專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療心力衰竭的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心力衰竭的藥物組合物，屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
心力衰竭是指任何原因造成的心肌損傷，使心肌結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，導(dǎo)致心室泵血功能降低而引起的復(fù)雜的臨床綜合征，是各種心臟病的終末階段。隨著人口老齡化進(jìn)程的加快和高血壓、冠心病等常見(jiàn)心血管病發(fā)病率的上升，心力衰竭的患病率正逐漸升高。據(jù)國(guó)外統(tǒng)計(jì)，人群中心衰的患病率約為1.5％～2.0％，而65歲以上人群可達(dá)6％～10％。目前美國(guó)的心力衰竭患者約有500萬(wàn)人，每年新診斷病例約40萬(wàn)，每年約有25萬(wàn)人死于心衰，每年用于治療心衰的直接費(fèi)用超過(guò)70億美元，其住院費(fèi)用是所有惡性腫瘤費(fèi)用的2倍。而在我國(guó)，成年人心衰的患病率為0.9％，其中男性為0.7％，女性為1.0％，我國(guó)心衰的患病率雖低于西方國(guó)家，但由于我國(guó)人口基數(shù)大，按這個(gè)患病率計(jì)算，我國(guó)目前35～74歲成年人中仍約有400萬(wàn)心衰患者，且隨著高血壓、冠心病等常見(jiàn)心血管病發(fā)病率的增加，心力衰竭發(fā)病率呈不斷上升的趨勢(shì)，這不僅給患者及其家人帶來(lái)極大痛苦，而且造成了社會(huì)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，心力衰竭的治療已成為社會(huì)和醫(yī)學(xué)界共同關(guān)注的重要課題。
由于心力衰竭是因心室功能不全引起的一種臨床綜合癥，其特點(diǎn)表現(xiàn)為心輸出量減少，心室充填壓增加，可產(chǎn)生呼吸困難、疲勞及水腫等癥狀。所以其治療一般著眼于決定心臟功能的三個(gè)主要因素即前負(fù)荷、后負(fù)荷(阻抗)和心肌收縮力。目前用于心力衰竭治療的藥物主要有一下幾類(lèi)利尿劑，洋地黃類(lèi)藥物，血管擴(kuò)張劑，正性肌力藥如磷酸二酯酶II抑制劑、鈣增敏劑，內(nèi)皮素受體拮抗劑，血管緊張素II受體拮抗劑和醛固酮受體拮抗劑等，它們雖在心力衰竭的治療上發(fā)揮了很大的作用，但心衰患者的治療狀況尚未得到根本性的改善。因而開(kāi)發(fā)新的心力衰竭治療藥物仍是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。
在傳統(tǒng)祖國(guó)醫(yī)學(xué)上，心力衰竭屬“胸痹”、“心悸”、“怔忡”、“咳嗽”、“喘證”、“水腫”、“痰飲”和“積聚”等范疇。從古至今，很多中醫(yī)醫(yī)家對(duì)心力衰竭進(jìn)行了大量的中醫(yī)辨證客觀化研究，認(rèn)為中醫(yī)藥治療充血性心力衰竭有確切療效，特別是在改善癥狀，提高生活質(zhì)量方面有其優(yōu)越性，而國(guó)內(nèi)用于治療心力衰竭的中藥新藥制劑相對(duì)較少。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種組方合理、療效顯著的治療心力衰竭的藥物組合物。
充血性心力衰竭可歸屬于中醫(yī)學(xué)“心悸”、“水腫“、“喘證”等范疇，病機(jī)總屬本虛標(biāo)實(shí)。根據(jù)對(duì)充血性心力衰竭中醫(yī)證治規(guī)律證實(shí)心氣虛和血瘀是充血性心力衰竭最基本病機(jī)，氣虛進(jìn)一步發(fā)展為氣陽(yáng)兩虛、陽(yáng)氣虛脫和氣陰兩虛，而發(fā)展為氣陽(yáng)兩虛及陽(yáng)氣虛脫者較發(fā)展為氣陰兩虛者顯著為多見(jiàn)；血瘀可進(jìn)一步發(fā)展而兼有水濕內(nèi)停，痰濁內(nèi)阻，而導(dǎo)致虛實(shí)交錯(cuò)，變化為多種證候，而氣虛血瘀為其始動(dòng)因素。據(jù)此我們認(rèn)為益氣溫陽(yáng)、活血化瘀、行氣利水在充血性心力衰竭的治療上有著不可替代的作用。在此基礎(chǔ)上我們擬定了具有益氣溫陽(yáng)、活血化瘀、行氣利水功效的中藥復(fù)方，符合中醫(yī)“方隨法出，法隨證立”的理論。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案 一種治療心力衰竭的藥物組合物，由以下重量份數(shù)的藥物制成紅參5-12份，炙黃芪15-45份，炮附子5-15份，炙淫羊藿8-15份，丹參10-20份，川芎5-15份，枳實(shí)5-15份，麥冬6-15份，葶藶子5-15份。
以上配方進(jìn)一步優(yōu)選下列配比紅參8-10份，炙黃芪20-40份，炮附子10-12份，炙淫羊藿9-12份，丹參13-17份，川芎8-10份，枳實(shí)8-10份，麥冬8-10份，葶藶子8-10份。
最優(yōu)選的配方為紅參9份，炙黃芪30份，炮附子12份，炙淫羊藿9份，丹參15份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬9份，葶藶子9份。
一種治療心力衰竭的藥物制劑，由上述藥物組合物和藥用輔料組成。所述藥用輔料包括但不限于糊精和甜菊糖。
所述制劑為口服劑型，包括丸劑、膠囊、片劑、口服液、散劑、滴丸、煎膏劑、糖漿劑、顆粒劑。
紅參來(lái)源于五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey的栽培品經(jīng)過(guò)蒸制后的干燥根；炙黃芪來(lái)源于豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪A.membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根經(jīng)過(guò)蜜炙法加工后的炮制加工品；炙淫羊藿來(lái)源于小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornumMaxim.、箭葉淫羊藿E.sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿E.pubescensMaxim.、巫山淫羊藿E.wushanense T.S.Ying、或朝鮮淫羊藿E.koreanum Nakai的干燥地上部分經(jīng)過(guò)羊脂油炒制后的炮制品；丹參來(lái)源于唇形科植物丹參Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根及根莖；炮附子來(lái)源于毛茛科植物烏頭Aconitum carmichaeli Debx.的子根的加工品；川芎來(lái)源于傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根莖；枳實(shí)來(lái)源于蕓香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培變種或酸橙C.sinensisOsbeck的干燥幼果麥冬來(lái)源于百合科植物麥冬Ophiopogon japonicus(Thunb.)Ker-Gawl.的干燥塊根；葶藶子來(lái)源于十字花科植物獨(dú)行菜Lepidium spetalum Willd.或播娘蒿Descurainia sophia(L.)Webb ex Prantl的干燥成熟種子。
在本方中，紅參、炙黃芪共為君藥，補(bǔ)益心氣，氣為血帥，氣行則血行；炮附子、炙淫羊藿助陽(yáng)溫腎，炮附子上助心陽(yáng)以通脈，下助腎陽(yáng)益命火，炙淫羊藿為溫陽(yáng)藥中的溫潤(rùn)之品，守而不走，兩者共奏溫陽(yáng)之效，也取“欲溫心陽(yáng)，必助腎陽(yáng)”之意；丹參、川芎活血化瘀，以助氣血運(yùn)行同為臣藥；葶藶子、枳實(shí)有行氣利水、祛痰利濕之效，也有防止溫補(bǔ)過(guò)度之用，麥冬益氣滋陰，可達(dá)“善補(bǔ)陽(yáng)者，必于陰中求陽(yáng)，則得陽(yáng)助而生化無(wú)窮”之效，同時(shí)也可防助陽(yáng)藥物過(guò)躁之虞，起佐使之用。諸藥共用，取益氣溫陽(yáng)，活血化瘀，行氣利水之功效。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為紅參可增強(qiáng)心肌收縮力，降低周?chē)茏枇托募『难趿?，明顯改善心力衰竭患者血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，而且還可清除氧自由基，抑制心肌脂質(zhì)過(guò)氧化而達(dá)到保護(hù)心肌的作用，其主要成份人參總皂苷具有抗心肌缺血再灌注損傷的作用，可明顯對(duì)抗實(shí)驗(yàn)性犬心源性休克，改善血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，緩解心力衰竭。黃芪可增加心絞痛患者的左心排血量，可降低急性心肌梗塞患者射血前期/左室射血時(shí)間比值，顯著改善心力衰竭患者的左室構(gòu)型和射血功能，而其主要成份黃芪總皂甙具有正性肌力作用，可明顯對(duì)抗心力衰竭。附子中的消旋去甲烏頭堿有較強(qiáng)的正性肌力作用，能增加冠脈血流量，降低外周阻力及心肌耗氧量，改善心肌能量代謝，促進(jìn)衰竭心肌的DNA合成，增加心肌能源儲(chǔ)備，而且有清除氧自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物形成、保護(hù)心肌的作用。淫羊藿除具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗衰老、抗腫瘤和改善腎功能外，它還具有擴(kuò)張血管，降低外周阻力，增加心腦血管血流量，促進(jìn)造血等功能?；钛鏊幍⒊呋钛鲎饔猛猓€可舒張血管，保護(hù)心肌高能磷酸化合物及線粒體膜，減少缺血再灌注心肌損傷，縮小心肌梗塞面積，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞，抗氧化、抗心律失常等作用；川芎可擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、降低外周阻力、增加血流量作用，還具有抗血小板聚集，抗血栓形成等作用，現(xiàn)已知其主要成份味川芎嗪。葶藶子除具有一定的利尿作用外，還有很強(qiáng)的強(qiáng)心作用，它可使在位蛙心停止于收縮期，利用在位貓心、貓心肺裝置，貓心電圖等研究方法，發(fā)現(xiàn)它可加強(qiáng)心肌收縮力，減慢心率，可增加衰竭心臟的心輸出量，降低靜脈壓，其中葶藶苷為其有效成分之一。枳實(shí)可加強(qiáng)心肌收縮力，減慢心率，增加心輸出量、冠脈流量和腎血流量，體外實(shí)驗(yàn)它還有明顯的抗血栓、抗血小板聚集和降低紅細(xì)胞聚集等作用。麥冬則具有明顯的抗心肌缺血作用，可促進(jìn)心肌損傷愈合，縮小心肌梗塞范圍，還具有抗心律失常、改善微循環(huán)等作用。綜上所述，上述九味藥物通過(guò)改善心肌的營(yíng)養(yǎng)代謝、增強(qiáng)心肌的收縮力；降低血粘度、擴(kuò)張小血管，以減低心臟后負(fù)荷，利尿以減輕心臟前負(fù)荷等作用，分別作用于治療心力衰竭的不同環(huán)節(jié)，以達(dá)到治療心力衰竭的效果，同時(shí)這與西藥抗充血性心力衰竭的擴(kuò)血管、利尿、強(qiáng)心、改善心肌代謝的治療方案是不謀而合的。
該處方中以紅參、黃芪為君藥，臣以淫羊藿、附子，佐以丹參、川芎，枳實(shí)、葶藶子為使藥，麥冬為反佐藥。從所含的有效成分或化學(xué)成分來(lái)看，紅參、黃芪和麥冬均含有皂苷類(lèi)成分，也是其主要有效成分；淫羊藿含有以淫羊藿苷為代表的黃酮類(lèi)有效成分；枳實(shí)、川芎含有揮發(fā)油。為了保證有效成分的提取，同時(shí)達(dá)到精制、減小服用量的目的，設(shè)計(jì)工藝為紅參、黃芪、淫羊藿、麥冬采用對(duì)上述各味藥中有效成分溶解度較好的乙醇提?。昏讓?shí)、川芎提取揮發(fā)油，藥渣與其余諸藥水煎煮；合并兩種提取液，濃縮，醇沉，醇沉液濃縮后，制粒，加入揮發(fā)油，目標(biāo)劑型為顆粒劑。紅參、黃芪、淫羊藿的提取工藝考察采用人參皂苷Rgl、黃芪甲苷、淫羊藿苷為指標(biāo)，應(yīng)用正交試驗(yàn)進(jìn)行考察，分析各因素的影響程度；水提取采用常規(guī)工藝設(shè)計(jì)；揮發(fā)油提取采用正交設(shè)計(jì)，考察提取時(shí)間、加水量等因素對(duì)出油量的影響。
本發(fā)明的生產(chǎn)工藝按配方量制取九味藥味，取枳實(shí)提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集；紅參、炙黃芪、炙淫羊藿、麥冬等四味藥，以60％乙醇回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮成稠膏，備用；余藥與枳實(shí)藥渣水液加水煎煮2次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮，加入上述稠膏，加乙醇使含醇量為70％，靜置過(guò)夜，取上清液，回收乙醇并濃縮成相對(duì)密度為1.20～1.30(50℃)的清膏。取清膏，加入適量的糊精和甜菊糖(每公斤顆粒中含糊精500克，甜菊糖約2克)，制成顆粒，干燥，加入上述枳實(shí)揮發(fā)油，混勻，制成1000g，即得。
本品為棕色顆粒；味甜、微苦。具有益氣溫陽(yáng)，活血化瘀、行氣利水的功效。用于氣虛血淤型心力衰竭治療，商品名暫定為“參芪益心顆?！?。
服用方式為口服，一次10克，一日2次。
以下情況者須慎服或在醫(yī)生的指導(dǎo)下服藥①.孕婦；②.中醫(yī)辨證屬實(shí)熱證者慎用；③.陰虛火旺者慎用；④.婦女月經(jīng)過(guò)多及出血性疾病者慎用；⑤.肝腎功能不全者。服用本藥物應(yīng)忌食生冷油膩辛辣食物，藥品性狀發(fā)生改變時(shí)禁止服用。
針對(duì)本發(fā)明的藥效學(xué)試驗(yàn)主要研究了參芪益心顆粒對(duì)犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭、大鼠實(shí)驗(yàn)性心力衰竭、大鼠利尿作用、小鼠耳廓微循環(huán)、小鼠常壓耐缺氧和小鼠低溫游泳等的影響。結(jié)果表明①.參芪益心顆粒3.0g生藥/kg對(duì)戊巴比妥鈉所致犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯的改善作用，主要表現(xiàn)為升高左室末期收縮壓(LVSP)及左室壓最大上升速率(dp/dtmax)，增加心輸出量(CO)，升高血壓(BP)，縮短左室收縮至發(fā)生dp/dtmax間隔時(shí)間(R-dp/dtmax)，降低左室末期舒張壓(LVEDP)，同時(shí)明顯增加腎血流量(RBF)；②.參芪益心顆粒10g生藥/kg可逆轉(zhuǎn)由于主動(dòng)脈狹窄所造成的后負(fù)荷增加導(dǎo)致的LVDEP、LVSP、動(dòng)脈血壓峰值(SAP)及dp/dtmax增加，心臟指數(shù)、左室指數(shù)增加等心臟功能的異常改變，并改善心肌K+、Na+離子代謝，調(diào)整血漿血管緊張素II(AII)水平，對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯改善作用；③.參芪益心顆粒10g生藥/kg能明顯增加大鼠排尿量，可促進(jìn)尿液中K+、Na+、Cl-的排泄，提示該藥具有明顯利尿作用；④.參芪益心顆粒各劑量組均能明顯改善血液流態(tài)，減輕小鼠耳廓微循環(huán)障礙的作用；⑤.參芪益心顆粒各劑量組與對(duì)照組比較，耐缺氧時(shí)間無(wú)顯著差異，但有延長(zhǎng)的趨勢(shì)；⑥.參芪益心顆粒各劑量組可增加小鼠低溫游泳存活時(shí)間。
小鼠急性毒性試驗(yàn)表明參芪益心顆粒干粉用常水稀釋藥物濃度為4.94g生藥/ml，累積劑量為197.6g生藥/kg，是臨床用藥的124倍。動(dòng)物未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)及死亡。大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)表明參芪益心顆粒80g、40g、20g生藥/kg(分別為臨床擬用量的50、25、12.5倍)，連續(xù)灌胃給藥6個(gè)月，各給藥組在藥后3個(gè)月、6個(gè)月及停藥4周，未見(jiàn)不良反應(yīng)，各項(xiàng)檢查指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。病理檢查各臟器均未見(jiàn)該藥引起的明顯中毒性病理改變。提示本品的毒性較低。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明組方科學(xué)，提取工藝明確、可靠、穩(wěn)定性好。急性毒性和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)顯示本品的毒性較低，藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明對(duì)戊巴比妥鈉所致犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯的改善作用。本發(fā)明對(duì)主動(dòng)脈狹窄法所致大鼠慢性心力衰竭有明顯改善作用，降低左室末期舒張壓、左室壓、動(dòng)脈血壓，心臟、左室、肝臟及肺臟指數(shù)下降，表明心臟負(fù)荷下降，心功能改善，同時(shí)心肌K+含量升高，血漿心鈉素(ANF)水平降低，與模型組比較均有顯著性差異。本發(fā)明具有明顯利尿作用，能增加大鼠排尿量，可促進(jìn)尿液中K+、Na+、Cl-的排泄。同時(shí)還具有耐缺氧作用。因此本發(fā)明具有明顯改善心力衰竭的藥理作用，并能調(diào)整和改善心血管系統(tǒng)的功能，而且毒性較低，為臨床治療心力衰竭提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
下面結(jié)合較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，凡依照本發(fā)明公開(kāi)內(nèi)容進(jìn)行的任何本領(lǐng)域的等同替換均屬于對(duì)本發(fā)明專(zhuān)利權(quán)的侵犯。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 一、配方紅參6份，炙黃芪30份，炮附子15份，炙淫羊藿9份，丹參20份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬15份，葶藶子9份。
二、生產(chǎn)工藝 1.揮發(fā)油提取工藝處方中的枳實(shí)、川芎為常用中藥，含揮發(fā)油成分，為了保證成分提取的完全，工藝中設(shè)計(jì)了提取過(guò)程。具體提取方法為將枳實(shí)、川芎粉碎成粗粉，過(guò)40目篩，依照處方量稱(chēng)取枳實(shí)、川芎藥材粗粉，加水8倍量，浸泡3小時(shí)，采用水蒸氣蒸餾方法提取12小時(shí)，得到揮發(fā)油。
2.紅參、炙黃芪、炙淫羊藿和麥冬等藥材的提取工藝依照處方量稱(chēng)取4味藥物，以60％乙醇回流提取2次，每次2小時(shí)，合并提取液濾過(guò)，濾液回收乙醇并濃縮成稠膏，備用。
3.余藥與川芎、枳實(shí)藥渣合并，加水煎煮2次，每次1小時(shí)，合并煎液與提取揮發(fā)油后的水溶液，濾過(guò)，濾液濃縮，加入上述稠膏，加乙醇使含醇量達(dá)70％，靜置過(guò)夜，取上清液，回收乙醇并濃縮成相對(duì)密度為1.20～1.30(50℃)的清膏。取清膏，加入適量的糊精和甜菊糖甙(每公斤顆粒中含糊精500克，甜菊糖約2克)，按常規(guī)制劑工藝制成顆粒，干燥，加入上述川芎、枳實(shí)揮發(fā)油，混勻，制成1000g，即得。
實(shí)施例2 一、配方紅參12份，炙黃芪30份，炮附子9份，炙淫羊藿9份，丹參20份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬12份，葶藶子9份。
二、生產(chǎn)工藝 同實(shí)施例1。
實(shí)施例3 一、配方紅參8份，炙黃芪30份g，炮附子12份，炙淫羊藿12份，丹參15份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬9份，葶藶子9份。
二、生產(chǎn)工藝 同實(shí)施例1。
實(shí)施例4 一、配方紅參9份，炙黃芪40份g，炮附子10份，炙淫羊藿9份，丹參15份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬9份，葶藶子9份。
二、生產(chǎn)工藝 同實(shí)施例1。
實(shí)施例5 最優(yōu)選的配方為紅參9份，炙黃芪30份，炮附子12份，炙淫羊藿9份，丹參15份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬9份，葶藶子9份。
二、生產(chǎn)工藝 同實(shí)施例1。
實(shí)施例6.參芪益心顆粒對(duì)犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭的影響 一.實(shí)驗(yàn)材料 1.藥物參芪益心顆粒提取干粉，按實(shí)施例5配方和方法制備，6.175g生藥/g粉，批號(hào)20031013，北京華醫(yī)神農(nóng)醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司提供，藥效學(xué)劑量均以生藥量計(jì)算，試驗(yàn)用生理鹽水配成所需濃度。人參生脈飲口服液，北京同仁堂制藥二廠生產(chǎn)(批號(hào)3262268)；戊巴比妥鈉(化學(xué)純)，廣東佛山市化工實(shí)驗(yàn)廠進(jìn)口分裝(批號(hào)860901)；地高辛片，0.25mg/片，杭州民生藥廠生產(chǎn)(批號(hào)0004-660)。肝素鈉注射液，2ml:12500u/支，南京生物化學(xué)制藥廠生產(chǎn)〔批號(hào)021102〕。0.9％氯化鈉注射液，北京雙鶴藥業(yè)有限公司生產(chǎn)(批號(hào)030312312)。
2.動(dòng)物健康成年雜種犬40只，體重15.48±0.56kg，雌雄兼用。由北京市通利實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖廠提供[京動(dòng)許字(2000)第010號(hào)]。
二.實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)分兩個(gè)部分8組進(jìn)行，第一部分為正常犬給藥組，共分兩組(1)空白對(duì)照組(n＝5)，生理鹽水3ml/kg；(2)參芪益心顆粒組(n＝5)，3.0g生藥/kg。第二部分為模型給藥組，共分六組(1)空白對(duì)照組(n＝5)，生理鹽水3ml/kg；(2)陽(yáng)性對(duì)照藥組(n＝5)，地高辛片，100ug/kg；(3)人參生脈飲組(n＝5)，2.0g生藥/kg；(4)參芪益心顆粒組(n＝5)，1.5g生藥/kg；(5)參芪益心顆粒組(n＝5)，3.0g生藥/kg；(6)參芪益心顆粒組(n＝5)，6.0g生藥/kg。上述實(shí)驗(yàn)藥物均在實(shí)驗(yàn)前用生理鹽水配制成等體積(3ml/kg)，經(jīng)十二指腸給藥。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈麻醉，氣管插管，聯(lián)接電動(dòng)人工呼吸機(jī)(SC-3型，上海醫(yī)療設(shè)備廠)分離右側(cè)股靜脈，連接電腦微量注射泵(AJ-5803型，上海)，以備輸入戊巴比妥鈉；分離右側(cè)股動(dòng)脈插管，測(cè)量動(dòng)脈血壓(BP)；左側(cè)第四肋間開(kāi)胸，暴露心臟，剪開(kāi)心包，做心包床，分離主動(dòng)脈，放置電磁流量計(jì)(MFV-1100型，日本光電)探頭，測(cè)量心輸出量(CO)；左心室尖部插管，連接壓力換能器(MPU-0.5A)，經(jīng)載波放大器(AP-601G)測(cè)定左室內(nèi)壓峰值(LVSP)，經(jīng)直流放大器(AD-601G)放大10倍，測(cè)定左室舒張末期壓(LVEDP)，將上述載波放大器(AP-601G)輸出信號(hào)經(jīng)微分器(ED-601G)測(cè)定左心室內(nèi)壓變化速率最大值(dp/dtmax)；用心率計(jì)(AT-601G)測(cè)定心率(HR)并描記變化曲線；以心電放大器(AC-601G)記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)，根據(jù)心電R波峰判斷心室開(kāi)始收縮的起點(diǎn)至dp/dtmax的間隔時(shí)間(R-dp/dtmax)；在左心室表面縱向放置心肌張力換能器(TG-12T)經(jīng)載波放大器(AP-601G)測(cè)量左室心肌收縮力(LVMCF)。腹部手術(shù)腎動(dòng)脈放置電磁流量計(jì)(MFV-1100型，日本光電公司)探頭，測(cè)量腎血流量(RBF)。上述各項(xiàng)指標(biāo)同步記錄于MP-100多導(dǎo)生理記錄儀(美國(guó)BIOPAC)。
施腹部手術(shù)，十二直腸插管，以備給予所試藥物。靜脈推注肝素注射液(125u/kg)進(jìn)行肝素化，30min后，記錄各項(xiàng)指標(biāo)，作為心衰前基礎(chǔ)值，經(jīng)蠕動(dòng)泵恒速輸入2％戊巴比妥鈉，輸入量為0.2ml/min·kg。以dp/dtmax下降70％作為心力衰竭指標(biāo)，達(dá)此值后調(diào)整戊巴比妥鈉給入量為0.08ml/min·kg，持續(xù)15min，保持dp/dtmax、LVSP相對(duì)穩(wěn)定，記錄各項(xiàng)心衰后指標(biāo)〔藥前值〕，十二指腸給入所試藥物，分別于藥后15、30、45、60、90、120、180min記錄各項(xiàng)觀測(cè)指標(biāo)。
正常給藥組觀察正常犬血流動(dòng)力學(xué)相關(guān)指標(biāo)，術(shù)后直接給藥，分別于藥前、藥后15、30、45、60、90、120、180min記錄各項(xiàng)指標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以藥后不同時(shí)間的實(shí)測(cè)值與藥前(心衰后)進(jìn)行自身比較，給藥組不同時(shí)間變化百分率與對(duì)照組進(jìn)行組間比較，以t檢驗(yàn)判斷其顯著性。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果正常給藥組血流動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示，參芪益心顆粒3.0g生藥/kg可于藥后30min和180min增加CO，而對(duì)正常動(dòng)物L(fēng)VSP，dp/dtmax、RBF以及LVEDP、R-dp/dtmax、HR、LVMCF及心電圖等均無(wú)明顯改變，與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。
戊巴比妥鈉造成犬急性實(shí)驗(yàn)性心力衰竭后，血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)發(fā)生明顯變化，30只犬實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示LVSP由162.68±7.27mmHg降至72.42±5.53mmHg，下降55.27±4.65％；dp/dtmax由3076.57±50.07mmHg/s降至1028.66±79.62mmHg/s，下降66.59±1.66％；SP由164.24±2.68mmHg降至75.50±5.39mHg，下降44.06±3.39％；LVEDP由3.86±0.84mmHg升至13.18±1.21mmHg，上升290.27±85.57％；R-dp/dtmax由88.21±3.98ms增至126.13±8.68ms，增加42.65±10.45％；HR由164.37±8.29beats/min減慢至136.68±6.92beats/min，減慢21.38±3.05％；CO由1.576±0.101L/min下降至0.827±0.138L/min，下降49.08±8.45％；LVMCF由30.75±3.20mm減至19.73±3.12mm，下降35.94±8.19％。結(jié)果表明，靜脈恒速輸入一定濃度戊巴比妥鈉，麻醉犬出現(xiàn)典型的急性心力衰竭，持續(xù)時(shí)間可達(dá)3hr。各給藥組對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的影響如下 1.對(duì)左室內(nèi)壓峰值(LVSP)的影響 結(jié)果見(jiàn)表1。對(duì)照組(生理鹽水3ml/kg)藥后15min至180min，LVSP保持較低的水平。參芪益心顆粒三個(gè)劑量組藥后15min即有明顯增加LVSP的作用，并一直持續(xù)至藥后180min。參芪益心顆粒(6.0g生藥/kg)劑量組藥前(心衰后)LVSP為77.04±9.66mmHg，藥后15min時(shí)為104.82±11.85mmHg，隨著時(shí)間的推移，作用逐漸加強(qiáng)，120min時(shí)為140.34±14.50mmHg，分別增加了36.81±13.63％和85.23±36.58％，與藥前比較(P＜0.01)及與對(duì)照組比較(P＜0.05)差異均非常顯著。
2.對(duì)左室壓最大上升速率(dp/dtmax)的影響 結(jié)果見(jiàn)表2。dp/dtmax作為評(píng)價(jià)心肌收縮性及強(qiáng)心甙作用的重要指標(biāo)之一，本實(shí)驗(yàn)以戊巴比妥鈉造成犬心衰模型，心衰后dp/dtmax明顯下降，參芪益心顆粒則能明顯增加dp/dtmax，藥后60-90min作用最為顯著，參芪益心顆粒6.0g生藥/kg劑量組分別由藥前1107.0±139.9mmHg/s上升至2270.2±273.3mmHg/s和2373.0±356.9mmHg/s，上升率分別為109.47±49.64％和118.56±52.63％，與藥前及對(duì)照組比較均有顯著性差異(P＜0.01和P＜0.01)；中劑量和小劑量也分別表現(xiàn)出不同程度的增加作用，藥后不同時(shí)間點(diǎn)的dp/dtmax高于相應(yīng)的藥前對(duì)照組；三個(gè)劑量組增加dp/dtmax作用可維持至藥后180min。地高辛作用強(qiáng)度較大，起效速度與參芪益心顆粒基本相當(dāng)；生理鹽水組則無(wú)明顯改變。
3.對(duì)左室收縮至發(fā)生dp/dtmax間隔時(shí)間(R-dp/dtmax)的影響 結(jié)果見(jiàn)表3。戊巴比妥鈉誘發(fā)動(dòng)物心衰后R-dp/dtmax明顯延長(zhǎng)，參芪益心顆粒則可在一定程度上縮短R-dp/dtmax，加快心肌細(xì)胞的反應(yīng)速度。6.0g生藥/kg劑量組藥效作用在藥后15min即可表現(xiàn)出來(lái)，并一直持續(xù)至藥后180min，180min時(shí)參芪益心顆粒大劑量組的R-dp/dtmax與藥前相比分別縮短了22.74±15.95％與對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
4.對(duì)左室心肌收縮力(LVMCF)的影響 結(jié)果見(jiàn)表4。生理鹽水對(duì)照組LVMCF給藥后隨時(shí)間延長(zhǎng)因動(dòng)物代償性恢復(fù)而有所增加，但與藥前相比無(wú)明顯差異。參芪益心顆粒6.0g/kg劑量組LVMCF藥后15min明顯增加，120-180min也有明顯增加；中劑量組3.0g生藥/kg藥后90min時(shí)也有明顯地增加，與藥前比較差異顯著，LVMCF接近心衰前水平。
5.對(duì)左室舒張末期壓(LVEDP)的影響 結(jié)果見(jiàn)表5。心衰后心臟心肌收縮張力降低、左室內(nèi)壓下降的同時(shí)，LVEDP顯著增加，參芪益心顆粒在增加心衰后心臟LVMCF、LVSP的同時(shí)，顯著降低LVEDP，6.0g生藥/kg劑量組藥后120、180min時(shí)LVEDP分別下降57.45％和61.08％，與藥前及對(duì)照組比較差異顯著(P＜0.001和P＜0.05)。
6.對(duì)心輸出量(CO)的影響結(jié)果 見(jiàn)表6。參芪益心顆粒三各劑量組有不同程度增加CO的作用，6.0g/kg劑量組作用最為顯著，藥后60-180min可明顯增加CO的作用，與對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05)。
7.對(duì)腎血流量(RBF)的影響 結(jié)果見(jiàn)表7。本實(shí)驗(yàn)以戊巴比妥鈉誘發(fā)動(dòng)物急性心衰后導(dǎo)致外周血流量降低，實(shí)驗(yàn)觀察到動(dòng)物RBF明顯降低，生理鹽水對(duì)RBF無(wú)明顯影響。參芪益心顆粒三個(gè)劑量組有不同程度的增加腎血流量的作用，6.0g生藥/kg藥后180min，RBF與對(duì)照組比較(P＜0.05)，有顯著性差異。
8.對(duì)動(dòng)脈血壓(BP)及的影響 結(jié)果見(jiàn)表8-1和8-2。生理鹽水對(duì)心衰后血壓無(wú)明顯影響。參芪益心顆粒三個(gè)劑量組藥后均增加股動(dòng)脈收縮壓(SP)、舒張壓(DP)，藥后SP、DP比藥前增加可達(dá)80％以上，與藥前及鹽水組比較均有非常顯著性差異，其作用可維持至藥后180min。
9.對(duì)標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)各參數(shù)、心率(HR)的影響 結(jié)果見(jiàn)表9-1、9-2、9-3、9-4。實(shí)驗(yàn)觀察到戊巴比妥鈉誘發(fā)急性心力衰竭后動(dòng)物ECG(標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián))參數(shù)有所改變，動(dòng)作電位在心房?jī)?nèi)的傳導(dǎo)減慢導(dǎo)致PR間期有所延長(zhǎng)；心臟復(fù)極速度減慢，導(dǎo)致QT間期有所延長(zhǎng)，參芪益心顆粒對(duì)其有部分改善作用，增強(qiáng)心房?jī)?nèi)的電傳導(dǎo)，縮短心室復(fù)極時(shí)程。參芪益心顆粒三劑量組對(duì)心衰后動(dòng)物HR無(wú)明顯影響，與生理鹽水對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。
四.結(jié)論 實(shí)驗(yàn)犬靜脈輸入一定量戊巴比妥鈉，可誘發(fā)典型的急性實(shí)驗(yàn)性心力衰竭，表現(xiàn)為dp/dtmax、LVSP、LVMCF、BP、CO及RBF的明顯下降；R-dp/dtmax明顯延長(zhǎng)；LVEDP明顯升高。本實(shí)驗(yàn)觀察到參芪益心顆粒對(duì)戊巴比妥鈉所致犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯的改善作用，主要表現(xiàn)為升高LVSP及dp/dtmax，增加CO，升高BP，縮短R-dp/dtmax，降低LVEDP，同時(shí)明顯增加RBF，因此本品具有明顯的抗心力衰竭作用，有效劑量為3.0g生藥/kg。
正常給藥組血流動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示，參芪益心顆粒3.0g生藥/kg于藥后30min和180min可增加CO，而對(duì)正常動(dòng)物L(fēng)VSP，dp/dtmax、RBF以及LVEDP、R-dp/dtmax、HR、LVMCF及心電圖等均無(wú)明顯改變，與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。
實(shí)施例7.參芪益心顆粒對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性心力衰竭的保護(hù)作用 一、試驗(yàn)材料 1.動(dòng)物SD種大鼠66只，VAF級(jí)，雄性，體重200～220kg，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003。
2.藥物參芪益心顆粒提取浸膏，同實(shí)施例6；地高辛，0.25mg/片，批號(hào)020102，上海信誼藥廠生產(chǎn)；生脈飲口服液，10ml/支，批號(hào)3262268，北京同仁堂制藥二廠。北京原子能所AI、AII、ANF、ALD放免試劑盒，批號(hào)分別為040225、040425、040125、040325。
3.儀器PlowerLab生理記錄儀，澳大利亞埃德儀器國(guó)際貿(mào)易有限公司(Ad instruments)生產(chǎn)；Z-5000原子吸收光譜儀；全自動(dòng)γ計(jì)數(shù)儀(FT-630G)，北京核儀器廠生產(chǎn)。
二.試驗(yàn)方法 動(dòng)物分為6組假手術(shù)組(蒸餾水)，模型組(蒸餾水)，生脈飲6.0ml/kg組，地高辛100μg/kg組，參芪益心顆粒浸膏20、10、5g生藥/kg組。藥物以蒸餾水配至所需濃度，給藥體積為3ml/kg(生脈飲組6.0ml/kg)，給藥途徑為口服。
動(dòng)物戊巴比妥鈉腹腔麻醉(0.45％，10ml/kg)，仰位固定，腹中線開(kāi)腹，在雙側(cè)腎動(dòng)脈分枝梢上處找到腹主動(dòng)脈，分離，穿線(0號(hào)線)，以7號(hào)針頭(φ＝0.7mm)順血管結(jié)扎后抽出，造成腹主動(dòng)脈狹窄，關(guān)腹。術(shù)后一個(gè)月開(kāi)始灌胃給藥，每日一次，連續(xù)一個(gè)月。
觀測(cè)指標(biāo)1.心臟功能以生理記錄儀(PlowerLab/8sp)測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)動(dòng)物麻醉，分離左頸總動(dòng)脈，插管測(cè)量血壓(SAP)，導(dǎo)管繼續(xù)插入左心室，測(cè)量LVP、LVEDP、dp/dtmax，同時(shí)測(cè)量心電圖；2.血液學(xué)指標(biāo)腹主動(dòng)脈取血，測(cè)定血漿心鈉素(ANF)、血管緊張素I、II(AI、II)及血清醛固酮(ALD)含量；3.摘取各臟器測(cè)定臟器指數(shù)(臟器重量g/體重g*100)心臟指數(shù)，左室重量指數(shù)，肺臟指數(shù)，肝臟指數(shù)；4.取左室心肌測(cè)定K+、Na+、Ca++含量；5.取心臟、肺臟及肝臟作病理檢查。
三.試驗(yàn)結(jié)果 1.參芪益心顆粒對(duì)心臟功能及心電圖各項(xiàng)指標(biāo)的影響 表10.參芪益心顆粒對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響 ##與假手術(shù)組比較、P＜0.01；*、**與模型組比較P＜0.05、P＜0.01. 表11.參芪益心顆粒對(duì)心電圖的影響 試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，模型組由于主動(dòng)脈狹窄，心室后負(fù)荷增加，導(dǎo)致SAP、LVP、LVEDP及dp/dtmax升高，與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.01)；陽(yáng)性對(duì)照藥生脈飲組SAP、LVP及LVEDP，地高辛組LVP及LVEDP降低，與模型組比較與顯著性差異(P＜0.05)；IGC828浸膏20g/kg組SAP、LVP及LVEDP降低、10g/kg組LVP及LVEDP降低，5g/kg組LVP及dp/dtmax降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)，表明受試藥可使心臟后負(fù)荷降低，改善心臟功能。
2.參芪益心顆粒對(duì)臟器指數(shù)(臟器重量mg/體重g)的影響 表12.參芪益心顆粒對(duì)臟指數(shù)(臟莊器重量g/體重g×100)的影響 注##與假手術(shù)組比較P＜0.01；*、**與模型組比較P＜0.05、P＜0.01. 試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，模型組心臟指數(shù)、左室指數(shù)明顯增加，與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.01)；生脈飲及地高辛組心臟指數(shù)及左室指數(shù)降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.01)；參芪益心顆粒20、10g/kg組心臟指數(shù)、左室指數(shù)降低，與模型組比較亦有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)。
3.參芪益心顆粒對(duì)心肌K+、Na+、Ca++含量的影響 表13.參芪益心顆粒對(duì)心肌K+、Na+、Ca++含量的影響mg/kg
#與假手術(shù)組比較P＜0.05，*與模型組比較P＜0.05. 試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，模型組心肌K+含量降低，Na+含量增加，與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05)；生脈飲組Na+、Ca++含量降低，地高辛組Na+含量降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)，參芪益心顆粒20g/kg組心肌Na+含量降低，5g/kg組K+含量增加，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；本試驗(yàn)未能觀察到模型組心肌Ca++含量的變化。試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，受試藥對(duì)心衰后Na+、K+水平均有明顯的調(diào)節(jié)作用。
4.參芪益心顆粒對(duì)血漿ANF、AII、AI及血清ALD含量的影響 表14參芪益心顆粒對(duì)血漿ANF、AII、AI及血清ALD含量的影響(pg/ml
##與假手術(shù)組比較P＜0.01***，與模型組比較，P＜0.05，P＜0.01. 試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，模型組AII及ANP含量明顯增加，與假手術(shù)組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)；生脈飲組及參芪益心顆粒20、10g/kg組AII含量降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)；地高辛組ALD含量降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)。
四.結(jié)論 造成心臟壓力超負(fù)荷的常見(jiàn)原因?yàn)楦哐獕杭靶氖已毫鞒龅朗茏瑁M窄大動(dòng)脈口徑是造成壓力超負(fù)荷心衰模型的主要途徑。主動(dòng)脈狹窄后造成左室血液流出受阻，左室后負(fù)荷增加，心臟首先動(dòng)用代償機(jī)制，造成心肌肥厚，失去代償機(jī)能后即可產(chǎn)生心臟衰竭。主要病理改變?yōu)檠獕?、左室壓及左室末期舒張壓升高，心臟及左室指數(shù)增加(心肌肥厚)等。心衰時(shí)心輸出量減少導(dǎo)致腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活是造成心力衰竭惡性循環(huán)的因素之一，AII的生成除經(jīng)典途徑外，在病理狀態(tài)下，有一系列蛋白酶參與，酶表達(dá)增加使AII值升高；AII受體拮抗劑(ARB)是近年來(lái)研究熱點(diǎn)之一，已經(jīng)證實(shí)，ARB能夠改善血流動(dòng)力學(xué)并降低死亡率；另有文獻(xiàn)報(bào)道，不同原因所致心力衰竭均可導(dǎo)致心房ANP過(guò)度釋放而耗竭，造成血漿ANF水平升高，認(rèn)為血漿ANF水平可作為心力衰竭程度的判斷指標(biāo)。
本試驗(yàn)采用主動(dòng)脈狹窄法導(dǎo)致大鼠慢性心衰腹主動(dòng)脈狹窄至φ＝0.7mm，術(shù)后一個(gè)月心肌增厚，逐漸形成心力衰竭，術(shù)后一個(gè)月開(kāi)始給藥，藥后一個(gè)月檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。
試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，模型組SP、LVP、LVEDP及dp/dt max升高；血漿AII及ANP含量增加，心肌K+含量降低，Na+含量增加，與假手術(shù)組比較均有顯著性差異(P＜0.05)，顯示了壓力超負(fù)荷性心力衰竭的病理特征。
參芪益心顆粒組SP、LVP、LVEDP及dp/dt max，心臟、左室指數(shù)，心肌K+、Na+含量，血漿AII水平均有明顯改善，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05～P＜0.01)。
病理鏡下檢查結(jié)果證實(shí)，模型組心臟可見(jiàn)毛細(xì)血管擴(kuò)張瘀血，其中一只肌纖維有萎縮；肺臟粘膜周邊及血管旁可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡壁內(nèi)毛細(xì)血管擴(kuò)張，肺泡壁增厚；肝臟少數(shù)區(qū)域肝竇瘀血，個(gè)別區(qū)域肝細(xì)胞索有萎縮。參芪益心顆粒三個(gè)劑量組病變可見(jiàn)，低劑量組病變范圍及程度較低，明顯優(yōu)于模型組。
綜上，參芪益心顆粒對(duì)壓力超負(fù)荷性心力衰竭有明顯的保護(hù)作用。其作用機(jī)理主要為逆轉(zhuǎn)由于主動(dòng)脈狹窄造成的后負(fù)荷增加所引起的心臟功能異常，改善心衰心肌Na+、K+代謝，調(diào)整血漿AII水平，本品的有效劑量為10g生藥/kg。
實(shí)施例8.參芪益心顆粒對(duì)大鼠利尿作用的影響 一.實(shí)驗(yàn)材料 1.藥物 (1)參芪益心顆粒同實(shí)施例6。(2)生脈飲(中藥陽(yáng)性藥)0.4g生藥/ml，批號(hào)1260015，北京同仁堂制藥二廠生產(chǎn)。(3)氫氯噻嗪(西藥陽(yáng)性藥)25mg/片，批號(hào)0205004-04，天津力生制藥廠生產(chǎn)。
2.動(dòng)物 Wistar種健康大鼠60只，體重180克左右，雄性，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，許可證編號(hào)SCXK京2000-0006。
二.實(shí)驗(yàn)方法 首先將大鼠放入代謝籠內(nèi)適應(yīng)一天。實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水18h，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)輕壓下腹，排盡余尿。用藥前按體重灌以去離子水(5ml/100g)，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)水平衡，收集2h尿量，凡尿量超過(guò)40％水負(fù)荷者，可用于正式實(shí)驗(yàn)。將60只大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，(1)對(duì)照組(生理鹽水)；(2)中藥陽(yáng)性藥生脈飲組(2.4g生藥/kg)；(3)西藥陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組(10mg/kg)；(4)參芪益心顆粒大劑量組(20g生藥/kg)；(5)參芪益心顆粒中劑量組(10g生藥/kg)；(6)參芪益心顆粒小劑量組(5g生藥/kg)。實(shí)驗(yàn)前連續(xù)灌胃給藥5天，用0.9％生理鹽水配制藥物，對(duì)照組給以相同容積生理鹽水，第6天對(duì)照組灌以0.9％生理鹽水(5ml/100g體重)，其他各組給以含有藥物的等量鹽水，給藥后立即將大鼠放入代謝籠內(nèi)，每籠1只，分別收集0-2h和2-5h的尿液(ml/100g體重)，用日立-7080全自動(dòng)分析儀(日本產(chǎn))測(cè)定K+、Na+、Cl-的含量(mmol/L)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))。
三.結(jié)果表15.參芪益心顆粒對(duì)大鼠排尿量的影響(n＝10，
注與對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01. 表16.參芪益心顆粒對(duì)大鼠尿液K+、Na+、Cl-的影響(n＝10，
注與對(duì)照組比較，*P＜0.05；**P＜0.01.***P＜0.001 由表15、16可見(jiàn)，西藥陽(yáng)性藥氫氯噻嗪組兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠排尿量均高于對(duì)照組(P＜0.001)；尿液中K+、Na+、Cl-含量明顯增高(P＜0.001)。參芪益心顆粒各劑量組兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)大鼠排尿量也均高于對(duì)照組(P＜0.05～0.001)。參芪益心顆粒大劑量組0～2h尿液中K+、Na+、Cl-含量明顯增高(P＜0.05～0.001)，2～5hK+、Na+含量明顯增高(P＜0.01～0.001)；中劑量組0～2h尿液中K+、Cl-含量明顯增高(P＜0.001)，2～5h K+含量明顯增高(P＜0.01)；小劑量組2～5h K+、Na+含量明顯增高(P＜0.05～0.01)。
四.結(jié)論 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，參芪益心顆粒能明顯增加大鼠排尿量；各劑量組可不同程度的促進(jìn)尿液中K+、Na+、Cl-的排泄，提示該藥具有明顯利尿作用。本試驗(yàn)中藥物的有效劑量為10g生藥/kg。
實(shí)施例9.參芪益心顆粒對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)的影響 一.實(shí)驗(yàn)材料 1.動(dòng)物選用ICR種雄性小鼠60只，體重18～22g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)SCXK(京)2002-003 2.藥物(1)參芪益心顆粒同實(shí)施例6。(2)生脈飲(中藥陽(yáng)性藥)0.4g生藥/ml，批號(hào)1260015北京同仁堂制藥二廠生產(chǎn)。(3)胰激肽原酶(西藥陽(yáng)性藥)60u/片，批號(hào)021104上海麗珠制藥有限公司。(4)高分子右旋糖苷(Dextran T500)瑞典 Phannacia公司產(chǎn)品，試驗(yàn)時(shí)用生理鹽水配成15％的溶液。
二.方法 將小鼠隨機(jī)分為6組(1)模型對(duì)照組；(2)中藥陽(yáng)性藥生脈飲組(3.2g生藥/kg)；(3)西藥陽(yáng)性藥胰激肽原酶(200u/kg)；(4)參芪益心顆粒大劑量組(28g生藥/kg)；(4)參芪益心顆粒中劑量組(14g生藥/kg)；(5)參芪益心顆粒小劑量組(7g生藥/kg)。胰激肽原酶實(shí)驗(yàn)前一次給藥，生脈飲及參芪益心顆粒各給藥組連續(xù)給藥四日。末次給藥后45分鐘，動(dòng)物腹腔麻醉(戊巴比妥鈉45mg/kg)。尾靜脈注射15％高分子右旋糖苷(10ml/kg)，應(yīng)用CM800微循環(huán)生物圖象分析系統(tǒng)(美國(guó)GOLDSpring公司)即刻觀察注射后小鼠左耳的血液流速及流態(tài)的變化。記錄血液流速開(kāi)始減慢的時(shí)間，觀察血液流態(tài)從線狀→線粒狀的時(shí)間，線粒狀→粒狀的時(shí)間。結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間比較。
三.結(jié)果 各組注射高分子右旋糖苷后，很快表現(xiàn)為血液微循環(huán)障礙，小鼠耳廓血液流速明顯減慢，血液流態(tài)逐漸從線狀→線粒狀→粒狀。參芪益心顆粒大劑量組從線狀→線粒狀的時(shí)間與模型對(duì)照組比較有差異((P＜0.05))，中、小劑量組與模型對(duì)照組比較無(wú)明顯差異。參芪益心顆粒各劑量組從線粒狀→粒狀的時(shí)間明顯延長(zhǎng)，與模型對(duì)照組比較有明顯差異(P＜0.001)。
表17參芪益心顆粒對(duì)小鼠耳廓微循環(huán)障礙的影響
與模型對(duì)照組比較*P＜0.05 ***P＜0.001 四.結(jié)論 結(jié)果表明參芪益心顆粒各劑量組能夠明顯改善血液流態(tài)，減輕小鼠耳廓微循環(huán)障礙。提示該藥具有改善微循環(huán)障礙的作用。本試驗(yàn)中藥物的有效劑量為14g生藥/kg。
實(shí)施例10.參芪益心顆粒對(duì)小鼠常壓耐缺氧的影響 一.實(shí)驗(yàn)材料 1.動(dòng)物選用ICR種雄性小鼠50只，體重18～22g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證編號(hào)SCXK 2002-0003 2.藥物(1)參芪益心顆粒同實(shí)施例6。(2)生脈飲(中藥陽(yáng)性藥)0.4g生藥/ml，批號(hào)1260015，北京同仁堂制藥二廠。
二.方法 將50只小鼠隨機(jī)分為5組(1)正常對(duì)照組；(2)陽(yáng)性藥生脈飲組(3.2g生藥/kg)；(3)參芪益心顆粒大劑量組(28g生藥/kg)；(4)參芪益心顆粒中劑量組(14g生藥/kg)；(5)參芪益心顆粒小劑量組(7g生藥/kg)。將小鼠放入裝有鈉石灰的250ml廣口瓶中，密封瓶蓋，記錄小鼠缺氧死亡時(shí)間。結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
三、結(jié)果 表18參芪益心顆粒對(duì)小鼠常壓缺氧的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，參芪益心顆粒各劑量組與對(duì)照組比較，耐缺氧時(shí)間無(wú)顯著差異，但有延長(zhǎng)的趨勢(shì)。
四.結(jié)論 參芪益心顆粒各劑量組與對(duì)照組比較，耐缺氧時(shí)間無(wú)明顯延長(zhǎng)。說(shuō)明該藥無(wú)明顯耐缺氧作用。
實(shí)施例11.參芪益心顆粒對(duì)小鼠低溫游泳的影響 一.實(shí)驗(yàn)材料 1.動(dòng)物選用ICR小鼠50只，雌雄各半，體重18～22g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證編號(hào)SCXK 2002-0003 2.藥物(1)參芪益心顆粒同實(shí)施例6。(2)生脈飲(中藥陽(yáng)性藥)0.4g生藥/ml，批號(hào)1260015，北京同仁堂制藥二廠生產(chǎn)。
二.方法 將50只小鼠隨機(jī)分為5組(1)正常對(duì)照組；(2)陽(yáng)性藥生脈飲組(3.2g生藥/kg)；(3)參芪益心顆粒大劑量組(28g生藥/kg)；(4)參芪益心顆粒中劑量組(14g生藥/kg)；(5)參芪益心顆粒小劑量組(7g生藥/kg)。各給藥組連續(xù)給藥四日。末次給藥后1小時(shí)將小鼠放入冰水中游泳，記錄其低溫游泳存活時(shí)間。(水溫為11℃±1，水深20cm，用秒表計(jì)算自小鼠落水至溺死所需時(shí)間。)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
三.結(jié)果 表19參芪益心顆粒對(duì)小鼠低溫游泳的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明參芪益心顆粒各劑量組與對(duì)照組比較，其存活時(shí)間有顯著性差異(P＜0.05～0.01)。
四.結(jié)論 參芪益心顆粒各劑量組與對(duì)照組比較，其低溫游泳存活時(shí)間有顯著性差異。說(shuō)明該藥有明顯的抗應(yīng)激、抗疲勞作用。本試驗(yàn)中藥物的有效劑量為7g生藥/kg。
實(shí)施例12.急性毒性實(shí)驗(yàn)(最大給藥量試驗(yàn)) 一.試驗(yàn)材料 1.藥物參芪益心顆粒干粉，6.175g生藥/g粉，批號(hào)20031013，北京華醫(yī)神農(nóng)醫(yī)藥科技有限責(zé)任公司提供。
2.動(dòng)物ICR小鼠40只，雌雄各半，體重19.6±0.88g(n＝40)，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。許可證編號(hào)Scxk(京)2002-0003。
二.試驗(yàn)方法動(dòng)物禁食12小時(shí)，分為對(duì)照組和給藥組，每組20只，雌雄各半。參芪益心顆粒干粉用常水稀釋藥物濃度為4.94g生藥/ml(用16號(hào)灌胃針頭能吸為準(zhǔn))，用16號(hào)灌胃針頭灌胃，一次灌胃給藥0.4ml/10g體重。累計(jì)劑量197.6g生藥/kg，對(duì)照組灌服同體積常水，每日觀察動(dòng)物狀況，稱(chēng)體重，體重增長(zhǎng)見(jiàn)表1，連續(xù)觀察7天后解剖動(dòng)物，肉眼觀察各重要臟器。
三.試驗(yàn)結(jié)果給藥組20只小鼠在給藥當(dāng)時(shí)精神不振，身體卷縮，4~6h后恢復(fù)正常，無(wú)明顯不良反應(yīng)及死亡。體重增加，精神狀態(tài)佳，毛色白而有光澤，二便正常。連續(xù)觀察7天后解剖動(dòng)物，肉眼觀察各重要臟器均無(wú)異常。參芪益心顆粒對(duì)小鼠灌胃的最大給藥量為197.6g生藥/kg，是臨床擬用量的124倍(臨床擬用量1.59g生藥/kg)。
表20參芪益心顆粒對(duì)小鼠體重的影響
四.結(jié)論 小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)觀察，因無(wú)法測(cè)出LD50，故進(jìn)行了最大給藥量的測(cè)定。小鼠灌胃給藥，累積劑量為197.6g生藥/kg，未見(jiàn)明顯的急性毒性反應(yīng)。本品的急性無(wú)毒劑量為197.6g生藥/kg，是臨床擬用量的124倍，是藥效學(xué)有效劑量的14倍。
實(shí)施例13.大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn) 應(yīng)用Wistar種大鼠，參芪益心顆粒80g生藥/kg、40g生藥/kg、20g生藥/kg(相當(dāng)于臨床擬用量的50、25、12.5倍，分別為藥效學(xué)有效劑量的5.8、2.9和1.5倍)組動(dòng)物連續(xù)灌胃給藥3個(gè)月、6個(gè)月及停藥4周后各組動(dòng)物未見(jiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，部分?jǐn)?shù)據(jù)與對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但均在正常范圍內(nèi)。病理檢查各臟器均未見(jiàn)該藥引起的明顯中毒性病理改變。因此，本品大鼠長(zhǎng)期給藥的無(wú)毒劑量為80g生藥/kg。
綜上，急性毒性試驗(yàn)和部分長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)顯示本品的毒性較低，藥效學(xué)試驗(yàn)表明，參芪益心顆粒對(duì)戊巴比妥鈉所致犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯的改善作用，主要表現(xiàn)為升高LVSP及dp/dtmax，增加CO及BP，縮短R-dp/dtmax，降低LVEDP，同時(shí)明顯增加RBF。參芪益心顆粒對(duì)主動(dòng)脈狹窄法所致大鼠慢性心力衰竭有明顯改善作用，降低左室末期舒張壓、左室壓、動(dòng)脈血壓，心臟、左室、肝臟及肺臟指數(shù)下降，表明心臟負(fù)荷下降，心功能改善，同時(shí)心肌K+含量升高，血漿心鈉素(ANF)水平降低，與模型組比較均有顯著性差異。參芪益心顆粒具有明顯利尿作用，能增加大鼠排尿量，可促進(jìn)尿液中K+、Na+、Cl-的排泄。同時(shí)參芪益心顆粒具有耐缺氧作用。因此參芪益心顆粒具有明顯改善心力衰竭的藥理作用，并能調(diào)整和改善心血管系統(tǒng)的功能，而且毒性較低，為臨床治療心力衰竭提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
表1.參芪益心顆粒對(duì)犬左室內(nèi)壓峰值(LVSP/mmHg)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01***P＜0.001 表2.參芪益心顆粒對(duì)犬左室壓最大上升速率dp/dtmax(mmHg/s)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001 表3.參芪益心顆粒對(duì)犬左室收縮至發(fā)生dp/dtmax間隔時(shí)間R-dp/dtmax(ms)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表4.參芪益心顆粒對(duì)犬左室心肌收縮力(mm)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜001，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表5.參芪益心顆粒對(duì)犬左室舒張末期壓(mmHg)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05**P＜0.01 ***P＜0.001 表6.參芪益心顆粒對(duì)犬心輸出量(L/min)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表7.參芪益心顆粒對(duì)犬腎血流量(ml/min)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0 01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表8-1.參芪益心顆粒對(duì)犬動(dòng)脈收縮壓(mmHg)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表8-2.參芪益心顆粒對(duì)犬動(dòng)脈舒張血壓(mmHg)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表8-3.參芪益心顆粒對(duì)犬心率(beats/min)的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0 001給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表9-1.參芪益心顆粒對(duì)犬標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)PR間期的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表9-2.參芪益心顆粒對(duì)犬標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)QRS的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表9-3.參芪益心顆粒對(duì)犬標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)QT間期的影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.00；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001 表9-4.參芪益心顆粒對(duì)犬標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)T波影響
注與正常值比較ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01，ΔΔΔP＜0.001；給藥前后自身比較#P＜0.05，##P＜0.01 ###P＜0.001；與對(duì)照組比較*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.00權(quán)利要求
1.一種治療心力衰竭的藥物組合物，出以下重量份數(shù)的藥物制成紅參5-12份，炙黃芪15-45份，炮附子5-15份，炙淫羊藿8-15份，丹參10-20份，川芎5-15份，枳實(shí)5-15份，麥冬6-15份，葶藶子5-15份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療心力衰竭的藥物組合物，出以下重量份數(shù)的藥物制成紅參8-10份，炙黃芪20-40份g，炮附子10-12份，炙淫羊藿9-12份，丹參13-17份，川芎8-10份，枳實(shí)8-10份，麥冬8-10份，葶藶子8-10份g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種治療心力衰竭的藥物組合物，由以下重量份數(shù)的藥物制成紅參9份，炙黃芪30份，炮附子12份，炙淫羊藿9份，丹參15份，川芎9份，枳實(shí)9份，麥冬9份，葶藶子9份。
4.一種治療心力衰竭的藥物制劑，其特征在于由權(quán)利要求1～3中任何一項(xiàng)所述的一種治療心力衰竭的藥物組合物和藥用輔料組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種治療心力衰竭的藥物制劑，其特征在于所述制劑為口服劑型，包括丸劑、膠囊、片劑、口服液、散劑、滴丸、煎膏劑、糖漿劑、顆粒劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療心力衰竭的藥物制劑，其特征在于所述制劑為顆粒劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種治療心力衰竭的藥物制劑，其特征在于所述藥用輔料包括糊精和甜菊糖。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療心力衰竭的藥物組合物，由以下重量份數(shù)的藥物制成紅參5－12份，炙黃芪15－45份，炮附子5－15份，炙淫羊藿8－15份，丹參10－20份，川芎5－15份，枳實(shí)5－15份，麥冬6－15份，葶藶子5－15份，屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域。本發(fā)明組方科學(xué)，提取工藝明確、可靠、穩(wěn)定性好。急性毒性和長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)顯示本品的毒性較低，藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明對(duì)戊巴比妥鈉所致犬實(shí)驗(yàn)性心力衰竭有明顯的改善作用。本發(fā)明具有明顯利尿作用，能增加大鼠排尿量，可促進(jìn)尿液中K+、Na+、Cl－的排泄。同時(shí)還具有耐缺氧作用。因此本發(fā)明具有明顯改善心力衰竭的藥理作用，并能調(diào)整和改善心血管系統(tǒng)的功能，而且毒性較低，為臨床治療心力衰竭提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1951469SQ20051010955
公開(kāi)日2007年4月25日 申請(qǐng)日期2005年10月21日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月21日
發(fā)明者王士雯, 朱慶磊, 曹雪濱, 余頌濤, 金道山, 馬路 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院