一種紅棗中總糖含量的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及分析化學領域，特別涉及一種紅棗中總糖含量的檢測方法。
【背景技術】
[0002] 紅棗(Zizyphus jujuba Mill.)為鼠李科棗屬植物成熟的果實，原產中國，是我國 的主要栽培種，現(xiàn)亞洲、歐洲、非洲、美洲和大洋洲的亞熱帶、溫帶地區(qū)的很多國家已有引 種，但尚少較大規(guī)模的經濟栽培。紅棗全身都是寶，其果實、種仁、根皮都有藥用功效，在《名 醫(yī)別錄》、《神農本草》、《本草綱目》、《中醫(yī)大辭典》等醫(yī)學名著中均有醫(yī)療價值的記載，認為 紅棗有健脾養(yǎng)胃、益血壯神之功效?，F(xiàn)代醫(yī)學研究表明，紅棗具有促進免疫、抗氧化、降脂、 抗腫瘤等多種藥理活性。近年來，隨著科技的進步與社會的發(fā)展，人們的保健意識日益增 強，對保健食品的需求迅速增加。紅棗以其特有的藥食同源及豐富的營養(yǎng)成分、優(yōu)良的保健 作用、顯著的療效，被人們譽為"天然的保健食品"，受到國內外眾多科研人員的青睞。研究 顯示，存在于大棗中的糖類主要以果糖、葡萄糖和蔗糖為主。目前研究主要采用紫外分光光 度計技術建立了大棗及棗屬藥用植物中包括糖類等多種化學成分的分析評價方法，但所測 定指標對照品分離制備難度大、分析成本高，作為大棗藥材質量控制方法不易推廣。截止目 前，《中國藥典》尚未見收載用于大棗藥材分析評價的有效方法，不利于大棗藥材及其制劑 產品的質量控制。
[0003] 據(jù)文獻報道，紅棗中不僅含有糖、蛋白質、氨基酸、膳食纖維、礦質元素等常見的營 養(yǎng)物質，還含有三萜酸、黃酮、皂苷、腺苷、脂肪油、
[0004] 多種維生素等生理活性物質，其中糖類成分含量最為豐富，約占干物質的60 %~ 80%。目前對于紅棗藥材或者紅棗提取物中總糖的測定方法是紫外分光光度計法，此方法 專屬性不好，準確度差，容易受輔料的影響。因此尋找一種不易受輔料影響的具有較好專屬 性和準確性的紅棗總糖含量的測定方法已經成為近年來的研究熱點之一。

【發(fā)明內容】

[0005] 有鑒于此，本發(fā)明提供了一種紅棗中總糖含量的檢測方法。目前對于紅棗藥材、紅 棗提取物、紅棗成品中總糖的測定方法是紫外分光光度計法，如苯酚硫酸法、蒽酮硫酸法 等，此方法是使用硫酸將聚糖水解為單糖，用比色法測定單糖的含量。當樣品中含有環(huán)糊 精、麥芽糖糊精、淀粉等輔料時，使用此方法測定時硫酸也會將輔料水解為單糖，因此不能 準確測定。同時紫外分光度計法受人為影響較大，專屬性不強，準確度差。本發(fā)明方法針對 上述問題，排除了紅棗產品原料中其它輔料(如環(huán)糊精、麥芽糖糊精、淀粉等）的干擾，能 夠準確測定紅棗以及紅棗產品原料中總糖的含量;通過對紅棗總糖的含量測定方法進行線 性、精密度試驗、重現(xiàn)性試驗、回收率試驗等以證明該檢測方法科學有效，從而達到對紅棗 總糖的含量測定起到質量控制的目的，也為紅棗的規(guī)模化使用提供了技術支持。
[0006] 本發(fā)明的目的在于提供了一種紅棗及其衍生品中總糖含量的檢測方法。
[0007] 為解決上述技術問題，本發(fā)明采用下述技術方案：
[0008] 一種紅棗中總糖檢測方法，其采用高效液相色譜儀進行測定。
[0009] 優(yōu)選地，取供試品，所述供試品可為食用紅棗、紅棗藥材、紅棗制品或紅棗提取物。
[0010] 優(yōu)選地，將供試品加水回流提取，過濾，稀釋，制得供試品溶液，注入高效液相色譜 儀進行測定，所述高效液相色譜條件為：以純化水和色譜有機溶劑進行洗脫，根據(jù)高效液相 色譜結果獲得紅棗總糖的含量。
[0011] 優(yōu)選地，所述過濾是經0.22μπι有機系濾膜過濾。
[0012] 優(yōu)選地，所述供試品可以為食用紅棗、紅棗藥材、紅棗制品或紅棗提取物。
[0013] 優(yōu)選地，所述加水量為紅棗供試品質量的20~100倍。
[0014]優(yōu)選地，所述稀釋倍數(shù)為4~6倍。
[0015]優(yōu)選地，所述回流提取時間至少為lh。
[0016] 優(yōu)選地，如果供試品為紅棗提取物時，直接加提取物質量的300~500倍純化水溶 解，過濾后注入高效液相色譜儀進行分析測定。
[0017] 優(yōu)選地，所述高效液相色譜儀使用的色譜柱為碳水化合物色譜柱或者氨基柱。
[0018] 優(yōu)選地，所述高效液相色譜條件中的檢測器可以為示差檢測器或者蒸發(fā)光散射檢 測器。
[0019] 優(yōu)選地，所述高效液相色譜條件中流動相中水與色譜有機溶劑的體積比為5:5~9 :1〇
[0020] 優(yōu)選地，所述高效液相色譜條件中色譜有機溶劑選自乙腈、甲醇、乙醇中的一種或 幾種。
[0021] 優(yōu)選地，所述高效液相色譜條件的流動相流速為0.5~1.2mL/min，柱溫為20~50 Γ。
[0022] 所述的檢測方法，所述高效液相色譜結果的色譜圖中可以觀察得到果糖、葡萄糖 和蔗糖色譜峰，此三個化合物的色譜峰具有較好的對稱性(對稱因子為0.8~1.2)，并與雜 質明顯分離開來，分離度均大于1.5;三個化合物的含量之和與紅棗總糖含量(紫外分光光 度計法測定結果)相當。
[0023] 優(yōu)選地，高效液相色譜的檢測條件為:儀器為Waters HPLC 1525series，色譜柱為 Prevail Carbohydrate ES碳水化合物色譜柱（4.6*250mm，5ym)，柱溫為20~50°C，流速為 0.5~1.2mL/min，進樣體積為20yL;Waters 2424蒸發(fā)光散射檢測器設定參數(shù)為:漂移管溫 度為80°C，氣體壓力為40Psi。
[0024]優(yōu)選地，流動相由流動相A和流動相B組成，流動相A為乙腈，流動相B為純化水。 [0025]優(yōu)選地，所述梯度洗脫的條件為:0~26min，流動相A相的體積分數(shù)保持為80%，B 相的體積分數(shù)保持為20% ; 26~28min，流動相A相的體積分數(shù)由80%降為20%，流動相B相 的體積分數(shù)由20 %升至80 % ; 28~33min，流動相A相的體積分數(shù)保持20%，流動相B相的體 積分數(shù)保持80% ; 33~35min，流動相A相的體積分數(shù)由20%升為80%，流動相B相的體積分 數(shù)由80%降至20% ; 35~40min，流動相A相的體積分數(shù)保持80%，流動相B相的體積分數(shù)保 持 20 %。
[0026] 果糖、葡萄糖及鹿糖對應的保留時間分別約為9.2min、12.6min和19.9min。
【附圖說明】
[0027] 圖1:對照品高效液相色譜圖；
[0028] 圖2:山東紅棗藥材總糖高效液相色譜圖；
[0029] 圖3:甘肅紅棗藥材總糖高效液相色譜圖；
[0030] 圖4:和田紅棗藥材總糖高效液相色譜圖；
[0031]圖5:麥芽糖糊精高效液相色譜圖。 實施例
[0032]下面通過實施例對本發(fā)明作進一步說明。應該理解的是，本發(fā)明實施例所述方法 僅僅是用于說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明的限制，在本發(fā)明的構思前提下對本發(fā)明制備方 法的簡單改進都屬于本發(fā)明要求保護的范圍。如無特別說明，實施例中用到的所有原料和 溶劑均貝勾自 Sigma Biochemical and Organic Compounds for Research and Diagnostic Clinical Reagents公司。
[0033] 實施例1:
[0034] 精密稱取果糖、葡萄糖、蔗糖對照品各20mg左右，置于lOmL容量瓶中，用純化水溶 解并稀釋至刻度，濃度為2000yg/mL，并繼續(xù)稀釋至100yg/mL、200yg/mL、400yg/mL、800yg/ mL、1600yg/mL，分別用0.22μηι有機系濾膜過濾，注入高效液相色譜儀進行檢測。果糖、葡萄 糖、蔗糖的標準曲線，分別以各自的濃度的對數(shù)值為橫坐標，峰面積的對數(shù)值為縱坐標，繪 制標準曲線，得到方程為：
[0035] 果糖： Υ=1·6513Χ+1·2696 r = 0.9998
[0036] 葡萄糖：Y= 1 · 6958X+0 · 2604 r = 1
[0037] 鹿糖： Y= 1 · 6922X+0 · 9644 r = 1
[0038] 高效液相色譜的檢測條件如下所示：
[0039] 儀