoside(2)，pyrocincholicacid 3P-〇-P-D-邑lucopyranosyl- (1 一 4) -P-D-quinovopyranosyl-28-〇-P-D-邑lucopyranos ide(3),pyrocincholicacid3P-0-P-D-glucopyranosyl-Q一 4) -P-D-quinovopyranos yl-28-〇-P-D-glucopyranosyl-( 1 一 6)-P-D-glucopyranoside(4)
[0010]
[0011] 式中，Ri=P-D-雞納糖基或P-D-葡萄糖-a- 4)-e-D-雞納糖基；R2= P-D-葡萄糖基或P-D-葡萄糖-(1 一 6) -P-D-葡萄糖基，
[0012]
[0013] 本發(fā)明同時(shí)提供Wpyrocincholicacid型S祗皂巧類(lèi)化合物或其藥理學(xué)上容許 的鹽為有效成分的降血糖藥物，所述的Pyrocincholicacid型S祗皂巧是指骨架含有一個(gè) pyrocincholicacid,pyrocincholicacid的C-3 位與一個(gè)P-D-雞納糖基的 1'位通過(guò) 氧原子相連接，且C-28位簇基與一個(gè)P-D-葡萄糖基的1"位通過(guò)氧原子相連接的=祗皂 巧和其它=個(gè)同骨架結(jié)構(gòu)的衍生物。
[0014] Wpyrocincholicacids祗皂巧化合物1-4或其藥理學(xué)上容許的鹽為有效成 分的抗二型糖尿病的降血糖藥物，所述的pyrocincholicacidS祗皂巧化合物1-4為具 有下述結(jié)構(gòu)式的化合物：pyrocincholicacid3 6-〇-P-D-quinovopyranos}d-28-〇-P -D-邑lucopyranoside(1),pyrocincholicacid3P-〇-P-D-quinovopyranosyl-28-〇-P-D-glucopyranosyl-(1 一 6)-P-D-glucopyranoside(2)，pyrocincholicacid3P-0 -P-D-邑lucopyranosyl- (1 一 4) -P-D-quinovopyranosyl-28-0-P-D-邑lucopyranoside (3),pyrocincholicacid3P-0-P-D-glucopyranosyl- (1 一 4) -P-D-quinovopyranosyl -28-0-P-D-邑lucopyranosyl-(l一 6)-P-D-邑lucopyranoside(4)
[0015]
[001引式中，Ri=P-D-雞納糖基或P-D-葡萄糖-(1 一 4)-e-D-雞納糖基；R2 =P-D-葡萄糖基或P-D-葡萄糖-(1 一 6) - 0 -D-葡萄糖基，
[0017]
[0018] 本發(fā)明還提供制備上述的藥物組合物和藥物的方法，取黃棉木枝葉，經(jīng)干燥、粉碎 后，用90%甲醇室溫冷浸充分提??；將甲醇浸膏加水混懸后，依次用氯仿和正下醇充分萃 ??；正下醇部分反復(fù)用硅膠、S巧hadexLH-20、RP-18各種層析柱分離純化，再結(jié)合S祗皂巧 的TLC檢測(cè)方法得pyrocincholicacid型S祗皂巧化合物，再用常規(guī)藥物制劑制備方法得 所述的藥物組合物和所述的藥物。
[0019]W及，制備所述的藥物組合物或藥物的方法，取黃棉木枝葉，經(jīng)干燥、粉粹后，用 90%甲醇室溫冷浸提取3次，時(shí)間分別為每次7、3、3天，提取液經(jīng)減壓濃縮得甲醇浸膏；將 甲醇浸膏加水混懸后，依次用氯仿和正下醇充分萃取，等體積各萃取=次，回收溶劑得到氯 仿部分、正下醇部分和水部分；將正下醇部分經(jīng)硅膠柱層析，用100:0,15:1，9:1，6:1，2:1， 0:100的氯仿/甲醇梯度洗脫，薄層