本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域，更具體地涉及一種用hplc方法測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法。

背景技術(shù)：

蘇沃雷生，化學(xué)名為5-氯-2-[(5r)-5-甲基-4-[5-甲基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)苯甲?；鵠-1,4-二氮雜環(huán)庚烷-1-基]-1,3-苯并惡唑，其結(jié)構(gòu)式如下：

蘇沃雷生為一新型催眠藥，是第一個批準治療失眠的食欲素受體拮抗劑，其藥理作用機制為雙重食欲素ox1r和ox2r受體抑制劑，用于入睡或睡眠維持困難的治療。

美國專利us7951797、us9108959公開了蘇沃雷生化合物、相關(guān)合成方法及用途；中國專利申請cn103012293a和cn103923068a等都公開了蘇沃雷生的化合物制備方法。因此蘇沃雷生目前已為大眾所知，且可以通過已有方法制備獲得。

為了控制藥品的質(zhì)量，保證用藥的安全需要開發(fā)出一種有效檢測蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

發(fā)明概述

現(xiàn)有技術(shù)中沒有公開能夠有效測定蘇沃雷生原料藥或其制劑的有關(guān)物質(zhì)的分析方法。本發(fā)明將提供一種采用hplc測定蘇沃雷生原料藥及其制劑的有關(guān)物質(zhì)的分析方法。

蘇沃雷生化合物具有多個n元素，因此其具有較強的親水性和氫鍵結(jié)合能力，因而蘇沃雷生的有關(guān)物質(zhì)也可能具有類似的結(jié)構(gòu)。在反相色譜系統(tǒng)中，由于親水性強所以化合物保留能力比較弱，很快將被洗脫，如此是不利于組分分離的。另外，由于化合物易于形成氫鍵，因此特別容易與色譜柱硅膠顆粒表面殘存的硅羥基進行結(jié)合，導(dǎo)致部分組分不易洗脫，形成拖尾色譜峰的現(xiàn)象。

本發(fā)明人通過多次的實驗嘗試，最終開發(fā)出一種有效測定蘇沃雷生原料藥及其制劑的有關(guān)物質(zhì)的分析方法。所述方法采用以十八烷基硅烷鍵合相作為固定相，采用磷酸和甲醇為流動相進行梯度洗脫，在反相色譜系統(tǒng)中對蘇沃雷生原料藥及其制劑的有關(guān)物質(zhì)進行分離測定。

本發(fā)明所述的分析方法能夠有效分離測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)，具有分離度好，靈敏度高，操作方便等優(yōu)點。

術(shù)語定義

術(shù)語“峰純度”是指hplc檢測中，用于判斷某一色譜峰是否只是由一個物質(zhì)引起的一個考察參數(shù)，一般認為峰純度在0.990～1.000之間即認為所考察的某一色譜峰純凈，該色譜峰是某單一物質(zhì)的色譜峰。

術(shù)語“不對稱因子”是指在hplc檢測中，用于考察峰型對稱性的參數(shù)，體現(xiàn)色譜柱效能；在液相色譜法中，當(dāng)不對稱因子在0.8～1.2之間認為峰型較好。

術(shù)語“r”在hplc檢測中是指分離度，用于考察色譜峰之間分離情況的參數(shù)；通常兩個峰型峰高相當(dāng)?shù)纳V峰，其分離度大于等于1.5則認為兩峰的分離達到99％以上；r值越大分離情況越好。

術(shù)語“約”在本發(fā)明中是指在所述數(shù)值的±10％以內(nèi)。

發(fā)明詳述

本發(fā)明提供的一種用hplc測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征是采用以十八烷基硅烷鍵合相作為固定相的色譜柱；流動相由a相和b相組成，其中以酸性溶劑與有機溶劑的混合物作為a相，以有機溶劑作為b相。

本發(fā)明所述的十八烷基硅烷鍵合相作為固定相的色譜柱可以選自不同廠家的色譜柱，在一些實施例中所述色譜柱是poroshell120ec-c18。

本發(fā)明所述有機溶劑可以是選自甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈或四氫呋喃中的一種或幾種。在一些實施例中有機溶劑為甲醇。

本發(fā)明所述的酸性溶劑可以是選自甲酸、乙酸、三氟乙酸、磷酸或磷酸鹽中的一種或幾種。在一些實施例中酸性溶劑為磷酸。在一些實施例中，酸性溶劑為0.05％～0.5％磷酸溶液。

在一些實施例中，所述酸性溶劑為0.1％的磷酸，其與甲醇的體積比為9:1。

在一些實施例中，本發(fā)明所述的分析方法是采用梯度洗脫程序進行的，其中梯度洗脫程序如下表1所示。

表1

在一些實施例中，本發(fā)明提供的一種用hplc測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征是：

采用以十八烷基硅烷鍵合相作為固定相的色譜柱；

流動相a相是0.05％～0.5％磷酸溶液與甲醇的混合物，其中0.05％～0.5％磷酸(體積比)與甲醇的體積比是約5:1～15:1；b相是甲醇；

其中梯度程序如上表1所示；

色譜柱柱溫：約20℃～60℃；

流速：約0.5ml/min～2.0ml/min；

檢測器：dad檢測器，檢測波長約215nm～290nm。

在一些實施例中，本發(fā)明提供的一種用hplc測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征是：

采用以十八烷基硅烷鍵合相作為固定相的色譜柱；

流動相a相是0.1％磷酸溶液與甲醇的混合物，其中0.1％磷酸與甲醇的體積比是約9:1；b相是甲醇；

梯度洗脫程序如上表1所示；

色譜柱柱溫：約45℃；

流速：約1.0ml/min；

檢測器：dad檢測器，檢測波長約254nm。

本發(fā)明所述的分析方法，其中，供試品溶液可通過以下方法配制：取供試品約40mg，精密稱定，置100ml容量瓶中，先用50ml甲醇超聲溶解，再用超純水稀釋至刻度，搖勻得到。在一些實施例中，供試品溶液的進樣量可以是1～100μl；在一些實施例中供試品溶液的進樣量可以是5μl。

本發(fā)明提供的一種用hplc測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法，適合用于測定蘇沃雷生原料藥及其制劑中蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的含量。

附圖說明

圖1示實施例1供試品溶液色譜圖。

具體實施方式

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面進一步披露一些非限制實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。

本發(fā)明所使用的試劑均可以從市場上購得或者可以通過本發(fā)明所描述的方法制備而得。

本發(fā)明所使用的分析試劑及溶液符合中國藥典2010版附錄的要求，除另有說明外。

實施例1

色譜條件：

色譜系統(tǒng)：美國agilent1260型高效液相色譜系統(tǒng)及工作站；

色譜柱：poroshell120ec-c18，4.6×100mm，2.7μm；

檢測器：dad檢測器，檢測波長約254nm；

流動相a相：0.1％的磷酸溶液:甲醇＝9:1(體積比)；流動相b相是甲醇溶液；

梯度洗脫程序如上表1所示；

流速：約1.0ml/min；

柱溫：約40℃；

供試品溶液進樣體積為約5μl。

實驗步驟：

供試品溶液：取供試品約40mg，精密稱定，置100ml容量瓶中，先用50ml甲醇超聲溶解，再用超純水稀釋至刻度，搖勻，即得。

按照中國藥典2010版第二部附錄ⅴd高效液相色譜法，取供試品溶液，在所述色譜條件下進樣檢測，并記錄色譜圖，如圖1所示。圖1中保留時間10.67分鐘的色譜峰為蘇沃雷生(suvorexant)的色譜峰；其余為蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的色譜峰；具體實驗結(jié)果如表2所示：

實施例1表明，本發(fā)明提供的分析方法，在測定蘇沃雷生原料藥的有關(guān)物質(zhì)中，靈敏度高，分離度好，操作方便等優(yōu)點。

因此，本發(fā)明的一種用hplc測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)的方法，能夠有效分離測定蘇沃雷生有關(guān)物質(zhì)，具有分離度好，靈敏度高，操作方便等優(yōu)點。

本發(fā)明的方法已經(jīng)通過較佳實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明內(nèi)。