本發(fā)明屬于植物育種，具體涉及gmmyb29蛋白在抗大豆胞囊線蟲病中的應用。

背景技術：

1、大豆(glycine?max(l.)merr.)在中國種植歷史悠久，是我國重要油料作物之一，優(yōu)質(zhì)的蛋白和食用油的主要來源。大豆胞囊線蟲病(soybean?cyst?nematode，簡稱scn)是嚴重的土傳性病害，一般情況下可造成大豆減產(chǎn)30-50％左右，嚴重時可造成顆粒無收。scn具有分布范圍廣、危害嚴重、胞囊在土壤中存活時間長，生理小種廣泛等特點成為一種極為難防的土傳性疾病。在在漫長的的育種實踐中，少數(shù)抗scn種質(zhì)資源的應用，造成抗病品種資源遺傳基礎狹窄的局限性，這是導致大豆產(chǎn)量低、不穩(wěn)定的主要原因之一。目前主流的防治措施主要包括：合理輪作、化學藥劑、培育抗scn種質(zhì)。合理輪作雖然可以有效的控制大豆胞囊線蟲的發(fā)展，但是伴隨生理小種的分化，無法從根本上完全消除大豆胞囊線蟲病?；瘜W藥劑可以有效的防治scn的發(fā)展，但是對土壤環(huán)境的危害又嚴重又不可控?？箂cn大豆的培育是一種極為有效的方式，但是傳統(tǒng)的培育抗scn種質(zhì)周期較長，利用分子生物學和基因工程等手段對大豆種質(zhì)改良變得迫在眉睫，因此挖掘可用于改良導大豆對scn抗性的基因資源至關重要。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了提供一種抗抗大豆胞囊線蟲病的育種方法。

2、本發(fā)明提供一種gmmyb29蛋白在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，所述gmmyb29蛋白的序列如seq?id?no.8所示。

3、本發(fā)明提供一種gmmyb29基因在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

4、本發(fā)明提供一種含有gmmyb29基因的重組載體在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

5、進一步地限定，所述重組載體的出發(fā)載體為pcambia3300。

6、本發(fā)明提供一種含有gmmyb29基因的重組微生物細胞在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

7、進一步地限定，所述重組微生物細胞為原核微生物細胞或真核微生物細胞。

8、本發(fā)明提供一種制備抗大豆胞囊線蟲病的植株的方法，所述方法的具體步驟如下：

9、步驟1：將seq?id?no.7所示的基因與載體pcambia3300連接，獲得重組載體；

10、步驟2：將步驟1所述的重組載體轉(zhuǎn)化至農(nóng)桿菌中，獲得重組農(nóng)桿菌；

11、步驟3：將步驟2所述的重組農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入大豆中獲得轉(zhuǎn)基因大豆植株，鑒定后獲得陽性的轉(zhuǎn)基因大豆植株。

12、進一步地限定，步驟1中擴增seq?id?no.7所示基因的引物如seq?id?no.1和seqid?no.2所示。

13、本發(fā)明提供一種提高大豆對大豆胞囊線蟲病抗性的方法，利用大豆胞囊線蟲感染過表達gmmyb29基因的大豆植株。

14、本發(fā)明提供一種含有過表達gmmyb29基因的大豆植株在抗大豆胞囊線蟲病中的育種中的應用。

15、有益效果：pcambia3300-gmmyb29轉(zhuǎn)基因陽性根雌蟲數(shù)目平均值為2.52個/cm，低于對照組，對照組根系雌蟲數(shù)目平均值為3.76個/cm，轉(zhuǎn)基因陽性根部與陰性對照根部存在著極顯著差異，證實gmmyb29基因?qū)Υ蠖拱揖€蟲病抗性提高作用明顯。

技術特征：

1.gmmyb29蛋白在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，其特征在于，所述gmmyb29蛋白的序列如seq?id?no.8所示。

2.gmmyb29基因在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，其特征在于，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

3.含有gmmyb29基因的重組載體在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，其特征在于，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于，所述重組載體的出發(fā)載體為pcambia3300。

5.含有gmmyb29基因的重組微生物細胞在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，其特征在于，所述gmmyb29基因的序列如seq?id?no.7所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于，所述重組微生物細胞為原核微生物細胞或真核微生物細胞。

7.一種制備抗大豆胞囊線蟲病的植株的方法，其特征在于，所述方法的具體步驟如下：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟1中擴增seq?id?no.7所示基因的引物如seq?id?no.1和seq?id?no.2所示。

9.一種提高大豆對大豆胞囊線蟲病抗性的方法，其特征在于，利用大豆胞囊線蟲感染過表達gmmyb29基因的大豆植株。

10.含有過表達gmmyb29基因的大豆植株在抗大豆胞囊線蟲病中的育種中的應用。

技術總結(jié)
本發(fā)明公開GmMYB29蛋白在抗大豆胞囊線蟲病中的應用，屬于植物育種技術領域。本發(fā)明為了提供一種抗抗大豆胞囊線蟲病的育種方法。本發(fā)明提供一種GmMYB29蛋白在提高大豆抗大豆胞囊線蟲病中的應用，所述GmMYB29蛋白的序列如SEQ?ID?NO.8所示。GmMYB29基因?qū)Υ蠖拱揖€蟲病抗性提高作用明顯，為大豆抗大豆胞囊線蟲病提供理論基礎。

技術研發(fā)人員：韓英鵬,曲碩,趙雪,王慧,滕衛(wèi)麗,李永光,戰(zhàn)宇航
受保護的技術使用者：東北農(nóng)業(yè)大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/5