專利名稱：一種穿山龍總皂苷元口服藥物制劑及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含穿山龍總皂苷元的藥物制劑，特別是一種穿山龍中的皂苷類成分水解 成以皂苷元為主要有效成分的口服藥物制劑及其用途。屬中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
穿山龍為薯蕷科薯蕷屬植物穿龍薯蕷Dioscorea nipponica Makino的干燥根莖，具有祛 風除濕、舒筋活絡(luò)、止咳平喘祛痰之功效，主治關(guān)節(jié)炎腰腿疼痛、肢體麻木、大關(guān)節(jié)病、跌 撲損傷、慢性支氣管炎等。穿山龍中主要成分為甾體皂苷類成分，總皂苷提取物對冠心病、 動脈粥樣硬化、高血脂、哮喘、炎癥及腫瘤有很好的療效。穿山龍中主要含有薯蕷皂苷、纖 細皂苷等幾十種甾體皂苷類成分，薯蕷皂苷元(diosgenin, Dio)是其中一種甾體皂苷元， 也稱為薯蕷皂甙元或薯蕷皂素，它是由薯蕷皂苷(dioscin)經(jīng)水解反應(yīng)脫去糖基后的產(chǎn)物(黃 亞輝、盛孝邦的文章"薯蕷皂甙元的研究進展"，發(fā)表于2005年10月的《中國野生植物資源》 第24巻第5期第20頁)。
雖然穿山龍中的皂苷類成分一直被做為藥用物質(zhì)被臨床應(yīng)用，但近年來的研究發(fā)現(xiàn)，真 正在人體內(nèi)發(fā)揮藥效的，是皂苷在人腸道內(nèi)被菌群分解轉(zhuǎn)化得到的皂苷元。大量實驗證明， Dio在抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、降血脂、抗艾滋病等方法均表現(xiàn)出很強的生物活性(王曉 鵬綜述文章"薯蕷皂苷生物活性研究新進展"，發(fā)表于《國外醫(yī)學中醫(yī)中藥分冊》2004年第 26巻第3期的第138頁)。
許多藥代動力學研究證明，皂苷類成分在腸道內(nèi)難以吸收，絕大多數(shù)需經(jīng)腸道細菌、酶 分解為皂苷元才能透過粘膜被吸收入血而發(fā)揮療效。故為減少穿山龍中皂苷類成分在體內(nèi)吸 收利用的步驟，在體外先以酸水解、酶水解或微生物水解的方法對皂苷類成分進行水解，以 其苷元用藥，則發(fā)揮療效迅速，比較合理。苷由苷元和糖組成，其親水性強，分子量大，而 苷元的親脂性強，分子量小。苷元相對于苷，脫去了糖基，其極性減小，脂溶性增強。從生 物藥劑學的研究中可以得知，脂溶性強的物質(zhì)雖然會更易于被人體吸收，但又正因為其脂溶 性強，造成其不易被體液潤濕，所以實際上很難進入吸收的過程，其生物利用度較低。這一 問題并不是常規(guī)制劑工藝所能解決的，多年來也一直沒有引起重視，所以才會出現(xiàn)皂苷元沒 有被制成制劑的現(xiàn)象。穿山龍中的皂苷類成分同樣存在這樣問題，因此對穿山龍總皂苷元的 研究有著重要的意義。但是，現(xiàn)有的技術(shù)都忽視了對穿山龍總皂苷元的研究，其效果與應(yīng)用 情況一直處于空白狀態(tài)。 發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的第一目的在于提供一種以穿山龍總皂苷元為活性成分的口服藥物； 第二目的是提供該藥物的制劑形式，特別是一種高效制劑 第三目的是提供該藥物高效制劑的制備方法。
最后是提供該藥物在治療痛風病、高脂血癥、糖尿病、冠心病、心絞痛、風濕病或抑郁 病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明目的第一 目的是這樣實現(xiàn)的
發(fā)明人提供一種口服的藥物，該藥物以穿山龍總皂苷元為活性成分。
以往盡管人們服用的是含穿山龍總皂苷的制劑，但必須要等到皂苷被腸道菌群分解轉(zhuǎn)化 成苷元后，才能真正起效。而這一轉(zhuǎn)化過程中存在的諸多缺陷導(dǎo)致藥效不穩(wěn)藥物在體內(nèi)運 行時間長、轉(zhuǎn)化效率低；轉(zhuǎn)化過程不確定，分解得到的不僅是苷元，也可能是其他無效物質(zhì)； 個體差異大，每個人轉(zhuǎn)化效率高低不同，不能充分發(fā)揮藥效等等。鑒于以上原因，只有將穿 山龍總皂苷元直接做成藥物制劑應(yīng)用于人體，才能保證減少用藥量的同時，提高藥效。
針對穿山龍的藥用價值，發(fā)明人按現(xiàn)有技術(shù)從穿山龍藥材中提取得到穿山龍總皂苷，并 對其進行水解，使其中的皂苷類成分脫去糖基，生成更具生物活性的皂苷元，即成為本發(fā)明 所提供的穿山龍總皂苷元，發(fā)明人經(jīng)研究證實，苷類物質(zhì)經(jīng)水解后所得苷元沒有了糖基，其 親脂性大大增強，因而苷元較苷更易透過腸粘膜被吸收；同時，藥物的分子越小也越容易被 吸收，苷水解掉所帶的糖分子變成苷元后，分子變得更小，也會更易吸收。另外，以苷元直 接作為藥用物質(zhì)，克服了以往苷類物質(zhì)在體內(nèi)運行時間長、轉(zhuǎn)化效率低、轉(zhuǎn)化結(jié)果不確定等 因素，大大提高了藥物的生物利用率，節(jié)約了藥物資源。
在本發(fā)明提供的藥物中，穿山龍總皂苷元可以單獨使用，也可以與其他藥物成分聯(lián)合使 用，即在藥物活性成分中，可以只有穿山龍總皂苷元純品，也可以是穿山龍總皂苷元粗品， 還可以是穿山龍總皂苷元與其他藥物的混合物，達到配合治療、輔助治療的目的。本發(fā)明優(yōu) 選使用穿山龍總皂苷元粗品，即從藥材中提取穿山龍總皂苷，再以適當方式水解，并根據(jù)需 要進行精制，得到所需純度。所得提取物中除了主要含有穿山龍總皂苷元外，還含有其他提 取和水解過程中不可避免的附產(chǎn)物及雜質(zhì)，包括少量未水解的苷以及次生苷等。
上述的水解方法包括了酸水解、酶水解或微生物水解，發(fā)明人經(jīng)過篩選，分別提供如下 幾種具體的水解方法酸水解可以用1 10mol/L的鹽酸、硫酸、醋酸及甲酸等進行水解；酶 水解可以用苦杏仁酶、麥芽糖酶、轉(zhuǎn)化糖酶、橙皮苷酶等進行水解；微生物可以用大腸桿菌、 腸球菌、乳酸桿菌、梭狀芽孢桿菌、畸形菌體、雙岐桿菌及人體腸道正常菌群等進行水解。
本發(fā)明的第二目的是提供上述穿山龍總皂苷元的藥物制劑，尤其是一種高效制劑。本領(lǐng) 域技術(shù)人員可以方便地將本發(fā)明的穿山龍總皂苷元配合適當?shù)妮o料，制備成各種常規(guī)制劑。但是發(fā)明人還注意到另一個問題，即由于苷元的脂溶性相對較強，因而其制劑應(yīng)用于人體后， 其中的苷兀成分不易被潤濕和溶出，如果不能解決這一問題，也會影響苷元的吸收。所以， 針對這一問題，發(fā)明人提供了一種新技術(shù)方案，可以保證將穿山龍總皂苷元制成高效制劑， 該技術(shù)方案是
方案一 一種以本發(fā)明所述穿山龍總皂苷元為活性成分的高效藥物制劑，其輔料中中含 有生物黏附劑和潤濕劑，還可以含有分散劑及其他藥劑學上的常規(guī)輔料，并被制成片劑、膠 囊劑、顆粒劑、丸劑等口服制劑。
該技術(shù)方案的核心在于將穿山龍總皂苷元用于藥物制劑，并通過特殊輔料保證穿山龍總 皂苷元的高效利用。因而，體現(xiàn)到具體的藥物制劑中，其藥物活性成分中可以只有本發(fā)明的 穿山龍總皂苷元，也可以與其他藥用或非藥用物質(zhì)配合使用，只要其目的是將所含的穿山龍 總皂苷元利用生物黏附劑和潤濕劑，還可以利用分散劑，進行潤濕、分散，以制成口服高效 制劑，均應(yīng)在本發(fā)明申請保護的范圍內(nèi)。同理，本發(fā)明技術(shù)方案選用生物黏附劑和潤濕劑， 還可以用分散劑作為主要輔料，目的在于使穿山龍總皂苷元得以充分、均勻的分散，利于吸 收；在實際應(yīng)用中，還可以根據(jù)需要加入其他常規(guī)輔料及成型輔料，如淀粉、微晶纖維素、 羧甲淀粉鈉、檸檬酸、碳酸氫鈉、低取代羥丙甲纖維素、乳糖、甘露醇、枸櫞酸、阿斯帕坦、 糊精、硬脂酸鎂等，這些均應(yīng)視為在本發(fā)明技術(shù)的基礎(chǔ)上完成的工作，也應(yīng)受本發(fā)明申請的 保護。
在該技術(shù)方案中，生物黏附劑優(yōu)選為殼聚糖、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮或它們之間的混 合物；潤濕劑優(yōu)選為卵磷脂、泊洛沙姆或其混合物；分散劑優(yōu)選為微粉硅膠、環(huán)糊精、聚乙 二醇或它們之間的混合物。
其中，殼聚糖、卡波姆作為生物黏附劑，具有生物黏附性能，可延長藥物在胃腸道的滯 留時間，顯著提高藥物的生物利用度。卵磷脂、泊洛沙姆等表面活性劑對穿山龍總皂苷元有 表面潤濕的作用，降低表面張力，增加脂溶性的穿山龍總皂苷元的溶解度，促進其迅速吸收 利用，利于迅速發(fā)揮療效。微粉硅膠、環(huán)糊精、聚乙二醇作為分散劑，其本身具有親水性， 利于苷元的潤濕、分散，增強藥物的穩(wěn)定性。將本發(fā)明的穿山龍總皂苷元與上述輔料配合使 用，充分混合均勻，可以增強其中穿山龍總皂苷元的分散性、潤濕性，提高其生物利用度。
在優(yōu)選的情況下，本發(fā)明藥物中各成分所占比例優(yōu)選為活性成分20 60%，生物黏附劑 1 10%，潤濕劑5 20%，分散劑0 30%，其他輔料0 50%。其中的其他輔料是指制劑 在成型過程中的一些其他輔料，如淀粉、微晶纖維素、羧甲淀粉鈉、檸檬酸、碳酸氫鈉、 低取代羥丙甲纖維素、乳糖、甘露醇、枸櫞酸、阿斯帕坦、糊精、硬脂酸鎂等。
上述技術(shù)方案主要應(yīng)用于口服制劑，最適宜的劑型為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑和丸劑。
方案二 一種以本發(fā)明所述穿山龍總皂苷元為活性成分的高效藥物制劑，其輔料中中含 有分散劑和潤濕劑，還可以含有生物黏附劑及其他藥劑學上的常規(guī)輔料，并被制成的軟膠囊 劑、液體硬膠囊劑、滴丸劑等口服制劑。
該技術(shù)方案的核心在于將穿山龍總皂苷元用于藥物制劑，并通過特殊輔料保證穿山龍總 皂苷元的高效利用。因而，體現(xiàn)到具體的藥物制劑中，其藥物活性成分中可以只有本發(fā)明的 穿山龍總皂苷元，也可以與其他藥用或非藥用物質(zhì)配合使用，只要其目的是將所含的穿山龍 總皂苷元利用分散劑和潤濕劑，還可以利用生物黏附劑，進行潤濕、分散，以制成口服高效 制劑，均應(yīng)在本發(fā)明申請保護的范圍內(nèi)。同理，本發(fā)明技術(shù)方案選用分散劑和潤濕劑，還可 以用生物黏附劑作為主要輔料，目的在于使穿山龍總皂苷兀得以充分、均勻的分散，利于吸 收；在實際應(yīng)用中，還可以根據(jù)需要加入其他常規(guī)輔料及成型輔料，如甘油、甘氨酸、檸檬 酸、尼泊金乙酯、蜂蠟等，這些均應(yīng)視為在本發(fā)明技術(shù)的基礎(chǔ)上完成的工作，也應(yīng)受本發(fā)明 申請的保護。
在該技術(shù)方案中，分散劑優(yōu)選為植物油或聚乙二醇；潤濕劑優(yōu)選為卵磷脂、泊洛沙姆、 丙二醇或它們之間的混合物；生物黏附劑優(yōu)選為殼聚糖、卡波姆或其混合物。將皂苷元與上 述輔料配合使用，充分混合均勻，可以增強苷元分散性、潤濕性，提高其生物利用度。
其中，卵磷脂、泊洛沙姆、丙二醇等表面活性劑對穿山龍總皂苷元有表面潤濕的作用， 降低表面張力，增加脂溶性的穿山龍總皂苷元的溶解度，促進其迅速吸收利用，利于迅速發(fā) 揮療效。植物油、聚乙二醇作為分散劑，可以將穿山龍總皂苷元分散均勻。殼聚糖、卡波姆 作為生物黏附劑，具有生物黏附性能，可延長藥物在胃腸道的滯留時間，顯著提高藥物的生 物利用度。將本發(fā)明的穿山龍總皂苷元與上述輔料配合使用，充分混合均勻，可以增強其中 穿山龍總皂苷元的分散性、潤濕性，提高其生物利用度。
在優(yōu)選的情況下，本發(fā)明藥物中各成分所占比例優(yōu)選為活性成分10 40%，生物黏附劑 0 10%，潤濕劑5 20%,分散劑50 80%，其他輔料0 20%。其中的其他輔料是指制劑 在成型過程中的一些其他輔料，如甘油、甘氨酸、檸檬酸、尼泊金乙酯、蜂蠟等。
上述技術(shù)方案主要應(yīng)用于口服制劑，最適宜的劑型為液體硬膠囊劑、軟膠囊劑和滴丸劑。
本發(fā)明的第三目的是提供上述高效制劑的制備方法，其中的核心技術(shù)是將穿山龍總皂苷 元與所需輔料通過熔融、溶解、攪拌、研磨或超微粉碎混合中的任一種方法混合均勻后，再 加入所需常規(guī)制劑輔料，按常規(guī)工藝制成制劑。而這里的混合方法優(yōu)選振動磨超微粉碎混合 的方法。
只有通過有效的混合方式，才能保證提取物中所含穿山龍總皂苷元與特殊輔料充分分散
7均勻，應(yīng)用于人體時才能夠迅速潤濕、溶出、吸收，發(fā)揮高效的作用。經(jīng)發(fā)明人驗證，熔融、 溶解、攪拌、研磨或超微粉碎混合等方式，都能夠?qū)崿F(xiàn)本發(fā)明目的，而其中的超微粉碎方式 效果最為突出。
雖然超微粉碎技術(shù)早已出現(xiàn)，但在中藥技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用， 一直停留于"粉碎"的概念上， 始終沒有突破，因而其范圍很局限。發(fā)明人在實踐中發(fā)現(xiàn)，超微粉碎技術(shù)已不僅僅是粉碎技 術(shù)，更是一種高效混合技術(shù)，它可使苷元與輔料一起受到強烈的正向擠壓力和切向剪切力的 作用，運用高速、高能量進行粉碎、混合，所得到的粉末中心粒徑由原來的75um減小到10 ym以下，粒度細膩、均勻，表面積增加，孔隙率增大，使藥物粒子與輔料粒子充分接觸、混 合，既提高了藥物粒子的分散度，又保證了其迅速潤濕并溶出，大大提高了藥物的吸收率和 生物利用度，其優(yōu)勢是目前常規(guī)混合方法不可比擬的。在這其中，振動磨超微粉碎方式是實 現(xiàn)本發(fā)明目的的最佳方法。
本發(fā)明藥物可以在制備用于治療痛風病、高脂血癥、糖尿病、冠心病、心絞痛、風濕病 或抑郁病的藥物中應(yīng)用。 有益效果
本發(fā)明的技術(shù)方案，從實用的角度考慮，結(jié)合制劑的需要，將穿山龍中的皂苷類成分水 解后，所得的穿山龍總皂苷元加適宜輔料，通過超微粉碎的方法高度粉碎混合，制成所需制 劑。既能使活性成分最大程度的潤濕、溶解和吸收，又能延長苷元的滯留時間，更進一步促 進苷元的吸收利用，提高生物利用度。具體來說，本專利方法具有以下優(yōu)勢
1、 提高生物利用度采用本專利發(fā)明制備方法，可明顯改善其他方法的不足，其具有以 下幾個明顯優(yōu)勢苷元的水溶性差，親脂性強，不易潤濕吸收，而本發(fā)明在制劑微粉混合前 加入了親水性的高分子生物黏附劑及潤濕劑、分散劑，增強了苷元的潤濕性，利于其吸收利 用，而且水解后剩余的部分皂苷類成分利于潤濕，也能夠?qū)τH脂性的苷元有一定的潤濕性能； 微粉化本身即可大大的增強藥物的黏附性能，提高潤濕性，而且本發(fā)明加入了高效生物黏附 劑，可以延長微粉的滯留時間，增強有效成分的吸收。
2、 節(jié)省原料，提高利用率本發(fā)明方法能最大限度地利用原料藥，用小于一般制劑的藥 量即可獲得原處方的療效，節(jié)約原料，提高原料藥的利用率，又可以減少資源的浪費。
故本發(fā)明取得了突出的技術(shù)效果，達到了發(fā)明目的。為進一步驗證本發(fā)明在為了證明本 發(fā)明藥物制劑提高生物利用度的作用，發(fā)明人依據(jù)其功能主治，進行了動物對比藥效學實驗 一、動物體內(nèi)代謝試驗 1、材料 1. 1試驗動物大耳白兔，體重(2.0土0.2)kg，雌雄各半。由山東大學實驗動物中心提供。 1.2試驗藥品及儀器
皂苷制劑取穿山龍總皂苷58g (相當于穿山龍藥材lkg)，加卡波姆10g、卵磷脂10g， 并加微粉硅膠至100g，超微粉碎混合60分鐘，取其中50g以水混懸至100ml;
皂苷元一般制劑取穿山龍總皂苷元46g (相當于穿山龍藥材lkg)，加淀粉至100g,混 勻，取其中50g以水混懸至100ml;
皂苷元高效制劑取穿山龍總皂苷元46g (相當于穿山龍藥材lkg)，加卡波姆10g、卵 磷脂10g，并加微粉硅膠至100g，超微粉碎混合60分鐘，取其中50g以水混懸至100ml。
儀器TGL-20B離心機；島津LC一10A高效液相色譜儀。
2、 試驗方法取禁食12h，自由飲水的大耳白兔6只，體重為(2.0土0.2)kg，隨機分為 3組，每組2只。第l組為皂苷元高效制劑組(實驗組)；第2組為皂苷元一般制劑組(參比組 1);第3組為皂苷制劑組(參比組2)。每組灌胃給藥劑量均為8ml/只，分別于給藥后第5、 10、 20、 30、 60、 90、 120、 180、 240min耳緣靜脈采血約2ml，置于肝素化試管中，以4000r/min 離心20rain，血漿于-20。C冰箱保存待用。取lml血漿樣品，100。C水浴10min以15000r/min 離心20min，取上清液以HPLC法檢測薯蕷皂苷元濃度。每個時間的峰面積為2只白兔同一時 間點的平均值。計算血藥濃度，繪制藥時曲線。
3、 試驗結(jié)果皂苷元高效制劑對正常白兔的血藥濃度測定結(jié)果見下表。
表 對白兔血藥濃度測定結(jié)果(ug/m丄)
時間(分鐘)皂苷元高效制劑皂苷元一般制劑皂苷制劑
519. 588. 676. 38
1027.3714.718.43
2034. 7518. 3812. 38
3041. 3822.6815.26
6048. 3128. 3718.04
9049. 2824. 8917.39
12046.8223.6514.93 42.8821.0211. 36
24037. 6818. 828. 95
根據(jù)上述時間與血藥濃度數(shù)據(jù)，繪制藥時曲線，詳見附圖。
以上試驗結(jié)果表明，皂苷元高效制劑中的薯蕷皂苷元吸收入血濃度比皂苷元一般制劑及 皂苷制劑高，效果明顯。
9二、對高尿酸血癥大鼠血尿酸水平的影響
1、 材料
1.1動物Wister大鼠，雌雄各半，體重200土20g。由山東大學實驗動物中心提供。 1.2藥品與試劑
皂苷制劑取穿山龍總皂苷58g (相當于穿山龍藥材lkg)，加殼聚糖5g、卵磷脂5g、微 粉硅膠25g，并加微晶纖維素至100g，超微粉碎混合50分鐘，取其中20g以水混懸至100ml;
皂苷元一般制劑取穿山龍總皂苷元46g (相當于穿山龍藥材lkg)，加淀粉至100g，混 勻，取其中20g以水混懸至100ml;
皂苷元高效制劑取穿山龍總皂苷元46g (相當于穿山龍藥材lkg)，加殼聚糖5g、卵磷 脂5g、微粉硅膠25g，并加微晶纖維素至100g，超微粉碎混合50分鐘。取其中20g以水混 懸至100ml。
陽性對照藥取秋水仙堿6g，加水制成100ml的溶液。 試劑次黃嘌呤，煙酸，血尿酸測試藥盒。
1.3儀器紫外-可見光分光光度計UV1100(上海天美科學儀器有限公司)。
2、 方法與結(jié)果
2. l試驗方法將60只大鼠隨機分為六組，每組10只空白對照組、模型組、陽性藥 對照組、苷元高效制劑組、苷元一般制劑組、皂苷制劑組，每天灌胃給藥l次，連續(xù)給藥4d， 給藥劑量分別為10ral/kg,空白對照組、模型組灌胃同體積生理鹽水。各組動物末次給藥lh 后，除空白對照組外其余4組動物腹腔注射次黃嘌呤100mg/kg，同時灌胃給予煙酸80mg/kg; 空白對照組動物腹腔注射并灌胃給予等體積的生理鹽水。注射后30min，各組動物經(jīng)腹主動 脈取血，3000r/min離心15min，取血清，按血尿酸測試盒說明書操作，測血尿酸值。
2.2試驗結(jié)果見下表。
表 對高尿酸血癥大鼠血尿酸水平的影響(X 土S)
組別動物數(shù)(只)劑量(g/kg)血尿酸值(nmol/L)
空白對照組10—99.87±31.85
模型組10一329. 72±40. 03
苷元高效制劑組102.0164. 96±26. 73"
苷元一般制劑組102. 0216. 42 ±38. 534
皂苷制劑組102. 0251. 05±29. 18*
秋水仙堿組100.6163. 81 ±19. 94*"*
10注與模型組比較'P<0.05， WP<0.01。
以上試驗結(jié)果表明，與空白對照組比較，模型組動物血尿酸值明顯升高，提示造模成功。 陽性藥對照組、皂苷元高效制劑組與模型組比較，血尿酸值明顯降低，具有極顯著性差異； 苷元一般制劑組、苷類制劑組與模型組比較，血尿酸值降低，具有顯著性差異，苷元一般制 劑組較苷類制劑組效果好。
三、 穿山龍總皂苷元抗大鼠靜脈血栓形成的作用 1、材料
1.1動物Wistei"大鼠，雌雄各半，體重200士20g。由山東大學實驗動物中心提供。
1. 2藥品
皂苷制劑、皂苷元一般制劑、皂苷元高效制劑的制備方法同上。
2、 方法與結(jié)果
2. l試驗方法取Wistar大鼠40只，雌雄各半，體重200土20g，隨機分為4組，每組 10只皂苷元高效制劑組、皂苷元一般制劑組、皂苷制劑組、空白對照組，灌胃給藥每天l 次，給藥劑量分別為10ml/kg，空白對照組灌胃給予同體積生理鹽水，連續(xù)7天。末次給藥 6h后，用內(nèi)徑為l腿的玻璃毛細管插入鼠內(nèi)眥靜脈叢取血，至毛細管血柱達5cm，每隔30s 折斷毛細管一段，檢查有無出現(xiàn)凝血絲，計算毛細管采血到出現(xiàn)血凝絲時間，即為凝血時間。
2.2試驗結(jié)果結(jié)果見下表。
表 對大鼠靜脈血栓形成的影響(S±s)
組別 動物數(shù)(只) 劑量(g藥材/kg) 凝血時間(s)
苷元高效制劑組 10 20 126.00±28.53,
苷元一般制劑組 10 20 93.00±30.82*
皂苷制劑組 10 20 87.00±21.68*
空白對照組 10 — 72.00±19.94 與空白對照組比較(t檢驗)，*P<0.05， ，<0.01， ***P<0.001。
以上試驗結(jié)果表明，穿山龍總皂苷元高效制劑組均可明顯延長凝血吋間，與空白對照組 比較具有顯著性差異，均較皂苷元一般制劑組、皂苷制劑組效果好。
四、 穿山龍總皂苷元對抑郁小鼠的影響 1、材料
l.l動物昆明種小鼠，(20士2)g,雌雄各半，由山東大學實驗動物中心提供。飼養(yǎng)在25 'C條件下，實驗前穩(wěn)定3d，自由進食飲水。1.2藥品
皂苷制劑、皂苷元一般制劑、皂苷元高效制劑的制備方法同上。 陽性對照藥取氟西汀3g，加水制成100ml的溶液。 2、方法與結(jié)果
2. l試驗方法小鼠強迫游泳實驗。
取小鼠50只，雌雄各半，體重(20土2)g，隨機分為5組，每組10只空白組、陽性藥 組、皂苷元高效制劑組、皂苷元一般制劑組、皂苷制劑組。給藥劑量均為0.2ml/10g，空白 組灌胃給予同體積的生理鹽水，各組動物每日灌胃給藥l次，連續(xù)給藥7d。末次給藥30min 后，將小鼠放入高20cm，直徑14cm的圓柱形玻璃缸中，每缸一只，缸中水深10cm，水溫(25 士1)'C。小鼠游泳2min后，立即開始觀察，觀察持續(xù)4min，累計此4min內(nèi)的不動(小鼠在 水中停止掙扎，或動物呈漂浮狀態(tài)，僅有細小的肢體運動)時間。 2.2試驗結(jié)果結(jié)果見下表。
表 對小鼠強迫游泳不動時間的影響(X士S， n=10)
組別劑量(g/kg)不動時間(秒)相對強度(%)
苷元高效制劑組4.093. 5 ±18. 6"52.9
苷元一般制劑組4.0114.9±17. 3*42. 1
皂苷制劑組4. 0121.8±18. 5*38.6
陽性藥組0.689. 3 ±14. 8"55.0
空白組—198, 5±21.20
注與對照組比較，*P<0.05， ，<0.01。
以上試驗結(jié)果表明，皂苷元的高效制劑組、陽性藥組均可明顯縮短小鼠不動時間，與空
白對照組比較具有極顯著性差異，均較皂苷制劑組效果好；皂苷元一般制劑組、皂苷制劑組， 與空白對照組比較具有顯著性差異，皂苷元一般制劑組優(yōu)于皂苷制劑組。
五、穿山龍總皂苷元對酒石酸銻鉀致小鼠扭體反應(yīng)的影響
1、材料
1.1動物昆明種小鼠，由山東大學實驗動物中心提供。
1. 2藥品與試劑
藥品皂苷制劑、皂苷元一般制劑、皂苷元高效制劑的制備方法同上。 試劑酒石酸銻鉀。
2、 方法與結(jié)果 2. 1試驗方法取小鼠40只，雌雄各半，體重20士2g,隨機均勻分為4組，每組10只，即空白組、皂 苷元高效制劑組、皂苷元一般制劑組、皂苷制劑組，灌胃給藥劑量均為0.25ml/10g，空白組 灌胃給予同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)給藥5天，于最后l次給藥后lh，每鼠腹 腔注射新配制的酒石酸銻鉀液，立即觀察小鼠首次出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期及10min內(nèi)小鼠扭 體發(fā)生數(shù)。
2.2試驗結(jié)果結(jié)果見下表。
表 對灑石酸銻鉀所致小鼠扭體反應(yīng)的影響(5士s)
拍口！動物數(shù) ^JS 首次發(fā)生扭體反應(yīng)~~10min內(nèi)扭體發(fā)生 一且力」_(只)(g/kg) 的潛伏期(min) 次數(shù)(次)
苷元高效制劑組10 5.0 3.59士0.93" 10.2士5.4"
苷元一般制劑組10 5.0 3.38±0.53* 12. 1±4.2*
皂苷制劑組 10 5.0 3.35±0.79* 13.8±8.5*
空白對照組 10 — 2.38±0.83 18.8±4.7
注與空白對照組比，'P〈0.05， ，〈0.01。
以上試驗結(jié)果表明，皂苷元的高效制劑組可明顯延長小鼠首次發(fā)生扭體的潛伏期，減少 小鼠扭體次數(shù)，與空白對照組比較具有極顯著性差異，較皂苷制劑組效果好；皂苷元一般制 劑組、皂苷制劑組與空白對照組比較，具有顯著性差異，皂苷元一般制劑組優(yōu)于皂苷制劑組。
六、穿山龍總皂苷元對高脂血癥大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影響
1、 材料
1.1動物Wistar大鼠，由山東大學實驗動物中心提供。 1.2藥品與試劑
皂苷制劑、皂苷元一般制劑、皂苷元高效制劑的制備方法同上。 陽性對照藥取洛伐他汀2g，以水混懸至100ml。
試劑高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)測試盒，總膽固醇(TC)測試盒，甘油三酯(TG)測試盒。 1.3儀器ZS-3型半自動生化測定儀。
2、 方法與結(jié)果
2. l動物模型的建立用1%膽固醇，0.2%甲基硫氧嘧啶，0.3%膽鹽，7. 5%豬油，10%蛋黃 粉，81%基礎(chǔ)伺料制成高脂飼料，喂飼大鼠。
2.2試驗方法大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)5天，禁食12h，檢測血清TC和TG，按體重和血脂水平 將大鼠隨機分為6組，每組10只即空白對照組、模型對照組、苷元高效制劑組、苷元一般 制劑組、皂苷制劑組、洛伐他汀組。除空白對照組喂飼基礎(chǔ)飼料外，其余各組均喂高脂飼料，平均每鼠每天18g，不足給予普通飼料補充。在給予高脂飼料的同時，灌胃給藥劑量均為 10ml/kg，空白組和模型組灌胃給予同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)給藥30天，末 次給藥后，禁食12h，下腔靜脈取血，酶法測定TC、 TG、 HDL-C。
2.3試驗結(jié)果對高脂血癥大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影響見下表。
表對高脂血癥大鼠血清TC、 TG、 HDL-C的影響(咖ol/L， X ±S， n = 10)
組別劑量(g/kg)TCTGHDL-C
空白對照組一1.87土0. 840. 91±0.410. 87±0. 18
模型對照組_6. 04 ±0. 922. 92±0. 380. 43 ±0. 22
苷元高效制劑組2. 03. 59 ±0. 37"1. 64±0. 35**0. 61 ±0. 13*
苷元一般制劑組2.03. 83±0. 38*L 74±0. 39*0. 56±0. 15*
皂苷制劑組2. 04. 18±0. 68*1, 78±0. 34*0. 51±0. 16*
洛伐他汀組0.23. 62±0. 42**1. 59±0. 19"0. 67±0. 10*
注與模型對照組比較，*P〈0.05， ，<0.01。
以上試驗結(jié)果表明，模型對照組大鼠血中TC、 TG水平顯著高于空白對照組(P〈0.01)， HDL-C顯著低于空白對照組(P〈0.01)，提示造模成功；與模型對照組比較，苷元高效制劑組 和洛伐他汀組均能顯著降低TC、 TG，并升高血HDL-C水平；苷元一般制劑組、苷制劑組與模 型對照組比較，能降低TC、 TG，升高血HDL-C水平。
七、穿山龍總皂苷元對糖尿病大鼠模型高血糖的影響
1、 材料
1.1動物Wistar大鼠，由山東大學實驗動物中心提供。 1.2藥品與試劑
皂苷制劑、皂苷元一般制劑、皂苷元高效制劑的制備方法同上。 陽性對照藥取優(yōu)降糖3g，以水混懸至100ml。 1.3儀器血糖分析儀。
2、 方法與結(jié)果
2. l試驗方法選取健康大鼠100只，體重200士20g，雌雄各半，適應(yīng)性飼養(yǎng)l周，室溫18 °C 24°C。造糖尿病模型前禁食12h后，從大鼠尾靜脈取血，使用血糖分析儀測血糖值，選取 血糖值在5.0鵬ol/L 6.0腿ol/L范圍內(nèi)大鼠以55mg/kg鏈脲佐菌素腹腔注射；72h后禁食12h 并取血測血糖，選擇血糖值相近的大鼠50只，隨機分為5組模型組、優(yōu)降糖組、苷元高效制 劑組、苷元一般制劑組、苷類制劑組；另取血糖值在5.0mmol/L 6.0ramol/L范圍內(nèi)健康大鼠
1410只，雌雄各半，作為空白對照組，各組灌胃給藥劑量均為10ml/kg，空白組和模型組灌胃給予同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)14d，分別于給藥期間第3天、第7天、第14天禁食12h取血，測血糖值。
2.2試驗結(jié)果試驗結(jié)果見下表。
表對糖尿病大鼠模型高血糖的影響(X士S， n=10)
組別劑量血糖值(mmol./L)
(g/kg)造模前第o天第3天第7天第14天
空白對照組一5. 6±0. 155. 4±0. 296, 1±0. 415. 4±0. 285. 5±0. 36
模型組—5. 2±0. 4623.9±0. 5823. 1±1. 9322, 6 ±1. 3821. 8±1. 41
優(yōu)降糖組0. 35. 7±0. 5223. 1±1. 1620. 8±1. 3116. 8±1. 25*10. 4±1. 13"
苷元高效制劑組2. 05. 2±0. 2822. 9±1. 0521. 2±1. 6817. 6±1. 18*10. 1±1. 06"
苷元一般制劑組2. 05. 6±0. 7823.6±1.3122. 1±1.5120. 5±1. 2415. 2±0. 69*
苷制劑組2.05. 3±0. 2923, 0±1.2422. 8±1. 1121.9±1.0716. 8±1. 03*
注與模型組比較，1X0.05， **P<0.01。
以上試驗結(jié)果表明，以55mg/kg鏈脲佐菌素腹腔注射后可使大鼠血糖明顯升高，連續(xù)灌服苷元高效制劑及優(yōu)降糖，第7天血糖明顯降低，第14天其降糖作用更為明顯；苷元一般制劑、皂苷制劑第14天降糖作用較為明顯。


附圖為穿山龍皂苷及其苷元不同制劑形式下的藥時曲線
具體實施例方式
下面列舉實施例，進一步說明本發(fā)明，各實施例僅用于說明本發(fā)明，并不限制本發(fā)明實施例1
取穿山龍總皂苷元100g，加入殼聚糖20g、卡波姆10g、泊洛沙姆50g、卵磷脂50g、微粉硅膠30g、倍他環(huán)糊精80g，并加淀粉至450g，振動磨超微粉碎混合30分鐘，制粒，干燥，整粒，制成膠囊。實施例2
取穿山龍總皂苷元80g、盾葉薯蕷總皂苷元10g，加入殼聚糖20g、泊洛沙姆30g、卵磷脂10g、微粉硅膠30g、倍他環(huán)糊精20g、微晶纖維素50g，并加淀粉至300g，振動磨超微粉碎30分鐘，加70%乙醇合坨10分鐘，制丸條、分粒與搓圓，干燥，打光，制成丸劑。實施例3取穿山龍總皂苷元120g，加入殼聚糖2g、卵磷脂10g、阿斯帕坦lg，并加糊精至200g，攪拌均勻，干壓制粒，分裝，制成顆粒劑。實施例4
取穿山龍總皂苷元60g，加入殼聚糖10g、聚乙烯吡咯烷酮2g、泊洛沙姆8g、倍他環(huán)糊精20g，并加淀粉至200g，過篩混合均勻，制粒，裝腸溶膠囊，制成膠囊劑。實施例5
取穿山龍總皂苷元100g，加入聚乙烯吡咯烷酮10g、泊洛沙姆20g、卵磷脂10g、微粉硅膠10g，倍他環(huán)糊精50g，振動磨超微粉碎混合50分鐘，制粒，壓片，包衣，制成片劑。實施例6
取穿山龍總皂苷元20g，加入丙二醇10g、泊洛沙姆10g、卵磷脂20g、殼聚糖10g、卡波姆10g、加入聚乙二醇400至200g，振動磨超微粉碎20分鐘，使混合均勻，制成液體硬膠囊，即得。實施例7
取穿山龍總皂苷元30g，加入卵磷脂10g、甘氨酸10g,甘油30g，再加入聚乙二醇600至200g,振動磨超微粉碎30分鐘，使混合均勻，壓制成軟膠囊，即得。實施例8
取穿山龍總皂苷元50g，加入殼聚糖10g、卵磷脂20g、泊洛沙姆4g、尼泊金乙酯lg，蜂蠟5g，并加入大豆油至200g，攪勻，膠體磨研磨5分鐘，壓制成軟膠囊，即得。實施例9
取穿山龍總皂苷元40g、丙二醇10g、甘油5g、聚乙二醇6000 50g、聚乙二醇4000 50g，加熱熔融，混合均勻，滴制成滴丸，即得。實施例10
取穿山龍總皂苷元100g、卵磷脂25g、尼泊金乙酯2.5g，蜂蠟47.5g，并加入大豆油至500g，振動磨超微40分鐘，使混合均勻，壓制成軟膠囊，即得。實施例11
取穿山龍藥材4.5kg，粉碎，加70%乙醇滲濾提取，滲濾液，回收乙醇，水液加0.5%活性炭脫色，濾過，濾液過DIOI大孔樹脂柱，分別用水、20%乙醇、60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，回收乙醇，余水液用苦杏仁酶水解72小時，水解液減壓濃縮，減壓千燥，得穿山龍總皂苷元(粗品)205g，加卡波姆40g、卵磷脂40g、微粉硅膠40g，并加淀粉至400g，超微粉碎混合60分鐘，制粒，干燥，整粒，填裝膠囊。實施例12取穿山龍4kg，粗粉碎，加60%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液加于D101大孔吸附樹脂柱上，分別以水、30%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，余水液以2mol/L硫酸水解2小時，水解液加氧化鈣適量，濾過，并以適量乙醇洗滌沉淀，濾過，合并水液與乙醇洗液，減壓回收乙醇，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元(粗品)178g，加殼聚糖20g、卵磷脂20g、微粉硅膠100g，并加微晶纖維素至400g，超微粉碎混合50分鐘，制粒，干燥，整粒，壓制成1000片。實施例13
取穿山龍4kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液以水飽和正丁醇提取三次，TH丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，115'C滅菌20min，以乳酸菌菌種水解72小時，水解液減壓濃縮，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元(粗品)186g，加卡波姆40g、卵磷脂20g、聚乙二醇6000 40g，并加糊精至400g，超微粉碎混合80分鐘，制粒，干燥，整粒，制得顆粒劑。實施例14
取穿山龍5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液以水飽和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，加于D10]大孔吸附樹脂柱上，分別以水、30%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，加鹽酸使含酸量達5mol/L，水解6小時，水解液加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7.0，濃縮、干燥，以無水乙醇回流提取，回收乙醇，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元178g，加殼聚糖10g、泊洛沙姆50g、環(huán)糊精180g、羧甲基淀粉鈉20g，并加淀粉至500g，超微粉碎混合30分鐘，以水為黏合劑，制軟材，壓制成丸。實施例15
取穿山龍藥材3kg，粉碎，加70%乙醇滲濾提取，滲濾液，回收乙醇，水液加0.5%活性炭脫色，濾過，濾液過D101大孔樹脂柱，分別用水、20%乙醇、60%乙醇洗脫，收集60°/。乙醇洗脫液，回收乙醇，余水液用苦杏仁酶水解72小時，水解液濃縮，干燥，得穿山龍總皂苷元(粗品)156g，加卡波姆20g、卵磷脂20g，并加聚乙二醇400至400g，超微粉碎混合60分鐘，壓制軟膠囊。實施例16
取穿山龍3kg，粗粉碎，加60%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液加于D101大孔吸附樹脂柱上，分別以水、30%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，余水液以2mol/L硫酸水解2小時，水解液加氧化鈣適量，濾過，并以適量乙醇洗滌沉淀，濾過，合并水液與乙醇洗液，減壓回收乙醇，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元127g，加丙二醇45g、尼泊金乙酯6g，并加聚乙二醇400至600g，超微粉碎混合30分鐘，灌裝成液體硬膠囊。實施例17
取穿山龍4.5kg，粗粉碎，加水煎煮三次，每次2小時，濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度為1. 10 1.15 (6(TC)，加乙醇使含醇量達70%，靜置12小時，濾過，濾液回收乙醇，以水飽和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，水浴蒸干，殘渣加水溶解，加于D101大孔吸附樹脂柱上，分別以水、30%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，余水液以5mol/L鹽酸水解3小時，水解液加氫氧化鈉適量調(diào)節(jié)至中性，濃縮、干燥，以適量乙醇提取，濾過，回收乙醇，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元184g，加卡波姆7.5g、泊洛沙姆30g、丙二醇50g、廿氨酸3g，并加聚乙二醇400至600g，超微粉碎混合40分鐘，壓制軟膠囊1000粒。實施例18
取穿山龍5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液以水飽和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，115'C滅菌20min，以雙岐桿菌菌種發(fā)酵水解72小時，水解液減壓濃縮，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元198g，加殼聚糖10g、卵磷脂20g，并加大豆油至500g，超微粉碎混合30分鐘，灌裝成液體硬膠囊。實施例19
取穿山龍3kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小時，濾過，合并濾液，減壓回收乙醇，水液以水飽和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，加于DIOI大孔吸附樹脂柱上，分別以水、30%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，加鹽酸使含酸量達5molZL，水解3小時，水解液加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7. 0，濃縮、干燥，以無水乙醇回流提取千燥物，回收乙醇，減壓干燥，得穿山龍總皂苷元132g，加殼聚糖10g、泊洛沙姆20g,并加聚乙二醇6000至400g，加熱熔融，滴制成滴丸。實施例20
取實施例12所制片劑治療風濕性關(guān)節(jié)炎患者40例。治療方案每日3次，每次3片，使用20天后，治愈率為41.7%，顯效率為50.8%。實施例21
取實施例17所制軟膠囊治療腫瘤患者52例。治療方案每天3次，每次2粒，2周為一個療程，2個療程后統(tǒng)計治療結(jié)果，顯效率為25.8%，總有效率為82.4%。
權(quán)利要求
1、一種以穿山龍總皂苷元為活性成分的口服藥物。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于所述活性成分可以只有穿山龍總皂苷元，也可以 是穿山龍總皂苷元與其他藥物成分聯(lián)合使用。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物，其特征在于所述穿山龍總皂苷元是通過水解穿山龍總皂苷而 得到的。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物，其特征在于水解方法為酸水解、酶水解或微生物水解。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的藥物，其特征在于藥物活性成分與藥劑學上可接受的 輔料配合使用。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于輔料中含有生物黏附劑和潤濕劑。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物，其特征在于輔料中還可含有分散劑。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物，其特征在于輔料中的生物黏附劑是指殼聚糖和/或卡波姆； 潤濕劑是指卵磷脂和/或泊洛沙姆；分散劑是指微粉硅膠、環(huán)糊精、聚乙二醇中的任一種或二 種以上的組合物。
9、 根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于藥物組成比例為 活性成分 20 60%，生物黏附劑 1 10%， 潤濕劑 5 20%， 分散劑 0 30%， 其他輔料 0 50%。
10、 根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物，其特征在于被制成片劑、膠囊劑、顆粒劑或丸劑。
11、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于輔料中含有潤濕劑和分散劑。
12、 根據(jù)權(quán)利要求ll所述的藥物，其特征在于輔料中還可含有生物黏附劑。
13、 根據(jù)權(quán)利要求12所述的藥物，其特征在于輔料中的生物黏附劑是指殼聚糖、卡波姆、聚 乙烯吡咯烷酮中的任一種或二種以上的組合物；潤濕劑是指丙二醇、卵磷脂、泊洛沙姆中的 任一種或二種以上的組合物；分散劑是指聚乙二醇或植物油。
14、 根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物，其特征在于藥物組成比例為 活性成分 10 40%，生物黏附劑 0 10%， 潤濕劑 5 20%， 分散劑 50 80%， 其他輔料 0 20%。
15、 根據(jù)權(quán)利要求14所述的藥物，其特征在于被制成軟膠囊劑、液體硬膠囊劑或滴丸劑。
16、 制備權(quán)利要求6至15中任一項所述藥物的方法，其特征在于將藥物活性成分與所需輔料 通過熔融、溶解、攪拌、研磨或超微粉碎混合中的任一種方法混合均勻后，再加入所需常規(guī) 制劑輔料，按常規(guī)工藝制成制劑。
17、 根據(jù)權(quán)利要求16所述的制備方法，其特征在于使用振動磨超微粉碎方法混合。
18、 權(quán)利要求1至4中任一項所述藥物在制備用于治療痛風病、高脂血癥、糖尿病、冠心病、 心絞痛、風濕病或抑郁病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種穿山龍總皂苷元口服藥物制劑及其制備方法和用途，屬中藥領(lǐng)域。本發(fā)明是將穿山龍中的皂苷類成分水解成以皂苷元，再配以高效藥用輔料，通過超微粉碎的方法混合均勻，制成高效口服藥物制劑，可以大大增加皂苷元類成分的分散性、潤濕性、溶解性，增大皂苷元吸收利用的程度，提高皂苷元的生物利用度。本發(fā)明藥物制劑在治療痛風病、高脂血癥、糖尿病、冠心病、心絞痛、風濕病和抑郁病方面具有顯著的效果。
文檔編號A61P9/00GK101530532SQ20081010172
公開日2009年9月16日 申請日期2008年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月11日
發(fā)明者劉國飛, 周小明 申請人:北京凱瑞創(chuàng)新醫(yī)藥科技有限公司