Aspochalasin類化合物在制備抗HIV潛伏藥物和治療艾滋病藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及治療艾滋病藥物的技術領域，具體涉及Aspochalasin類化合物在制 備抗HIV潛伏藥物和治療艾滋病藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS)是由艾滋病毒（HIV)感染引起的一種嚴重危害 人們生命健康的傳染性疾病，目前臨床采用的高效抗逆轉錄病毒療法（Highly active antiretroviral therapy, HAART)，雖然能極大地提高艾滋病人的生存時間和質量，但是 HIV感染人體后會與宿主細胞整合，形成無法被HAART清除的病毒庫。這些潛伏病毒，在 停止HAART后會重新激活并迅速反彈，因此艾滋患者需長期用藥，而長期用藥會引起病毒 變異，耐藥性增加，藥物不良反應增加而使治療失?。℉o, D.D. Toward HIV eradication or remission:the tasks ahead. Science，1998. 280:1866 - 1867·)。研究顯不，HIV難以 在體內被完全清除的一個重要原因是HIV能夠潛伏在靜息的記憶CD4+T細胞中，該潛伏 感染細胞是由一小部分HIV感染的活化CD4+T細胞轉化而產(chǎn)生的，其整合的前病毒缺乏 轉錄活性，因而，不會被免疫系統(tǒng)和抗逆轉錄酶病毒的藥物攻擊。盡管感染個體攜帶潛伏 感染細胞數(shù)量較少，但衰減率是如此之慢，以至于欲在個體生存期內僅靠 HAART治療將其 徹底清除是不可能的。因此，HIV潛伏感染的靜息CD4+T細胞是構成機體內病毒儲藏庫 (reservoir)的主要部分，同時也是目前臨床治療不能徹底清除HIV的巨大障礙[Finzi，D. et al.Latent infection of CD4+T cells provides a mechanism for lifelong persistence of HIV-Ij even in patients on effective combination therapy. Nature Med. 1999, 5, 512 - 517]。
[0003] 現(xiàn)實成功的個案提示，艾滋病的"功能性"治愈是可以實現(xiàn)的，而清除HIV潛 伏病毒庫是最有希望的方法[實現(xiàn)艾滋病的功能性治愈的策略，中國艾滋病性病， 2015, 21:253-256]，因而探索激活和清除HIV潛伏庫的方法以獲得艾滋病臨床功能性治 愈，是當前艾滋病研究的熱點。目前臨床研究的HIV潛伏激活劑有細胞因子IL-2、細胞因子 IL-7,組蛋白去乙?；敢种苿┓⒅Z他，以及甲基化酶抑制劑。以上在研藥物都存在不同 的不足，如激活效果弱，不良反應明顯等。因而，發(fā)現(xiàn)更加安全有效的HIV潛伏激活劑及相 應的治療方案已是當務之急。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明提供了一種Aspochalasin類化合物在制備抗HIV潛伏藥物和在制備治療 艾滋病藥物中的應用。
[0005] Aspochalasin類化合物在制備抗HIV潛伏藥物和在制備治療艾滋病藥物中的應 用，本發(fā)明提供的Aspochalasin類化合物，為一種具有激活HIV潛伏作用的藥物，為式I所 示的結構，式Π 所示的結構是在式I結構的基礎上，標注了 A、B、C，本發(fā)明的Aspochalasin 類化合物，A、B、C環(huán)形成5/6/11三環(huán)駢合結構，其C大環(huán)可有不同的取代。即所述的札、 R2、R3、RJP R5為氫、羥基、羰基、雙鍵、環(huán)氧、甲基、烷烴酰胺等中的一種或兩種以上（包括兩 種），札、R2、R 3、化和R5相同或者不相同。
[0008] 本發(fā)明提供的Aspochalasin類化合物，可以為混合物，也可以為單一的化合物， Aspochalasin 類化合物可包括 Aspochalasin E (Rp R2、R3、1?4和 R5分別為 OH、OH、OH、H 和 H)、Aspochalasin IVKR1' R2、R3、R4和 R 5分別為 H、= 0、OH、H 和 H)、Aspochalasin P (R p R2、 R3、尺4和 R 5分別為 Η、OH、= 0、H 和 Η)、aspochlasin C (R !、R2、R3分別為 H、OH、OH，R 4和 R 5形 成雙鍵）和19,20-乜1^辦〇-&8口〇(*1&8111(：(1?1、1? 2、1?3、1?4和1?5分別為11、0!1、0!1、!1和！1)及 其組合物。
[0009] 即所述的 Aspochalasin 類化合物為 Aspochalasin E、Aspochalasin M、 Aspochalasin P、aspochlasin C、19, 2〇-dihydr〇-aspochlasin C 中的一種或兩種以上， 其中，Aspochalasin E 中 R!、R2、R3、心和 R5分別為 OH、OH、OH、H 和 H，Aspochalasin M 中 R!、R2、R3、R4和 R 5分別為 H、= 0、OH、H 和 H，Aspochalasin P 中 R !、R2、R3、心和 R 5分 別為 Η、0H、= 0、H 和 H，aspochlasin C 中 Rn R2、R3分別為 H、OH、OH，R 4和 R 5形成雙鍵， 19, 20-dihydro-aspochlasin C 中 R1' R2、R3、心和 R 5分別為 H、OH、OH、H 和 H0
[0010] 進一步優(yōu)選，所述的 Aspochalasin 類化合物為 aspochlasin C，aspochlasinC 中 Ri、R2、R3分別為10!1、0!1，1?4和1?5形成雙鍵。在低濃度時即能明顯使感染細胞內潛伏的!11￥ 表達，相對激活率高，與抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合使用，可更好地清除被激活的潛伏感染的細 胞，以此加速潛伏病毒庫的清除，從而用于艾滋病的治療。
[0011] Aspochalasin類化合物可以商業(yè)購買，也可以由曲 J. Org. Chem. 2009, 3045-3051)、或 Trichodermagamsii (Fitoterapia, 2012, 541-544)、或黃 柄曲霉Aspergillus flavipes (J. Nat. Prod. 2004, 328-332)等真菌發(fā)酵產(chǎn)物提取分離得 到。
[0012] 本發(fā)明采用HIV潛伏細胞模型進行活性篩選試驗，結果顯示Aspochalasin類化合 物能使感染細胞內潛伏的HIV表達，具有干預HIV潛伏的作用，與抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合使 用，可清除被激活的潛伏感染的細胞，以此加速潛伏病毒庫的清除，為艾滋病的徹底治愈提 供新的途徑。
[0013] 本發(fā)明提供的Aspochalasin類化合物和抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合在制備治療艾滋 病藥物中的應用。
[0014] 本發(fā)明提供的Aspochalasinl類化合物特別適合與其它抗HIV的藥物聯(lián)用。尤其 是本發(fā)明的活性成分可與抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合使用，清除潛伏感染的細胞，從而用于艾 滋病的治療。所述的抗HIV藥物包括：一、核苷類逆轉錄酶抑制劑：齊多夫定、地丹諾辛、扎 西他濱、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韋；二、非核苷類逆轉錄酶抑制劑：奈韋拉平、地拉韋 啶、依非韋倫；三、及蛋白酶抑制劑：沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋、奈非那韋、安普那韋。 即所述的抗逆轉錄病毒藥物為齊多夫定、地丹諾辛、扎西他濱、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡 韋、奈韋拉平、地拉韋啶、依非韋倫、沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋、奈非那韋、安普那韋中 的一種或兩種以上（包括兩種）。
[0015] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的主要優(yōu)點包括：
[0016] 1.提出了 Aspochalasin類化合物的新用途，其在低濃度時即能明顯使感染細胞 內潛伏的HIV表達。
[0017] 2.所述的Aspochalasin類化合物可作為活性成分，制備具有激活HIV潛伏作用的 藥物。
[0018] 3.所述的Aspochalasin類化合物可進一步可與抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合使用，為 艾滋病的徹底治愈提供新的途徑。
【具體實施方式】
[0019] 實施例1
[0020] HIV潛伏誘導激活實驗
[0021] 將活性篩選用的細胞按每孔2 X IO4個種植于96孔板，每孔加入100微升含10% FBS (胎牛血清，Gibco)的1640培養(yǎng)基（Gibco)。24小時后，加入一定濃度的Aspochalasin 類化合物。藥物處理細胞72小時后，在熒光顯微鏡下觀察細胞GFP表達情況，并收集細胞 進行流式細胞術檢測，分析熒光細胞所占比例。
[0022] 實施例2
[0023] 用終濃度為20微克/毫升的As