條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為6年；生物破乳的破乳率為 98. 6%〇
[0091] 實(shí)施例4
[0092] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0093] 1)微波輻照滅酶：將苦杏仁浸入質(zhì)量百分比濃度為0. 15%的碳酸氫鈉溶液中室 溫漂洗、瀝干，置容器中密封靜置潤(rùn)濕4h，然后脫皮，將脫皮苦杏仁放入微波干燥機(jī)中于頻 率2450MHz、功率3000W、溫度90°C、料層厚度5cm條件微波輻照滅酶4min;
[0094] 2)冷凍破碎：經(jīng)微波輻照滅酶后的苦杏仁在質(zhì)量百分比濃度為0.3%的檸檬酸溶 液中室溫浸泡4h，清水漂洗3次，瀝干，于-25°C、料層厚度10cm冷凍5h，破碎至粒徑0. 4_ 得苦杏仁粉；
[0095] 3)酶解：向苦杏仁粉中加入其質(zhì)量5倍的pH值為6. 5的離子溶液，均勻混合，控 制混合物料溫度為55°C，向其中加入苦杏仁粉質(zhì)量0. 05%的復(fù)配酶，攪拌均勻，保溫，酶解 60min；
[0096] 所述離子溶液為含有鈉離子33mg/L、鎂離子25mg/L、鋅離子25mg/L、鉀離子23mg/ L和鈣離子14mg/L的水溶液；
[0097] 所述復(fù)配酶的質(zhì)量組成為：酸性蛋白酶：纖維素酶：果膠酶：β-葡聚糖酶：淀粉 酶=15:4:3:3:2 ;
[0098] 4)真空離心：將酶解液置真空離心機(jī)中8000r/min真空離心8min，自上而下分離 得到游離油、乳狀液、水解液和苦杏仁渣，將得到的乳狀液控制溫度為50°C，添加乳狀液質(zhì) 量4%的生物破乳菌培養(yǎng)液破乳60min,破乳后于3000r/min再次真空離心15min得到游離 油，合并所得的游離油，加入其質(zhì)量〇. 03%的葡萄籽提取物，均勻混合即得苦杏仁油；
[0099]所述生物破乳菌培養(yǎng)液的制備方法為：將產(chǎn)堿桿菌Alcaligenessp.S-XJ-1的試 管斜面菌種活化后接種1環(huán)于100mL肉湯培養(yǎng)基中，35°C、130r/min搖床培養(yǎng)36h，然后接 種于2000mL種子培養(yǎng)基中，35°C、120r/min搖床培養(yǎng)48h，得到種子液，將種子液以體積比 7%的接種量接種于裝有201^發(fā)酵培養(yǎng)基的氣升式發(fā)酵罐中，于40°(：、通氣量4171^11恒溫 敞口發(fā)酵601!，然后以0.8°(：/11的速率降溫至32°(：，繼續(xù)將種子液以體積比3%接種量追 加接種，閉罐發(fā)酵30h，保持罐壓0. 03MPa，最后以1. 0°C/h的速率升溫至40°C，通氣量3L/min恒溫敞口發(fā)酵30h即得生物破乳菌培養(yǎng)液；
[0100] 所述肉湯培養(yǎng)基組成為：牛肉膏5. 0g，蛋白胨10. 0g，酵母膏5. 0g，NaC15. 0g，葡 萄糖10. 0g，蒸餾水1L，pH值7. 0 ;
[0101] 所述種子培養(yǎng)基組成為：ΝΗ4Ν034· 0g，Κ2ΗΡ044· 0g，ΚΗ2Ρ046 · 0g，MgS04 · 7H20 0· 2g， FeS04.7H20lmg，NaCl25g，CaCl2.2H20 0.8mg,乙二胺四乙酸 1.3mg,中草藥提取物 3g, 蒸餾水1L，pH值7. 0，碳源為菜籽油，以培養(yǎng)基體積比2 %添加；
[0102] 所述發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：NH4N034. 0g，K2HP044. 0g，KH2P046 . 0g，MgS04 · 7H20 0. 2g， FeS04.7H20lmg，NaCl25g，CaCl2.2H20 0.8mg,乙二胺四乙酸 1.3mg,中草藥提取物 5g, 蒸餾水1L，pH值7. 0，碳源為菜籽油，以培養(yǎng)基體積比4 %添加；
[0103] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為95% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0. 07mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為98. 1%。
[0104] 實(shí)施例5
[0105] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0106] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例2,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0107] 生物破乳劑添加量：0. 02% ;
[0108] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：糖脂類：脂肽類：胞壁結(jié)合類=8:6:4 ;
[0109] 所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂：烷基糖苷=8:2 ;
[0110] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為96% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.05mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為6年；生物破乳的破乳率為97. 5%。
[0111] 實(shí)施例6
[0112] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0113] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例3,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0114] 生物破乳劑添加量：0. 01% ;
[0115] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：糖脂類：脂肽類：胞壁結(jié)合類=6:5:7 ;
[0116] 所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂：烷基糖苷=7:1 ;
[0117] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為94% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.06mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為6年；生物破乳的破乳率為96. 4%。
[0118] 實(shí)施例7
[0119] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0120] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例4,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0121] 生物破乳劑添加量：0. 03% ;
[0122] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：糖脂類：脂肽類：胞壁結(jié)合類=10:7:5 ;
[0123] 所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂：烷基糖苷=9:3 ;
[0124] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為94% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.07mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為96%。
[0125] 實(shí)施例8
[0126] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0127] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例2,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0128] 生物破乳劑添加量：0. 02% ;
[0129] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂：脂肽類：胞壁結(jié)合類=8:6:4 ;
[0130] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為93% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.07mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為96%。
[0131] 實(shí)施例9
[0132] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0133] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例4,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0134] 生物破乳劑添加量：0. 02% ;
[0135] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：烷基糖苷：脂肽類：胞壁結(jié)合類=8:6:4 ;
[0136] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為94%;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.07mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為96. 6%。
[0137] 實(shí)施例10
[0138] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0139] 步驟1)至步驟4)其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例2,僅僅采用生物破乳劑破乳；
[0140] 生物破乳劑添加量：0. 02% ;
[0141] 所述生物破乳劑為鼠李糖脂；
[0142] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為95% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.06mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為6年；生物破乳的破乳率為97. 2%。
[0143] 實(shí)施例11
[0144] 一種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0145] 步驟1)漂洗液和步驟2)浸泡液均為水，其它工藝及參數(shù)同實(shí)施例2 ;
[0146] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為95% ;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0. 05mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為98. 1%。
[0147] 實(shí)施例12
[0148] -種保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的提取方法，包括如下步驟：
[0149] 步驟1)漂洗液和步驟2)浸泡液均為水，僅僅采用生物破乳劑破乳，其它工藝及參 數(shù)同實(shí)施例2;
[0150] 生物破乳劑添加量：0. 02% ;
[0151] 所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為：糖脂類：脂肽類：胞壁結(jié)合類=8:6:4 ;
[0152] 所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂：烷基糖苷=8:2 ;
[0153] 上述方法制備苦杏仁油的提取率為94%;苦杏仁油中氰化物的殘留量為0.05mg/ kg;室溫、通風(fēng)、避光條件下苦杏仁油的保質(zhì)期為5年；生物破乳的破乳率為96. 8%。
[0154] 實(shí)施例13本發(fā)明制備的保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的脂肪酸組成
[0155] 以本發(fā)明實(shí)施例2制備的未加天然抗氧化劑的苦杏仁油和市售相同生產(chǎn)日期的 采用水酶法生產(chǎn)的未加抗氧化劑的苦杏仁油為樣品，檢測(cè)苦杏仁油的脂肪酸組成，檢測(cè)結(jié) 果如表1。氣相色譜（GC)法測(cè)定。樣品甲酯化：稱取約100mg油樣，置于具塞試管中，加 入1~2mL石油醚（30-60°C)與苯（1:1)的混合液，振搖使油脂溶解后，加入0. 4mol/L Κ0Η-甲醇溶液1~2mL，混勻后，室溫下靜置5~lOmin，再加入12mL水，靜置后取上層清 液，進(jìn)行色譜分析。氣相色譜分析條件：石英毛細(xì)管柱型號(hào)：DB-nAX(3cmX0. 25mm);柱溫： 50°C保持5min，以10°C/min升溫速率升到230°C，保持20min;檢測(cè)口：FID270°C;進(jìn)樣 口 ：25(TC〇
[0156]表1 :苦杏仁油的脂肪酸組成
[0158] 以上結(jié)果表明：本發(fā)明制備的苦杏仁油主要脂肪酸組成有7種，分別為棕櫚酸 (C16:0)、硬脂酸（C18:0)、棕櫚一烯酸（C16:l)、油酸（C18:l)、亞油酸（C18:2)、亞麻酸 (C18:3)、花生一烯酸（C20:l)。其中主要為油酸和亞油酸，不飽和脂肪酸含量為95. 8%，比 市售苦杏仁油不飽和脂肪酸含量高，雖然差異性不大，但也充分顯示了本發(fā)明提取工藝的 先進(jìn)性和實(shí)用性，尤其顯示了對(duì)多不飽和脂肪酸的抗氧化保護(hù)作用。
[0159] 需要說明的是：本發(fā)明實(shí)施例3-12制備的苦杏仁油同樣具有上述實(shí)驗(yàn)效果，各實(shí) 施例之間及與上述實(shí)驗(yàn)效果差異性不大。
[0160] 實(shí)施例14本發(fā)明保質(zhì)期長(zhǎng)的苦杏仁油的質(zhì)量指標(biāo)檢測(cè)
[0161] 以本發(fā)明實(shí)施例2制備的未加天然抗氧化劑的苦杏仁油和市售相同生產(chǎn)日期的 采用水酶法生產(chǎn)的未加抗氧化劑的苦杏仁油為樣品，檢測(cè)苦杏仁油的外觀及理化質(zhì)量指 標(biāo)，檢測(cè)結(jié)果如表2。檢測(cè)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)：酸值：GB/T5530-2005 ;過氧化值：GB/T5538-2005 ; 碘值：GB/T5532-2008;皂化值GB/T5534- 2008;折光指數(shù)：GB/T5527-2010;水分及揮 發(fā)物：GB/T5528-2008 ;透明度、氣味、滋味：GB/T5525- 2008 ;色澤：GB/T5492