層析，結(jié)合S祗皂巧TLC檢測方法合并其中的9:1和 6:1含有=祗皂巧的部分；W下的每一步驟都須結(jié)合=祗皂巧TLC檢測方法來進行分離純 化，合并后的浸膏再次經(jīng)硅膠柱層析，先用15:1的氯仿/甲醇等度洗脫去除非=祗皂巧部 分，再W80:10的氯仿/甲醇等度洗脫，根據(jù)S祗皂巧點的不同合并為S個組分化.1-Fr. 5 ; 化.1組分經(jīng)Se地adexLH-20凝膠柱層析，1:1的氯仿/甲醇洗脫，合并得到S個亞組分 化.1-1 -化.1-3 ;Fr. 1-2再經(jīng)反相RP-18柱層析，先W40:60的甲醇/水洗脫去除雜質(zhì)，再 W55:45的甲醇 / 水洗脫得到化合物pyrocincholicacid3P-0-6 -D-quinovopyranosy 1-28-0-P-D-glucopyranoside(1);化.2組分經(jīng)Se地adexLH-20凝膠柱層析，用1:1氯仿 /甲醇為洗脫劑除去色素，富集得到的=祗皂巧再經(jīng)反相RP-18柱層析，先W38:62的甲醇 /水洗脫去除雜質(zhì)，所得=祗皂巧最后經(jīng)硅膠柱層析，W80:10的氯仿/甲醇等度洗脫，經(jīng) TLC檢測合并，減壓蒸干后得到化合物pyrocincholicacid3 6 -0-6 -D-quinovopyranosy 1-28-0-P-D-glucopyranos}d- (1 一 6) -P-D-glucopyranoside(2);化.3 組分經(jīng)Se地adex LH-20凝膠柱層析，1:1的氯仿/甲醇洗脫，合并得到S個亞組分化.3-1 -化.3-3,化.3-2 再經(jīng)反相RP-18柱層析，先W35:65的甲醇/水洗脫去除雜質(zhì)，再W46:54的甲醇/水洗脫 得到化合物pyrocincholicacid3 6 -〇-P-D-glucopyranosyl-(l一 4)-6 -D-quinovopyr anos}d-28-〇-P-D-glucopyranoside(3);化.4 組分經(jīng)MCI柱層析，W20 :80 的甲醇 / 水洗 脫除去色素等雜質(zhì)，再W50:50甲醇/水洗脫得到S祗皂巧部分化.4-2,化.4-2再經(jīng)反相 RP-18柱層析，W32:68的甲醇/水洗脫得到化合物pyrocincholicacid3P-0-P-D-glu copyranosyl- (1 一 4) -P_D_quinovopyranosyl_28_0_P_D_邑lucopyranosyl- (1 一 6) -P_D_邑 lucopyranoside(4);然后再用制備藥物的常規(guī)方法制得所述的藥物組合物和所述的藥物。
[0020] 本發(fā)明另外還提供了所述的藥物組合物或其中的活性成分pyrocincholicacid 型=祗皂巧類化合物或其藥理學(xué)上容許的鹽在制備抗二型糖尿病降血糖藥物中的應(yīng)用。
[0021] W及，所述的藥物組合物或其中的活性成分pyrocincholicacids祗皂巧化合 物1-4在制備抗二型糖尿病降血糖藥物中的應(yīng)用。
[0022] 再次，本發(fā)明提供了含有治療有效量的黃棉木=祗皂巧提取物，和藥學(xué)上可接受 的載體的藥物組合物，所述的黃棉木=祗皂巧提取物是由下述方法制得的，用90%甲醇，充 分浸提出含有黃棉木=祗及其皂巧類化合物的浸膏，再利用有機溶劑萃取技術(shù)將上述=祗 及其皂巧類化合物富集到正下醇溶解部位，然后用正相色譜柱進行吸附層析，W氯仿/甲 醇系統(tǒng)梯度洗脫，分離富集得到含色素較少的黃棉木=祗皂巧提取物（氯仿/甲醇9:1至 氯仿/甲醇6:1部位），該提取物含有不低于23. 8%的pyrocincholicacidS祗皂巧化合 物 1-4。
[0023]W及，黃棉木=祗皂巧提取物在制備抗二型糖尿病降血糖藥物中的應(yīng)用，所述的 黃棉木=祗皂巧提取物是由下述方法制得的，用90%甲醇，充分浸提出含有黃棉木=祗及 其皂巧類化合物的浸膏，再利用有機溶劑萃取技術(shù)將上述=祗及其皂巧類化合物富集到正 下醇溶解部位，然后用正相色譜柱進行吸附層析，W氯仿/甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，分離富集得 到含色素較少的黃棉木=祗皂巧提取物（氯仿/甲醇9:1至氯仿/甲醇6:1部位），該提取 物含有不低于23. 8%的pyrocincholicacids祗皂巧化合物1-4。
[0024] 本發(fā)明對茜草科黃棉木屬植物黃棉木進行系統(tǒng)的=祗皂巧化學(xué)成分研究，利用多 種分離純化手段，包括正反相硅膠柱層析，S巧hadexLH-20凝膠層析，MCI和RP-C18等，從 中獲得了一系列pyrocincholicacids祗皂巧。之后，對S祗皂巧成分pyrocincholic acid3P-0-P-D-quinovopyranosyl-28-0-P-D-邑lucopyranoside(1),pyrocincholic acid3P-〇-P-D-quinovopyranosyl-28-〇-P-D-邑lucopyranosyl- (1 一 6) -P-D-邑lucopy ranoside(2)、pyrocincholicacid3P-0-P-D-glucopyranosyl-(1 一 4) -P-D-quinovopy ranosyl-28-0-P-D-邑lucopyranoside(3),pyrocincholicacid3P-0-P-D-邑lucopyrano syl- (1 一 4) -P_D-quinovopyranosyl-28-〇-P_D_邑lucopyranosyl- (1 一 6) -P_D_邑lucopyra noside(4)在小鼠高血糖體內(nèi)模型上檢測其降血糖作用，發(fā)現(xiàn)口71'〇(3；[]1油〇1;[03(31(13 6-0-P-D-quinovopyranosyl-28-O-P-D-邑lucopyranoside(1),pyrocincholicacid3 6-0-P-D-quinovopyranosyl-28-0-P-D-邑lucopyranosyl- (1 一 6) -P-D-邑lucopyranoside(2)、 pyrocincholicacid3P-0-P-D-邑lucopyranosyl-(1 一 4) -P-D-quinovopyranosyl-28-0-P-D-glucopyranoside(3),pyrocincholicacid3P-0-P-D-glucopyranosyl-(1一4)- P-D-quinovopyranosyl-28-0-P-D-邑lucopyranosyl- (1 一 6) -P-D-邑lucopyranoside(4) 在體內(nèi)顯示出優(yōu)于陽性對照藥二甲雙脈（同濃度給藥）的降血糖活性，為新型植物來源的 抗二型糖尿病降血糖活性化合物，可用于制備抗二型糖尿病的降血糖藥物。
[00巧]本發(fā)明的所述黃棉木中pyrocincholicacid型S祗皂巧或其藥理學(xué)上容許的鹽， 可W列舉例如與鹽酸、硝酸、硫酸、憐酸、氨漠酸等無機酸，或者馬來酸、富馬酸、酒石酸、乳 酸、巧樣酸、乙酸、甲橫酸、對-苯甲橫酸、己二酸、棟桐酸、單寧酸等有機酸，裡，鋼、鐘等堿 金屬，巧、儀等堿±金屬，賴氨酸等堿性氨基酸成的鹽。
[0026] 本發(fā)明所述的治療二型糖尿病相關(guān)疾病的藥物組合物或藥物，由黃棉木中 pyrocincholicacid型立祗皂巧化合物或黃棉木立祗皂巧提取物與藥學(xué)上可接受的載體 制備的藥物劑型包括片劑、膠囊、口服液、針劑、注射用凍干劑或粉針劑等。由于片劑、膠囊、 口服液、針劑、注射用凍干劑或粉針劑等藥物劑型的制備是本領(lǐng)域的常規(guī)知識，因此，由黃 棉木中pyrocincholicacid型=祗皂巧與相應(yīng)載體制備的各種藥物劑型也能夠由本領(lǐng)域 技術(shù)人員實現(xiàn)。
[0027] 上文中所述的藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，例如：稀釋劑、 賦形劑如水等，填充劑如淀粉、薦糖等；黏合劑如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙締化咯 燒酬；濕潤劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸巧和碳酸氨鋼；吸收促進劑如季錠化合物；表面 活性劑如十六燒醇；吸附載體如高嶺±和皂黏± ;潤滑劑如滑石粉、硬脂酸巧和硬脂酸儀、 W及聚乙二醇等。另外還可W在組合物中加入其它輔劑如香味劑、甜味劑等。
[0028]本發(fā)明的提取物或化合物可組合物的形式通過口服、鼻吸入、直腸或腸胃外 給藥的方式施用于需要運種治療的患者。用于口服時，可將其制成常規(guī)的固體制劑如片劑、 粉劑、粒劑、膠囊等，制成液體制劑如水或油懸浮劑或其他液體制劑如糖漿、馳劑等；用于腸 胃外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油性懸浮劑等。本發(fā)明藥物組合物的各種劑型 可W按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將 其制成所需的劑型。
[0029] 本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選含有重量比為0. 1%~99. 5%的活性成分，最優(yōu)選含有 重量比為0. 5%~95%的活性成分。
[0030] 本發(fā)明提取物或化合物的施用量可根據(jù)用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療的疾 病的類型和嚴重程度等變化，其日劑量可W是0. 01~lOmg/kg體重，優(yōu)選0. 1~5mg/kg體 重。可W-次或多次施用。
[0031] 本發(fā)明黃棉木S祗皂巧提取物和黃棉木中pyrocincholicacid型S祗皂巧提 取方法的優(yōu)越性在于，植物樣品選取的是枝葉部分，原料豐富且利于植物資源的保護和可 持續(xù)利用，提取分離思路具有新穎性，成功利用色譜層析技術(shù)將其它小分子和黃棉木中 pyrocincholicacid型S祗皂巧分離，得到較為集中的pyrocincholicacid型S祗皂巧， 再利用正向及反向柱色譜技術(shù)等分離得到純化的pyrocincholicacid型S祗皂巧。概括 地說，因黃棉木的主要化學(xué)成分還有其它類型的S祗皂巧，在pyrocincholicacid型S祗 皂巧分離過程中，有大量的其它類型的=祗皂巧化合物干擾，尤其是烏蘇酸型=祗皂巧，常 常和pyrocincholicacid型S祗皂巧混雜在一起不易分離。
[0032] 本發(fā)明首先利用90%甲醇，充分浸提出=祗及其皂巧類化合物，再利用有機溶劑 萃取技術(shù)將=祗皂巧富集到正下醇溶解部位，然后用正相色譜柱進行吸附層析，W氯仿/ 甲醇系統(tǒng)梯度洗脫，成功分離富集得到含色素較少的黃棉木=祗皂巧部分（氯仿/甲醇 9:1至氯仿/甲醇6:1部位，也就是黃棉木=祗皂巧提取物），再結(jié)合各種層析材料包括正 向硅膠W及反向RP-18等多種分離手段包括重結(jié)晶等，分離純化到pyrocincholicacid型 S祗皂巧純品。其次，僅利用實驗室或工業(yè)上常規(guī)的層析材料，包括正反相硅膠、S巧hadex LH-20等，不必運用特殊層析材料如氨丙基鍵合硅膠，也避免運用吸附性較強的活性炭和 氧化侶等層析材料；最后，黃棉木中pyrocincholicacid型=祗皂巧的分離過程中必須結(jié) 合pyrocincholicacid型S祗皂巧的TLC檢測方法。總之，本發(fā)明提取分離方法可控性