專利名稱：參麥注射液的化學成分的制備及其在治療心腦血管疾病中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種應用于治療心腦血管疾病的中藥注射劑的活性化學成分的制備方法及在治療心血管疾病方面的應用。
背景技術(shù)：
參麥注射液(又稱“參麥水針劑”，以下簡稱“參麥針”)是古方“生脈散”的衍變方，由紅參和麥冬兩種中藥材經(jīng)現(xiàn)代工藝提取加工而成，用于治療氣陰兩虛型之休克、冠心病、病毒性心肌炎、慢性肺心病、粒細胞減少癥，為國家中藥保護品種，系基本急救藥品。參麥針已有20余年的臨床應用，但是其中的活性成分一直不清楚，目前的參麥針的質(zhì)量標準定為人參(紅參)里的三個人參皂甙Rb1、Rg1和Re，不過研究表明這三個化合物對現(xiàn)有的所有心腦血管方面的藥理模型沒有顯著作用。參麥針在生產(chǎn)上是由藥材紅參和麥冬分別制成紅參原液和麥冬原液，經(jīng)滅菌后1∶1混合而成，我們對參麥針、紅參原液和麥冬原液進行了保護心肌細胞凋亡、抑制AAPH的氧化和增加血管內(nèi)皮細胞一氧化氮的釋放等藥理活性測試，結(jié)果表明紅參原液幾乎不起作用，而麥冬原液和參麥針的主要活性指標相近。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是通過對參麥針的麥冬原液所含化學成分及其藥理活性的研究，確定其中用于治療心腦血管疾病的有效成分，此研究可以用于參麥針產(chǎn)品的質(zhì)量控制指標以及參麥針的二次開發(fā)提高心腦血管疾病的治療效果。
本發(fā)明主要將參麥針的麥冬原液經(jīng)大孔樹脂吸附，以水和含乙醇水溶液洗脫，再經(jīng)硅膠柱、反向硅膠柱、葡聚糖凝膠柱等層析分離，高效液相分離，升華和結(jié)晶等方法得到這9個化合物，這9個化合物具有單獨或同時保護心肌細胞凋亡、抗氧化和增加血管內(nèi)皮細胞一氧化氮釋放等功效。
具體實施例方式
1.化合物的制備方法1.1化合物I-VIII的制備方法i.)10公斤的中藥浙麥冬藥材按照參麥注射液的生產(chǎn)工藝制備成麥冬原液，經(jīng)40℃減壓濃縮后，用大孔樹脂柱層析分離，以梯度的水-酒精洗脫液洗脫，得到麥冬原液的水、10％、20％、40％、60％、80％及95％酒精洗脫部分。
ii.)i中獲得的95％酒精洗脫部分用硅膠柱分離，用石油醚、氯仿、氯仿-丙酮(1∶0→1∶1)、氯仿-甲醇(50∶1→1∶1)為展開劑洗脫；氯仿-丙酮(20∶1)洗脫部分繼續(xù)用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙酯(5∶1)作為展開劑純化可獲得化合物VI；氯仿-丙酮(5∶1)洗脫部分用硅膠柱層析進一步分離，以石油醚-乙酸乙酯(2∶1)作為展開劑，可獲得化合物V和化合物(VIIa+VIIb)富集部分，再分別用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱純化，以氯仿展開可分別獲得V和(VIIa+VIIb)，后者為一對差向異構(gòu)體，用制備型的高效液相(PreStar系統(tǒng)，merckODS填充柱1.2×25cm，乙腈-水30％-60％)制備得到VIIa和VIIb；氯仿-甲醇(50∶1)洗脫部分用硅膠柱層析(展開劑為氯仿-甲醇25∶1)進一步純化可獲得化合物I富集部分，再經(jīng)升華可得純I；氯仿-甲醇25∶1洗脫部分洗脫部位用用硅膠柱層析(氯仿-甲醇15∶1)進一步純化可獲得IV。
iii.)i中的80％酒精洗脫部分硅膠柱分離，用氯仿-甲醇(50∶1→1∶1)為展開劑洗脫；氯仿-甲醇10∶1洗脫部分洗脫部位再用硅膠柱層析(氯仿-甲醇-水5∶1∶0.1)進一步純化可獲得化合物II富集部分，再用RP-18反相柱純化，用乙醇(或甲醇)-水(2∶1)作為分配溶液沖洗可以獲得II。
iv.)i中獲得的40％酒精洗脫部分用硅膠柱分離，用氯仿(或乙酸乙酯和二氯甲烷)-甲醇(或乙醇)梯度洗脫。氯仿-甲醇5∶1洗脫部分進一步用RP-18反相柱純化，用甲醇-水(4∶1)作為分配溶液可分別獲得化合物III和VIII。
1.2理化數(shù)據(jù)化合物I(2-莰醇)白色結(jié)晶(甲醇)，熔點208℃，旋光[α]D20-38°(c＝5，EtOH)。分子式C10H18O，分子重154；ESI-MSm/z＝155([M+H]+).1H NMR(CDCl3，300MHz)δ0.81(6H，s，Me-8和Me-9)，0.83(3H，s，Me-10)，0.95(1H，dd，J＝13.3，3.6Hz，Hax-3)，1.58(1H，t，J＝4.6Hz，H-4)，3.94(1H，ddd，J＝10.0，3.7，2.0Hz，H-2)；13C NMR(pyridine-d5)δ13.35(C-10)，18.48(C-8)，19.46(C-9)，26.79(C-6)，28.03(C-5)，36.84(C-3)，44.82(C-4)，47.12(C-7)，49.23(C-1)，83.16(C-2).
化合物II(2-莰醇葡萄糖苷)白色針狀結(jié)晶(甲醇)，熔點125-127℃，旋光[α]D20-8.6(c＝0.3，MeOH)。分子式C16H28O6，分子重316；ESI-MSm/z＝317([M+H]+).1H NMR(pyridine-d5)δ0.75(6H，s，Me-8和Me-9)，1.05(3H，s，Me-10)，4.51(dd，J＝11.4，2.2Hz，H-2)，4.89(1H，d，J＝7.8Hz，H-1′)；13C NMR(pyridine-d5)δ14.3(C-10)，18.9(C-8)，19.9(C-9)，27.2(C-6)，28.6(C-5)，38.1(C-3)，45.5(C-4)，48.8(C-7)，50.0(C-1)，86.2(C-2)，106.2(C-1′)，75.6(C-2′)，78.7(C-3′)，71.9(C-4′)，78.2(C-5′)，63.1(C-6′)。(藥學雜志(Yakugaku Zasshi)1983，103(11)1133)化合物III(2-莰醇-O-芹糖(1-6)葡萄糖苷)白色針狀結(jié)晶(甲醇)，熔點183-185℃，旋光[α]D23-53.4(c＝0.44，MeOH)，分子式C21H36O10，分子重448；IRυKBrmaxcm-13400，2982，1054；1H NMR(400MHz，pyridine-d5)5.86(d，J＝2.3Hz)，4.85(d，J＝7.7Hz，H-1′)，4.77(d，J＝2.3Hz，H-1”)，4.73(dd，J＝11.2，1.8，H-2)，4.59(d，J＝9.4，Ha-5″)，4.37(d，J＝9.4，Hb-5″)，1.04(s，10-Me)0.81(s，8-Me)，0.74(s，9-Me).13C NMR(pyridine-d5)δ86.14(C-2)，49.89(C-1)，47.57(C-7)，45.33(C-4)，38.08(C-3)，28.54(C-5)，27.08(C-6)，19.81(C-8)，18.89(C-9)，14.13(C-10)，106.16(C-1′)，78.57(C-3′)，77.83(C-5′)，75.42(C-2′)，71.84(C-4′)，68.76(C-6′)，111.06(C-1″)，80.54(C-3”)，77.17(C-2”)，75.01(C-4″)，65.63(C-5”).(藥學雜志(Yakugaku Zasshi)，1983，103(11)1133)
化合物IV(2，5-莰二醇)白色結(jié)晶(甲醇)，熔點255-257，旋光[α]D25-16.12(c＝0.46，MeOH)。分子式C10H18O2，分子重170.251；ESI-MS m/z193([M+Na]+).1H NMR(pyridine-d5)δ0.92(3H，s，H-9 or H-10)，1.21(3H，s，H-9 or H-10)，1.42(3H，s，H-1)，4.36(1H，br.s，H-3)，5.21(1H，br.s，H-7)；13C NMR(pyridine-d5)δ13.2(C-1)，50.4(C-2)，74.5(C-3)，34.9(C-4)，53.1(C-5)，40.1(C-6)，82.5(C-7)，47.3(C-8)，20.0(C-9)，21.2(C-10)。(Phytochemistry，1983，22(3)774)化合物V(甲基麥冬二氫高異黃酮B)白色粉末，分子式C19H20O6，分子重344；EI-MSm/z(％)344[M]+(80)，326[M-H2O]+，220(25)，208(84)，207(62)，137(100)，121(5)，84(40)，77，56.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.25(1H，dd，J＝12.0，7.0Hz，H-2)，4.42(1H，dd，J＝12.0，3.0Hz，H-2)，3.30-3.40(1H，m，H-3)，13.10(5-OH)，2.30(3H，s，6-Me)，2.39(3H，s，8-Me)，2.95(1H，dd，J＝10.0，10.0Hz，H-9)，3.75(1H，d，J＝10.0Hz，H-9)，7.10(1H，d，J＝8.2Hz，H-2′)，6.58(1H，dd，J＝8.2，2.4Hz，H-3′)，6.78(1H，d，J＝2.4Hz，H-5′)，3.80(3H，s，7′-OMe)；13C NMR(100MHz)δ69.9(C-2，t)，45.4(C-3，d)，198.4(C-4，s)，158.4(C-5，s)，102.5(C-6，s)，160.2(C-7，s)，104.5(C-8，s)，27.6(C-9，t)，157.7(C-10，s)，102.3(C-11，s)，8.8(6-Me)，8.5(8-Me)，118.2(C-1′，s)，132.1(C-2′，d)，104.5(C-3′，d)，158.1(C-4′，s)，103.3(C-5′，d)，164.1(C-6′，s)，55.0(5′-OMe).(Chem Pharm Bull，1980，28(5)1477)化合物VI(羥基甲基麥冬二氫高異黃酮B)白色針狀結(jié)晶(丙酮)熔點159-160℃，分子式C19H20O5，分子量328；EI-MS(m/z)329(M+，36)，310(MH2O)，207(4)，135(16)，121(100).1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.09(1H，dd，J＝12.0，7.0Hz，H-2)，4.31(1H，dd，J＝12.0，3.0Hz，H-2)，2.72-3.08(1H，m，H-3)，12.34(5-OH)，2.03(3H，s，6-Me)，2.08(3H，s，8-Me)，2.66(1H，dd，J＝10.0，10.0Hz，H-9)，3.20(1H，d，J＝10.0Hz，H-9)，7.15(2H，d，J＝9.0Hz，H-2′andH-6′)，6.87(2H，d，J＝9.0Hz，H-3′and H-5′)，3.80(3H，s，7′-OMe)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ68.6(C-2，t)，46.6(C-3，d)，198.3(C-4，s)，159.3(C-5，s)，102.6(C-6，s)，160.4(C-7，s)，102.0(C-8，s)，31.8(C-9，t)，157.5(C-10，s)，101.3(C-11，s)，8.0(6-Me)，7.6(8-Me)，129.8(C-1′，s)，129.8(C-2′，d)，113.8(C-3′，d)，158.1(C-4′，d)，113.8(C-5′，d)，129.8(C-6’，d)，55.0(5’-OMe).
化合物VIIa(2β-羥基甲基麥冬二氫高異黃酮A)黃色無定形粉末，分子式C19H18O7，分子量358；EIMS(％，m/z)358[M]+(56)，340[M-H2O]+(16)，329(20)，181(35)，135(100)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δδ12.22(1H，s，5-OH)，6.70-6.65(3H，重疊信號，H-2′，H-3′and H-6′)，5.94(2H，s，H-7′)，5.56(1H，br.s，H-2)，3.41(1H，dd，J＝14.1，4.7Hz，H-9a)，3.11(1H，m，H-3)，2.71(1H，dd，J＝14.1，10.7Hz，H-9b)，2.03(6H，s，6-Me and 8-Me)；13C NMR(100MHz，DEPT)δ96.3(C-2，t)，51.4(C-3，d)，196.4(C-4，s)，159.1(C-5，s)，103.5(C-6，s)，161.0(C-7，s)，102.9(C-8，s)，30.1(C-9，t)，153.4(C-10，s)，102.4(C-11，s)，7.7(6-Me)，7.2(8-Me)，131.4(C-1′，s)，109.6(C-2′，d)，108.6(C-3′，d)，146.6(C-4′)，108.7(C-5′，s)，122.6(C-6′，d)，101.3，(7′-C，t).
化合物VIIb(2α-羥基甲基麥冬二氫高異黃酮A)黃色無定形粉末，分子式C19H18O7，分子量358；EIMS(m/z)358[M]+(56)，340[M-H2O]+(16)，329(20)，135(100)，121(12)；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ12.22(1H，s，5-OH)，6.70-6.65(3H，重疊信號，H-2′，H-3′andH-6′)，5.94(2H，s，H-7′)，5.50(1H，br.s，H-2)，3.41(1H，dd，J＝14.1，4.7Hz，H-9a)，3.11(1H，m，H-3)，2.71(1H，dd，J＝14.1，10.7Hz，H-9b)，2.03(6H，s，6-Me and 8-Me)；13C NMR(100MHz，DEPT)δ95.4(C-2，t)，52.9(C-3，d)，197.5(C-4，s)，159.1(C-5，s)，103.8，(C-6，s)，161.5(C-7，s)，102.9(C-8，s)，34.6(C-9，t)，153.8(C-10，s)，102.0(C-11，s)，7.9(6-Me)，7.2(8-Me)，132.3(C-1’，s)，109.9(C-2’，d)，108.6(C-3’，d)，148.0(C-4’)，108.6(C-5’，s)，122.2(C-6’，d)，101.3(7’-C，t).
化合物VIII(川麥冬皂苷A，Ophiopojaponin A)白色針晶(氯仿-甲醇，1∶1)，熔點230-232℃，旋光[α]D21-45.7°(c＝0.35，MeOH)；ESI-MS(m/z)913([M+H]+).1H NMR(400MHz，C5D5N，Jin Hz，δ)δ0.66(3H，d，J＝5.4Hz，Me-27)，0.95(3H，s，H-18)，1.07(3H，s，H-19)，1.22(3H，d，J＝7.1Hz，H-21)，1.78(3H，d，J＝6.6Hz，RhaH-6)，1.99(3H，s，CH3CO)，4.01(1H，t，J＝6.9Hz，Xyl-H-2)，4.17(1H，t，重疊信號，Glc-H-2)，4.17(1H，重疊信號，Glc-H-3)，4.17(1H，重疊信號，XylH-3)，4.20(1H，重疊信號，RhaH-5)，4.25(1H，m，Rha-H-4)，4.72(1H，m，Rha-H-3)，4.90(1H，d，J＝7.2Hz，Glc-H-1)，5.02(1H，d，J＝7.7Hz，Xyl-H-1)，5.27(1H，m，H-6)，6.05(1H，d，J＝4.9Hz，Rha-H-2)，6.13(1H，br.s Rha-H-1).13C-NMR(125MHz，C5D5N，δ)甙元部分9.6(C-21)，17.2(C-18)，17.3(C-27)，19.5(C-19)，21.0(C-11)，28.9(C-24)，30.2(C-2)，30.5(C-25)，31.7(C-23)，32.1(C-7)，32.1(C-12)，32.4(C-8)，32.5(C-15)，37.2(C-10)，37.6(C-1)，39.1(C-4)，44.9(C-20)，45.2(C-13)，50.4(C-9)，53.1(C-14)，66.8(C-26)，78.4(C-3)，90.2(C-16)，90.2(C-17)，110.0(C-22)，121.9(C-6)，140.9(C-5)；糖部分100.1(C-1a)，77.1(C-2a)，81.5(C-3a)，70.8(C-4a)，78.5(C-5a)，61.8(C-6a)，98.8(C-1b)，74.0(C-2b)，70.5(C-3b)，74.2(C-4b)，69.4(C-5b)，18.6(C-6b)，21.0(CH3CO)，177.6(CH3CO)，105.8(C-1c)，75.0(C-2c)，77.3(C-3c)，70.8(C-4c)，67.4(C-5c).(植物學報，2001，43(1)97)2.生物活性測試2.1化合物保護心肌細胞凋亡的測試2.1.1測試原理在人心肌細胞中加入不同濃度的樣品溶液，在缺血/再灌注條件下誘導細胞凋亡，對比不加入樣品的空白，評估樣品對心肌細胞凋亡的保護作用。
2.1.2實驗方法將6孔板和載玻片用90％的乙醇消毒，在每個孔里放置7.5×104原代單層心肌細胞(1m1)和2ml DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)培養(yǎng)液，生長1.5天，移除培養(yǎng)液，加2ml I/R Media(致細胞缺血的介質(zhì))和樣品溶液(20或50μl，對應50μg/ml或250μg/ml)，60分鐘后移除培養(yǎng)液，再加入正常的2ml培養(yǎng)液(無色的DMEM)和樣品溶液，30分鐘后移除液體，用1ml PBS洗3次，加1ml有機溶劑(甲醇-丙酮，1∶1)固定細胞，將6孔板放置冰箱-20℃ 10分鐘，取出加1ml甲醇使細胞滲透，再放入冰箱-20℃10分鐘，取出用1ml PBS洗滌3次，移出載波片，用吸墨紙吸干液體，用膠水將有細胞的載波片固定在標記好的載波片上，加一滴PBS到載波片上防止細胞干掉，將載波片放置密閉的玻璃容器10分鐘使充分潤濕，取出、吸干液體，均勻加200μl Hoechst染色劑于載玻片，將載玻片放置陰暗處10分鐘，然后用PBS沖洗掉殘余的染色劑，用吸墨紙吸干，加一滴抗褪色劑，用玻片封裝，放置冰箱于4℃儲存。然后用熒光顯微鏡(激發(fā)光波長352nm，發(fā)射光波長461nm)觀察細胞凋亡情況。
2.1.3實驗結(jié)果如表1所示，化合物I和II能明顯抑制I/R導致的心肌細胞凋亡，且有濃度依賴效應?；衔颕II、IV、V、VIII在100μg/ml能抑制由缺血/再灌注引起的細胞凋亡。
表1、參麥針的化學成分對缺血/再灌注引起的心肌細胞凋亡的保護作用

樣本數(shù)n＝6，Ctrl＝(空白)對照；I/R模型對照組。
2.2.檢測化合物激活內(nèi)皮細胞一氧化氮合成酶(NOS)的活性2.2.1測試原理NOS是定量催化生成一氧化氮(NO)的功能酶，生成的NO具有舒張血管、抑制血管平滑肌細胞增殖等功能，在體內(nèi)，NO以硝酸根(NO3-)，亞硝酸根(NO2-)和亞硝基硫醇(R-S-N＝O)的形式存在，一氧化氮分析儀(Nitric Oxide Analyzer)可以用三氯化釩-鹽酸在90℃時將上述NO物質(zhì)定量還原成氣相的NO，通過一個氣相的化學發(fā)光(NO+臭氧)反應檢測NO的量，可以檢測細胞內(nèi)總的NOS的活性。
2.2.2測試方法將購買的人內(nèi)皮細胞(ECV304)放置于24孔板，加培養(yǎng)液(500μL DMEMmedium+10％FBS+抗生素)培養(yǎng)過夜，吸盡培養(yǎng)液，另加入500μL不加FBS的DMEM，每孔加入不同濃度的化合物樣品(陽性對照物或空白)，培養(yǎng)4小時，然后于冰箱4℃儲存，用NO分析儀(NOATM280)檢測每個樣品的NOS含量。
2.2.3測試結(jié)果以麥冬促進NO最強的活性部位M2(100μg/m1)的NO釋放率為陽性對照(100％)，化合物VI和VIII有顯著的促進NO釋放的作用，在0.01μg/ml濃度時可以達到M2(100μg/ml)的40％左右的NO釋放量；化合物I和II也有較強的促進NO釋放的作用。
表2、參麥針的化學成分對血管內(nèi)皮細胞促進NO釋放的作用

2.3化合物對AAPH導致的氧化的抑制作用2.3.1測試原理2，2-偶氮二(2-脒基丙烷)二鹽酸鹽(AAPH)可以將二氫若丹明123(Dihydrorhodamine 123，dihydrochloride salt，DHR)定量氧化為可發(fā)出綠色熒光的若丹明123(rhodamine 123，Rh)，Rh的量可以用熒光酶標儀檢測。

2.3.2測試方法在消毒的96孔板上加入30μl 500μM DHR、15μl不同濃度的樣品溶液或陽性對照物，45μl甲醇，再將新配置的60μl的50mM AAPH于每孔(除空白外)、放置VersaMax熒光酶標儀運行90min(設定檢測波長500nm).
2.3.3實驗結(jié)果如下表所示，化合物IV對AAPH誘導的氧化作用的抑制效果最為明顯，且有濃度依賴效應；化合物I和II也有較強的抗氧化效果。
表3、參麥針的化學成分對AAPH引起的氧化作用的抑制效果



圖1 化合物I(MDP-2A)、II(MDP-2A)、VI(CMD-6-2)和VIII(CMD-b2)對血管內(nèi)皮細胞促進NO釋放的作用(注MDP-2B為含少量雜質(zhì)的化合物I)圖2 化合物I(MDP-2)、II(MDP-8)和III(MDP-4)對AAPH引起的氧化作用的抑制效果
權(quán)利要求
1.一種從參麥注射液中分離得到的化合物(結(jié)構(gòu)和化學名如下)的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟 a)10公斤的中藥浙麥冬藥材按照參麥注射液的生產(chǎn)工藝制備成麥冬原液，經(jīng)40℃減壓濃縮后，用大孔樹脂柱層析分離，以梯度的水-酒精洗脫液洗脫，得到麥冬原液的水、10％、20％、40％、60％、80％及95％酒精洗脫部分。b)a中獲得的95％酒精洗脫部分用硅膠柱分離，用石油醚、氯仿、氯仿-丙酮(1∶0→1∶1)、氯仿-甲醇(50∶1→1∶1)為展開劑洗脫；氯仿-丙酮(20∶1)洗脫部分繼續(xù)用硅膠柱層析分離，以石油醚-乙酸乙酯(5∶1)作為展開劑純化可獲得化合物VI；氯仿-丙酮(5∶1)洗脫部分用硅膠柱層析進一步分離，以石油醚-乙酸乙酯(2∶1)作為展開劑，可獲得化合物V和化合物(VIIa+VIIb)富集部分，再分別用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20柱純化，以氯仿展開可分別獲得V和(VIIa+VIIb)，后者為一對差向異構(gòu)體，用制備型的高效液相(PreStar系統(tǒng)，merck ODS填充柱1.2×25cm，乙腈-水30％-60％)制備得到VIIa和VIIb；氯仿-甲醇(50∶1)洗脫部分用硅膠柱層析(展開劑為氯仿-甲醇25∶1)進一步純化可獲得化合物I富集部分，再經(jīng)升華可得純I；氯仿-甲醇25∶1洗脫部分洗脫部位用用硅膠柱層析(氯仿-甲醇15∶1)進一步純化可獲得IV。c)a中的80％酒精洗脫部分硅膠柱分離，用氯仿-甲醇(50∶1→1∶1)為展開劑洗脫；氯仿-甲醇10∶1洗脫部分洗脫部位再用硅膠柱層析(氯仿-甲醇-水5∶1∶0.1)進一步純化可獲得化合物II富集部分，再用RP-18反相柱純化，用乙醇(或甲醇)-水(2∶1)作為分配溶液沖洗可以獲得II。d)a中獲得的40％酒精洗脫部分用硅膠柱分離，用氯仿(或乙酸乙酯和二氯甲烷)-甲醇(或乙醇)梯度洗脫。氯仿-甲醇5∶1洗脫部分進一步用RP-18反相柱純化，用甲醇-水(4∶1)作為分配溶液可分別獲得化合物III和VIII。
2.一種權(quán)利如要求1所述的化合物用于參麥注射液質(zhì)量控制表征。
3.一種權(quán)利如要求1所述的化合物在制備用于治療心腦血管疾病的用途。
4.一種權(quán)利如要求1所述的新化合物VIIa和VIIb的制備方法及其在用于治療心腦血管疾病的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種從參麥注射液中提取分離得到的以下化合物I－VIII的制備方法，這些化學成分具有抑制心肌細胞凋亡、促進血管內(nèi)皮細胞一氧化氮釋放、抑制AAPH引起的氧化等功能，表明可能為參麥注射液治療心腦血管疾病的主要活性物質(zhì)。制備方法包括大孔樹脂柱、MCI柱、硅膠柱、葡聚糖凝膠柱及反相硅膠柱的層析分離、高效液相分離，升華及結(jié)晶等方法；化合物結(jié)構(gòu)鑒定方法有紅外、一維和二維的核磁共振、質(zhì)譜等波譜學方法。
文檔編號C07J71/00GK101077852SQ20071012281
公開日2007年11月28日 申請日期2007年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2007年7月5日
發(fā)明者朱大元, 黎豫杭, 許正宇, 蕭耀龍, 李云森, 譚昌恒, 蔣福祥, 柯嘉敏, 文英強, 張善飛, 柴建國 申請人:正大青春寶藥業(yè)有限公司