一種腫瘤耐藥的靶點(diǎn)及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于分子生物學(xué)和腫瘤防治領(lǐng)域，更具體而言，本發(fā)明設(shè)及預(yù)測(cè)、診斷和治 療腫瘤耐藥性領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 惡性腫瘤是危害人類(lèi)健康的一類(lèi)疾病，化療是目前治療惡性腫瘤的主要手段之 一。然而，腫瘤對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性已成為影響腫瘤治療效果的一大障礙。對(duì)腫瘤耐藥發(fā) 生機(jī)制的研究和尋找開(kāi)發(fā)逆轉(zhuǎn)耐藥的藥物是當(dāng)前腫瘤防治研究領(lǐng)域的重點(diǎn)和難點(diǎn)。
[0003] 818作02家族基因臟〇：1基因編碼細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子魁(：1(肌(316113 3(3州油6郵-1，伏隔 核1)的表達(dá)，其定位于人染色體區(qū)化19pl3.2"NACl在多種腫瘤中（例如卵巢癌、宮頸癌、子 宮內(nèi)膜癌、乳腺癌和結(jié)腸癌等)過(guò)表達(dá)NACUBTB結(jié)構(gòu)域(也稱(chēng)為POZ結(jié)構(gòu)域)是介導(dǎo)蛋白相互 作用的重要結(jié)構(gòu)域，NACl的BZB結(jié)構(gòu)域（1-129氨基酸序列）是形成NACl二聚體復(fù)合物所必需 的，形成的NACl二聚體復(fù)合物可W參與多種生物功能調(diào)控:例如基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、泛素途徑的 蛋白降解、細(xì)胞形態(tài)、增殖和調(diào)亡等等。
[0004] 為了逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥，提高化療療效，本領(lǐng)域迫切需要通過(guò)多種方式研究腫瘤耐藥 發(fā)生的機(jī)制、腫瘤耐藥的關(guān)鍵基因祀點(diǎn)，并根據(jù)運(yùn)些祀點(diǎn)設(shè)計(jì)治療腫瘤耐藥的新藥，從而引 導(dǎo)腫瘤耐藥?kù)胂蛐灾委煛?br>
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本部分的目的在于概述本發(fā)明的實(shí)施例的一些方面W及簡(jiǎn)要介紹一些較佳實(shí)施 例。在本部分W及本申請(qǐng)的說(shuō)明書(shū)摘要和發(fā)明名稱(chēng)中可能會(huì)做些簡(jiǎn)化或省略W避免使本部 分、說(shuō)明書(shū)摘要和發(fā)明名稱(chēng)的目的模糊，而運(yùn)種簡(jiǎn)化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。
[0006] 鑒于上述和/或現(xiàn)有腫瘤藥物及其應(yīng)用中存在的問(wèn)題，提出了本發(fā)明。
[0007] 因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種腫瘤耐藥的關(guān)鍵基因祀點(diǎn)及蛋白祀點(diǎn)，為逆 轉(zhuǎn)腫瘤耐藥、提高化療療效提供更為有效的工具。
[000引為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案:一種腫瘤耐藥的祀點(diǎn)，其所述 祀點(diǎn)為核轉(zhuǎn)錄因子伏隔核1和/或其參與的自隧途徑。
[0009] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種伏隔核1抑制劑在降低和/或消除腫瘤治療中的 耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
[0010] 作為本發(fā)明所述伏隔核1抑制劑在降低和/或消除腫瘤治療中的耐藥性的藥物中 的應(yīng)用的一種優(yōu)選方案，其中：所述伏隔核1抑制劑包括:抗伏隔核1的抗體、針對(duì)伏隔核1編 碼序列的RNA干擾分子或反義寡核巧酸、伏隔核1介導(dǎo)的自隧途徑抑制劑。
[0011] 作為本發(fā)明所述伏隔核1抑制劑在降低和/或消除腫瘤治療中的耐藥性的藥物中 的應(yīng)用的一種優(yōu)選方案，其中：所述抗伏隔核1的抗體包括:對(duì)抗伏隔核1或其活性片段具有 特異性的多克隆抗體和單克隆抗體。
[0012] 作為本發(fā)明所述伏隔核1抑制劑在降低和/或消除腫瘤治療中的耐藥性的藥物中 的應(yīng)用的一種優(yōu)選方案，其中：所述抗伏隔核I的抗體還包括具有免疫活性的抗體片段。
[0013] 作為本發(fā)明所述伏隔核1抑制劑在降低和/或消除腫瘤治療中的耐藥性的藥物中 的應(yīng)用的一種優(yōu)選方案，其中：所述具有免疫活性的抗體片段包括:Fab'或(Fab)2片段、抗 體重鏈、抗體輕鏈、遺傳工程改造的單鏈Fv分子或嵌合抗體。
[0014] 本發(fā)明的還一個(gè)目的是提供一種藥物組合物，其包括:如權(quán)利要求2所述的伏隔核 1抑制劑W及藥學(xué)上能夠接受的載體。
[0015] 作為本發(fā)明所述藥物組合物的一種優(yōu)選方案，其中：所述藥學(xué)上能夠接受的載體 包括:鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇中的一種或幾種。
[0016] 本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種篩選抗耐藥的腫瘤治療藥物的方法，其包括:提 供表達(dá)伏隔核1的腫瘤細(xì)胞系、腫瘤培養(yǎng)物或荷瘤動(dòng)物;將候選藥物與提供的所述腫瘤細(xì)胞 系、腫瘤培養(yǎng)物或荷瘤動(dòng)物接觸，作為給藥組;檢測(cè)給藥組中伏隔核1的表達(dá)水平，并與未給 予候選藥物的對(duì)照腫瘤細(xì)胞系、腫瘤培養(yǎng)物或荷瘤動(dòng)物的NACl表達(dá)水平進(jìn)行比較，如果檢 測(cè)結(jié)果顯示，給藥組伏隔核1的表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組，則表明該候選藥物是抗耐藥的腫 瘤治療藥物。
[0017] 本發(fā)明的有益效果：
[0018] (1)掲示了 NACl與腫瘤耐藥性之間的關(guān)系，為設(shè)計(jì)和篩選耐藥腫瘤藥物提供了新 的途徑和祀點(diǎn)；
[0019] (2)提供了通過(guò)抑制NACl及其相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)提高腫瘤對(duì)腫瘤治療的敏感性 的新方法，從而起到了提高腫瘤治療效果、減少腫瘤治療劑用量、緩解患者痛苦的積極作 用，具有臨床的實(shí)用性。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】 對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】做詳細(xì)的說(shuō)明。
[0021] 在下面的描述中闡述了很多具體細(xì)節(jié)W便于充分理解本發(fā)明，但是本發(fā)明還可W 采用其他不同于在此描述的其它方式來(lái)實(shí)施，本領(lǐng)域技術(shù)人員可W在不違背本發(fā)明內(nèi)涵的 情況下做類(lèi)似推廣，因此本發(fā)明不受下面公開(kāi)的具體實(shí)施例的限制。
[0022] 其次，此處所稱(chēng)的"一個(gè)實(shí)施例"或"實(shí)施例"是指可包含于本發(fā)明至少一個(gè)實(shí)現(xiàn)方 式中的特定特征、結(jié)構(gòu)或特性。在本說(shuō)明書(shū)中不同地方出現(xiàn)的"在一個(gè)實(shí)施例中"并非均指 同一個(gè)實(shí)施例，也不是單獨(dú)的或選擇性的與其他實(shí)施例互相排斥的實(shí)施例。
[0023] 本發(fā)明中提供了一種新的腫瘤耐藥標(biāo)志物:在腫瘤組織中高表達(dá)并導(dǎo)致腫瘤耐藥 的核轉(zhuǎn)錄因子伏隔核Unucleus accumbens-1 ,NACl )，將該蛋白作為祀點(diǎn)，可設(shè)計(jì)出針對(duì)該 蛋白及其相關(guān)分子的預(yù)測(cè)、診斷腫瘤耐藥試劑盒、篩選針對(duì)該蛋白及其相關(guān)分子的治療腫 瘤耐藥的藥物。
[0024] 本發(fā)明的主要目的之一就是為了提供一種腫瘤耐藥的關(guān)鍵基因祀點(diǎn)及蛋白祀點(diǎn)， 為逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥、提高化療療效提供更為有效的工具。本發(fā)明的另一個(gè)主要目的是根據(jù)運(yùn) 些祀點(diǎn)設(shè)計(jì)預(yù)測(cè)、診斷腫瘤耐藥試劑盒、篩選針對(duì)該蛋白及其相關(guān)分子信號(hào)通路的治療腫 瘤耐藥的藥物。本發(fā)明的目的之一是提供一種逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的關(guān)鍵祀點(diǎn)NACl，針對(duì)該祀點(diǎn) 及其相關(guān)信號(hào)通路，如自隧激活抑制劑，設(shè)計(jì)藥物和治療方案，下調(diào)腫瘤中NACl表達(dá)或抑制 其功能，能夠有效治療耐藥腫瘤。
[0025] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述NACl來(lái)自人或其它真核生物，例如小鼠、大鼠、 ?；蚝锏龋宜鼈冎g具有高度的保守性。
[0026] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述抑制劑選自：抗NACl的抗體、針對(duì)NACl編碼序列 的RNA干擾分子或反義寡核巧酸。
[0027] 在另一個(gè)優(yōu)選例中，所述NACl相關(guān)信號(hào)通路抑制劑選自：自隧抑制劑氯哇。
[0028] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述抑制劑是選自下組的RNA干擾分子:shRNA、 siRNA、miRNA或dsRNA，更優(yōu)選運(yùn)些RNA干擾分子是針對(duì)NACl序列的干擾分子，更優(yōu)選所述 ShRNA 的序列為:GAGGAAGAACUCGGUGCCCUUCUCCAU。
[0029] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述腫瘤選自：卵巢癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、乳 腺癌、、乳腺癌、結(jié)腸癌、優(yōu)選卵巢癌。
[0030] 在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，所述腫瘤治療所采用的治療劑選自：燒化劑、抗代 謝藥、抗腫瘤抗生素、植物類(lèi)抗癌藥或免疫制劑。
[0031] 在一個(gè)優(yōu)選例中，所述治療劑選自：順?shù)N、卡銷(xiāo)、環(huán)憐酷胺、氮締咪胺、異環(huán)憐酷胺、 鹽酸氮芥/苯丙氨酸氮芥、5-氣脈喀晚、甲氨蝶嶺、阿糖胞巧、環(huán)胞巧、博來(lái)霉素、更生霉素、 紅必霉素、阿霉素、黃膽素、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、=尖杉醋堿、足葉乙武、n冬酷胺酶、維甲酸。
[0032] 在另一個(gè)優(yōu)選例中，所述治療劑優(yōu)選為銷(xiāo)類(lèi)藥物:順?shù)N或卡銷(xiāo)。
[0033] 在本發(fā)明的第二方面中，提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含：
[0034] (i)NACl 抑制劑；
[0035] (ii)腫瘤治療劑；
[0036] (iii)藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
[0037] 在一個(gè)優(yōu)選例中，所述腫瘤治療劑是化療劑。
[0038] 在本發(fā)明的第=方面中，提供了一種藥盒，所述藥盒包含：
[0039] (A)容納有NACl抑制劑的容器；
[0040] (B)容納腫瘤治療劑的容器和(C)使用說(shuō)明書(shū)。
[0041] 在一個(gè)優(yōu)選例中，本發(fā)明的藥物組合物或藥盒中所包含的抑制劑選自：抗NACl的 抗體、針對(duì)NACl編碼序列的RNA干擾分子或反義寡核巧酸、自隧抑制劑氯哇。
[0042] 在另一個(gè)優(yōu)選例中，本發(fā)明的藥物組合物或藥盒中所包含的抑制劑為選自下組的 RNA干擾分子:shRNA、siRNA、miRNA或dsRNA，優(yōu)選為ShRNA或siRNA，更優(yōu)選序列為針對(duì)NACl 的 26 個(gè)堿基序列:GAGGAAGAACUCGGUGCCCUUCUCCAU。
[0043] 在另一個(gè)優(yōu)選例中，所述的自隧抑制劑氯哇作用于NACl介導(dǎo)的自隧激活信號(hào)通路
[0044] 在另一個(gè)優(yōu)選例中，所述腫瘤選自卵巢癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌、結(jié)腸 癌，更優(yōu)選卵巢癌。