專利名稱：因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，更具體地說，是以特定的氨基噠嗪衍生物或其鹽為有效成分的、因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑。
近些年來，作為狹小化血管的治療方法，經(jīng)皮冠狀動脈擴(kuò)張術(shù)(Percutaneous Transluminal Coronary AngioplastyPTCA)、經(jīng)皮動脈擴(kuò)張術(shù)(Percutaneous Transluminal AngioplastyPTA)正日益普及。這是從大腿動脈等部位遠(yuǎn)距離插入氣球?qū)Ч?balloon catheter)，在狹窄部位使氣球膨脹，使血管物理性擴(kuò)張的方法。但該治療方法實施3～6個月后有時會再次出現(xiàn)血管變窄。在這種再狹窄中，觀察不到膽固醇的沉積，無疑這幾乎都是由平滑肌細(xì)胞以及由它們產(chǎn)生的細(xì)胞間基質(zhì)構(gòu)成，即所謂細(xì)胞纖維性內(nèi)膜肥厚(Journal of AmericanCollege of Cordiology 23，(6)，1278-1289，1994，5月)。另外，平滑肌細(xì)胞的增殖引起心臟、肝臟、腎臟、血管等內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄(FASEB Journal7，1055～1060，1993，8月)。
為此，作為治療、預(yù)防PTCA及PTA術(shù)后的再狹窄與內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄的方法，抑制血管內(nèi)腔出現(xiàn)的平滑肌細(xì)胞的游走、增殖被認(rèn)為是有效的。
為解決此課題，一直在進(jìn)行藥劑的研究(特開昭57-38715號、特開平2-121922號、特開平3-83923號、特開平3-83957號、特開平3-118383號、特開平4-99775號、特開平4-154720號等)，但至今還未開發(fā)成功。
另一方面，2，3-二氮雜萘的各種衍生物的各種藥理作用已被報導(dǎo)。如特開昭56-53659、特開昭56-53660以及特開昭57-48972報導(dǎo)了1-苯胺基-4-苯基-2，3-二氮雜萘衍生物具有強(qiáng)烈的體外血小板凝集抑制作用，而特開昭60-218377、特開昭60-243074中，也報導(dǎo)了下述2種化合物具有強(qiáng)烈的體外血小板凝集抑制作用。 關(guān)于英國專利第1303016號、J.Med.Chem.12，555(1969)等公開的1-氨基-4-苯基-2，3-二氮雜萘衍生物，只記載過它具有消炎及抗鋰作用。
此外，歐洲公開專利公報449203(特開平4-211666)中公開了1-α-取代芐氨基-4-苯基-2，3-二氮雜萘衍生物，歐洲公開專利公報534443中公開了3，6-二取代噠嗪衍生物，兩者都具有強(qiáng)烈的血小板凝集抑制作用，鑒于這一作用，預(yù)計它們對腦血栓、腦塞栓等腦血管障礙、血肌梗塞等缺血性心疾病、末梢循環(huán)障礙等循環(huán)阻礙有效果。
但是，這些2，3-二氮雜萘衍生物對平滑肌細(xì)胞增殖有抑制作用尚不為人所知。
本發(fā)明者為解決上述問題經(jīng)過多次研究，結(jié)果首次發(fā)現(xiàn)已知對血小板凝集有抑制作用的氨基噠嗪衍生物對血管內(nèi)腔出現(xiàn)的平滑肌細(xì)胞增殖有抑制作用，從而完成了本發(fā)明。
即本發(fā)明的要點在于以通式(I)代表的氨基噠嗪衍生物或其鹽為有效成分的、因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑， 其中，R1表示環(huán)己基、任選具有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基以及鹵原子的取代基的苯基、任選具有一個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的噻吩基，或任選具有1個以上選自C1～C4烷基C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的呋喃基；R2表示-CHR3R4(R3表示氫原子或C1～C4烷基，R4表示C1～C4烷基、環(huán)己基、噻吩基或任選具有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的苯基)、或任選具有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及C1～C6亞烷基的取代基的環(huán)己基；
環(huán)A表示苯環(huán)、噻吩環(huán)或呋喃環(huán)。
以下詳細(xì)說明本發(fā)明。
本發(fā)明的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑以上述通式(I)的氨基噠嗪衍生物或其鹽為有效成分。
上述通式中C1～C4烷基可列舉甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基等，C1～C4烷氧基可列舉甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等，鹵原子可列舉氟原子、氯原子、溴原子等，C1～C6亞烷基可列舉任意二個取代基連結(jié)的基團(tuán)，如亞甲基、亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基、1，2-亞丙基、乙基亞乙基、二甲基亞甲基等。
R1優(yōu)選苯基、2-噻吩基或2-呋喃基，特別優(yōu)選苯基。R2優(yōu)選-CHR3′R4′(R3′表示C1～C4烷基，R4′表示環(huán)己基)，特別優(yōu)選下式基團(tuán)， 環(huán)A優(yōu)選苯環(huán)或噻吩環(huán)，優(yōu)選為苯環(huán)。
通式(I)的氨基噠嗪衍生物形成的鹽可列舉其鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等無機(jī)酸鹽，或甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、樟腦磺酸鹽、乙酸鹽、安息香酸鹽、蘋果酸鹽、乳酸鹽、羥基乙酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、草酸鹽、抗壞血酸鹽、檸檬酸鹽、水楊酸鹽、尼古丁酸鹽、酒石酸鹽等有機(jī)酸鹽。因通式(I)的化合物及其鹽有時也以水合物或溶劑化物形式存在，故這些水合物、溶劑化物也包括在本發(fā)明化合物內(nèi)。
另外，上述通式(I)的氨基噠嗪衍生物中存在不對稱碳原子時，(R)體、(S)體、(RS)體都可以采用，這些均包括在用作本發(fā)明的有效成分的化合物中。
因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病具體可列舉PTCA術(shù)后的再狹窄，心臟、肝臟、腎臟、血管等內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄、PTA術(shù)后的再狹窄等。
以下表-1為本發(fā)明氨基噠嗪衍生物的具體實例。
表-1
表-1(續(xù))
表-1(續(xù))
表-I(續(xù))
表-1(續(xù))
表-I(續(xù))
這類氨基噠嗪衍生物就是在歐洲公開專利449203號或534443號所記載的化合物，無論哪種化合物都可根據(jù)這些專利中的方法合成。
本發(fā)明的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑對于血管內(nèi)腔出現(xiàn)的因平滑肌細(xì)胞游走、增殖引起的各種疾病有效。具體而言，可用于PTCA術(shù)后的再狹窄、經(jīng)皮動脈擴(kuò)張術(shù)(PTA)后的再狹窄、心臟、肝臟、腎臟、血管等內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄等的預(yù)防或治療。
本發(fā)明的氨基噠嗪衍生物作為因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑應(yīng)用于臨床時，經(jīng)口使用時成人優(yōu)選一次1～100mg，一日1～3次給藥，靜脈注射時成人優(yōu)選一次0.01～10mg，一日2～5次給藥，另外直腸內(nèi)給藥時優(yōu)選一次1～100mg，一日1～3次給藥。此外，以上給藥量更優(yōu)選隨年齡、病態(tài)、癥狀等作適宜增減。
制成藥劑時，將氨基噠嗪衍生物或其1種或2種以上可藥用鹽與常用的藥用載體、賦型劑及其它添加劑混合。載體無論固體還是液體均可，作為固體載體可列舉乳糖、白陶土(高嶺土)、蔗糖、結(jié)晶纖維素、玉米淀粉、滑石粉、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸、硬脂酸鎂、卵磷脂、氯化鈉等。
作為液體載體可列舉糖漿、甘油、花生油、聚乙烯吡咯烷酮、橄欖油、乙醇、苯甲醇、丙二醇、水等。
醫(yī)藥制劑可采用各種劑型，采用固體載體時，有片劑、散劑、顆粒劑、硬明膠囊劑、栓劑或錠劑。固體載體量可在很寬范圍改變，優(yōu)選約1mg～約1g。
采用液體載體時，可制成糖漿劑、乳液劑、軟明膠囊劑，以及裝入安瓿瓶的無菌注射液或水性或非水性懸浮液劑。以下用實施例詳細(xì)說明本發(fā)明，只要不超出本發(fā)明的要點，則本發(fā)明不限于下述實施例。
合成例(R)-1-(1-環(huán)己基乙基氨基)-4-苯基-2，3-二氮雜萘(表-1化合物No.17的(R)體)富馬酸鹽的合成(以下簡稱為化合物A)。
在400ml N-甲基吡咯烷酮中添加144.4g(0.6mol)1-氯-4-苯基-2，3-二氮雜萘和230g(1.8mol)(R)-(-)-1-環(huán)己基乙胺后，在120～130℃下加熱攪拌混合物6小時。反應(yīng)終了后，冷卻，添加4.0升5％NaOH水溶液，用氯仿萃取。有機(jī)層用MgSO4干燥后，濃縮，然后用硅膠柱色譜法(分離液為乙酸乙酯正己烷氯仿＝1∶3∶1)精制，用乙醚-氯仿重結(jié)晶，合成出150.2g(R)-1-(1-環(huán)己基乙基氨基)-4-苯基-2，3-二氮雜萘。
熔點164.0～167.0℃將得到的(R)-1-(1-環(huán)己基乙基氨基)-4-苯基-2，3-二氮雜萘100.0g、富馬酸32.0g在1.01的甲醇中攪拌回流16小時。一邊攪拌一邊自然冷卻到20℃，濾取晶體，用200ml甲醇洗滌，在約60℃1～2mmHg下干燥，得到121.5g的富馬酸鹽。
烷點240～250℃(分解)實施例1對大鼠內(nèi)膜肥厚模型的作用將戊巴比妥麻醉下的SD大鼠(20周齡)背位固定，露出左頸動脈。由外頸動脈將用于除去血栓的福格替氏導(dǎo)管(2フレンチ)在氣球不膨脹的狀態(tài)下插入到大動脈分支部位(約5cm)。使氣球膨脹，并一邊轉(zhuǎn)動一邊引入到插入部位。重復(fù)操作三次，使頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞剝離。操作完畢后，撥出導(dǎo)管，結(jié)扎外頸動脈，用醫(yī)療用夾子使切開部位閉合。將化合物A懸浮分散在0.7％西黃蓍膠溶液中，采用1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg的用量一日一次經(jīng)口給藥。對于對照組，以0.7％西黃蓍膠溶液同樣經(jīng)口給藥。第一天給藥在頸動脈內(nèi)膜剝離后進(jìn)行。
內(nèi)膜剝離兩周后，在戊巴比妥麻醉下，將3％伊凡斯藍(lán)從大腿靜脈注入靜脈內(nèi)。30分鐘后剖腹，用0.01M磷酸緩沖液從大動脈開始全身灌流后，摘出頸動脈。
將摘出的頸動脈中確認(rèn)已剝離內(nèi)皮細(xì)胞的部分做成6～8個2mm長的動脈片，用福爾馬林固定后用石蠟包覆。由各片制作橫斷面組織切片，進(jìn)行彈性組織·范吉遜氏染色。各切片內(nèi)膜、中膜面積用數(shù)字轉(zhuǎn)換器測定，內(nèi)膜肥厚度用內(nèi)膜/中膜面積比表示。結(jié)果如表-2所示。
表-2
*；p＜0.05(檢測法)一元配置分散分析Dunnett型化合物A對內(nèi)膜剝離引起的大鼠頸動脈內(nèi)膜肥厚的抑制情況與其用量相關(guān)。
實施例2對大鼠內(nèi)膜肥厚模型的作用將戊巴比妥麻醉下的SD大鼠(20周齡)背位固定，露出左頸動脈。由外頸動脈將除血栓用福格替氏導(dǎo)管(2フレンチ)在氣球不膨脹的狀態(tài)下插入到大動脈分支部位(約5cm)。使氣球膨脹，一邊使之旋轉(zhuǎn)一邊引入到插入部位。重復(fù)操作三次，使頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞剝離。操作完畢后，撥出導(dǎo)管，結(jié)扎外頸動脈，用醫(yī)療用夾子使切開部位閉合。將化合物A懸浮分散在0.7％西黃蓍膠溶液中，采用3mg/kg用量一日一次經(jīng)口給藥，對于對照組，同樣地經(jīng)口給予0.7％西黃蓍膠溶液。A組中第一次給藥在頸動脈內(nèi)膜剝離后立即進(jìn)行，B組則在頸動脈內(nèi)膜剝離4日后開始。
內(nèi)膜剝離2周后，在戊巴比妥麻醉下，將3％伊凡斯藍(lán)由大腿靜脈注入靜脈內(nèi)。30分鐘后剖腹，用0.01M磷酸緩沖液從大動脈開始全身灌流后摘出頸動脈。
將摘出的頸動脈中確認(rèn)已剝離內(nèi)皮細(xì)胞的部分制成6～8個長度為2mm的動脈片，用福爾馬林固定后，用石蠟包覆。用各片制作橫截面組織切片，進(jìn)行彈性組織·范吉遜氏染色。用數(shù)字轉(zhuǎn)換器測定內(nèi)膜、中膜面積，內(nèi)膜肥厚度用內(nèi)膜/中膜面積比表示。其結(jié)果列于表-3中。
表-3
*；p＜0.05(粒測法)一元配置分散分析Dunnett型化合物以3mg/kg經(jīng)口給藥，可抑制由于內(nèi)膜剝離引起的大鼠頸動脈內(nèi)膜肥厚，即或頸動脈內(nèi)膜剝離4日后給藥也有意義。
氨基噠嗪衍生物由于可抑制平滑肌細(xì)胞的游走、增殖，故對因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病，例如經(jīng)皮冠狀動脈擴(kuò)張術(shù)(PTCA)后的再狹窄，心臟、肝臟、腎臟、血管等內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄、經(jīng)皮動脈擴(kuò)張術(shù)(PTA)后的再狹窄的預(yù)防或治療有效。
權(quán)利要求
1.以通式(I)的氨基噠嗪衍生物或其鹽作為有效成分的、因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑， 其中，R1表示環(huán)己基、任選含有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的苯基、任選含有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的噻吩基或任選含有1個以上選自C4～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的呋喃基；R2表示-CHR3R4，R3表示氫原子或C1～C4烷基、R4表示C1～C4烷基、環(huán)己基、噻吩基或任選含有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及鹵原子的取代基的苯基；或任選含有1個以上選自C1～C4烷基、C1～C4烷氧基及C1～C6亞烷基的取代基的環(huán)己基；環(huán)A表示苯環(huán)、噻吩環(huán)或呋喃環(huán)。
2.按權(quán)利要求1的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于R2表示-CHR3′R4′、R3′表示C1～C4烷基，R4′表示環(huán)己基。
3.按權(quán)利要求1或2的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于R1表示苯基、2-噻吩基或2-呋喃基。
4.按權(quán)利要求1或2的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于R1表示苯基。
5.按權(quán)利要求1～4中任一項的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于環(huán)A表示苯環(huán)或噻吩環(huán)。
6.按權(quán)利要求1～4中任一項的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于環(huán)A表示苯環(huán)。
7.按權(quán)利要求1的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑，其特征在于R1表示苯基，R2表示 環(huán)A表示苯環(huán)。
8.以(R)-1-(1-環(huán)己基乙基氨基)-4-苯基-2，3-二氮雜萘或其可藥用鹽作為有效成分的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑。
9.按權(quán)利要求1～8中任何一項的治療、預(yù)防劑，其中因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病為經(jīng)皮冠狀動脈擴(kuò)張術(shù)后的再狹窄。
10.按權(quán)利要求1～8中任何一項的治療、預(yù)防劑，其中因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病為內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄。
11.按權(quán)利權(quán)利要求1～8中任何一項的治療、預(yù)防劑，其中因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病為經(jīng)皮動脈擴(kuò)張術(shù)后的再狹窄。
全文摘要
以通式(I)的氨基噠嗪衍生物或其鹽作為有效成分的因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病的治療、預(yù)防劑(其中各代號意義詳見說明書)，由于氨基噠嗪衍生物抑制平滑肌細(xì)胞的游走、增殖，故對因平滑肌細(xì)胞增殖引起的疾病，如經(jīng)皮冠狀動脈擴(kuò)張術(shù)(PTCA)后的再狹窄、心臟、肝臟、腎臟、血管等內(nèi)臟器官移植后的血管狹窄，經(jīng)皮動脈擴(kuò)張術(shù)(PTA)后的再狹窄具有預(yù)防和治療作用。
文檔編號A61K31/50GK1116526SQ9510631
公開日1996年2月14日 申請日期1995年5月18日 優(yōu)先權(quán)日1994年5月19日
發(fā)明者山田久美, 玉尾嘉邦, 大島正裕, 巖瀨德道 申請人:三菱化學(xué)株式會社