吡啶胺基嘧啶衍生物、其制備方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種選擇性抑制突變形態(tài)的表皮生長因子受體（EGFR)活性的吡啶胺 基嘧啶衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽以及其制備方法，包含所述衍生物及其藥學(xué)上可接受 鹽的藥物組合物，以及所述衍生物及其藥學(xué)上可接受鹽在治療由某些突變形態(tài)的EGFR介 導(dǎo)的疾病以及制備用于治療由某些突變形態(tài)的EGFR介導(dǎo)的疾病的藥物方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥被認為是細胞內(nèi)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)或信號傳導(dǎo)機制的疾病。癌癥的最常見病因是 一系列的缺損，所述缺損可以是蛋白質(zhì)的缺損（當其突變時），或者是對細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的量 的調(diào)節(jié)的缺損，從而使蛋白質(zhì)過度產(chǎn)生或產(chǎn)生不足。細胞表面受體的突變（該突變通常通 過酪氨酸激酶將信號傳遞到細胞內(nèi)）可導(dǎo)致激酶在缺乏配體的條件下被激活，并傳遞事實 上并不存在的信號?；蛘?，許多受體酪氨酸激酶可在細胞表面過度表達，導(dǎo)致對弱信號的過 強響應(yīng)。
[0003] 表皮生長因子受體（EGFR)被確認為是在細胞生長和增值過程中至關(guān)重要的驅(qū)動 因素。表皮生長因子受體家族由EGFR(Erb-Bl)、Erb-B2 (HER-2/neu)、Erb-B3和Erb-B4組 成。表皮生長因子受體與大部分癌癥的疾病進程有關(guān)，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等。EGFR的 過度表達和突變已被明確證實是預(yù)后不好的乳腺癌的主要危險因素。此外，已證實該受體 家族的所有四個成員均可與該家族的其他成員聚合為異源二聚體，形成信號傳導(dǎo)復(fù)合物， 如果該家族中有一個以上的成員在惡性腫瘤中過度表達，便可導(dǎo)致協(xié)同的信號傳導(dǎo)作用。
[0004] EGFR屬于蛋白酪氨酸激酶（PTK)家族，蛋白酪氨酸激酶是一類將磷酸基團從三磷 酸腺苷（ATP)催化轉(zhuǎn)移到位于蛋白質(zhì)底物的酪氨酸殘基的酶。蛋白酪氨酸激酶在正常細胞 生長中起作用。EGFR的過度表達或突變，導(dǎo)致受體在缺乏配體的條件下被激活，使某些蛋白 發(fā)生磷酸化，產(chǎn)生了細胞分裂的信號。因此，EGFR通過自身酪氨酸激酶的作用，導(dǎo)致了弱信 號的過度放大，引起了細胞的過量增值。
[0005] 作為潛在的抗癌治療藥物的特異性PTK抑制劑備受關(guān)注。目前已經(jīng)上市的EGFR 可逆性抑制劑的典型代表包括吉非替尼（Gefitinib)、埃羅替尼（Erlotinib)、拉帕替尼 (Lapatinib)，抑制EGFR野生型和激活型突變（例如19號外顯子缺失激活突變、或L858R激 活突變），其結(jié)構(gòu)如下，分別用于非小細胞肺癌（NSCLC)和乳腺癌的治療。臨床研究證明吉 非替尼、埃羅替尼對EGFR發(fā)生19號外顯子缺失或L858R點突變的NSCLC患者有良好的治 療作用。然而，它們的局限在于患者在接受治療后產(chǎn)生耐藥，使得此類抑制劑在臨床上的進 一步應(yīng)用受到限制。研究表明，50%的吉非替尼、埃羅替尼治療后耐藥性的產(chǎn)生與EGFR發(fā) 生二次突變（T790M)相關(guān)（PaoW.等，PlosMed.，2 :1-11，2005)，可逆抑制劑失去療效。
[0006]
[0007] T790M位于EGFR與ATP結(jié)合口袋的入口，其邊鏈的大小直接影響EGFR和ATP的 結(jié)合能力。T790M突變在空間上阻礙EGFR抑制劑與ATP結(jié)合位點的作用，增加EGFR對ATP 的親和力，使細胞對EGFR抑制劑產(chǎn)生耐藥。
[0008] 與可逆性EGFR抑制劑相比，不可逆EGFR抑制劑具有非常突出的優(yōu)點。不可逆 EGFR抑制劑可長時間的抑制EGFR，只受到受體再結(jié)合（也稱為回復(fù)）的正常速率的限制。 有研究發(fā)現(xiàn)，不可逆EGFR抑制劑可通過麥克爾加成反應(yīng)與EGFR上半胱氨酸殘基（Cys797) 共價結(jié)合，使不可逆EGFR抑制劑與ATP結(jié)合位點擴大，從而能在一定程度上克服T790M突 變引起的耐藥性（LiD等，0ncogene，27:4702-4711，2008)。目前已上市的不可逆EGFR抑 制劑有BIBW-2992(Afatinib)，在研的包括HKI-272(Neratinib)、EKB-569(Pelitinib)、 PR)0299804(Dacomitinib)等，其結(jié)構(gòu)如下。
[0009]
[0010]
[0011] 然而，這類能夠抑制EGFRT790M的不可逆EGFR抑制劑，對野生型EGFR的抑制 作用也很大，帶來較大的毒副作用，如腹瀉、皮疹、惡心、厭食，虛弱無力（BeSSe，B.等Eur.J.CancerSuppl. , 6,64,abstr. 203, 2008 ;Janne,Ρ·Α·等，J.Clin.Oncol. , 25 :3936-3944, 2007)，因此雖然據(jù)文獻報道，在臨床前BIBW2992 (Afatinib)和PF00299804 (Dacomitinib) 顯示具有顯著的抗腫瘤活性，能抑制EGFR和EGFRT790M的活性，但在臨床過程中因為這些 不良反應(yīng)的發(fā)生，最終限制了其臨床給藥劑量及有效血藥濃度，使得BIBW2992 (Afatinib) 和PF00299804 (Dacomitinib)在克服T790M耐藥突變方面未能取得令人矚目的進展 (KatakamiN,AtagiS,GotoK,etal. [J].JournalofClinicalOncology,2013,31 (27)： 3335-3341.；JannePA,BossDS,CamidgeDR,etal. [J].ClinicalCancerResearch, 2011,17(5) ：1131-1139.；LandiL,CappuzzoF. [J].TranslationalLungCancer Research,2013,2(1) :40-49.)。
[0012] 上述上市或在研的可逆或不可逆EGFR抑制劑主要結(jié)構(gòu)類型為喹唑啉類化合物， 目前已報道的喹唑啉類EGFR抑制劑均為野生型EGFR的ATP競爭性抑制劑，由此導(dǎo)致一些 副反應(yīng)的發(fā)生。2009年，研究人員報道了一類嘧啶類的特異性作用于EGFRT790M的不可 逆EGFR抑制劑，結(jié)構(gòu)如下所示。與現(xiàn)有的苯胺喹唑啉EGFR抑制劑相比，此類嘧啶化合物對 EGFRT790M的抑制活性提高了 30-100倍，對野生型EGFR的抑制活性降低了 100倍（Wenjun Zhou等，Nature，462 :1070-1074, 2009)，但后期該類嘧啶化合物未進入臨床研究。
[0013]
[0014] AvilaTherapeutics申請的國際專利W0 2012/061299A1中公開了另一系列啼陡 類化合物，結(jié)構(gòu)式如下，其中代表性的化合物為C01686。據(jù)文獻報道，C01686能夠選擇性作 用于EGFR激活型突變和T790M耐藥型突變，而對野生型EGFR抑制作用較弱（WalterA0， SjinRTT,HaringsmaHJ,etal· [J].Cancerdiscovery,2013,3(12) :1404_1415·)。目 前準備進入臨床II期階段。
[0015]
123 ASTRAZENECAAB申請的國際專利W0 2013/014448A1中也公開了一系列嘧啶類化 2 合物，結(jié)構(gòu)式如下，其中代表性的化合物為AZD9291，相對于野生型EGFR對EGFR激活型突變 3 和T790M耐藥型突變有更好的抑制作用，目前處在I期臨床階段。
[0017]
[0018] 為克服臨床中常見的EGFR耐藥性突變（例如T790M突變）以及現(xiàn)有EGFR抑制劑 的毒副作用問題，即開發(fā)更多的對某些激活突變體和耐藥型突變體形式的EGFR顯示較高 的抑制同時對野生型EGFR顯示相對較低的抑制的小分子抑制劑已經(jīng)是當前抗腫瘤領(lǐng)域的 迫切需要。本發(fā)明人在研究EGFR抑制劑的過程中，驚喜地發(fā)現(xiàn)了一類吡啶胺基嘧啶衍生 物，對EGFR激活型突變（如19號外顯子缺失激活突變、或L858R激活突變）和T790M耐藥 型突變的抑制活性顯著高于對野生型EGFR(WTEGFR)的抑制活性，有很好的選擇性，并且毒 副作用較低，安全性好。預(yù)期此類抑制劑將會有好的療效，有望克服耐藥性問題及毒副作用 問題，具有良好的開發(fā)前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0019] 本發(fā)明提供如下通式（I)化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽：
[0020] 1234567
式中： 2 環(huán)A為芳基尤， 3 札選自氫、鹵素、烷基、鹵代烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔基或-CN; 4 R2 選自C「C4 烷基、鹵代C「C4 烷基、C2_C6 烯基、-(CH2)q0R7、_ (CH2)qNR7R/ 或-(CH2) qC(0)R7 ； 5 R4 6 每個R5獨立地為鹵素、烷基、鹵代烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔 基、-or6、-c(0)r7、-c(0)NR7R/、-or7、-nr7r/、-CN或-no2 ; 7 R3 選自鹵素、-CN、-N02、C「C4 烷基、鹵代C「C4 烷基、-C(0)R6、-C(0)R7、-C(0) NR7R7，、-0R7、-0R6、-NHR7、-NR7- (CfC4 烷基）、-NR7-(鹵代CfC4 烷基）、-nr7 (CH2)nC(0) r6、-nr6r7、-NR7_未取代或被1~2個選自R7取代基取代的雜環(huán)烷基或_NR7S02R7，或未取代 或被1~3個選自鹵素、CfC4烷基、鹵代CfC4烷基、-(CH2)n0H、-NR7R/、-0R7或-C(0)R7的 取代基取代的雜環(huán)烷基；
[0028]其中，R6為-(CH2)q0R7、-(CH2)qNR7R/、- (CH2)qNR7C(0)R7、-(CH2)qC(0)R7或-(CH2) qC(0)NR7R/；
[0029] R7和R/分別獨立地為氫、烷基、C2_C6烯基、C2_C6炔基或鹵代烷基， 或R7、R/與所相連的氮原子一起環(huán)合形成未取代或被1~3個選自鹵素、Ci-Q烷基、鹵代 C「C4烷基、_(CH2)n0H、_NR7R7,、_0R7或_C(0)R7的取代基取代的雜環(huán)烷基；
[0030]m為 1、2 或 3;
[0031]η為 0、1、2、3 或 4;
[0032]q為 0、1、2、3 或 4。
[0033] 本發(fā)明提供通式（I)化合物，其能夠抑制一種或多種EGFR激活型或耐藥型突變， 例如L858R激活突變體、19號外顯子缺失激活突變體、T790M耐藥型突變體。有利地，這種 化合物可用于對基于EGFR抑制劑的現(xiàn)有療法已產(chǎn)生一定程度的耐藥性患者的癌癥治療。
[0034] 本發(fā)明提供通式（I)化合物，其對激活或耐藥型突變體形式的EGFR顯示比野生型 EGFR更高的抑制。由于與野生型EGFR抑制相關(guān)的毒性降低，因而預(yù)期這種化合物更適于用 作治療劑，尤其適用于癌癥的治療。
[0035] 本發(fā)明還提供了通式（I)化合物的制備方法。
[0036] 本發(fā)明還提供藥物組合物，它含有上述本發(fā)明通式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受 的鹽、以及藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
[0037] 本發(fā)明還提供本發(fā)明通式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在治療哺乳動物尤 其人類由EGFR激活型或耐藥型突變體介導(dǎo)的疾病、特別是癌癥方面的應(yīng)用。
[0038] 本發(fā)明還提供本發(fā)明通式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療哺乳動 物尤其人類由EGFR激活型或耐藥型突變體介導(dǎo)的疾病、特別是癌癥的藥物的應(yīng)用。
[0039] 本發(fā)明還提供一種治療哺乳動物尤其人類由EGFR激活型或耐藥型突變體介導(dǎo)的 疾病、特別是癌癥的方法，所述方法包括對患者施用通式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽、或包括治療有效量的通式（I)化合物和藥物可接受載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合 物。
[0040] 本發(fā)明還提供一種相比于野生型EGFR(WTEGFR)選擇性地抑制EGFR激活型或耐 藥型突變的方法，所述方法包括使生物樣品接觸或向患者投與通式（I)化合物或其藥學(xué)上 可接受的鹽或其藥物組合物。
[0041] 本發(fā)明所提及癌癥，可以選自肺癌、卵巢癌、宮頸癌、乳腺癌、胃癌、結(jié)腸直腸癌、胰 腺癌、膠質(zhì)瘤、膠質(zhì)母細胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、肝細 胞癌、胃腸道基質(zhì)瘤（GIST)、甲狀腺癌、膽管癌、子宮內(nèi)膜癌、腎癌、間變性大細胞淋巴瘤、急 性髓細胞白血?。ˋML)、多發(fā)性骨髓瘤、間皮瘤。
[0042] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，環(huán)A為雜 芳基。
[0043] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，環(huán)A 為吲哚基、剛唑基、吡咯[2, 3-c]駢吡啶基、吡咯[3, 2-c]駢吡啶基、吡咯[2, 3-b]駢吡啶 基、吡咯[3, 2-b]駢吡啶基、吡咯[2, 3-b]駢吡嗪基、剛哚啉-2-酮基、吡啶基、吡唑基或嘧 啶基。
[0044] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，&為氫、鹵 素或鹵代烷基。
[0045] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，札為 氫、氯、氟或三氟甲基。
[0046] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，R2為CfQ
烷基或鹵代Q-C；烷基，優(yōu)選為C2_C4烷基或鹵代C2_C4烷基，更優(yōu)選為異丙基或三氟乙基。rmul 龍?zhí)珓谌赵徊牛é?化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，R4為 I和R/分別獨立地為氫或烷基。 L0048」仕不友明瓦U)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，&為 '/v^\R7，R7 為氫。
[0049] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，R3選自鹵 素、-CN、-N02、CfC4 烷基、鹵代C「C4 烷基、-C(0)R7、-C(0)NR7R/、-0R7、-NHR7、-NR7_ (CfC4 烷基）、_NR7 (CH2)nC(0)R6或-NR6R7，或未取代或被1~3個選自鹵素、CfQ烷基、鹵代CfQ 烷基、-(CH2)n0H、-NR7R/、-0R7或-C(0)R7的取代基取代的雜環(huán)烷基；
[0050] 其中，R6 為-(CH2)q0R7、- (CH2)qNR7R/、- (CH2)qC(0)R7 或-(CH2)qC(0)NR7R/ ;
[0051] RJPR/分別獨立地為氫、C「C4烷基或鹵代C「C4烷基，或R7、R/與所相連的氮 原子一起環(huán)合形成雜環(huán)烷基；
[0052] η為 0、1、2、3 或 4;
[0053] q為 0、1、2、3 或 4。
[0054] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，R3 為-NR6R7，其中R6為-(CH2)qNR7R/，R7和R/分別獨立地為氫或C「C4烷基，q為2。
[0055] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，R3為 被1個選自鹵素、烷基、鹵代烷基或_NR7R/的取代基取代的雜環(huán)烷基，R7和R/ 分別獨立地為氫或烷基；更優(yōu)選的雜環(huán)烷基為四氫吡咯基。
[0056] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個優(yōu)選實施方案中，每個1?5獨 立地為鹵素、烷基、鹵代烷基、_0R7、_NR7R/、-CN或-N02,R7和R/分別獨立地 為氫或烷基，m為1、2或3。
[0057] 在本發(fā)明式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的一個更優(yōu)選的實施方案中，每個 R5獨立地為鹵素、(；-(；烷基、-0R7或-NR7R/，R7和R/分別獨立地為氫或烷基，m為 1、2 或 3。
[0058] 在本發(fā)明中，具體優(yōu)選的通式（I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，包括如下：
[0059] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0060] N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-異丙氧基-5-{[4-(1-甲基-1H-吲 哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0061]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5- {[4- (1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0062]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5_ {5-氯-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0063]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}_6_異丙氧基-5-{[4-(l-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0064]N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-異丙氧基-5-{[4-(1-甲基-5， 6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0065] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-6-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0066] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0067]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0068]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0069]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0070]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氟-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0071] N-{2-{[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-異丙氧基-5-{[4-(l-甲 基-6-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0072]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5_ {5-氟-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0073]N-{2-{[2_(二甲胺基）乙基](甲基）胺基}-6-(2,2,2_二氟乙氧 基）-5-{[4-(1-甲基-5-氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰 胺；
[0074]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸鹽；
[0075] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {5-氯-[4- (1-甲 基-5,6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸鹽； [0076]N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {[4- (1-甲基-5， 6-二氟-1H-吲哚-3-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺甲磺酸鹽；
[0077] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {[5-氯-4- (1-甲 基-1H-批略[2, 3_b]批陡-3-基）啼陡-2-基]胺基}批陡-3-基}丙烯酰胺；
[0078] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲基）胺基} -6-異丙氧基-5- {[5-氯-4- (1-甲 基-1H-吡咯[2, 3-b]吡啶-5-基）嘧啶-2-基]胺基}吡啶-3-基}丙烯酰胺；
[0079] N- {2- {[2-(二甲胺基）乙基](甲