貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，它是以特女貞苷對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=20～50:80～50或者乙腈:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=5～35:95～65為流動(dòng)相的高效液相色譜法。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過高效液相色譜法對(duì)貞芪扶正制劑中特女貞苷成分的含量進(jìn)行測(cè)定，所述方法的專屬性強(qiáng)、精密度高、重復(fù)性好、回收率高、穩(wěn)定性高、測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確，達(dá)到了有效控制藥物質(zhì)量的目的，確保了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定以及臨床用藥的安全、有效。
【專利說明】貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，屬于中藥質(zhì)量檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】 [0002]貞芪制劑有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、扶正固本之功效。現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明能提高人體免疫功能，保護(hù)骨髓和腎上腺皮質(zhì)功能，促進(jìn)干擾素產(chǎn)生；配合腫瘤患者放、化療，減輕病人放、化療期間的毒副作用，促進(jìn)正常功能的恢復(fù)的作用。其處方由黃芪、女貞子組成。目前，貞芪制劑供臨床選擇的常用劑型有片劑、膠囊劑、顆粒劑及滴丸劑等。
[0003]其中，女貞子中的環(huán)烯醚萜苷類成分特女貞苷具有免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用，是貞芪扶正制劑中的主要有效成分，因此對(duì)其進(jìn)行精確的含量測(cè)定是非常必要的。雖然，《中國藥典》中記載了女貞子中特女貞苷的具體含量測(cè)定方法，但是，還沒有任何針對(duì)現(xiàn)有的貞芪扶正制劑中的特女貞苷成分的含量測(cè)定方法的記載，因此，現(xiàn)有的貞芪扶正制劑的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)是不完整、不準(zhǔn)確的，亟需提供一種專門針對(duì)貞芪扶正制劑中特女貞苷成分的含量測(cè)定方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于，提供一種貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，能夠?qū)ω戃畏稣苿┲刑嘏戃粘煞值暮窟M(jìn)行快速、準(zhǔn)確、高重現(xiàn)性、高回收率的測(cè)定。
[0005]本發(fā)明所述的貞芪扶正制劑:稱取黃芪藥材2084g、女貞子藥材1042g混合，加入10倍量水煎煮2小時(shí)，過濾，收集煎液，連續(xù)兩次向藥渣中加入8倍量水煎煮I小時(shí)，過濾，合并煎液，超濾，濃縮，干燥，粉碎，加入適量輔料制成各種制劑。
[0006]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案:
[0007]—種貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，它是以特女貞苷對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=20~50:80~50或者乙腈:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=5~35:95~65為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
[0008]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法照高效液相色譜法、按下述步驟進(jìn)行測(cè)定:
[0009](I)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=20~50:80~50或者乙腈:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=5~35:95~65為流動(dòng)相；柱溫為20~40°C;檢測(cè)波長為210~240nm ;流速為0.5~1.5mL/min ;理論板數(shù)按特女貞苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000 ；
[0010](2)對(duì)照品溶液的制備:取特女貞苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為
0.2mg/mL的溶液，即得；[0011](3)供試品溶液的制備:采用方法①?③之一進(jìn)行制備:
[0012]①精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，取續(xù)濾液即得;
[0013]②精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或加熱回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，精密量取續(xù)濾液50mL，減壓回收溶劑，殘?jiān)铀♂?，上大孔樹脂，水洗至無色，再以50%?95%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50mL容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，即得；
[0014]③精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或加熱回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，精密量取續(xù)濾液50mL，減壓回收溶劑，殘?jiān)铀芙?，過硅膠柱以氯仿:甲醇:水=5?45:3:1洗脫，洗脫液濃縮至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50mL容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，即得；
[0015](4)測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ L，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0016]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法中，所述流動(dòng)相為甲醇:0.05%磷酸水溶液=30:70。(甲醇:水=30:70可很好的將特女貞苷分離開來；其中水可用磷酸水溶液、冰醋酸或甲酸代替，因?yàn)樗锛铀?、加堿、加鹽可改善峰形、提高分離度)。
[0017]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法中，所述檢測(cè)波長為224nm ;流速為0.8?1.0mL/min ;柱溫為35°C。
[0018]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法中，供試品溶液的制備方法③中過硅膠柱以氯仿:甲醇:水=20:3:1洗脫。
[0019]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法中，所述大孔樹脂為非極性大孔吸附樹脂D101、非極性大孔吸附樹脂HPD100、弱極性大孔吸附樹脂AB-8或中極性大孔吸附樹脂DM301。
[0020]前述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法中，優(yōu)選大孔樹脂為弱極性大孔吸附樹脂AB-8。
[0021]采用本發(fā)明所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，貞芪扶正制劑含特女貞苷C31H42O17不得少于1.0%。
[0022]為確保本發(fā)明含量測(cè)定方法科學(xué)、合理、可行， 申請(qǐng)人:進(jìn)行了一系列試驗(yàn)研究和考察。
[0023]一、儀器與試藥(見表I)
[0024]表I
[0025]
【權(quán)利要求】
1.一種貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:它是以特女貞苷對(duì)照品為對(duì)照，以甲醇:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=20?50:80?50或者乙腈:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=5?35:95?65為流動(dòng)相的高效液相色譜法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:照高效液相色譜法、按下述步驟進(jìn)行測(cè)定: (O色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=20?50:80?50或者乙腈:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=5?35:95?65為流動(dòng)相；柱溫為20?40°C;檢測(cè)波長為210?240nm ;流速為0.5?1.5mL/min ;理論板數(shù)按特女貞苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000 ； (2)對(duì)照品溶液的制備:取特女貞苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為0.2mg/mL的溶液，即得； (3)供試品溶液的制備:采用方法①?③之一進(jìn)行制備: ①精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，取續(xù)濾液即得； ②精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或加熱回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，精密量取續(xù)濾液50mL，減壓回收溶劑，殘?jiān)铀♂專洗罂讟渲?，水洗至無色，再以50%?95%的乙醇洗脫，洗脫液濃縮至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50mL容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，即得； ③精密稱取貞芪扶正制劑或其內(nèi)容物3g，精密加入甲醇IOOmL,稱定重量，超聲或加熱回流提取30?60min，或者微波輔助提取2?lOmin，用甲醇補(bǔ)足重量，過濾，精密量取續(xù)濾液50mL，減壓回收溶劑，殘?jiān)铀芙猓^硅膠柱以氯仿:甲醇:水=5?45:3:1洗脫，洗脫液濃縮至干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50mL容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，即得； (4)測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ L，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:所述流動(dòng)相為甲醇:0.05%磷酸水溶液=30:70。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:所述檢測(cè)波長為224nm ;流速為0.8?1.0mL/min ;柱溫為35°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:供試品溶液的制備方法③中，過硅膠柱以氯仿:甲醇:水=20:3:1洗脫。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:所述大孔樹脂為非極性大孔吸附樹脂D101、非極性大孔吸附樹脂HPD100、弱極性大孔吸附樹脂AB-8或中極性大孔吸附樹脂DM301。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的貞芪扶正制劑中特女貞苷的含量測(cè)定方法，其特征在于:所述大孔樹脂為弱極性大孔吸附樹脂AB-8。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK103592391SQ201310593979
【公開日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】張觀福 申請(qǐng)人:貴州信邦制藥股份有限公司