專利名稱：治療細胞增殖疾病的化合物的制作方法
本申請要求2003年12月11日提交的美國臨時申請60/528,877的優(yōu)先權(quán)，該申請的全部內(nèi)容尤其被引入本文作為參考。
背景技術(shù)：
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明一般涉及細胞增殖疾病如癌癥的治療。更具體地涉及用于治療細胞增殖疾病如癌癥的酪氨酸磷酸化抑制劑和酪氨酸磷酸化抑制劑樣化合物，合成這些化合物的方法，以及應(yīng)用這些化合物的治療方法。
2.相關(guān)領(lǐng)域的描述AG490是抑制Jak2/Stat3信號發(fā)放的激酶抑制劑。用AG490靶向抑制Jak/Stat通路可抑制腫瘤細胞生長并增加對細胞凋亡刺激的敏感性；因此，該通路的抑制劑可能是癌癥治療的潛在治療法(Catlett-Falcone等，1999；Alas和Bonavida，2003；Burdelya等，2002)。因為IL-6通過STAT3的磷酸化來促進某些癌細胞系的存活和增殖(Bharti等，Verma等，Kerr等)，激酶抑制劑類似于AG490，具有作為抗癌藥物的可能性。
AG490結(jié)構(gòu)上分類為酪氨酸磷酸化抑制劑。美國專利6,596,828B2和美國專利申請2003/0013748描述了結(jié)構(gòu)類似AG490的化合物。
然而，AG490在動物試驗中活性有限，必須施用高濃度(～50到100μM)以抑制Jak2/Stat3信號發(fā)放和實現(xiàn)抗腫瘤作用，AG490的這種低效能不足以保證該化合物治療癌癥的臨床效果(Burdelya等，2002；Meydan等，1996；Constantin等，1998)。因此，需要在低治療濃度下通過類似的機制具有強抗增殖作用的治療劑。
發(fā)明概述本發(fā)明通過提供與AG490相比具有改進的藥理特征(例如，效能增加)的化合物，克服技術(shù)上的限制；這些化合物在低濃度(～1μM)下阻斷IL-6介導(dǎo)的Stat3活化，并快速抑制c-myc原癌基因的表達，在許多惡性腫瘤中原癌基因常常過量表達、重排或突變(Hallek等，1998；Selvanayagam等，1988；Jemberg-Wiklund等，1992；Kuehl等，1997)。此外，本發(fā)明化合物還可在c-myc過量表達腫瘤細胞中伴隨其c-myc下調(diào)活性來誘導(dǎo)凋亡。本發(fā)明涉及可用作抗腫瘤和/或化學(xué)治療藥物的化合物，合成這些化合物的方法，以及使用這些化合物治療癌癥患者的方法。
本發(fā)明的一方面涉及具有以下化學(xué)通式的化合物 式中，R0選自R1和R1-Z1-；而其中，Z1是烷基；R1選自 上式中，X1、X2、X3和X4各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2；
Y1選自鹵素和O2N；和R2選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷芳基、鹵素、氫、OH、NO2、硫醚、胺、SH和NH2；R3選自 上式中，Z3是烷基；和m1＝1、2、3或4；R4選自CN、取代胺、CH2S-烷基、烷基和CH2N3；上式中，R5和R6各自獨立地選自 單糖、單糖衍生物、多糖、多糖衍生物、芳基和烷芳基；Z選自NH、S和O，X5和X6各自獨立地選自氫或低級烷基。
在本發(fā)明的某些實施方式中，R4是CN。在一些實施方式中，R1選自
在更具體的實施方式中，R1是 在一些實施方式中，X1是鹵素如Br。
R5可選自具有以下結(jié)構(gòu)的烷芳基 具有以下結(jié)構(gòu)的芳基 式中，m＝0、1、2、3、4、5、6或7，X5和X6各自獨立地選自氫和烷基，R7、R8、R9、R10和R11各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2。
在更具體的實施方式中，R5是烷芳基。X1、X2、X3和X4選自氫。Z1可以是低級烷基，低級烷基可以是-(CH2)m3-，式中M3＝0、1、2、3或4。
Z3可以是低級烷基，低級烷基可以是-(CH2)m4-，式中M4＝0、1、2、3或4。
Y1可以是O2N或鹵素如Cl或Br。
在某些實施方式中，R5選自
R2可以是氫。Y1可選自O(shè)2N和鹵素如Br或Cl。
本發(fā)明某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物
本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物
本發(fā)明的另一方面涉及治療細胞增殖疾病的方法，該方法包括將治療相關(guān)量的本發(fā)明第一化合物給予對象。對象可以是哺乳動物，哺乳動物可以是人。第一化合物可包含在藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或運載體中。細胞增殖疾病可以是癌。癌可以是黑色素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺癌、肝癌、成視網(wǎng)膜細胞瘤、星形細胞瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、白血病、血癌、腦癌、皮膚癌、眼癌、舌癌、膠質(zhì)瘤、成神經(jīng)細胞瘤、頭癌、頸癌、乳房癌、胰腺癌、腎癌、骨癌、睪丸癌、卵巢癌、間皮瘤、宮頸瘤、胃腸癌、淋巴瘤、結(jié)腸癌或膀胱癌。
細胞增殖疾病可以是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、骨關(guān)節(jié)炎、平滑肌瘤、腺瘤、脂肪瘤、血管瘤、纖維瘤、血管閉塞、再狹窄、動脈硬化(artherosclerosis)、瘤前病變、原位癌、口腔毛狀白斑或銀屑病。
在某些實施方式中，對象的細胞中stat3活性降低。對象的細胞中c-myc表達減少。可與治療相關(guān)量的第二化合物聯(lián)合給予第一化合物。第二化合物可以是抗癌化合物。第一化合物可與外科手術(shù)、放射治療或基因治療聯(lián)合給予。
附圖簡要說明下面的附圖構(gòu)成本說明書的一部分，以進一步說明本發(fā)明的某些方面。通過參考這些附圖中的一幅或多幅，結(jié)合本文所述具體實施方式
的詳細描述，可更好地理解本發(fā)明。


圖1化合物AG490、AG1801和AG 2019對MM集落形成的抑制。AG1801(12μM)和AG 2019(12μM)完全抑制MM集落形成，而AG490(25μM)在較高濃度下不大有效。
圖2A-C抑制MM細胞系生長和存活。圖2A，化合物在MM-1MM細胞中的劑量反應(yīng)關(guān)系。MM細胞用指定濃度的AG或WP化合物培養(yǎng)72小時后，用MTT試驗測定細胞生長和存活。化合物AG1801、AG490和WP1034可有效減少MM1細胞的生長和存活。圖2B，化合物在OCI MM細胞中的劑量反應(yīng)關(guān)系?；衔顰G1801、AG490和WP1034可有效減少OCI細胞的生長和存活。圖2C，化合物在U266MM細胞中的劑量反應(yīng)關(guān)系?；衔顰G1801、AG490和WP1034可有效減少U266細胞的生長和存活。
圖3A-CAG和WP化合物對MM細胞生長/存活的作用。為確定AG和WP化合物對MM細胞生長/存活的作用，將MM細胞用指定濃度的AG或WP培養(yǎng)72小時后，用MTT試驗測定細胞生長和存活?？捎^察到與AG490相比，AG1801、WP1034和WP1050的效能明顯增加。圖3A，AG1801、WP1034和WP1050抑制MM1細胞的生長和存活，與AG490相比效能增加。圖3B，AG1801、WP1034和WP1050抑制OCI細胞的生長和存活，與AG490相比效能增加。圖3C，AG1801、WP1034和WP1050抑制U266細胞的生長和存活，與AG490相比效能增加。
圖4顯示W(wǎng)P1015和WP1066的結(jié)構(gòu)。
圖5WP1066對多種癌細胞系的作用。WP1066在多種細胞系中可有效減少細胞增殖，顯示強抗癌作用。
圖6顯示W(wǎng)P1066、WP1130和WP1129的結(jié)構(gòu)。顯示了這些化合物抗MM-1骨髓瘤的IC50值。該圖說明這些化合物活性得到改進。
圖7用WP1066、WP1130和WP1129提高對c-myc/Stat3的抑制。比較這些化合物在MM-1細胞中的Stat3/c-myc抑制活性。觀察到WP1066、WP1130和WP1129對c-myc/Stat3的強抑制作用。
圖8WP1066減小體內(nèi)腫瘤大小。顯示了人A375黑色素瘤在裸鼠中生長，腫瘤達到可觸摸大小后用WP1066處理的動物試驗的結(jié)果。每隔一天(QID)使動物接受40mg/kg WP1066，共注射8次。第21天終止試驗，這時對照組達到最大腫瘤負荷。這些結(jié)果表明，WP1066可降低體內(nèi)腫瘤體積。
圖9顯示W(wǎng)P1119、WP1026和WP1127的結(jié)構(gòu)。WP1119、WP1026和WP1127的結(jié)構(gòu)示例性說明了可包含在本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)中的單糖(例如，半乳糖)和單糖衍生物(例如，乙?；瘑翁侨缫阴；肴樘?，1，2，3，4-二異亞丙基(ideno)-D-半乳糖)的例子。
說明性實施方式的描述過去研究表明，在多種腫瘤類型中，激活轉(zhuǎn)錄因子(例如，NF-kB，Stat 3)的細胞因子通路因遺傳損傷或自分泌/旁分泌機制未被調(diào)節(jié)或激活(Hallek等，1998；Hideshima等，2002)。這些通路有助于致腫瘤性和癌癥進程。在本發(fā)明中，合成了幾種化合物，體內(nèi)篩選表明，這些化合物在低濃度(～1μM)下可完全阻斷IL-6介導(dǎo)的Stat3活化。此外，這些化合物可快速抑制c-myc原癌基因的表達，c-myc原癌基因在許多惡性腫瘤中常常過量表達、重排或突變(Hallek等，1998；Selvanayagam等，1988；Jernberg-Wiklund等，1992；Kuehl等，1997)。本發(fā)明描述了酪氨酸磷酸化抑制劑和酪氨酸磷酸化抑制劑樣的化合物的結(jié)構(gòu)和活性關(guān)系。這些化合物在IL-6處理細胞中抑制Jak2/Stat3信號發(fā)放的活性是AG490的20-50倍，并具有快速c-myc下調(diào)活性。在相應(yīng)于其c-myc下調(diào)活性的濃度下，這些化合物還可誘導(dǎo)過量表達c-myc的腫瘤細胞凋亡。本發(fā)明揭示了可使對腫瘤細胞存活和增殖重要的基因和信號通路失活的化合物，這些化合物可單獨使用或與治療癌癥的其它試劑聯(lián)合使用。
化學(xué)定義根據(jù)長期存在的專利法公約，說明書和權(quán)利要求書中使用的術(shù)語“一”和“一個”指一個或多個。
“烷基”指飽和脂族烴，包括直鏈、支鏈、和環(huán)狀烷基。優(yōu)選地，烷基具有1-12個碳原子。更優(yōu)選地，烷基是具有1-7個碳原子的低級烷基，更優(yōu)選具有1-4個碳原子。烷基可取代或未取代。如果取代，取代基優(yōu)選是羥基、氰基、烷氧基、＝O、＝S、NO2、N(CH3)2、氨基或SH。
“烯基”指具有至少一個碳碳雙鍵的不飽和烴基，包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團。優(yōu)選地，烯基具有1-12個碳原子。更優(yōu)選是具有1-7個碳原子的低級烯基，更優(yōu)選具有1-4個碳原子。烯基可取代或未取代。如果取代，取代基優(yōu)選是羥基、氰基、烷氧基、＝O、＝S、NO2、N(CH3)2、鹵素、氨基或SH。
“炔基”指具有至少一個碳碳三鍵的不飽和烴基，包括直鏈、支鏈和環(huán)狀基團。優(yōu)選地，炔基具有1-12個碳原子。更優(yōu)選是具有1-7個碳原子的低級炔基，更優(yōu)選具有1-4個碳原子。炔基可取代或未取代。如果取代，取代基優(yōu)選是羥基、氰基、烷氧基、＝O、＝S、NO2、N(CH3)2、氨基或SH。
“烷氧基”指“-O-烷基”，其中，“烷基”如上述定義。
“芳基”指具有至少一個共軛pi電子系統(tǒng)的環(huán)的芳族基團，包括碳環(huán)芳基、雜環(huán)芳基和聯(lián)芳基，所有這些基團可任選地被取代。優(yōu)選地，芳基是取代或未取代的苯基或吡啶基。優(yōu)選的芳基取代基為鹵素、三鹵代甲基、羥基、SH、OH、NO2、胺、硫醚、氰基、烷氧基、烷基和氨基。
“烷芳基”指烷基(如上所述)，共軛結(jié)合芳基(如上所述)。優(yōu)選地，烷基是低級烷基。
“碳環(huán)芳基”指所有芳環(huán)上的原子都是碳原子的基團。碳原子可任選地被如上文芳基所述的優(yōu)選基團所取代。
“雜環(huán)芳基”指芳環(huán)的環(huán)原子中具有1-3個雜原子、其余環(huán)原子為碳原子的基團。合適的雜原子包括氧、硫和氮，包括呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-低級烷基吡咯并、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基等，所有基團可任選地被取代。
“酰胺”指-C(O)-NH-R，其中R為烷基、芳基、烷芳基或氫。
“硫代酰胺”指-C(S)-NH-R，其中，R為烷基、芳基、烷芳基或氫。
“酯”指-C(O)-OR’，其中，R’為烷基、芳基或烷芳基。
“胺”指-N(R”)R，其中，R”和R各自獨立地為氫、烷基、芳基或烷芳基，前提是R”和R不都是氫。
“硫醚”指-S-R，其中，R為烷基、芳基或烷芳基。
“磺?；敝?S(O)2-R，其中，R為芳基、C(CN)＝C-芳基、CH2-CN、烷芳基、NH-烷基、NH-烷芳基或NH-芳基。
酪氨酸磷酸化抑制劑和酪氨酸磷酸化抑制劑樣的化合物本發(fā)明提供酪氨酸磷酸化抑制劑和酪氨酸磷酸化抑制劑樣的化合物，用于治療細胞增殖疾病如癌癥。本發(fā)明化合物包括具有以下化學(xué)通式的化合物 式中，R0選自R1和R1-Z1-；而其中，Z1是烷基；和式中，R1選自
上式中，X1、X2、X3和X4各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2；Y1選自鹵素和O2N；和R2選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷芳基、鹵素、氫、OH、NO2、硫醚、胺、SH和NH2；R3選自 上式中，Z3是烷基；和m1＝1、2、3或4；和R4選自CN、取代胺、CH2S-烷基、烷基和CH2N3；上式中，R5和R6各自獨立地選自
單糖(例如，葡萄糖、果糖、半乳糖等)、多糖、單糖衍生物(例如，乙?；瘑翁侨缫阴；肴樘?，1，2，3，4-二異亞丙基-D-半乳糖)取代和未取代的芳基和取代和未取代的烷芳基；Z選自NH、S和O，和X5和X6各自獨立地選自氫和低級烷基。
在本發(fā)明的某些實施方式中，R4是CN。在某些實施方式中，R1可選自 在更具體的實施方式中，R1是 在某些實施方式中，X1是鹵素如Br。
R5可選自具有以下結(jié)構(gòu)的烷芳基
具有以下結(jié)構(gòu)的芳基 式中，m＝0、1、2、3、4、5、6或7，和X5和X6各自獨立地選自氫和烷基，和R7、R8、R9、R10和R11各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2。
在更具體的實施方式中，R5是烷芳基。X1、X2、X3和X4可以是氫。Z1可以是低級烷基，低級烷基可以是-(CH2)m3-，式中，M3＝0、1、2、3或4。
Z3可以是低級烷基，低級烷基可以是-(CH2)m4-，式中，M4＝0、1、2、3或4。Y1可以是O2N或鹵素如Cl或Br。
在某些實施方式中，R5選自 R2可以是氫。Y1可選自O(shè)2N和鹵素如Br或Cl。
本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物
本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物
本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 本發(fā)明的某些實施方式涉及具有以下通式的化合物 細胞增殖疾病術(shù)語“細胞增殖疾病”指在多細胞生物體中，由于異常增加和/或不受控制的細胞生長導(dǎo)致多細胞生物體損傷(例如，不適或預(yù)期壽命降低)的疾病。細胞增殖疾病可在動物或人中發(fā)生。癌癥是細胞增殖疾病的一個例子，本發(fā)明的某些實施方式針對癌癥的治療。
在某些實施方式中，可使用本發(fā)明化合物和方法治療多種癌性狀態(tài)，包括(例如)黑色素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺癌、肝癌、成視網(wǎng)膜細胞瘤、星形細胞瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、白血病、血癌、腦癌、皮膚癌、眼癌、舌癌、膠質(zhì)瘤、成神經(jīng)細胞瘤、頭癌、頸癌、乳房癌、胰腺癌、腎癌、骨癌、睪丸癌、卵巢癌、間皮瘤、宮頸瘤、胃腸癌、淋巴瘤、結(jié)腸癌和/或膀胱癌。癌癥包括癌細胞組成的腫瘤。這些癌性狀態(tài)包括癌、癌變前和/或惡性的細胞。
還期望將本發(fā)明化合物用于治療除癌癥外的細胞增殖疾病。本發(fā)明某些實施方式中治療的其它細胞增殖疾病包括(例如)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、骨關(guān)節(jié)炎、平滑肌瘤、腺瘤、脂肪瘤、血管瘤、纖維瘤、血管閉塞、再狹窄、動脈硬化、瘤前病變(例如，腺瘤增生、前列腺上皮內(nèi)瘤形成)、原位癌、口腔毛狀白斑和/或銀屑病。
此外，本發(fā)明化合物可用于治療除過度增殖以外的疾病。例如，某些酪氨酸磷酸化抑制劑可用于治療肥大和局部缺血(美國專利6,433,018)以及乙型肝炎感染(美國專利6,420,338)。因此，本發(fā)明化合物還可用于治療其它疾病，包括肥大、局部缺血和病毒感染(例如，乙型肝炎感染)。
藥物組合物通過可使活性成分與腫瘤中的試劑作用位點接觸的任何方法給予本發(fā)明抗腫瘤化合物，來殺死某些與細胞增殖疾病有關(guān)的細胞，例如腫瘤細胞。可通過與藥物聯(lián)用的任何常規(guī)方法給予這些化合物，這些化合物作為單獨的治療性活性成分或與治療活性成分組合。這些化合物可單獨給予，但通常與根據(jù)給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥物操作所選的藥學(xué)上可接受的載體一起給予。
本發(fā)明水性組合物包含有效量的化合物，以殺死癌細胞或減緩癌細胞的生長。這些組合物通常溶解或分散在藥學(xué)上可接受的載體或水性介質(zhì)中。
術(shù)語“AG化合物”和“WP化合物”指本發(fā)明的具體實施例。例如，化合物WP1015是WP化合物的一個例子，AG1801是AG化合物的一個例子。
短語″藥學(xué)上或藥理上可接受的″指給予動物、人(適當(dāng)時)時，不產(chǎn)生副反應(yīng)、過敏反應(yīng)或其它不良反應(yīng)的分子實體或組合物。如本文所用，″藥學(xué)上可接受的載體″包括任何及所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲試劑等。對藥物活性物質(zhì)使用這些介質(zhì)和試劑是本領(lǐng)域公知的。除非常規(guī)介質(zhì)或試劑與活性成分不相容，考慮其用于治療組合物。組合物中也可包含補充的活性成分，如其它抗癌劑。
除配制成胃腸道外給藥，例如靜脈內(nèi)或肌內(nèi)注射的化合物以外，其它藥學(xué)上可接受的形式包括，例如片劑或其它口服固體劑型；緩釋膠囊；以及目前使用的任何其它形式，包括乳膏、洗劑、漱口劑、吸入劑、脂質(zhì)載體、脂質(zhì)體等。
A.胃腸道外給藥常常將活性化合物配制用于胃腸道外給藥，例如，配制用于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、甚至是腹腔內(nèi)注射。根據(jù)本說明書，本領(lǐng)域技術(shù)人員將了解含本發(fā)明蒽環(huán)霉素作為活性成分的水性組合物的制劑。典型地，將這些組合物制備成可注射的，作為液體溶液或混懸液；也可制備成適合在注射前加入液體制成溶液或混懸液的固體形式；也可乳化制劑。
可在適當(dāng)混有表面活性劑如羥丙基纖維素的水中制備作為游離堿或藥學(xué)上可接受的鹽形式的活性化合物溶液。也可在甘油、液體聚乙二醇、及其混合物和油中制備分散體。在普通儲存和使用條件下，這些制劑含有防腐劑以防止微生物生長。
在一些情況下，需要配制鹽形式的化合物，通常為了改善溶解性和生物利用度，以提供更易于吸收的活性藥物形式。如本文所用，術(shù)語″藥學(xué)上可接受的鹽″指，用生理上容許的酸酸化取代的蒽環(huán)霉素溶液所形成的化合物。合適的生理上容許的酸是有機酸或無機酸，例如鹽酸、硫酸、磷酸、醋酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、馬來酸、甲磺酸、異蘇氨酸、乳酸、葡糖酸、葡糖醛酸、酰胺硫酸、苯甲酸、酒石酸和雙羥萘酸(pamoaic acid)。通常，使用前提供或混合這些活性化合物的鹽形式。
適合注射使用的藥物形式包括無菌水溶液或分散體；包括芝麻油、花生油、丙二醇的制劑；用于當(dāng)場制備無菌注射用溶液或分散體的無菌粉末。在所有情況下，劑型必須是無菌的，必須具有一定程度的流動性易于在注射器中存在。在生產(chǎn)和儲存條件下必須穩(wěn)定，必須在抗微生物如細菌或真菌污染作用的條件下保存。
活性化合物可以中性或鹽形式配制到組合物中。藥學(xué)上可接受的鹽包括酸加成鹽，它們用無機酸如鹽酸或磷酸，或有機酸如醋酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等形成。
本發(fā)明化合物還可配制成含脂質(zhì)體或任何其它脂質(zhì)載體的組合物。脂質(zhì)體包括多泡脂質(zhì)體、多層脂質(zhì)體、單層脂質(zhì)體。
載體還可以是溶劑或分散介質(zhì)，包括(例如)水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液體聚乙二醇等)、其合適的混合物以及植物油。例如，通過使用合適的包衣如卵磷脂來維持適當(dāng)流動性，對于分散體，通過使用表面活性劑來維持所需的粒度。通過各種抗菌劑或抗真菌劑如對羥基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等來防止微生物的作用。在許多情況下，優(yōu)選包含等滲劑，例如糖類或氯化鈉。通過在組合物中使用延遲吸收的試劑如單硬脂酸鋁和明膠，來實現(xiàn)注射用組合物的延遲吸收。
將所需量的活性化合物和上述各種其它成分(如果需要)加入適當(dāng)溶劑中，然后無菌過濾，制備無菌注射用溶液。通常，將各種無菌活性成分加入到含有堿性分散介質(zhì)和所需的上述其它成分的無菌運載體中，制備分散體。在制備無菌注射用溶液的無菌粉末時，優(yōu)選制備方法是真空干燥和冷凍干燥技術(shù)，得到活性成分和來自前述無菌過濾溶液的任何其它所需成分的粉末。
在某些情況下，也可制備適合局部給藥的本發(fā)明治療制劑，例如乳膏和洗劑。這些制劑可用于治療皮膚相關(guān)疾病，如各種肉瘤。
配制成制劑后，可以與劑型相容的方式，以治療有效量給予該溶液。制劑易于以多種劑型給予，例如上述可注射的溶液，也可采用藥物釋放膠囊等。
例如，對于胃腸道外給藥的水溶液，需要時應(yīng)適當(dāng)緩沖該溶液，并用足夠的鹽水或葡萄糖首先使稀釋液成為等滲的。這些具體的水溶液尤其適合靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下和腹腔內(nèi)給藥。在這方面，根據(jù)本說明書，可采用的無菌水性介質(zhì)對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說將是已知的。例如，將一劑量溶解在1mL等滲NaCl溶液中，加入到1000mL皮下輸液中或在輸注的適當(dāng)位點注射(例如參見″Remington′sPharmaceutical Sciences″第15版，第1035-1038和1570-1580頁)。當(dāng)然根據(jù)受治療者的條件，劑量會有些變化。在任何情況下，負責(zé)給藥的人決定各個受治療者的適當(dāng)劑量。
B.口服給藥在某些實施方式中，可口服給予活性化合物。對于那些通常耐受消化酶的蛋白酶解，或已產(chǎn)生耐受的試劑可考慮這種方式。這些化合物包括所有市售片劑形式的化合物或藥物、及其衍生物和類似物。
對于口服給藥，活性化合物可與惰性稀釋劑或與吸收性可食用載體混合，或可包含入硬或軟殼明膠膠囊中，或壓制成片劑，或直接與食物混合給藥。對口服治療給藥，活性化合物可與賦形劑混合，以可攝食片劑、含化片、含片、膠囊、酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙囊劑等形式使用。這種組合物和制劑應(yīng)至少含有0.1％的活性化合物。當(dāng)然，組合物和制劑的百分比可變化，一般適合約為單位重量的2-60％。這些治療用組合物中活性化合物的量應(yīng)使得可得到合適的劑型。
片劑、含片、小丸、膠囊等還可含有以下成分粘合劑，如西黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；賦形劑，如磷酸二鈣；崩解劑，如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、海藻酸等；潤滑劑，如硬脂酸鎂；甜味劑，如蔗糖、乳糖和糖精；芳香劑，如薄荷、冬青油或櫻桃香料。當(dāng)劑量單位形式為膠囊時，除上述類型的物質(zhì)以外，還可含有液體載體?？纱嬖诙喾N其它物質(zhì)作為包衣或用于改進劑量單位的物理形式。例如，可用蟲膠、糖或兩者對片劑、小丸或膠囊包衣。酏劑糖漿可包含活性化合物、作為甜味劑的蔗糖、作為防腐劑的尼泊金甲酯和尼泊金丙酯、染料和矯味劑如櫻桃和橙香料。當(dāng)然，用于制備任何單位劑型的所有物質(zhì)都應(yīng)是藥學(xué)上純的，且在用量上基本無毒。此外，活性化合物也可包含入緩釋制劑和配方中。
配制成制劑后，可以與劑型相容的方式、以治療有效量給予化合物。可以各種劑型，如下面具體實施例中描述的劑型，容易地給予該制劑。
IV.療法現(xiàn)代腫瘤學(xué)的主要挑戰(zhàn)之一是給定腫瘤的有效治療。腫瘤常常耐傳統(tǒng)療法。因此，在尋找有效治療癌癥的方法方面進行了許多努力。一種方法是新藥與傳統(tǒng)療法聯(lián)合應(yīng)用。在本發(fā)明的內(nèi)容中，考慮應(yīng)用本發(fā)明化合物的治療法與外科手術(shù)、化學(xué)治療、放射治療和/或基因療法聯(lián)用。
″有效量”或“治療相關(guān)量”指足以產(chǎn)生治療效果的化合物的量(例如，對可重復(fù)地抑制、降低、減少、抑制或終止癌細胞的生長有效)。在治療對象的情況下，有效量足以產(chǎn)生治療效果。在這里使用的術(shù)語“治療效果”指針對對象的細胞增殖疾病的醫(yī)學(xué)治療，可促進或提高對象健康的任何情況。非完全的例子包括患者壽命延長一段時間；減少或延遲疾病的瘤性發(fā)展；減少過度增殖；減慢腫瘤生長；延緩轉(zhuǎn)移；降低癌細胞、腫瘤細胞或任何其它過度增殖細胞的增殖速率；在任何處理細胞或受處理細胞影響的細胞中誘導(dǎo)凋亡；和/或降低對象的造成患者疾病的痛苦。
通過下面的實施例來說明本發(fā)明優(yōu)選的實施方式。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，按照本發(fā)明技術(shù)的實施例中所公開的技術(shù)是發(fā)明者發(fā)現(xiàn)的，在實施本發(fā)明時起良好的作用，因此認為其構(gòu)成了本發(fā)明的優(yōu)選實施方式。然而，根據(jù)本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，在所公開的具體實施方式
中可進行許多改變，仍然得到相同或類似的結(jié)果。
實施例1合成化合物的一般方法根據(jù)一般步驟制備N-(苯基烷基)肉桂酰胺。將芐胺(3.0g，28mmol)和氰基醋酸乙酯(4.7g，42mmol)的乙腈(20mL)溶液攪拌并回流4小時。該一般步驟中的芐胺可被上述R3中描述了任何其它取代基所取代。真空除去溶劑，得到油，靜置固化。沉淀(EtOAc)得到3.28g(68％)米色粉末，其為N-芐基氰基乙酰胺中間體。將N-芐基氰基甲酰胺(1.3，7.5mmol)、3，4-二羥基苯甲醛(1.1g，8.2mmol)和哌啶(催化，5滴)攪拌回流3小時。急驟色譜法(EtOAc)后，兩次重結(jié)晶(H2O/EtOH)，得到白色粉末產(chǎn)物0.8g(36％)。
實施例2合成化合物使用實施例1所述方法，合成下面的化合物，并列出了關(guān)于合成這些化合物的數(shù)據(jù)。
AG1801的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.49(s，1H，H-3)，7.39(d，2H，J＝8.7Hz，H-3’，5’)，8.12(d，2H，J＝7.5Hz，H-2’，6’)，7.43-7.39(5H，來自芐基的芳族H)，6.75(bs，1H，NH)，4.68(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。.對C17H13N3O3，的元素分析計算，理論值C；66.44，H；4.26，N；13.67，實測值C；65.70，H；4.27，N；13.45。熔點165-166℃。
WP1002的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.23(s，1H，H-3)，7.83(d，2H，J＝8.6Hz，H-2’，6’)，7.39-7.28(5H，來自芐基的芳族H)，6.69(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，6.58(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，4.30(bs，2H，NH2)。
WP1003的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.30(s，1H，H-3)，7.92(d，2H，J＝8.7Hz，H-2’，6’)，7.71(s，1H，NH)，7.66(d，2H，J＝8.4Hz，H-3’，5’)，7.42-7.28(5H，來自芐基的芳族H)，6.70(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，2.22(s，3H，CH3)。
WP1004的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.30(s，1H，H-3)，7.94(d，2H，J＝8.7Hz，H-2’，6’)，7.68(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，7.51(s，1H，NH)，7.43-7.39(5H，來自芐基的芳族H)，6.67(t，1H，J＝5.3Hz，NH)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，2.41(t，2H，J＝7.4Hz，CH2)，1.73(m，2H，CH2)，1.42(m，2H，CH2)，0.96(t，3H，J＝7.4Hz，CH3)。
WP1005的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.31(s，1H，H-3)，7.94(d，2H，J＝8.7Hz，H-2’，6’)，7.68(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，7.41(s，1H，NH)，7.40-7.28(5H，來自芐基的芳族H)，6.66(t，1H，J＝5.7Hz，NH)，5.35(m，2H，CH＝CH)，4.62(d，1H，J＝5.7Hz，CH2)，2.40(t，2H，J＝7.4Hz，CH2)，1.73(m，4H，CH2)，1.75(m，2H，CH2)，1.31(m，22H，CH2)，0.89(t，3H，J＝7.0Hz，CH3)。
WP1009的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)11.88(bs，1H，H-1’)，8.64(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，8.07(s，1H，H-3)，7.36-7.22(m，7H，H-3’，5’和來自芐基的芳2H)，6.41(bs，1H，H-4’)，4.39(d，2H，J＝6.0Hz，CH2)。熔點216-217℃。
WP1010的合成。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz，δ)10.42(bs，1H，NHSO2Me)，8.94(bs，1H，NH)，8.15(s，1H，H-3)，7.98(d，2H，J＝8.5Hz，H-2’，6’)，7.43-7.39(7H，H-3’，5’和來自芐基的芳族H)，4.43(d，1H，J＝5.4Hz，CH2)，3.15(s，3H.Me)。
WP1006的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.35(s，1H，H-3)，7.98(ddd，2H，J＝8.6Hz，J＝5.4Hz，J＝5.1Hz，H-2’，6’)，7.40-7.31(5H，來自芐基的芳族H)，7.20(dd，2H，J＝8.5Hz，J＝11.5Hz，H-3’，5’)，6.71(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)。對C17H13FN2O的元素分析計算，理論值C；72.85，H；4.67，F(xiàn)；6.78，N；9.99，實測值C；72.86，H；4.65，F(xiàn)；6.68，N；9.80。熔點150-151℃。
WP1007的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.33(s，1H，H-3)，8.00(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，7.40-7.27(5H，來自芐基的芳族H)，7.14(dd，2H，J＝7.0Hz，J＝1.9Hz，H-2’，6’)，6.66(bs，1H，NH)，4.63(d，1H，J＝5.8Hz，CH2)。熔點147-149℃。
WP1011的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.31(s，1H，H-3)，7.98(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，7.63(d，2H，J＝8.5Hz，H-2’，6’)，7.40-7.26(5H，來自芐基的芳族H)，6.67(bs，1H，NH)，4.61(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)。熔點177-178℃。
WP1012的合成。1H-NMR(DMSO-d6，300MHz，δ)11.58(bs，1H，H-1’)，8.86(t，1H，J＝5.7Hz，NH)，8.28(s，1H，H-3)，8.25(bs，1H，H-4’)，7.83(dd，1H，J＝8.6Hz，J＝1.7Hz，H-8’)，7.57(d，1H，J＝8.7Hz，H-7’)，7.50(dd，1H，J＝2.8Hz，H-2’)，7.35-7.21(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.60(bs，1H，H-3’)，4.44(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點199-200℃。
WP1013的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)10.93(s，1H，OH)，8.66(d，1H，J＝2.3Hz，H-6)，8.31(s，1H，H-7)，8.26(dd，1H，J＝8.9Hz，J＝2.2Hz，H-2)，7.40-7.29(6H，H-3和來自芐基的芳族H)，6.66(bs，1H，NH)，4.61(d，1H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點158-159℃。
WP1014的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)10.56(s，1H，OH)，8.33(s，1H，H-3)，8.23(d，1H，J＝8.8Hz，H-3’)，7.63(d，2H，J＝2.0Hz，H-6’)，7.51(dd，1H，J＝8.8Hz，J＝2.0Hz，H-2’)，7.40-7.31(5H，來自芐基的芳疾H)，6.71(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝6.0Hz，CH2)。對C17H13N3O4的元素分析計算，理論值C；63.16，H；4.05，N；13.00，實測值C；62.88，H；4.15，N；12.80。熔點171-172℃。
WP1015的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.26(s，1H，H-3)，7.67(dd，1H，J＝7.6Hz，H-5’)，7.60(dd，1H，J＝7.4Hz，J＝1Hz，H-4’)，7.58(dd，1H，J＝7.7Hz，J＝1Hz，H-6’)，7.40-7.26(m，5H，H，來自芐基的芳族H)，6.91(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)。熔點182-183℃。
WP1016的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.50(s，1H，H-3)，8.43(dd，1H，J＝6.8Hz，J＝2.2Hz，H-6’)，7.81(ddd，1H，J＝8.7Hz，J＝5.2Hz，J＝2.0Hz，H-3’)，7.40-7.31(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.96(dd，1H，J＝9.7Hz，J＝8.7Hz，H-4’)，6.68(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。對C17H12FIN2O的元素分析計算，理論值C；50.27，H；2.98，F(xiàn)；4.68，I；31.24，N；6.90，實測值C；50.68，H；3.22，N；6.73，F(xiàn)；4.46，I；30.33。熔點138-139℃。
WP1017的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.50(s，1H，H-3)，8.43(dd，1H，J＝6.8Hz，J＝2.2Hz，H-6’)，7.81(ddd，1H，J＝8.7Hz，J＝5.2Hz，J＝2.0Hz，H-3’)，7.40-7.31(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.96(dd，1H，J＝9.7Hz，J＝8.7Hz，H-4’)，6.68(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點183-184℃。
WP1018的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.38(s，1H，H-3)，8.06(d，2H，J＝8.6Hz，H-2’，6’)，7.93(s，1H，H-2”)，7.53(d，2H，J＝8.6Hz，H-3’，5’)，7.40-7.30(6H，H-5”和來自芐基的芳族H)，7.25(d，1H，J＝4.1Hz，H-4”)，6.77(d，1H，J＝6.2Hz，NH)，4.62(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)。熔點187-188℃。
WP1019的合成。1H-NMR(DMSO-d6400MHz，δ)9.04(t，1H，J＝6.0Hz，NH)，8.29(bs，2H，OH)，8.22(s，1H，H-3)，7.94(d，2H，J＝8.5Hz，H-2’，6’)，7.90(d，2H，J＝8.4Hz，H-3’，4’)，7.37-7.24(m，5H，來自芐基的芳族H)，4.43(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)。
WP1020的合成。1H-NMR(DMSO-d6300MHz，δ)12.87(bs，1H，NH)，12.45(bs，1H，NH)，7.82(s，1H，H-3)，7.49(s，1H，H-3’)，7.26-7.11(m，6H，H-5’和來自芐基的芳族H)，4.37(d，2H，J＝5.5Hz，CH2)。熔點230-231℃。
WP1021的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)12.42(bs，1H，H-1’)，8.83(dd，1H，J＝5.7Hz，NH)，8.49，8.47(2s，1H ea，H-2’，3)，8.01(d，1H，J＝2.0Hz，H-4’)，7.56(d，1H，J＝8.5Hz，H-7’)，7.33-7.32(5H，來自芐基的芳族H)，7.26(dd，1H，J＝8.6Hz，J＝2.1Hz，H-6’)，4.44(d，2H，J＝6.0Hz，CH2)。對C19H14ClN3O的元素分析計算，理論值C；67.96，H；4.20，Cl；10.56，N；12.51，實測值C；68.15，H；4.34，Cl；10.78，N；12.31。熔點229-230℃。
WP1022的合成。1H-NMR(DMSO-d6，300MHz，δ)12.46(bs，1H，H’)，8.87(dd，1H，J＝5.9Hz，NH)，8.50(s，1H，H-3)，8.49(d，1H，J＝2.6Hz，H-2’)，8.17(d，1H，J＝1.7Hz，H-4’)，7.53(d，1H，J＝8.6Hz，H-7’)，7.40(dd，1H，J＝8.5Hz，J＝2Hz，H-6’)，7.36-7.23(5H，來自芐基的芳族H)，4.43(d，2H，J＝5.9Hz，CH2)。熔點224-225℃。
WP1026的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.30(s，1H，H-3)，8.01(s，1H，H-6’)，7.89(d，1H，J＝8.0Hz，H-4’)，7.66(d，1H，J＝8.1Hz，H-2’)，7.40-7.30(m，6H，H-3’和來自芐基的芳族H)，6.68(bs，1H，NH)，4.61(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點150-151℃。
WP1027的合成。1H-NMR(DMSO-d6300MHz，δ)8.81(bs，1H，OH)，8.74(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，7.32-7.09(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.66(d，1H，J＝2.3Hz，H-2’)，6.64(d，1H，J＝8.3Hz，H-5’)，6.50(dd，1H，J＝8.1Hz，J＝2.1Hz，H-6’)，4.32(dd，1H，J＝15.2Hz，J＝6.3Hz，CH2)，4.22(dd，1H，J＝15.2Hz，J＝5.5Hz，CH2)，3.87(dd，1H，J＝7.1Hz，CH)，2.98(dd，1H，J＝13.4Hz，J＝7.3Hz，3-CH2)，2.90(dd，1H，J＝13.4Hz，J＝8.2Hz，3-CH2)。熔點131-132℃。
WP1034的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)8.41(s，1H，H-3)，8.33(d，2H，J＝8.8Hz，H-3’，5’)，8.05(d，2H，J＝8.7Hz，H-2’，6’)，7.41-7.26(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.60(d，1H，J＝7.6Hz，NH)，5.28-5.21(m，1H，CH)，1.62(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點172-173℃。
WP1035的合成。1H-NMR(DMSO-d6，300MHz，δ)11.07(s，1H，OH)，8.90(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，8.10(s，1H，H-3)，7.85(dd，1H，J＝12.5Hz，J＝2.1Hz，H-6’)，7.69(dd，1H，J＝8.5Hz，J＝2.0Hz，H-5’)，7.37-7.22(m，5H，來自芐基的芳族H)，7.12(d，1H，J＝8.8Hz，H-2’)，4.41(d，2H，J＝5.9Hz，CH2)。熔點211-212℃。
WP1036的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)10.71(bs，1H，OH)，8.86(t，1H，J＝6.2Hz，NH)，8.05(s，1H，H-3)，7.96(d，1H，J＝1.9Hz，H-2’)，7.66(d，1H，J＝2.0Hz，H-6’)，7.34-7.21(m，5H，來自芐基的芳族H)，4.40(d，2H，J＝5.8Hz，CH2)，3.85(s，3H，OMe)。熔點206-207℃。
WP1037的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)7.37-7.21(m，5H，來自芐基的芳族H)，7.11(d，1H，J＝11.4Hz，H-3)6.40(bs，1H，NH)，4.56(d，1H，J＝5.8Hz，CH2)，2.10-2.03(m，1H，H-1’)，1.30(ddd，2H，J＝12.8Hz，J＝7.6Hz，J＝5.0Hz，CH2)，0.98(ddd，2H，J＝8.9Hz，J＝7.3Hz，J＝4.6Hz，CH2)。熔點106-107℃。
WP1038的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)10.54(s，1H，OH)，8.27(s，1H，H-3)，8.21(d，1H，J＝8.8Hz，H-5’)，7.60(d，1H，J＝2.2Hz，H-2’)，7.50(dd，1H，J＝8.9Hz，J＝2.0Hz，H-6’)，7.40-7.20(5H，來自芐基的芳族H)，6.60(d，1H，J＝6.5Hz，NH)，5.28-5.21(m，1H，CH)，1.60(d，1H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點178-179℃.。
WP1040的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)10.07，9.54(2s，1H ea，OH)，8.62(d，1H，J＝7.8Hz，NH)，7.92(s，1H，H-3)，7.52(d，1H，J＝2.0Hz，H-2’)，7.37-7.20(5H，來自芐基的芳族H)，7.26(dd，1H，J＝8.3Hz，J＝2.1Hz，H-6’)，6.86(d，1H，J＝8.3Hz，H-5’)，5.06-4.99(m，1H，CH)，1.45(d，1H，J＝7Hz，CH3)。熔點141-142℃。
WP1041的合成。1H-NMR(CDCl3，500MHz，δ)8.20(s，1H，H-3)，7.98(d，2H，J＝9Hz，H-2’，6’)，7.37-7.28(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.69(d，2H，J＝9Hz，H-3’，5’)，6.54(bs，1H，NH)，4.59(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，3.09(s，6H，CH3N)。熔點185-186℃。
WP1042的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.27(s，1H，H-3)，7.69(d，1H，J＝2.1Hz，H-6’)，7.44-7.26(12H，H-2’，5’和來自芐基的芳族Hs)，6.95(d，1H，J＝8.4Hz，H-3’)，6.6(t，1H，J＝5.7Hz，NH)，5.24(s，2H，H-7’)，4.61(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，3.94(s，3H，OMe)。熔點132-133℃。
WP1043的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.72(d，1H.J＝1.7Hz，H-4’)，8.55(s，1H，H-3)，8.15(m，2H，H-5，H-2’)，7.54(ddd，1H，J＝8.2Hz，J＝1.3Hz，H-6’)，7.46(m，2H，H-1’，8’)，7.38-7.29(m，6H，H-7’和來自芐基的芳族H)，6.66(t，1H，J＝5.0Hz，NH)，4.65(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，4.40(q，2H，J＝7.3Hz，H-10’)，1.47(t，3H，H-11’)。熔點182-183℃。
WP1044的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.25(s，1H，H-3)，8.00(s，1H，H-2’)，7.54(d，1H，J＝2Hz，H-5’)，7.39-7.29(5H，來自芐基的芳族H)，7.18(d，1H，J＝2Hz，H-4’)，6.56(bs，1H，NH)，4.59(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點188-189℃。
WP1049的合成。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz，δ)8.75(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，8.26(dd，2H，J＝8.8Hz，J＝1.9Hz，H-3’，5’)，7.84(dd，2H，J＝8.7Hz，J＝2.4Hz，H-2’，6’)，7.59(d，1H，J＝15.9Hz，H-3)，7.38-7.24(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.89(d，1H，J＝15.9Hz，H-2)，4.43(d，2H，J＝5.9Hz，CH2)。熔點193-194℃。
WP1050的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.38(s，1H，H-3)，8.33(d，2H，J＝8.9Hz，H-3’，5’)，8.04(d，2H，J＝8.9Hz，H-2’，6’)，7.41-7.29(5H，來自芐基的芳族H)，6.60(d，1H，J＝8.2Hz，NH)，5.28-5.21(m，1H，CH)，1.62(d，3H，J＝7.0Hz，CH3)。熔點173-174℃。
WP1051的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)10.56(bs，1H，OH)，8.28(s，1H，H-3)，8.21(d，1H，J＝8.8Hz，H-5’)，7.61(d，1H，J＝1.8Hz，H-2’)，7.50(dd，1H，J＝8.8Hz，J＝1.8Hz，H-6’)，7.41-7.30(5H，來自芐基的芳族H)，6.62(d，1H，J＝8.0Hz，NH)，5.27-5.21(m，1H，CH)，1.61(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點176-177℃。
WP1052的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)10.93(s，1H，OH)，8.64(d，1H，J＝2.3Hz，H-2’)，8.25(s，1H，H-3)，8.24(dd，1H，J＝8.9Hz，J＝2.3Hz，H-6’)，7.40-7.28(6H，H-5’和來自芐基的芳族H)，6.54(d，1H，J＝6.4Hz，NH)，5.28-5.21(m，1H，CH)，1.61(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點182-183℃。
WP1053的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.34(s，1H，H-3)，8.57(dd，1H，J＝2.1Hz，H-6’)，7.50(d，1H，J＝7.8Hz，H-2’)，7.40-7.30(10H，來自芐基的芳族H)，7.16(dd，1H，J＝7.5Hz，J＝2.4Hz，H-3’)，6.67(bs，1H，NH)，5.12(s，2H，H-7’)，4.62(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)。熔點190-191℃。
WP1054的合成。1H-NMR(DMSO-d6，500MHz，δ)11.4(s，1H，OH)，8.89(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，8.09(s，1H，H-3)，8.05(d，1H，J＝2.2Hz，H-2’)，7.83(dd，1H，J＝8.7Hz，J＝2.2Hz，H-6’)，7.40-7.22(5H，來自芐基的芳族H)，7.12(d，1H，J＝8.6Hz，H-5’)，4.41(d，1H，J＝5.9Hz，CH2)。熔點213-214℃。
WP1055的合成。1H-NMR(DMSO-d6，300MHz，δ)9.06(t，1H，J＝5.8Hz，NH)，8.77(d，1H，J＝4.6Hz，H-3’)，8.18(s，1H，H-3)，7.99(ddd，1H，J＝7.8Hz，J＝2.2Hz，H-5’)，7.85(d，1H，J＝7.7Hz，H-6’)，7.55(dd，J＝7.5Hz，J＝4.9Hz.H-4’)，7.38-7.23(5H，來自芐基的芳族H)，4.44(d，1H，J＝5.9Hz，CH2)。熔點184-185℃。
WP1060的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.13(dd，2H，J＝8.7Hz，J＝2.4Hz，H-3’，5’)，7.42(d，2H，J＝8.7Hz，H-2’，6’)，7.37-7.17(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.78(bs，1H，NH)，4.69(dd，1H，J＝7.1Hz，J＝4.5Hz，H-2)，4.49(dd，1H，J＝14.7Hz，J＝6.1Hz，CH2)，4.39(dd，1H，J＝14.7Hz，J＝5.7Hz，CH2)，3.55(dd，1H，J＝14.2Hz，J＝4.5Hz H-3)，3.46(dd，1H，J＝14.2Hz，J＝7.1Hz H-3)。熔點129-130℃。
合成了WP1063和WP1064。1H-NMR(DMSO-d6，300MHz，δ)8.23(t，1H，J＝6.1Hz，NH)，8.16(d，2H，J＝8.8Hz，H-3’，5’)，7.64(d，2H，J＝8.6Hz，H-2’，6’)，7.29-7.18(m，5H，來自芐基的芳族H)，5.68(d，1H，J＝6.2Hz，OH)，5.49(d，1H，J＝6.9Hz，OH)，5.07(dd，1H，J＝6.1Hz，J＝2.9Hz，CH)，4.31(d，2H，J＝3.9Hz，CH2)，4.09(dd，1H，J＝7.0Hz，J＝2.9Hz，CH)。熔點160-161℃。
WP1065的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.81(d，1H，J＝4.3Hz，H-3’)，8.30(s，1H，H-3)，7.80(ddd，1H，J＝7.7Hz，J＝0.8Hz，H-5’)，7.61(d，1H，J＝7.7Hz，H-6’)，7.42-7.28(m，6H，H-4’和來自芐基的芳族H)，6.79(d，1H，J＝6.8Hz，NH)，5.30-5.21(m，1H，CH)，1.61(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點153-154℃。
WP1066的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.20(s，1H，H-3)，7.66(dd，1H，J＝7.6Hz，H-5’)，7.59-7.56(m，2H，H-4’，6’)，7.37-7.26(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.80(d，1H，J＝7.0Hz，NH)，5.29-5.20(m，1H，CH)，1.61(d，3H，J＝6.9Hz，CH3)。熔點143-144℃。
WP1067的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.80(s，1H，H-3)，8.27(dd，1H，J＝7.8Hz，J＝0.6Hz，H-3’)，7.80-7.76(m，2H，H-5’，6’)，7.72-7.67(m，1H，H-4’)，7.41-7.26(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.69(bs，1H，NH)，4.62(d，1H，J＝5.7Hz，CH2)。
WP1069的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)9.09(d，1H，J＝2.2Hz，H-3’)，8.80(s，1H，H-3)，8.62(dd，1H，J＝8.5Hz，J＝2.3Hz，H-5’)，7.97(d，1H，J＝8.5Hz，H-6’)，7.42-7.31(m，6H，來自芐基的芳族H)，6.69(bs，1H，NH)，4.63(d，2H，CH2)。
WP1076的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.59(s，1H，H-3)，8.01(d，1H，J＝9.0Hz，H-6’)，7.39-7.31(m，5H，來自芐基的芳族H)，4.77(d，1H，J＝2.7Hz，H-3’)，6.89(dd，1H，J＝8.9Hz，J＝2.7Hz，H-5’)，6.58(bs，1H，NH)，4.60(d，2H，J＝5.7Hz，CH2)，3.13(s，6H，2 CH3)。
WP1074的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.71(dd，1H，J＝1.9Hz，H-2’)，8.44(s，1H，H-3)，8.38(ddd，1H，J＝8.2Hz，J＝2.1Hz，J＝0.8Hz，H-4’)，8.27(d，1H，J＝7.8Hz，H-6’)，7.72(dd，J＝8.0Hz，H-5’)，7.40-7.30(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.71(bs，1H，NH)，4.63(d，1H，J＝5.8Hz，CH2)。
WP1073的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)11.44(bs，1H，OH)，9.07(dd，1H，J＝5.9Hz，NH)，8.59(s，1H，H-3)，8.22(d，1H，J＝9.0Hz，H-3’)，7.38-7.25(m，5H，來自芐基的芳族H)，7.12(d，1H，J＝2.6Hz，H-6’)，7.08(dd，J＝9.1Hz，J＝2.6Hz，H-4’)，4.44(d，2H，J＝5.9Hz，CH2)。
WP1077的合成。1H-NMR(CDCl3，400MHz，δ)8.35(d，1H，J＝2Hz，H-2’)，8.34(s，1H，H-3)，8.09(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.4Hz，H-6’)，7.70(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，7.40-7.26(m，5H，來自芐基的芳族H)，6.68(bs，1H，NH)，4.62(d，2H，J＝5.6Hz，CH2)。
WP1075的合成。1H-NMR(DMSO-d6，400MHz，δ)9.08(dd，1H，J＝6.1Hz，NH)，8.98(d，1H，J＝2.3Hz，H-2’)，4.96(dd，1H，J＝4.8Hz，J＝1.6Hz，H-4’)，8.37(ddd，1H，J＝8.2Hz，J＝2.0Hz，H-6’)，8.26(s，1H，H-3)，7.60(dd，1H，J＝8.2Hz，J＝4.8Hz，H-5’)，7.35-7.23(m，5H，來自芐基的芳族H)，4.43(d，2H，J＝6.0Hz，CH2)。
WP1119的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.20(s，1H，H-3)，7.70-7.62(m，2H，H-4’，H-6’)，7.59-7.56(m，1H，H-5’)，7.14(m，1H，NH)，5.54(d，1H，H-1”，J＝4.97Hz)，4.63(dd，1H，H-3”，J＝2.23，J＝7.94Hz)，4.32(dd，1H，H-2”，J＝2.23，J＝4.97Hz)，4.29-4.26(m 1H，H-4”)，4.03-4.00(m，1H，H-5”)，3.93-3.85(m，1H，H-6”)，3.54-3.45(m，1H，H-6”)，1.51(s，3H CH3”)，1.49(s，3H，CH3”)，1.36(s，3HCH3”)，1.32(s，3H，CH3”)。
WP1126的合成。1H-NMR(DMSO，300MHz，δ)8.42(m，1H，NH)，8.10(s，1H，H-3)，7.97-7.88(m，2H，H-4’，H-6’)，7.82-7.79(m，1H，H-5’)，5.75-6.50(bs，1H，OH)，4.94(d，1H，H-1”，J＝2.66Hz)，4.49-3.77(m，3H，OH)，4.02-3.98(m，1H)，3.67(m，1H)，3.60-3.50(m 2H)，3.40-3.36(m，2H，H-6”)。
WP1127的合成。1H-NMR(CDCl3，300MHz，δ)8.21(s，1H，H-3)，7.72-7.59(m，3H，H-4’，H-5’，H-6’)，6.95-6.91(m，1H，NH)，6.41(m，1H，H-1”)，5.48(m，1H)，5.37(m，2H)，4.34-4.29(m，1H，H-5”)，3.66-3.47(m，2H，H-6”)，2.24(s，3H，CH3)，2.17(s，3H，CH3)，2.04(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)。
實施例3顯示強抗癌作用的化合物在多發(fā)性骨髓瘤(MM)和非Hodgkin’s淋巴瘤(NHL)細胞中IL-6刺激Stat3磷酸化。圖1中，用IL-6(10ng/ml)處理MM細胞(MM-1，8226，8226/S，U266)或NHL(DBr，DB，DS，LP，LR，Mino，MS，F(xiàn)N，Jeko，JM)細胞10分鐘后，制備細胞溶解產(chǎn)物，用免疫印跡(來自細胞信號發(fā)放的抗-pY705-Stat3)評價Stat3酪氨酸磷酸化。IL-6在所有MM細胞系及10種NHL細胞系中的5種(具體地說，DB，DS，LP，F(xiàn)N和JM細胞)中刺激Stat3磷酸化。應(yīng)指出U266細胞組成型表達受外源性加入的IL-6進一步刺激的活化Stat3。
為了研究新合成的AG和WP化合物對細胞因子介導(dǎo)的Stat激活的作用，用2.5、12和25μM濃度的(持續(xù)2小時)AG490或AG1801預(yù)處理多發(fā)性骨髓瘤(MM-1)細胞后，用IL-6或IFN-α刺激10分鐘。用免疫印跡分析Stat3和Stat1的表達和活化。AG1801(12和25μM)可有效抑制IL-6信號發(fā)放而不影響IFN-α信號發(fā)放。AG2019在12和25μM下具有類似的活性。在這些條件下AG490無活性。
為了測定AG1801是否影響MM細胞中的半胱天冬酶活化，如上所述處理OCI-My5細胞后，分析細胞溶解產(chǎn)物的半胱天冬酶活化和PARP分裂。在12.5和25μM，AG1801活化上游和下游半胱天冬酶(即，半胱天冬酶3和半胱天冬酶8)，AG1801增加PARP分裂。12.5和25μM下，AG490在這些細胞的半胱天冬酶活化和PARP分裂上不起作用。
為了測定這些化合物是否影響原始MM集落生長，從MM患者抽取的骨髓經(jīng)磁珠分離法部分純化，用PCR分析免疫球蛋白重鏈基因重排。在存在或不存在所指出的AG化合物的條件下，細胞在甲基纖維素中以集落生長7-10天。測定對照集落的Ig重鏈基因重排，以證實細胞群體的集落性質(zhì)。如圖1所示，AG1801和AG2019完全抑制MM集落形成，而AG490在較高濃度下不大有效。
為了測定化合物對Stat3活化和c-myc蛋白表達的影響，將MM-1、OCI-My5和U266細胞用25μM AG1801、AG490、WP1038、WP1039、WP1051或WP1052培養(yǎng)2小時后，用2ng/ml IL-6刺激細胞10分鐘。制備細胞溶解產(chǎn)物，用免疫印跡分析p-Stat3、Stat3、c-myc和肌動蛋白(作為對照)。Stat3活化和c-myc表達都受到WP和AG化合物的影響。IL-6刺激Stat3活化，但不明顯影響c-myc的表達。
為了測定AG和WP化合物對MM細胞生長/存活的影響，將MM細胞用指定濃度的AG或WP培養(yǎng)72小時后，用MTT試驗測定細胞生長和存活。如圖2A-C所示，具有下調(diào)c-myc和阻斷IL-6介導(dǎo)的Stat3活化的活性的化合物在減少MM細胞系的生長和存活方面是有效的。
為了測定在MM細胞中AG490和AG1801對c-myc表達的暫時作用和作用機制，將MM-1細胞用0、25或50μM的AG490或AG1801培養(yǎng)，第30、60或120分鐘收集。用免疫印跡分析溶解產(chǎn)物的c-myc或作為加蛋白樣對照的肌動蛋白。在所有測定的培養(yǎng)時間內(nèi)，25和50μM的AG1801可快速減少在MM-1細胞中的c-myc表達。相反，在試驗濃度和培養(yǎng)時間內(nèi)，AG490完全不能影響c-myc的表達。采用半定量PCR測定從用25μM AG1801處理30分鐘的細胞中提取的c-myc mRNA的變化。GAPDH PCR用作對照。用上述技術(shù)評價時，AG1801對c-myc mRNA的表達的影響最小。
為了測定AG和WP化合物對MM細胞生長/存活的影響，將MM細胞用指定濃度的AG或WP培養(yǎng)72小時后，用MTT試驗評價細胞生長和存活。本試驗的結(jié)果如圖3A-C所示。
最新的表格總結(jié)了本發(fā)明其它化合物的附加數(shù)據(jù)，如表1所示。下表1中顯示了對于每種化合物，c-myc下調(diào)和Stat3抑制與IC50值的SAR。
表1激酶抑制劑酪氨酸磷酸化抑制劑-生物評價
符號(大于)＝＞(小于)＝＜(未測)＝ND(抑制＝↓(無作用)＝-基于前述SAR研究，合成了兩種新化合物(WP1015和WP1066)，如圖4所示。在多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤和慢性髓細胞性白血病細胞系中評價這些化合物的信號抑制和抗增殖/凋亡性質(zhì)。采用免疫印跡法，在一系列濃度(6、12和25μM)下試驗WP1015、WP1034、AG1801和AG490抑制c-myc表達的能力。WP1015比先前合成的WP化合物在抑制c-myc蛋白的表達上活性大。AG490在高達50μM濃度下，對c-myc表達幾乎沒有或沒有影響。類似地，在MM-1細胞中，WP1015比現(xiàn)有化合物更有效地抑制Stat3磷酸化。
然后合成了WP1066；WP1066中的進一步修飾(與WP1015相比)可改善活性。如上所述采用免疫印跡法評價，WP1066比WP1015在抑制c-myc蛋白的表達上活性大。這些免疫印跡測定了一系列濃度(WP化合物，1.56-25μM)，采用β-肌動蛋白作為對照。也用強的翻譯抑制劑環(huán)己酰亞胺(CHX)處理細胞0-30分鐘，以測定WP1066是否對c-myc蛋白表達介導(dǎo)類似作用。CHX在高得多的濃度下得不到在WP1066處理的細胞中所見的快速減少c-myc的結(jié)果，提示W(wǎng)P1066可能對c-myc翻譯和/或降解兩者有作用。
研究其它細胞類型對用WP1066處理的反應(yīng)。如上所示使用免疫印跡法測定，WP1066可快速下調(diào)LP非Hodgkin′淋巴瘤細胞和MM細胞的c-myc蛋白，表明c-myc下調(diào)活性并不只限于多發(fā)性淋巴瘤細胞。對WP1066試驗多種培養(yǎng)時間(5、15、30、60分鐘)；最短(5分鐘)培養(yǎng)時間時觀察到c-myc大幅度減少。
進行進一步的研究，測定這些新化合物對LP和其它細胞類型的IL-6介導(dǎo)的Stat3活化、c-myc蛋白表達以及抗增殖的劑量和時間依賴性作用。如所示，采用免疫印跡法和一系列濃度(3-25μM的WP化合物)，WP1066和WP1015都在LP細胞中阻斷IL-6介導(dǎo)的Stat3活化并減少c-myc的表達。WP1066的活性稍微優(yōu)于WP1015，顯示該化合物一致改善對多種細胞類型的作用。
還在已知過量表達c-myc的細胞系中研究WP1066的抗增殖/凋亡作用。如圖5所示，WP1066處理可誘導(dǎo)對多發(fā)性骨髓瘤(MM-1)、套細胞淋巴瘤(Mino)和CML(WDT-2、WDT-3、K562、K562-R)細胞系的與劑量有關(guān)的抗腫瘤作用，包括那些耐激酶抑制劑甲磺酸伊馬替尼(K562-R)的細胞系。因此，WP1066在多種癌細胞系中可強效抑制細胞增殖和/或存活，WP1066將用作治療劑。
根據(jù)本發(fā)明，無需過多實驗即可制備和完成本文公開和要求的所有組合物。雖然用優(yōu)選實施方式描述了本發(fā)明組合物和方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白，在不偏離本發(fā)明的概念、精神和范圍情況下，對本文所述組合物、方法的步驟或方法步驟的順序可進行許多改變。更具體地說，應(yīng)明白，某些化學(xué)和生理學(xué)上相關(guān)的試劑可代替本文所述試劑，而達到相同或類似的結(jié)果。所有這些類似的取代和變化對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，認為在如所附權(quán)利要求書所述的本發(fā)明的精神、范圍和概念內(nèi)。
實施例4顯示體內(nèi)強抗癌作用的化合物根據(jù)實施例1所述方法合成化合物WP1129和WP1130。WP1129和WP1130的結(jié)構(gòu)如圖6所示。這些化合物抗MM-1骨髓瘤的IC50值如圖6所示，這些化合物的IC50值甚至要優(yōu)于化合物WP1066。WP1129和WP1130增加的效能支持采用這些化合物來治療細胞增殖疾病如癌癥。
觀察到用WP1066、WP1130和WP1129提高了對c-myc/Stat3的抑制(圖7)。比較這些化合物在MM-1細胞中的Stat3/c-myc抑制活性。發(fā)現(xiàn)WP1066、WP1130和WP1129可強效抑制c-myc/Stat3。
發(fā)現(xiàn)WP1066可減小體內(nèi)腫瘤大小。人A375黑色素瘤接種裸鼠中，腫瘤達到可觸摸大小后用WP1066處理的動物實驗的結(jié)果如圖8所示。采用下面的動物模型來評價化合物的抗腫瘤和抗癌作用第0天，將A375細胞以20×106細胞/ml懸浮在RPMI 1640培養(yǎng)基中。第0天，將0.2ml含A375細胞的該懸浮液注射(s.c.)到6-7周齡的雌性瑞士裸鼠中。第7天，將在0.1ml DMSO/PEG300(50/50)的懸浮液中的40mg/kg WP1066注射(i.p.)到上述裸鼠中，每隔一天注射一次，共8次。每個試驗組5只小鼠，包括運載體(DMSO/PEG300)對照組。每隔一天(QID)動物接受40mg/kg WP1066，共8次注射。第21天對照組達到最大腫瘤負荷，因而終止實驗。WP1066顯示體內(nèi)強抗癌和抗腫瘤作用。這些結(jié)果表明WP1066和本文所述其它化合物可用于治療過度增殖疾病如癌癥。
參考文獻下面的參考文獻在這樣的范圍內(nèi)，即它們提供示例性的方法，或是本文所述內(nèi)容的詳細補充，具體包括在此作為參考。
美國專利6,596,828B2美國專利6,433,018美國專利6,420,338美國專利申請2003/0013748Alas和Bonavida，Clin.Cancer Res.，9(1)316-26，2003.
Arbel等，Am.J.Obstet.Gynecol.，188(5)1283-90，2003.
Bharti等，J.Immunol.，171(7)3863-3871，2003.
Burdelya等，Mol.Cancer Ther.，1(11)893-9，2002.
Catlett-Falcone等，Immunity，10(1)105-15，1999.
Constantin等，Eur.J.Immunol.，28(11)3523-9，1998.
Hallek等，Blood，91(1)3-21，1998.
Hideshima等，J.Biol.Chem.，277(19)16639-47，2002.
Jernberg-Wiklund等，Int.J.Cancer，51(1)116-23，1992.
Kerr等，F(xiàn)EBS Lett.，546(1)1-5，2003.
Kuehl等，Curr.Top Microbiol.Immunol.，224277-82，1997.
Meydan等，Nature，379(6566)645-8，1996.
Remington′s Pharmaceutical Sciences″第15版，第1035-1038和1570-1580頁.
Selvanayagam等，Blood，71(1)30-5，1988.
Verma等，Cancer Metastasis Rev.，22(4)423-34，2003.
權(quán)利要求
1.一種具有以下化學(xué)通式的化合物 式中，R0選自R1和R1-Z1-；而其中，Z1是烷基；和R1選自 上式中，X1、X2、X3和X4各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2；Y1選自鹵素和O2N；和R2選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷芳基、鹵素、氫、OH、NO2、硫醚、胺、SH和NH2；R3選自 上式中，Z3是烷基；和m1＝1、2、3或4；和R4選自CN、取代胺、CH2S-烷基、烷基和CH2N3；上式中，R5和R6各自獨立地選自 單糖、單糖衍生物、芳基和烷芳基；Z選自NH、S和O，和X5和X6各自獨立地選自氫和低級烷基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R4是CN。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R2是氫。
4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R1是烷基。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R1選自
6.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R1是
7.如權(quán)利要求6所述的化合物，其中，X1是鹵素。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物，其中，X1是Br。
9.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，R5選自具有以下結(jié)構(gòu)的烷芳基 具有以下結(jié)構(gòu)的芳基 式中，m＝0、1、2、3、4、5、6或7，和X5和X6各自獨立地選自氫和烷基，以及R7、R8、R9、R10和R11各自獨立地選自氫、鹵素、烷基、烷氧基、OH、三鹵代甲基和NO2。
10.如權(quán)利要求6所述的化合物，其中，R5是烷芳基。
11.如權(quán)利要求10所述的化合物，其中，X1、X2、X3和X4是氫。
12.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，Z1是低級烷基。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物，其中，所述低級烷基是-(CH2)m3-，式中M3＝0、1、2、3或4。
14.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，Z3是低級烷基。
15.如權(quán)利要求14所述的化合物，其中，所述低級烷基是-(CH2)m4-，式中M4＝0、1、2、3或4。
16.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，Y1是OxN。
17.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，Y1是鹵素。
18.如權(quán)利要求17所述的化合物，其中，所述鹵素是Cl。
19.如權(quán)利要求17所述的化合物，其中，所述鹵素是Br。
20.如權(quán)利要求10所述的化合物，其中，R5選自
21.如權(quán)利要求20所述的化合物，其中R2是氫。
22.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，Y1選自O(shè)2N和Cl。
23.如權(quán)利要求22所述的化合物，其中，Y1是O2N。
24.如權(quán)利要求22所述的化合物，其中，Y1是Cl。
25.如權(quán)利要求6所述的化合物，其中，X1是鹵素。
26.如權(quán)利要求25所述的化合物，其中，X1是Br。
27.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
28.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
29.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
30.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
31.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
32.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
33.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
34.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
35.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
36.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
37.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
38.如權(quán)利要求1所述的化合物，具有以下通式
39.一種治療細胞增殖疾病的方法，所述方法包括給予對象治療相關(guān)量的如權(quán)利要求1-38所述的第一化合物。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述對象是哺乳動物。
41.如權(quán)利要求40所述的方法，其特征在于，所述哺乳動物是人。
42.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述第一化合物包含在藥學(xué)上可接受的賦形劑、稀釋劑或運載體中。
43.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述細胞增殖疾病是癌。
44.如權(quán)利要求43所述的方法，其特征在于，所述癌是黑色素瘤、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺癌、肝癌、成視網(wǎng)膜細胞瘤、星形細胞瘤、成膠質(zhì)細胞瘤、白血病、血癌、腦癌、皮膚癌、眼癌、舌癌、膠質(zhì)瘤、成神經(jīng)細胞瘤、頭癌、頸癌、乳房癌、胰腺癌、腎癌、骨癌、睪丸癌、卵巢癌、間皮瘤、宮頸瘤、胃腸癌、淋巴瘤、結(jié)腸癌或膀胱癌。
45.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述細胞增殖疾病是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、骨關(guān)節(jié)炎、平滑肌瘤、腺瘤、脂肪瘤、血管瘤、纖維瘤、血管閉塞、再狹窄、動脈硬化、瘤前病變、原位癌、口腔毛狀白斑或銀屑病。
46.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，在所述對象的細胞中stat3活性降低。
47.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，在所述對象的細胞中c-myc表達減少。
48.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，與治療相關(guān)量的第二化合物聯(lián)合給予所述第一化合物。
49.如權(quán)利要求48所述的方法，其特征在于，所述第二化合物是抗癌化合物。
50.如權(quán)利要求39所述的方法，其特征在于，所述第一化合物與外科手術(shù)、放射療法或基因療法聯(lián)合給予。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療細胞增殖疾病如癌癥的化合物及其應(yīng)用。本發(fā)明化合物作為激酶抑制劑具有明顯效能，可下調(diào)c－myc和抑制癌細胞系的生長和存活。
文檔編號A61K31/277GK1894215SQ200480037045
公開日2007年1月10日 申請日期2004年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月11日
發(fā)明者W·普里伯, N·多納托, M·塔爾帕茲, S·希曼斯基, I·?？颂? A·列維茨基 申請人:德克薩斯州大學(xué)系統(tǒng)董事會