專利名稱：用于治療神經(jīng)變性障礙的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療神經(jīng)變性障礙或減輕神經(jīng)變性障礙的嚴(yán)重性的藥物活性化合物。

背景技術(shù)：
β淀粉樣肽的長形式，特別是Aβ(1-42)在阿爾茨海默病的中心作用已通過多種組織病理學(xué)、基因和生化研究確立。見Selkoe，D J，Physiol.Rev.2001，81741-766，阿爾茨海默病基因、蛋白、和治療；和Younkin S G，JPhysiol Paris.1998，92289-92，Aβ42在阿爾茨海默病中的作用。具體地，已發(fā)現(xiàn)Aβ(1-42)在大腦中的沉積是阿爾茨海默病所有形式的早期和不變的特征。事實(shí)上，這發(fā)生在可能是阿爾茨海默病的診斷以前并且在A-β的較短的基本形式——Aβ(1-40)的沉積以前。見Parvathy S等人，Arch Neurol.2001，582025-32，在含Abetax-40-、Abetax-42-、和Abetax-43-的淀粉樣斑塊和認(rèn)知下降之間的相互關(guān)系。Aβ(1-42)在疾病病因?qū)W的更進(jìn)一步的含義來自與早發(fā)家族性阿爾茨海默病相關(guān)的早老素(γ分泌酶)中的突變一致地導(dǎo)致Aβ(1-42)水平的升高的觀察結(jié)果。見Ishii K等人，Neurosci Lett.1997，22817-20，在有外顯子9缺失和在PS-1基因中的錯(cuò)義點(diǎn)突變(H163R)的早發(fā)家族性阿爾茨海默病大腦中的增加的Aβ42(43)-蝕斑沉積作用。在淀粉樣前體蛋白APP中的另外的突變升高了總體Aβ，且在一些情況下僅升高了Aβ(1-42)。見Kosaka T等人，Neurology，48741-5，βAPP717阿爾茨海默病突變?cè)黾恿搜獫{Aβ42(43)末端β淀粉樣蛋白的百分?jǐn)?shù)。盡管各種APP突變可能影響Aβ沉積的類型、數(shù)量和位置，已發(fā)現(xiàn)在腦實(shí)質(zhì)中沉積的占多數(shù)的和初始的種類是長Aβ(Mann)。見Mann D M等人，Am JPathol.1996，1481257-66，在阿爾茨海默病和遺傳性腦出血的情況下斑塊中的β淀粉樣蛋白Aβ42(43)的占優(yōu)勢的沉積作用與淀粉樣前體蛋白基因突變相關(guān)。
在Aβ的早期沉積物中，當(dāng)大多數(shù)沉積蛋白是無定型或彌漫性斑塊的形式時(shí)，事實(shí)上所有的Aβ是長形式。見Gravina S A等人，J Biol Chem，2707013-6，在阿爾茨海默病大腦中的β淀粉樣蛋白(Aβ)。用對(duì)Aβ40或Aβ42(43)末端形式有特異性的抗體的生化和免疫細(xì)胞化學(xué)分析；IwatsuboT等人，Am J Pathol.1996，1491823-30，β淀粉樣蛋白的全長形式(1-42(43))和氨基末端修飾的及截短的β淀粉樣蛋白42(43)在彌漫性斑塊中的沉積；和Roher A E等人，Proc Natl Acad Sci USA.1993，9010836-40，B淀粉樣蛋白(1-42)是腦血管淀粉樣沉著物的主要成分阿爾茨海默病的病理學(xué)含義。Aβ(1-42)的這些初始的沉積物之后能夠播下Aβ的長形式和短形式兩者進(jìn)一步沉積作用的種子。見Tamaoka A等人，Biochem Biophys ResCommun.1994，205834-42，β淀粉樣蛋白的長尾形式(Aβ 1-42/43)作為在阿爾茨海默病大腦沉積物中的種子分子的生化證據(jù)。
在表達(dá)Aβ的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中，沉積物伴隨著Aβ(1-42)水平的升高，且沉積物的形式與人體疾病中所見的在Aβ(1-42)早期沉積之后沉積Aβ(1-40)相似。見Rockenstein E等人，J Neurosci Res.2001，66573-82，在突變的APP轉(zhuǎn)基因模型中的成熟β淀粉樣蛋白沉積物的早期形成依賴Aβ(1-42)的水平；和Terai K等人，Neuroscience 2001，104299-310，在表達(dá)人體β淀粉樣蛋白前體的轉(zhuǎn)基因小鼠中的β淀粉樣沉積物與阿爾茨海默病中的那些具有相同的特性。相似的沉積形式和時(shí)機(jī)見于Aβ表達(dá)升高且沉積作用加速的唐氏綜合征患者。見Iwatsubo T等人，Ann Neurol.1995，37294-9，β淀粉樣蛋白(Aβ)的沉積作用在唐氏綜合征中Aβ42(43)在Aβ40之前。
因此，Aβ(1-42)的選擇性降低可作為疾病特異性的策略，用于降低Aβ的所有形式的淀粉樣蛋白形成潛力，減緩或停止Aβ新沉積物的形成，抑制可溶性毒性Aβ低聚物的形成，且借此減緩或停止神經(jīng)變性的進(jìn)展。
發(fā)明摘要 如本文所述，本發(fā)明提供了用于治療神經(jīng)變性障礙或減輕其嚴(yán)重性的化合物。本發(fā)明亦提供了治療這類障礙或減輕其嚴(yán)重性的方法，其中所述方法包括給患者施用本發(fā)明的化合物、或其組合物。所述方法用于治療或減輕例如阿爾茨海默病的嚴(yán)重性。



圖1描繪了色譜級(jí)分sat14-9和sat14-10的1H NMR譜。
圖2描繪了色譜級(jí)分sat14-11和sat14-12的1H NMR譜。
圖3描繪了色譜級(jí)分sat15-1和15-2的1H NMR譜。
圖4描繪了色譜級(jí)分sat15-4和sat15-5的1H NMR譜。
圖5描繪了sat15-5的C-18反相HPLC色譜分離的放大圖，其中編號(hào)1至5對(duì)應(yīng)于級(jí)分sat 16-1至16-9的時(shí)間窗。
圖6描繪了相應(yīng)于純度98％的化合物6的級(jí)分sat16-3的1H NMR譜。
圖7描繪了分離方案2的流程圖摘要。
圖8描繪了黑升麻提取物在半制備型HPLC后的HPLC示蹤圖。
圖9描繪了顯示少量脫酰基峰的化合物6的HPLC示蹤圖。
圖10描繪了化合物6的HPLC示蹤圖。
圖11描繪了脫?；衔?的質(zhì)譜圖。
圖12描繪了脫?；衔?的1H NMR譜。
圖13描繪了化合物6的HPLC示蹤圖。
圖14描繪了化合物6的1H NMR譜(CD3OD)。
圖15描繪了化合物6的質(zhì)譜圖。
圖16描繪了按照方案2分離的在205nm檢測的化合物6的HPLC示蹤圖。
圖17描繪了按照方案2分離的在230nm檢測的化合物6的HPLC示蹤圖。圖18描繪了化合物6在ELSD檢測的HPLC。
圖19描繪了按照方案2分離的化合物6的1H NMR譜。
圖20描繪了按照方案2分離的化合物6的質(zhì)譜。
圖21描繪了IP-MS測定的化合物6對(duì)β淀粉樣(1-40)、(1-42)、(1-37)、(1-38)、和(1-39)肽的相對(duì)量的影響。
圖22描繪了IP-MS測定的化合物6對(duì)在野生型和717突變細(xì)胞中的β淀粉樣(1-40)、(1-42)、(1-37)、(1-38)、和(1-39)肽量的影響。
本發(fā)明的某些實(shí)施方案的詳細(xì)描述 1.本發(fā)明的化合物的一般描述 根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了式I化合物或其可藥用鹽
其中 環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的每一個(gè)獨(dú)立地是飽和的、部分不飽和的或芳香的； G是S、CH2、NR、或O； R1和R2彼此獨(dú)立地是鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、或適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； 每個(gè)R獨(dú)立地是氫，任選地取代的C1-6脂族基，或任選有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)，其中 在相同氮原子上的兩個(gè)R任選地與所述氮原子一起形成有1-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； N是0-2； R3、R4、R7、和R8彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； m是0-2； R5是T-C(R’)3、T-C(R’)2C(R”)3、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2，或 當(dāng)R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3時(shí)，則R5上的R6和R’基團(tuán)任選地合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的或芳環(huán)； 每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或任選的取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的、C1-6亞烷基鏈，其中T的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換； 每個(gè)R’和R”獨(dú)立地選自R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； R6是鹵素、R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； R9和R9’彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、OR、SR、或N(R)2、或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； Q是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的、C1-6亞烷基鏈其中Q的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換；且 R10是R，適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)，適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)，適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)，任選有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳香單環(huán)、任選取代的有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的8-10元飽和的、部分不飽和的、或芳香雙環(huán)、可檢測部分、聚合物殘基、肽、或含糖或糖樣部分。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了式I化合物或其可藥用的鹽
其中 環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的每一個(gè)獨(dú)立地是飽和的、部分不飽和的或芳香的； G是S、CH2、NR、或O； R1和R2彼此獨(dú)立地是鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、或適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2，或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； 每個(gè)R獨(dú)立地是氫，任選取代的C1-6脂族基，或具有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的任選取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)，其中 在相同氮原子上的兩個(gè)R任選地與所述氮原子一起形成有1-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； n是0-2； R3、R4、R7、和R8彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； m是0-2； R5是T-C(R’)3、T-C(R’)2C(R”)3、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2，或 當(dāng)R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3時(shí)，則R5上的R6和R’基團(tuán)任選地合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的或芳環(huán)； 每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或任選的取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的、C1-6亞烷基鏈其中T的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換； 每個(gè)R’和R”獨(dú)立地選自R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； R6是鹵素、R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2； R9和R9’是彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、OR、SR、或N(R)2，或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)； Q是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的、C1-6亞烷基鏈其中Q的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換；且 R10是R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)、有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子任選取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳香單環(huán)、任選取代的有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的8-10元飽和的、部分不飽和的、或芳香雙環(huán)、可檢測部分、聚合物殘基、肽、或含糖或糖樣部分， 條件是所述化合物不是


，或。

2.定義 本發(fā)明的化合物包括上文總體描述的那些，并通過實(shí)施方案、分實(shí)施方案和本文公開的類進(jìn)一步地闡述。如本文所使用，將使用以下定義除非另外標(biāo)明。為了本發(fā)明的目的，化學(xué)元素是與元素周期表、CAS版、化學(xué)和物理手冊(cè)第75版中等同的。另外，有機(jī)化學(xué)的一般原理在“有機(jī)化學(xué)”，Thomas Sorrell，University Science Books，Sausalito1999中被描述，和“March′s高等有機(jī)化學(xué)”，第5版，Ed.Smith，M.B.和March，J.，JohnWiley & Sons，New York2001，本文引用其全部內(nèi)容作為參考。
如上文的一般定義，環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的每個(gè)獨(dú)立地是飽和的、部分不飽和的或芳香的。應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的化合物約定是化學(xué)上可行的化合物。因此，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)能理解當(dāng)環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E中任何環(huán)是不飽和時(shí)，則環(huán)上的某些取代基將不存在以便滿足價(jià)鍵的一般原則。例如，如果環(huán)D在環(huán)D和環(huán)E之間的鍵是不飽和的，則R6將不存在?；蛘撸绻h(huán)D在環(huán)D和環(huán)C之間的鍵是不飽和的，則R8和R3將不存在。環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E中的任何環(huán)的飽和和不飽和的所有組合均約定在本發(fā)明中。因此，為了滿足價(jià)鍵的一般原則，取決于環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的任何的飽和和不飽和度，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R9’、QR10的每一個(gè)的必要的存在與不存在被相應(yīng)地約定。
如本文所述，本發(fā)明的化合物可任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，諸如上文一般闡述的，或被本發(fā)明的特別的類、亞類、和種所例舉。應(yīng)該理解術(shù)語“任選被取代的”可與術(shù)語“取代或非取代的”互換使用。一般地，術(shù)語“取代的“，不管前面有無術(shù)語“任選地”，指在指定結(jié)構(gòu)中用特定取代基替換氫基。除非另外標(biāo)明，任選取代的基團(tuán)可在基團(tuán)中的每個(gè)可取代的位置有取代基，且當(dāng)在任意給定結(jié)構(gòu)中的多于一個(gè)位置可被多于一個(gè)選自特定基團(tuán)的取代基取代，取代基在每個(gè)位置可以是相同的或不同的。包含在本發(fā)明中的取代基的組合優(yōu)選地是可導(dǎo)致形成穩(wěn)定的或化學(xué)上可行的化合物的那些。
本文中使用的術(shù)語“穩(wěn)定”，是指在經(jīng)受可允許其生產(chǎn)、檢測、和優(yōu)選地其回收、純化、和本文中公開的一個(gè)或多個(gè)目的的使用的條件下基本上不改變的化合物。在一些實(shí)施方案中，穩(wěn)定的化合物或化學(xué)上可行的化合物是當(dāng)貯存在40℃或更低的溫度下、沒有濕氣或其他化學(xué)反應(yīng)條件下至少一周基本上不變化的化合物。
本文使用的術(shù)語“脂肪族”或“脂族基”，是指完全飽和的或含一個(gè)或多個(gè)不飽和單位的直鏈(即，非支鏈的)或支鏈的、取代的非取代的烴鏈，或完全飽和的或含一個(gè)或多個(gè)不飽和單位的單環(huán)烴或雙環(huán)烴，但不是芳香族的(亦指本文中的“碳環(huán)”或“環(huán)脂肪族的”或“環(huán)烷基”)，其與分子的另一部分有單個(gè)連接點(diǎn)。除非另外指定，脂族基含1-20個(gè)脂肪碳原子。在一些實(shí)施方案中，脂族基含1-6個(gè)脂肪族碳原子。在其他實(shí)施方案中，脂族基含1-4個(gè)脂肪族碳原子。在一些實(shí)施方案中，“環(huán)脂肪族”(或“碳環(huán)”或“環(huán)烷基”)指完全飽和的或含一個(gè)或多個(gè)不飽和單位的單環(huán)C3-C8烴或雙環(huán)C8-C12烴，但不是芳香族的，其與分子的另一部分有單個(gè)連接點(diǎn)，其中在所述的雙環(huán)體系中的任何單個(gè)環(huán)有3-7個(gè)成員。適當(dāng)?shù)闹寤ǖ幌抻?，直鏈的或支鏈的、取代的或非取代的烷基、鏈烯基、炔基基團(tuán)及其雜合的諸如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基或(環(huán)烷基)鏈烯基。在其他實(shí)施方案中，脂族基可有兩個(gè)成對(duì)的氫原子被氧代(二價(jià)羰基氧原子＝O)或成環(huán)取代基諸如-O-(直鏈或支鏈亞烷基)-O-形成縮醛或縮酮替換。
在某些實(shí)施方案中，示例性的脂族基包括但不限于乙炔基、2-丙炔基、1-丙烯基、2-丁烯基、1，3-丁二烯基、2-戊烯基、乙烯基(次乙基)、烯丙基、異丙烯基、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、環(huán)戊基、己基、異己基、仲己基、環(huán)己基、2-甲基戊基、叔己基、2，3-二甲基丁基、3，3-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、和2，3-二甲基丁-2-基。
術(shù)語“鹵代烷基”、“鹵代鏈烯基”和“鹵代烷氧基”是指烷基、鏈烯基或烷氧基，被一個(gè)或多個(gè)鹵素原子取代的情況。術(shù)語“鹵素”是指F、Cl、Br、或I。這些“鹵代烷基”、“鹵代鏈烯基”和“鹵代烷氧基”基團(tuán)可有兩個(gè)或多個(gè)可以是相同的或不同的鹵素取代基或可以在相同的或不同的碳原子上。實(shí)例包括氯甲基、全碘甲基、3，3-二氯丙基、1，3-二氟丁基、三氟甲基、和1-溴-2-氯丙基。
本文中使用的術(shù)語“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)脂肪族”、或“雜環(huán)的”是指其中有一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立選擇的雜原子的非芳香的、單環(huán)、雙環(huán)、或三環(huán)的環(huán)體系。在一些實(shí)施方案中，“雜環(huán)”、“雜環(huán)基”、“雜環(huán)脂肪族”、或“雜環(huán)的”基團(tuán)有三至十四個(gè)環(huán)成員，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)成員是獨(dú)立地選自氧、硫、氮、或磷的雜原子，且體系中的每個(gè)環(huán)含3至7個(gè)環(huán)成員。
本文使用的術(shù)語“雜原子”是指一個(gè)或多個(gè)氧、硫、氮、磷、或硅(包括，氮、硫、磷、或硅的任何氧化形式；任何堿性氮的季銨鹽形式或，雜環(huán)的可取代的氮，例如N(如在3，4-二氫-2H-吡咯基)、NH(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代吡咯烷基中)。
本文使用的術(shù)語“不飽和的”是指有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元的部分。
本文使用的術(shù)語“烷氧基”或“硫烷基”是指如上文所定義的烷基基團(tuán)，通過氧(“烷氧基”)或硫(“硫烷基”)原子與主碳鏈相連。
單獨(dú)使用的術(shù)語“芳基”或作為較大基團(tuán)一部分的“芳烷基”、“芳氧基”或“芳氧基烷基”是指總共有五個(gè)至十四個(gè)環(huán)成員、其中體系中的至少一個(gè)環(huán)是芳香的且其中體系中的每個(gè)環(huán)含3至7個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、雙環(huán)、和三環(huán)體系。術(shù)語“芳基”可與術(shù)語“芳環(huán)”互換使用。術(shù)語“芳基”亦指如下文所定義的雜芳環(huán)體系。
單獨(dú)使用的術(shù)語“雜芳基”或作為較大基團(tuán)的一部分“雜芳烷基”或“雜芳基烷氧基”指總共有五個(gè)至十四個(gè)環(huán)成員、其中體系中至少一個(gè)環(huán)是芳香的、體系中至少一個(gè)環(huán)含有一個(gè)或多個(gè)雜原子、且體系中的每個(gè)環(huán)含3至7個(gè)環(huán)成員的單環(huán)、雙環(huán)和三環(huán)環(huán)體系。術(shù)語“雜芳基”可與術(shù)語“雜芳環(huán)”或術(shù)語“雜芳族的”互換使用。
芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳基氧基烷基等)或雜芳基(包括雜芳基烷基和雜芳基烷氧基等)基團(tuán)可包含一個(gè)或多個(gè)取代基。芳基或雜芳基的不飽和碳原子上適當(dāng)?shù)娜〈x自鹵素、N3、CN、Ro、ORo、SRo、1，2-亞甲基-二氧基、1，2-乙二氧基、任選被Ro取代的苯基(Ph)、任選被Ro取代的-O(Ph)、任選被Ro取代的(CH2)1-2(Ph)、任選被Ro取代的CH＝CH(Ph)、NO2、CN、N(Ro)2、NRoC(O)Ro、NRoC(O)N(Ro)2、NRoCO2Ro、-NRoNRoC(O)Ro、NRoNRoC(O)N(Ro)2、NRoNRoCO2Ro、C(O)C(O)Ro、C(O)CH2C(O)Ro、CO2Ro、C(O)Ro、C(O)N(Ro)2、OC(O)N(Ro)2、S(O)2Ro、SO2N(Ro)2、S(O)Ro、NRoSO2N(Ro)2、NRoSO2Ro、C(＝S)N(Ro)2、C(＝NH)-N(Ro)2、或(CH2)0-2NHC(O)Ro，其中每次獨(dú)立出現(xiàn)的Ro選自氫、任選取代的C1-6脂族基、未取代的5-6元雜芳基或雜環(huán)基、苯基、O(Ph)、或CH2(Ph)，或盡管有以上定義，在相同取代基或不同取代基上的兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro，與每個(gè)Ro基團(tuán)結(jié)合的原子合在一起形成有0至4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或雜芳基環(huán)。在Ro的脂族基上的任選的取代基選自N3、CN、NH2、NH(C1-4脂族基)、N(C1-4脂族基)2、鹵素、C1-4脂族基、OH、O(C1-4脂族基)、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基)、O(鹵代C1-4脂族基)、或鹵代C1-4脂族基，其中上述的Ro的C1-4脂族基的每個(gè)是未取代的。
脂肪族或雜脂肪族基或非芳香雜環(huán)的環(huán)可包含一個(gè)或多個(gè)取代基。脂肪族或雜脂族基或非芳香雜環(huán)的環(huán)上的飽和碳上的適當(dāng)?shù)娜〈x自以上為芳基或雜芳基的不飽和碳列舉的那些，還另外包括＝O、＝S、＝NNHR*、＝NN(R*)2、＝NNHC(O)R*、＝NNHCO2(烷基)、＝NNHSO2(烷基)、或＝NR*，其中每個(gè)R*獨(dú)立地選自氫或任選取代的C1-6脂族基。R*的脂族基上的任選取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基)、N(C1-4脂族基)2、鹵素、C1-4脂族基、OH、O(C1-4脂族基)、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基)、O(鹵代C1-4脂族基)、或鹵代(C1-4脂族基)，其中上述R*的C1-4脂族基基團(tuán)的每個(gè)是未取代的。
非芳香雜環(huán)的氮上的任選取代基選自R+、N(R+)2、C(O)R+、CO2R+、C(O)C(O)R+、C(O)CH2C(O)R+、SO2R+、SO2N(R+)2、C(＝S)N(R+)2、C(＝NH)-N(R+)2、或NR+SO2R+，其中R+是氫、任選取代的C1-6脂族基、任選取代的苯基、任選取代的O(Ph)、任選取代的CH2(Ph)、任選取代的(CH2)1-2(Ph)、任選取代的CH＝CH(Ph)、或有一至四個(gè)獨(dú)立地選自氧、氮、或硫的雜原子的未取代的5-6元雜芳環(huán)或雜環(huán)，或雖然有以上定義，相同取代基或不同取代基上的兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的R+，每個(gè)R+基團(tuán)相連接的原子合在一起形成有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或雜芳基環(huán)。R+的脂族基或苯環(huán)上的任選取代基選自NH2、NH(C1-4脂族基)、N(C1-4脂族基)2、鹵素、C1-4脂族基、OH、O(C1-4脂族基)、NO2、CN、CO2H、CO2(C1-4脂族基)、O(鹵代C1-4脂族基)或鹵代(C1-4脂族基)，其中上述的R+的C1-4脂族基的每個(gè)是未取代的。
如上文的詳述，在一些實(shí)施方案中，兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或R+，或本文中任何其他有相似定義的變體)，與每個(gè)變體連接的原子合在一起形成有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、或雜芳基環(huán)。當(dāng)兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或R+，或本文中任何其他有相似定義的變體)與每個(gè)變體連接的原子合在一起形成的可作示例的環(huán)包括但不限于以下情況a)兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或R+，或本文中任何其他有相似定義的變體)與相同的原子連接且與該原子合在一起形成環(huán)，例如N(Ro)2，其中兩次出現(xiàn)的Ro與氮原子合在一起形成哌啶-1-基、哌嗪-1-基、嗎啉-4-基基團(tuán)；和b)或兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或R+，或本文中任何其他有相似定義的變量)與不同的原子連接并與這些原子的兩個(gè)一起形成環(huán)，例如被ORo兩次出現(xiàn)取代的苯基基團(tuán)

這些兩次出現(xiàn)的Ro與它們連接的氧原子合在一起形成融合的6-元含氧環(huán)

。應(yīng)理解當(dāng)兩個(gè)獨(dú)立出現(xiàn)的Ro(或R+，或本文中任何其他有相似定義的變體)與每個(gè)變量連接的原子合在一起可形成各種其他環(huán)，以上詳細(xì)的實(shí)例不是為了限制。
如本文使用，術(shù)語“可檢測的部分”與術(shù)語“標(biāo)記物”可互換使用，并且與能被檢測的任何部分相關(guān)，例如主指示物和副指示物。主標(biāo)記物，諸如放射性同位素(例如，32P、33P、35S、或14C)、質(zhì)量標(biāo)記物、和熒光標(biāo)記物是無需進(jìn)一步修飾可被檢測的信號(hào)產(chǎn)生指示基團(tuán)。
本文使用的術(shù)語“副標(biāo)記物”是指需要用于產(chǎn)生可檢測信號(hào)的第二個(gè)中間體存在的諸如生物素和各種蛋白抗原的部分。對(duì)于生物素，第二個(gè)中間體可包括抗生蛋白鏈菌素-酶結(jié)合物。對(duì)于抗原標(biāo)記物，第二個(gè)中間體可包括抗體-酶結(jié)合物。一些熒光基團(tuán)充當(dāng)副標(biāo)記物因?yàn)樗鼈冊(cè)诜禽椛錈晒夤舱衲芰哭D(zhuǎn)移(FRET)過程中轉(zhuǎn)移能量給其他基團(tuán)，并且第二個(gè)基團(tuán)產(chǎn)生檢測信號(hào)。
本文使用的術(shù)語“熒光標(biāo)記物”、“熒光染料”和“熒光基團(tuán)”是指在指定的激發(fā)波長下吸收光能并在不同的波長下發(fā)出光能的部分。熒光標(biāo)記物的實(shí)例包括但不限于Alexa Fluor染料(Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 532、Alexa Fluor 546、Alexa Fluor 568、Alexa Fluor 594、AlexaFluor 633、Alexa Fluor 660和Alexa Fluor 680)、AMCA、AMCA-S、BODIPY染料(BODIPY FL、BODIPY R6G、BODIPY TMR、BODIPY TR、BODIPY 530/550、BODIPY 558/568、BODIPY 564/570、BODIPY 576/589、BODIPY 581/591、BODIPY 630/650、BODIPY 650/665)、羧基羅丹明6G、羧基-X-羅丹明(ROX)、Cascade藍(lán)、Cascade黃、香豆素343、花青染料(Cy3、Cy5、Cy3.5和Cy5.5)、丹酰、Dapoxyl、二烷基氨基香豆素、4′，5′-二氯-2′，7′-二甲氧基-熒光素、DM-NERF、曙紅、赤蘚紅、熒光素、FAM、羥基香豆素、IR染料(IRD 40、IRD 700、和IRD 800)、JOE、麗絲胺若丹明B、Marina藍(lán)、甲氧香豆素、萘并熒光素、俄勒岡綠488、俄勒岡綠500、俄勒岡綠514、太平洋藍(lán)、PyMPO、芘、若丹明B、若丹明6G、若丹明綠、若丹明紅、Rhodol綠、2′，4′，5′，7′-四-溴代砜-熒光素、四甲基-若丹明(TMR)、羧基四甲基若丹明(TAMRA)、德克薩斯紅、德克薩斯紅-X。
本文使用的術(shù)語“質(zhì)量標(biāo)記物”是指使用質(zhì)譜(MS)檢測技術(shù)因其質(zhì)量特點(diǎn)能夠被獨(dú)特地檢測的部分。質(zhì)量標(biāo)記物的實(shí)例包括電泳釋放標(biāo)記物諸如N-[3-[4′-[(對(duì)-甲氧基四氟芐基)氧基]苯基]-3-甲基甘油?；鵠六氫異煙酸、4′-[2，3，5，6-四氟-4-(五氟苯氧基)甲基苯乙酮，及其衍生物。這些質(zhì)量標(biāo)記物的合成和使用描述于美國專利4,650,750、4,709,016、5,360,8191、5,516,931、5,602,273、5,604,104、5,610,020、和5,650,270中。質(zhì)量標(biāo)記物的其他實(shí)例包括但不限于核苷酸、二脫氧核苷酸、不同長度和堿基組成的寡核苷酸、寡肽、寡糖、和其他不同長度和單體組成的合成聚合物。適當(dāng)質(zhì)量范圍(100-2000道爾頓)的中性的和帶電荷的(生物分子或合成化合物)的各種有機(jī)分子亦可用作質(zhì)量標(biāo)記物。
本文使用的術(shù)語“底物”是指與可被連接的本發(fā)明的化合物的功能化末端基團(tuán)連接的任何材料或大分子復(fù)合物。常用底物的實(shí)例包括但不限于玻璃表面、硅膠表面、塑料表面、金屬表面、含金屬或化學(xué)包衣的表面、膜(例如，尼龍、聚砜、或硅膠)、微珠(例如，膠乳、聚苯乙烯、或其他聚合物)、多孔聚合物基質(zhì)(例如，聚丙烯酰胺凝膠，多糖、或聚甲基丙烯酸酯)、大分子復(fù)合物(例如，蛋白質(zhì)、多糖)。
除非另外說明，本文描繪的結(jié)構(gòu)亦指包括結(jié)構(gòu)的所有異構(gòu)體(例如，對(duì)映的、非對(duì)映的、和幾何的(或構(gòu)象的))形式，例如，每個(gè)不對(duì)稱中心的R和S構(gòu)型，雙鍵異構(gòu)體的(Z)型或(E)型，構(gòu)象異構(gòu)體的(Z)型或(E)型。因此，本化合物的單個(gè)立體化學(xué)異構(gòu)體以及對(duì)映、非對(duì)映、和幾何(或構(gòu)象)異構(gòu)體混合物在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
除非另外說明，本發(fā)明化合物的所有互變形式在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
另外，除非另外說明，本文描繪的結(jié)構(gòu)亦指包括僅在一種或多種富集同位素原子存在上不同的化合物。例如，具有現(xiàn)有結(jié)構(gòu)的化合物只是氫被氘或氚替換，或碳被富含13C或14C的碳替換在本發(fā)明的范圍內(nèi)。這類的化合物用于例如作為生物分析的分析工具或探針。
3.示例性化合物的說明 如上文的總體定義，式I的G部分是S、CH2、NR、或O。在某些實(shí)施方案中，式I的G部分是O。
如上文的總體定義，式I的的R1和R2各自獨(dú)立地是鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)NR2，或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)。在某些實(shí)施方案中，式I的的R1和R2各自獨(dú)立地是R或OR。在其他實(shí)施方案中，式I的的R1和R2各自獨(dú)立地是R，其中R是氫或任選地取代的C1-6脂族基。根據(jù)本發(fā)明的其他方面，式I的R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-6元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)。本發(fā)明的又一方面提供了式I化合物，其中R1和R2合在一起形成3-6元飽和碳環(huán)。在其他實(shí)施方案中，式I的R1和R2合在一起形成環(huán)丙基環(huán)。
在某些實(shí)施方案中，式I的n是0-1。在其他實(shí)施方案中，式I的n是1。
如上文的總體定義，式I的R5基團(tuán)是R5，是T-C(R’)3、T-C(R’)2C(R”)3、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2，其中每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的C1-6亞烷基鏈，其中T的最多兩個(gè)亞甲基單位任選且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換。在某些實(shí)施方案中，每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或直鏈或支鏈的C1-4亞烷基鏈，其中T的一個(gè)亞甲基單位任選地被-O-、-N(R)-、或-S-替換。在其他實(shí)施方案中，每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或直鏈或支鏈的C1-4亞烷基鏈。在其他實(shí)施方案中，每個(gè)T是價(jià)鍵。
當(dāng)式I的R5基團(tuán)是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3時(shí)，每個(gè)R’和R”獨(dú)立地選自R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2。在某些實(shí)施方案中，每個(gè)R’和R”獨(dú)立地是R、OR、O(C)OR、SR、或N(R)2。在其他實(shí)施方案中，每個(gè)R’和R”獨(dú)立地是R、OR或O(C)OR。示例性的R’和R”基團(tuán)包括氫、CH3、OH和OC(O)CH3。
如上文的總體定義，當(dāng)R5是T-C(R’)3或T-CH(R’)C(R”)3時(shí)，則R5上的R6和R’基團(tuán)任選地合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的或芳環(huán)。在某些實(shí)施方案中，R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3，且R5上的R6和R’基團(tuán)合在一起形成有1-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的5-7元飽和環(huán)。在其他實(shí)施方案中，R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3，且R5上的R6和R’基團(tuán)合在一起形成有1個(gè)氧原子的6元飽和環(huán)。這些化合物，當(dāng)T是價(jià)鍵時(shí)，當(dāng)R5是T-C(R′)3時(shí)是式IIa，當(dāng)R5是T-C(R′)2C(R″)3時(shí)是式IIb
其中R’、R”、R1、R2、R3、R4、R7、R8、R9、R9’、Q和R10的每個(gè)如上文的一般定義，且在上文和此處定義的類和亞類中。
如上文的一般定義，式I的R5基團(tuán)尤其是適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)、或適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)。羥基保護(hù)基團(tuán)在本領(lǐng)域上是熟知的且在有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protecting Groups in Organic Synthesis)，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999中有詳細(xì)描述，本文整體引用作為參考。式I的R5基團(tuán)的適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于，酯、烯丙基醚、醚、甲硅烷基醚、烷基醚、芳基烷基醚、和烷氧基烷基醚。這類酯的實(shí)例包括甲酸酯、乙酸酯、碳酸酯、和磺酸酯。具體的實(shí)例包括甲酸酯、苯甲?；姿狨?、氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、對(duì)-氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯、4，4-(亞乙基二硫代)戊酸酯、新戊酯(三甲基乙?；?、巴豆酸酯、4-甲氧基-巴豆酸酯、苯甲酸酯、對(duì)-芐基苯甲酸酯、2，4，6-三甲基苯甲酸酯、碳酸酯諸如甲基、9-芴基甲酯、乙基、2，2，2-三氯乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(苯基磺?；?乙基、乙烯基、烯丙基、和對(duì)-硝基芐基。這類甲硅烷基醚的實(shí)例包括三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、和其他三烷基甲硅烷基醚。烷基醚包括甲基、芐基、對(duì)甲氧基芐基、3，4-二甲氧基芐基、三苯甲基、叔丁基、烯丙基、烯丙基氧基羰基醚或衍生物。烷氧基烷基醚包括縮醛諸如甲氧基甲基、甲基硫甲基、(2-甲氧基乙氧基)甲基、芐基氧基甲基、β-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、和四氫吡喃基醚。芳基烷基醚的實(shí)例包括芐基、對(duì)甲氧基芐基(MPM)、3，4-二甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對(duì)硝基芐基、對(duì)鹵代芐基、2，6-二氯芐基、對(duì)-氰基芐基、2-和4-甲基吡啶基醚。
巰基保護(hù)基團(tuán)在本領(lǐng)域是熟知的，且在有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protecting Groups in Organic Synthesis)，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999中有詳細(xì)描述，本文整體引用作為參考。式I的R5部分的適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)包括但不限于，二硫化物、硫醚、甲硅烷基硫醚、硫酯、硫代碳酸酯、硫代氨基甲酸酯等。這類基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于烷基硫醚、芐基和取代的芐基硫醚、三苯基甲基硫醚、三氯乙氧基羰基醚，以上只是一小部分。
根據(jù)本發(fā)明的其他方面，式I的R5部分是在中性條件下例如用AgNO3、HgCl2等可離去的巰基保護(hù)基團(tuán)。其他中性條件包括使用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原。適當(dāng)?shù)倪€原劑包括二硫蘇糖醇(DTT)、巰基乙醇、連二亞硫酸鹽、還原型谷胱甘肽、還原型谷氧還蛋白、還原型硫氧還蛋白、取代的磷化氫諸如三羧基乙基膦(TCEP)、和任何其他肽或有機(jī)基礎(chǔ)的還原劑，或其他本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的其他試劑。根據(jù)本發(fā)明的其他方面，式I的R5部分是“可光裂解的”巰基保護(hù)基團(tuán)。這類適當(dāng)?shù)膸€基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域已知的并且包括但不限于，硝基芐基基團(tuán)、四氫吡喃基(THP)基團(tuán)、三苯甲基基團(tuán)、-CH2SCH3(MTM)、二甲基甲氧基甲基、或-CH2-S-S-吡啶-2-基。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到如本文所述的許多適當(dāng)?shù)牧u基保護(hù)基團(tuán)亦適合作為巰基保護(hù)基團(tuán)。
在某些實(shí)施方案中，式I的R5基團(tuán)是適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)。氨基保護(hù)基團(tuán)是本技術(shù)領(lǐng)域熟知的且在有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protecting Groups inOrganic Synthesis)，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley& Sons，1999中有詳細(xì)描述，本文整體引用作為參考。所述的R5部分的適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)還包括但不限于，芳烷基胺、氨基甲酸酯、環(huán)亞胺、烯丙基胺、酰胺等。這類基團(tuán)的實(shí)例包括叔丁氧基羰基(BOC)、乙氧基羰基、甲氧基羰基、三氯乙基氧基羰基、烯丙基氧基羰基(Alloc)、芐基氧代羰基(CBZ)、烯丙基、鄰苯二甲酰亞胺、芐基(Bn)、芴甲基羰基(Fmoc)、甲?；⒁阴；?、氯乙?；⒍纫阴；⑷纫阴；?、苯基乙?；⑷阴；⒈郊柞；?。在某些實(shí)施方案中，R5部分的氨基保護(hù)基團(tuán)是鄰苯二甲酰亞胺。在其他實(shí)施方案中，R5部分的氨基保護(hù)基團(tuán)是叔丁氧基羰基(BOC)基團(tuán)。
如上文的一般定義，式I的Q基團(tuán)是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈的、飽和的或不飽和的C1-4亞烷基鏈，其中Q的最多兩個(gè)亞甲基單位任選且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換。在某些實(shí)施方案中，Q是任選取代的直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的C1-2亞烷基鏈，其中Q的最多一個(gè)亞甲基單位任選地被-O-、-N(R)-或-S-替換。在其他實(shí)施方案中，Q是-O-。
如上文的一般定義，式I的R10基團(tuán)是R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)、任選取代的有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳香單環(huán)，任選取代的有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的8-10元飽和的、部分不飽和的或芳香雙環(huán)，可檢測部分、聚合物殘基、肽、或含糖基團(tuán)、或糖類基團(tuán)。
在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是含糖基團(tuán)。這類含糖基團(tuán)是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的，且在“糖生物學(xué)基礎(chǔ)(Essentials ofGlycobiology)”中有詳細(xì)描述，Varki，A等人編輯，冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社，紐約冷泉港，2002。在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是糖苷。示例性的R10基團(tuán)包括阿拉伯吡喃糖苷和木吡喃糖苷。在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是木吡喃糖苷。在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是阿拉伯吡喃糖苷。在其他實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是

根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，式I的R10基團(tuán)是

另一個(gè)實(shí)施方案提供了式I化合物，其中R10是
根據(jù)本發(fā)明的其他方面，式I的R10基團(tuán)是糖類似物。這類糖類似物是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的并在“糖生物學(xué)基礎(chǔ)”(Essentials ofGlycobiology)中有詳細(xì)描述。例如，本發(fā)明約定的糖類似基團(tuán)包括環(huán)多醇等。在某些實(shí)施方案中，R10是環(huán)多醇部分，其中所述的按IUPAC規(guī)定定義的環(huán)多醇是在三個(gè)或多個(gè)環(huán)原子的每個(gè)含一個(gè)羥基基團(tuán)的環(huán)烷。在其他實(shí)施方案中，這些環(huán)多醇部分包括肌醇諸如鯊肌醇。
另外，式I的R10基團(tuán)的適當(dāng)?shù)奶菢硬糠职o環(huán)糖基團(tuán)。這類基團(tuán)包括直鏈alkytols和赤蘚糖醇，這里提到的只是一少部分。應(yīng)當(dāng)理解糖基團(tuán)可以環(huán)狀或非環(huán)狀形式存在。因此，糖基團(tuán)的非環(huán)狀形式亦約定在本發(fā)明中作為適當(dāng)?shù)氖絀的R10基團(tuán)的糖樣部分。
在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是可檢測的部分。在其他實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是如本文、上文定義的熒光標(biāo)記物、熒光染料、或熒光基團(tuán)。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，式I的R10基團(tuán)是聚合物殘基。聚合物殘基是本領(lǐng)域熟知的并在“蛋白質(zhì)結(jié)合和交聯(lián)化學(xué)”(Chemistry of ProteinConjugation and Cross-Linking)中有詳述，Shan S.Wong，CRC Press.Boca Raton，佛羅里達(dá)州，1991。式I的R10基團(tuán)適當(dāng)?shù)木酆衔餁埢ň?環(huán)氧烷)、諸如PEG、聚(氨基酸)、和能與本發(fā)明化合物結(jié)合的其他聚合物殘基。
如上文的一般定義，式I的R10基團(tuán)尤其是適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)。羥基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域熟知的并在有機(jī)合成的保護(hù)基團(tuán)(Protecting Groups in Organic Synthesis)中有詳細(xì)描述，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999，本文整體引用作為參考。式I的R10基團(tuán)適當(dāng)?shù)牧u基保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于，酯、烯丙基醚、醚、甲硅烷基醚、烷基醚、芳烷基醚、和烷氧基烷基醚。這類酯的實(shí)例包括甲酸酯、乙酸酯、碳酸酯、和磺酸酯。具體的實(shí)例包括甲酸酯、苯甲?；姿狨ァ⒙纫宜狨?、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、對(duì)氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯、4，4-(亞乙基二硫)戊酸酯、新戊酯(三甲基乙?；?、巴豆酸酯、4-甲氧基-巴豆酸酯、苯甲酸酯、對(duì)-芐基苯甲酸酯、2，4，6-三甲基苯甲酸酯、碳酸酯諸如甲基、9-芴基甲基、乙基、2，2，2-三氯乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(苯基磺?；?乙基、乙烯基、烯丙基、和對(duì)-硝基芐基。這些甲硅烷基醚的實(shí)例包括三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、和其他三烷基甲硅烷基醚。烷基醚包括甲基、芐基、對(duì)甲氧基芐基、3，4-二甲氧基芐基、三苯甲基、叔丁基、烯丙基、和烯丙基氧基羰基醚或衍生物。烷氧基烷基醚包括縮醛諸如甲氧基甲基、甲基硫甲基、(2-甲氧基乙氧基)甲基、芐氧基甲基、β-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基、和四氫吡喃基醚。芳基烷基醚的實(shí)例包括芐基、對(duì)甲氧基芐基(MPM)、3，4-二甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對(duì)硝基芐基、對(duì)鹵代芐基、2，6-二氯芐基、對(duì)-氰基芐基、2-和4-甲基吡啶基醚。
巰基保護(hù)基團(tuán)在本領(lǐng)域是熟知的，且在有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protecting Groups in Organic Synthesis)中有詳細(xì)描述，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999，本文整體引用作為參考。式I的R10部分的適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)包括但不限于二硫化物、硫醚、甲硅烷基硫醚、硫酯、硫代碳酸酯、硫代氨基甲酸酯等。這些基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于烷基硫醚、芐基和取代的芐基硫醚、三苯基甲基硫醚、三氯乙氧基羰基醚，提到的只是一小部分。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，式I的R10部分是在中性條件下例如用AgNO3、HgCl2等可離去的巰基保護(hù)基團(tuán)。其他中性條件包括使用適當(dāng)?shù)倪€原劑還原。適當(dāng)?shù)倪€原劑包括二硫蘇糖醇(DTT)、巰基乙醇、連二亞硫酸鹽、還原型谷胱甘肽、還原型谷氧還蛋白、還原型硫氧還蛋白、取代的磷化氫諸如三羧乙基膦(TCEP)、和任何其他肽或有機(jī)基礎(chǔ)的還原劑，或其他本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的其他試劑。根據(jù)本發(fā)明的其他方面，式I的R10部分是“可光裂解的”巰基保護(hù)基團(tuán)。這些適當(dāng)?shù)膸€基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域熟知的并且包括但不限于，硝基芐基基團(tuán)、四氫吡喃基(THP)基團(tuán)、三苯甲基基團(tuán)、-CH2SCH3(MTM)、二甲基甲氧基甲基、或-CH2-S-S-吡啶-2-基。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到本文所述的許多適當(dāng)?shù)牧u基保護(hù)基團(tuán)亦適合于巰基保護(hù)基團(tuán)。
在某些實(shí)施方案中，式I的R10基團(tuán)是適當(dāng)飽和的氨基基團(tuán)。氨基保護(hù)基團(tuán)是本領(lǐng)域熟知的且在有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)(Protecting GroupsinOrganic Synthesis)中有詳細(xì)描述，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999，本文整體引用作為參考。所述的R10部分的適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)還包括但不限于，芳烷基胺、氨基甲酸酯、環(huán)亞胺、烯丙基胺、酰胺等。這些基團(tuán)的實(shí)例包括叔丁氧基羰基(BOC)、乙氧基羰基、甲氧基羰基、三氯乙氧基羰基、烯丙基氧基羰基(Alloc)、芐基氧代羰基(CBZ)、烯丙基、鄰苯二甲酰亞胺、芐基(Bn)、芴甲基羰基(Fmoc)、甲?；?、乙酰基、氯乙?；?、二氯乙酰基、三氯乙?；?、苯基乙?；⑷阴；⒈郊柞；?。在某些實(shí)施方案中，R10部分的氨基保護(hù)基團(tuán)是鄰苯二甲酰亞胺基。在其他實(shí)施方案中，R10部分的氨基保護(hù)基團(tuán)是叔丁氧基羰基(BOC)基團(tuán)。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了式I化合物，其中所述化合物不是以下的任意一個(gè)、兩個(gè)、或全部三個(gè)并包括其每個(gè)的立體異構(gòu)體

或
如上文的一般描述，本發(fā)明提供了式I化合物或其可藥用鹽，
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的類和亞類中。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了有如式I-a中描繪的立體化學(xué)的式I化合物或其可藥用的鹽，
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式I的R1和R2基團(tuán)合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)。在其他實(shí)施方案中，式I的R1和R2基團(tuán)合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-6元飽和環(huán)。在其他實(shí)施方案中，式I的R1和R2基團(tuán)合在一起形成3-6元飽和碳環(huán)。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了式I-b的化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了有式I-c化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
如上文的一般定義，環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的每個(gè)獨(dú)立地是飽和的、部分不飽和的或芳香的。在某些實(shí)施方案中，環(huán)B是不飽和的，且無R1和R2，因此形成式II化合物或其可藥用的鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式II的n基團(tuán)是0-1且式II的G基團(tuán)是氧。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了式II-a化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式II-a的n基團(tuán)是0-1且式II-a的G基團(tuán)是氧。
在其他實(shí)施方案中，環(huán)B和環(huán)D兩者都是不飽和的，且R1、R2和R6不存在，因此形成式III化合物或其可藥用鹽，
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式III的n基團(tuán)是0-1且式III的G基團(tuán)是氧。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了式IV化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。如本文所用，

表示單鍵或雙鍵。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解當(dāng)

表示雙鍵時(shí)，則R6不存在。相反地，當(dāng)

表示單鍵時(shí)，則R6存在。因此，在某些實(shí)施方案中，

表示雙鍵且R6不存在。在某些實(shí)施方案中，

表示單鍵，且R6如上文所定義。
根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供了式IV-a的化合物或起可藥用鹽，
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式IV-a的G基團(tuán)是氧。在其他實(shí)施方案中，式IV-a的R4基團(tuán)是R、或適當(dāng)飽和的羥基基團(tuán)OR。在其他實(shí)施方案中，式IV-a的R4基團(tuán)是R。
本發(fā)明的另一方面涉及式IV-b化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式IV-b的R1和R2基團(tuán)合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的或芳環(huán)。在其他實(shí)施方案中，式IV-b的R1和R2基團(tuán)合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-6元飽和環(huán)。在其他實(shí)施方案中，式IV-b的R1和R2基團(tuán)合在一起形成3-6元飽和碳環(huán)。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了式IV-c化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式IV-c的R7基團(tuán)是-OH。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了IV-d化合物或其可藥用鹽
其中每個(gè)變量如上文所定義，且在上文和此處所述的式I化合物的類和亞類中。
在某些實(shí)施方案中，式IV-d的R7基團(tuán)是-OH。
本發(fā)明的示例性化合物列于下表1中 表1.式I的示例性化合物


式IVa的示例性化合物列于下表2中
4.提供本發(fā)明化合物的一般方法 本發(fā)明的化合物大體上可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的用于相似化合物的合成和/或半合成的方法和以下實(shí)施例中詳述的方法制備或分離。
活性成分的分離 本發(fā)明的某些化合物是從黑升麻根，亦稱作總狀升麻(cimicifugaracemosa)或美類葉升麻(actaea racemosa)中分離的，并闡明了這些化合物的結(jié)構(gòu)?？缮藤彨@得用于治療各種絕經(jīng)和婦科障礙的黑升麻根的提取物、粉末和膠囊。但是，已驚異地發(fā)現(xiàn)存在于黑升麻根的某些化合物可用于調(diào)節(jié)和/或抑制β-淀粉樣肽的產(chǎn)生。特別地，某些化合物已從黑升麻根中分離出來并鑒定，其中這些化合物可用于調(diào)節(jié)和/或抑制β-淀粉樣肽的產(chǎn)生特別是β-淀粉樣肽(1-42)的產(chǎn)生。式I化合物包括這類化合物。這些化合物可以基本上無通常見于根中的其他化合物的形式被分離和使用?；蛘撸崛∥锟蓮钠渲兴鎏崛∥锔缓景l(fā)明化合物的根部制備。
如上文和此處所述，本發(fā)明的某些化合物是從種植的或野生的黑升麻根和根莖的標(biāo)準(zhǔn)提取物中分離的。亦約定本化合物亦可從培養(yǎng)生長的植物根組織或培養(yǎng)植物根組織的培養(yǎng)基中分離。培養(yǎng)生長植物根組織的這些方法為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知并在發(fā)根、培養(yǎng)和應(yīng)用(Hairy Roots，Cultureand Applications)中有所描述，Pauline M.Doran編輯，荷蘭阿姆斯特丹Harwood Academic Publishers出版，1997年版權(quán)OPA(OverseasPublishers Association)阿姆斯特丹B.V.ISBN 90-5702-117-X，本文整體引用作為參考。
或者，本發(fā)明的化合物可用半合成的方法從黑升麻和相關(guān)升麻種中、不論從這些植物的根部或根莖部或氣生根部分的提取物中發(fā)現(xiàn)的其他化合物開始通過半合成的方法制備。這可通過分離的化合物或提取部分或化合物的混合物的化學(xué)或生物轉(zhuǎn)化實(shí)現(xiàn)?；瘜W(xué)轉(zhuǎn)化可通過溫度、pH、和/或各種溶劑處理的方法但不限于這些方法而實(shí)現(xiàn)。生物轉(zhuǎn)化可通過以下方法但不限于這些方法實(shí)現(xiàn)分離化合物或植物組織、植物組織提取物、其他微生物或來自任意有機(jī)體中的分離酶的提取組分或化合物的混合物的處理。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了黑升麻根的提取物，其中所述提取物包含至少10％重量的本發(fā)明的化合物。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了黑升麻根的提取物，其中所述提取物含從約10％重量至約50％重量的本發(fā)明的化合物。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了黑升麻根提取物，其中所述提取物包含從約10％重量至約50％重量的本發(fā)明化合物，其中所述提取物基本上不含黃肉楠堿。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了基本上沒有存在于黑升麻中的其他化合物的式I化合物。如本文所用，術(shù)語“基本上沒有”意思是，與存在于黑升麻根或其提取物的化合物相比，化合物是由顯著地更大比例的式I化合物組成。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了約1％重量至約99％重量的式I化合物。在某些實(shí)施方案中，被提供的式I化合物大于約80％的化學(xué)純度。在其他實(shí)施方案中，式I化合物提供了大于90％的化學(xué)純度。在其他實(shí)施方案中，式I化合物包含相對(duì)于HPLC色譜圖的總面積不多于HPLC10.0％面積的黑升麻根的其他化合物。在其他實(shí)施方案中，式I化合物包含相對(duì)于HPLC色譜圖的總面積不多于HPLC 8.0％面積的黑升麻根的其他成分，且在其他實(shí)施方案中，不大于約3％面積。
測定本發(fā)明化合物是否基本上沒有通常存在于黑升麻根的其他化合物的方法對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員是已知的，如下文所述。前面已經(jīng)從黑升麻根中分離和鑒定的化合物包括某些基于環(huán)木菠蘿烷醇的三萜類化合物包括類葉升麻醇(acteol)、乙酰基類葉升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿、和升麻苷。(E)異阿魏酸和大豆異黃酮芒柄花黃素亦被分離和鑒定。這些化合物的代表物質(zhì)有以下結(jié)構(gòu)
黃肉楠堿升麻苷
黃肉楠堿 升麻苷 因此，本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了基本上沒有類葉升麻醇、乙?；惾~升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿、和升麻苷中的一種或多種的式I化合物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了基本上名沒有類葉升麻醇、乙酰類葉升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿和升麻苷的式I化合物。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了富含式I化合物且類葉升麻醇、乙?；惾~升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿和升麻苷的一種或多種的量減少的黑升麻根的提取物。根據(jù)又一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明提供了富含式I化合物且類葉升麻醇、乙?；惾~升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿和升麻苷的每種量均減少的黑升麻根提取物。
多種技術(shù)在本領(lǐng)域已熟知用于提取、分離、和/或純化黑升麻根中的單個(gè)活性成分。本發(fā)明包括本文所述的這些活性成分和這些成分加入到本文所述的本發(fā)明的組合物中的鑒定。
黑升麻提取物的單個(gè)活性成分可照本文所述鑒定，并使用任何本領(lǐng)域已知的技術(shù)分離和/或純化。活性成分可從以任意形式的根本身、或本發(fā)明的提取物的混合物的煎液或可商購得到的提取物等等進(jìn)行純化。各種技術(shù)可用于純化，包括過濾、選擇性沉淀、用有機(jī)溶劑提取、用水性溶劑提取、柱色譜(硅膠)、高效液相色譜(HPLC)和其他本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法。
根據(jù)某些實(shí)施方案，本提取物是從使用黑升麻根分離部分的提取物。分離部分是指已通過例如色譜手段、蒸餾、沉淀、提取、過濾或其他方法從根本身被去除的根物質(zhì)的附屬量。在其他實(shí)施方案中，根提取物和組分是借助色譜法、蒸餾、沉淀或提取除去。這些提取和分離技術(shù)是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。這些技術(shù)中的一些的細(xì)節(jié)可在下文的實(shí)施例部分闡明。
根據(jù)本發(fā)明的其他實(shí)施方案，活性化合物的存在和純度是通過化學(xué)方法包括核磁光譜法(NMR)、質(zhì)譜、紅外光譜(IR)、紫外-可見光譜、元素分析、和旋光測定法、折光法評(píng)價(jià)的，提到的只是一少部分。這些分析方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。在其他實(shí)施方案中，從黑升麻根中分離的活性化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)是通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法測定的，包括NMR、質(zhì)譜、紅外光譜(IR)、紫外-可見光譜、元素分析、旋光測定法、折光法、和X-射線結(jié)晶學(xué)，提到的只是一少部分。
盡管某些示例性的實(shí)施方案在上文和此處有所描述，應(yīng)理解本發(fā)明的根提取物可根據(jù)上文描述的方法使用適當(dāng)?shù)钠鹗疾牧贤ㄟ^本領(lǐng)域普通技術(shù)人員一般能夠獲得的方法制備。
5.用途、制劑和施用 可藥用組合物 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了可藥用組合物，其中這些組合物包含本文所述的任意化合物，且任選地包含可藥用載體、輔劑或基質(zhì)。在某些實(shí)施方案中，這些組合物任選地包含一種或多種另外的治療劑。
應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的某些化合物可以游離形式存在或當(dāng)適當(dāng)時(shí)以其可藥用鹽形式用于治療。
如本文使用的，術(shù)語“可藥用鹽”是指那些鹽，即在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適于用于接觸人體和低等動(dòng)物的組織而不產(chǎn)生不適當(dāng)?shù)亩拘?、刺激性、過敏反應(yīng)等，且具有合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比?！翱伤幱名}”是指本發(fā)明化合物的任意無毒鹽或酯，施用給受體時(shí)，不論直接或間接地能夠提供本發(fā)明化合物或其藥物活性代謝物或殘基。如本文所用，術(shù)語“其藥物活性代謝物或殘基”是指其代謝物或殘基根據(jù)本發(fā)明亦是藥物活性化合物。
可藥用鹽是技術(shù)上熟知的。例如，S.M.Berge等人，在J.Pharmaceutical Sciences，1977，66，1-19中詳細(xì)描述了可藥用鹽，本文引用作為參考。本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括由適當(dāng)?shù)臒o機(jī)和有機(jī)酸和堿衍生的那些?？伤幱玫臒o毒的酸加成鹽的實(shí)例包括氨基基團(tuán)與無機(jī)酸形成的鹽諸如，鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸或與有機(jī)酸諸如醋酸、草酸、馬來酸、酒石酸、枸櫞酸、丁二酸或丙二酸或通過使用本領(lǐng)域使用的其他方法諸如離子交換樹脂。其他可藥用鹽包括己二酸鹽、海藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、枸櫞酸鹽、環(huán)戊丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、磷酸甘油鹽、葡糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘化物、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖醛酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、十一酸酯、戊酸鹽等。從適當(dāng)?shù)膲A衍生的鹽包括堿金屬、堿土金屬、氨和N+(C1-4烷基)4鹽。本發(fā)明亦構(gòu)思了本文公開化合物的任意堿性含氮基團(tuán)的季銨化作用。水溶或油溶或可分散產(chǎn)物可通過這種季銨化作用獲得。代表性的堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。進(jìn)一步的可藥用鹽包括，當(dāng)適用時(shí)，非毒性的銨鹽、季銨鹽、和使用反離子形成的胺陽離子諸如鹵化物、氫氧化物、羧酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、低級(jí)烷基磺酸鹽和芳基磺酸鹽。
本發(fā)明的組合物可另外包含可藥用載體、輔劑、或基質(zhì)，如本文使用的，按照適合于特殊所需劑型可包括任何和所有的溶劑、稀釋劑、或其他液體基質(zhì)、分散體或混懸輔助劑、表面活性劑、等滲調(diào)節(jié)劑、增稠劑、或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤滑劑等。Remington′s PharmaceuticalSciences，第十六版，E.W.Martin(Mack Publishing Co.，Easton，Pa.，1980)公開了制備可藥用組合物制劑中使用的各種載體及制備其的已知技術(shù)。除了任何與本發(fā)明的化合物不相容諸如產(chǎn)生任何不良的生物學(xué)效應(yīng)或以有害的方式與可藥用組合物中的任何其他成分相互作用的傳統(tǒng)載體基質(zhì)以外，其應(yīng)用被約定在本發(fā)明的范圍內(nèi)?？捎米骺伤幱幂d體的一些材料的實(shí)例包括但不限于離子交換樹脂、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白，諸如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)諸如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、或山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯的混合物、水、鹽或電解質(zhì)、諸如精蛋白硫酸鹽、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂、糖類諸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉諸如玉米淀粉和土豆淀粉；纖維素及其衍生物諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和纖維素醋酸酯；粉狀西黃蓍膠；麥芽糖(malt)；明膠；滑石粉；賦形劑諸如可可脂和栓劑蠟；油諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；甘醇；諸如丙二醇或聚乙二醇；酯諸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑諸如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；無熱原的水；等滲的鹽水；林格氏溶液；乙醇、和磷酸鹽緩沖液以及其他非毒性可配伍的潤滑劑諸如月桂醇硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、矯味劑和加香劑，防腐劑和抗氧劑根據(jù)制劑人員的判斷亦可存在于組合物中。
本發(fā)明提供的組合物可用于組合治療，即本組合物可與一種或多種其他所需的治療劑或醫(yī)學(xué)方法同時(shí)、在其之前、或相繼施用。在組合療法中使用的治療的獨(dú)特組合(治療劑或方法)將考慮所需的治療劑和/或方法的相容性與要實(shí)現(xiàn)的所需的治療效果。應(yīng)該理解使用的治療對(duì)于相同的障礙可實(shí)現(xiàn)所需的作用(例如，本文所述的化合物可與另一種用于治療相同障礙的治療劑同時(shí)施用)，或它們可實(shí)現(xiàn)不同的作用(例如，任何副作用的控制)。
例如，已知的用于治療神經(jīng)變性障礙的成分可與本發(fā)明組合物組合治療神經(jīng)變性障礙，諸如阿爾茨海默病。這樣的已知用于治療神經(jīng)變性障礙成分的實(shí)例包括但不限于，用于治療阿爾茨海默病的諸如乙酰膽堿酯酶抑制劑，包括多奈哌齊、美金剛(和相關(guān)化合物如NMDA抑制劑)、艾斯能、用于治療帕金森氏病諸如L-DOPA/卡比多巴、恩他卡朋、羅吡尼洛、普拉克索、溴隱亭、培高利特、trihexephendyl和金剛烷胺；用于治療多發(fā)性硬化癥(MS)的成分諸如β-干擾素(例如，Avonex和Rebif)，Copaxone，和米托蒽醌、利魯唑、和抗帕金森藥。對(duì)于當(dāng)前用于治療神經(jīng)變性障礙治療的更復(fù)雜的討論，見FDA批準(zhǔn)藥物的名單http//www.fda.gov，和默克手冊(cè)，第十七版，1999，本文引用全部內(nèi)容作為參考。
在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物與其他用于治療神經(jīng)變性障礙諸如阿爾茨海默病的成分組合，其中這些成分包括β-分泌酶抑制劑、γ-分泌酶抑制劑、聚集抑制劑、金屬螫合劑、抗氧劑、和神經(jīng)保護(hù)劑。
如本文所用，術(shù)語“組合”、“組合的”和相關(guān)術(shù)語是指同時(shí)或相繼施用根據(jù)本發(fā)明的治療劑。例如，本發(fā)明的化合物可與另一種治療劑同時(shí)或相繼以單獨(dú)的單位劑型或合在一起在一個(gè)單位劑型中施用。相應(yīng)地，本發(fā)明提供了包含式I化合物、另外的治療劑、和可藥用載體、輔劑、或基質(zhì)的單個(gè)單位劑型。
本發(fā)明的抑制劑成分的其他實(shí)施例亦可與以下活性劑組合包括但不限于哮喘治療諸如沙丁胺醇和順爾寧；用于治療精神分裂癥的藥物諸如再普樂、維思通、思瑞康、和氟哌啶醇；抗炎藥諸如皮質(zhì)類固醇類、TNF阻斷劑、IL-1 RA、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺、和柳氮磺吡啶；免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑諸如環(huán)孢素、他克莫司、雷帕霉素、嗎替麥考酚酯、干擾素、皮質(zhì)類固醇、環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤、和柳氮磺吡啶；神經(jīng)營養(yǎng)因子諸如乙酰膽堿酯酶抑制劑、MAO抑制劑、干擾素、抗驚厥藥、離子通道阻斷劑；用于治療心血管病的藥物諸如β-受體阻斷藥、ACE抑制劑、利尿劑、硝酸酯類、鈣通道阻斷劑、和他汀類；用于治療肝臟疾病的藥物諸如皮質(zhì)類固醇類、消膽胺、干擾素、和抗病毒藥；用于治療血液病的藥物諸如皮質(zhì)類固醇類，抗白血病藥、和生長因子；和用于治療免疫缺陷疾病的藥物諸如γ-球蛋白。
存在于本發(fā)明組合物中的另外的治療劑的量將不多于通常包含該種治療劑作為唯一活性成分的組合物中被施用的量。在某些實(shí)施方案中，存在于本組合物中的另外的治療劑的量的范圍是通常包含該治療劑作為唯一治療活性成分的組合物中存在的量的約50％至100％。
在可替代的的實(shí)施方案中，使用不包含另外的治療劑的組合物的本發(fā)明的方法，包括分別給所述患者施用另外的治療劑的另外的步驟。當(dāng)這些另外的治療劑被單獨(dú)施用時(shí)，它們可在本發(fā)明的組合物施用之前、相繼或之后施用于患者。
本發(fā)明的可藥用組合物可經(jīng)口、直腸、胃腸外、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、局部(以粉末、軟膏、或滴劑的形式)、頰部、以口服或鼻部噴劑等根據(jù)被治療的障礙的嚴(yán)重性給人和其他動(dòng)物施用。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以約每天0.01mg/kg至約50mg/kg并優(yōu)選地從約1mg/kg至約25mg/kg個(gè)體體重的劑量水平，每日一次或多次口服或胃腸外施用，以獲得所需的治療作用。
用于口服施用的液體劑型包括但不限于，可藥用乳劑、微乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。除了活性化合物以外，液體劑型可包含本領(lǐng)域常使用的惰性稀釋劑諸如，例如水或其他溶劑、增溶劑和乳化劑諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特別地，棉籽、落花生、玉米、胚芽、橄欖、蓖麻、和芝麻油)、甘油、四氫呋喃甲醇、聚乙二醇和脫水山梨醇脂肪酸酯、及其混合物。除惰性稀釋劑外，口服組合物亦可包括輔劑諸如潤濕劑、乳化劑和助懸劑、甜味劑、矯味劑、和香味劑。
可注射制劑，例如，無菌可注射水或油狀混懸液可按照已知技術(shù)使用適當(dāng)?shù)姆稚┗驖櫇駝┖椭鷳覄┲苽渲苿?。無菌可注射制劑亦可是在無毒可注射稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、混懸液或乳劑，例如，1，3-丁二醇溶液。在可接受的基質(zhì)和溶劑中，可使用水、林格氏溶液U.S.P和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌、不易揮發(fā)的油被傳統(tǒng)地作為溶劑或助懸基質(zhì)使用。為此目的，可使用任何刺激性小的不易揮發(fā)的油包括合成單-或二甘油酯。另外，在可注射制劑中可使用脂肪酸諸如油酸。
可注射制劑可被滅菌，例如，通過可截留細(xì)菌的濾器過濾，或通過在用前溶解或分散在無菌水中或其他無菌固體組合物中的無菌固體組合物的形式中加入滅菌劑而滅菌。
為了延長本發(fā)明化合物的作用，常需要從皮下或肌肉注射延緩化合物的吸收。這可以通過使用水溶性差的結(jié)晶或無定型材料的液體混懸劑實(shí)現(xiàn)?；衔锏奈账俾蕜t依賴其溶解速率，依次地，溶解速率則依賴結(jié)晶大小和晶型?；蛘?，胃腸外施用的化合物形式的延遲吸收是通過將化合物溶解或混懸在油基質(zhì)中實(shí)現(xiàn)的?？勺⑸滟A庫形式可通過在生物可降解聚合物諸如聚丙交酯-聚乙交酯中制成化合物的微囊基質(zhì)而制備的。根據(jù)化合物與聚合物的比例和使用的個(gè)別聚合物的屬性，化合物釋放速率可被控制。其他生物可降解聚合物的實(shí)例包括聚原酸酯和聚酸酐?？勺⑸滟A庫制劑亦可通過將化合物包埋在與身體組織可相容的脂質(zhì)體或微乳中而制備。
用于直腸或陰道施用的組合物優(yōu)選地是栓劑，其可通過將本發(fā)明化合物與適當(dāng)?shù)氖覝叵率枪腆w但在體溫下是液體的且因此可在直腸或陰道腔體中熔化并釋放活性化合物的非刺激性賦形劑或載體諸如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟混合而制備。
用于口服施用的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉劑、和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種惰性、可藥用賦形劑或載體混合，諸如枸櫞酸鈉或磷酸鈣和/或a)填充劑或膨脹劑諸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和硅酸，b)粘合劑諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、和阿拉伯膠，c)保濕劑諸如甘油，d)崩解劑諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽、和碳酸鈉，e)溶液阻滯劑諸如石蠟，f)吸收促進(jìn)劑諸如季銨化合物，g)潤濕劑諸如，例如十六醇和甘油單硬脂酸酯，h)吸收劑諸如高嶺土和膨潤土，及i)潤滑劑諸如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂醇硫酸鈉、及其混合物。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，劑型亦可包含緩沖劑。
亦可使用相似類型的固體組合物作為軟膠囊或硬填充膠囊的填充劑，使用乳糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇等這樣的賦形劑。片劑、糖衣片劑、膠囊劑、丸劑、和顆粒劑的固體劑型可使用衣層和殼層諸如藥物制劑技術(shù)中熟知的腸衣和其他衣層制備。它們可任選地包含遮光劑，且亦可是優(yōu)先地在腸道的某一部位、任選地以延遲的方式僅釋放活性成分的組合物?？墒褂玫陌窠M合物的實(shí)例包括聚合物物質(zhì)和蠟。亦可使用相似類型的固體組合物作為軟膠囊和硬填充明膠膠囊的填充劑，使用如乳糖或奶糖及高分子量聚乙二醇等的賦形劑。
活性化合物亦可以是有一種或多種以上所述的賦形劑的微囊形式。片劑、糖衣片劑、膠囊劑、丸劑、和顆粒劑的固體劑型可使用衣層和殼層諸如藥物制劑技術(shù)中熟知的腸衣層、速度控制衣層和其他衣層制備。在這些固體劑型中，活性化合物可與至少一種諸如蔗糖、乳糖或淀粉的惰性稀釋劑混合。正如與在通常的實(shí)踐中一樣，這些劑型亦可包含除惰性稀釋劑以外的另外的物質(zhì)，例如，壓片潤滑劑和其他成片輔助劑如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，劑型亦包含緩沖劑。它們可任選地包含遮光劑，并且亦是優(yōu)選地在腸道的某一部位、任選地以延遲的方式僅釋放活性成分的組合物?？墒褂玫陌窠M合物的實(shí)例包括聚合物物質(zhì)和蠟。
本發(fā)明化合物的用于局部或經(jīng)皮施用的劑型包括軟膏劑、糊劑、乳膏劑、洗劑、凝膠劑、粉劑、溶液劑、噴劑、吸入劑或貼劑?；钚猿煞质窃跓o菌條件下與可藥用載體和可能需要的任意需要的防腐劑或緩沖劑混合的。眼用制劑、滴耳劑、和滴眼劑亦被約定在本發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明約定透皮貼劑的使用，有增加的提供化合物控制地遞送至體內(nèi)的優(yōu)點(diǎn)。這些劑型可通過溶解或分散化合物在適當(dāng)?shù)幕|(zhì)中制備。亦可使用吸收促進(jìn)劑增加化合物穿過皮膚的通量?？赏ㄟ^提供速度控制膜或通過將化合物分散在聚合物骨架或凝膠中控制速度。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了含量在約1％至約99％的重量百分?jǐn)?shù)的式I化合物的組合物。在其他實(shí)施方案中，包含式I化合物的組合物含黑升麻根的其他成分相對(duì)于HPLC色譜圖總面積不多于約10.0HPLC面積百分?jǐn)?shù)。在其他實(shí)施方案中，含式I化合物的組合物包含黑升麻根的其他成分相對(duì)于HPLC色譜圖總面積不多于約8.0HPLC面積百分?jǐn)?shù)，且在其他實(shí)施方案中，不多于約3面積百分?jǐn)?shù)。
化合物和可藥用組合物的用途 本發(fā)明的化合物用于調(diào)節(jié)和/或抑制患者中的β-淀粉樣(1-42)肽的產(chǎn)生。因此，本發(fā)明的化合物用于治療患者中與β-淀粉樣(1-42)肽的產(chǎn)生相關(guān)的障礙、或減輕其嚴(yán)重的程度。
按照本發(fā)明的方法的化合物、提取物、和組合物可以有效治療或減輕神經(jīng)變性障礙的嚴(yán)重程度的任意量和任意施用途徑施用。所需的準(zhǔn)確用量可根據(jù)人種、年齡、和個(gè)體的一般狀況、感染的嚴(yán)重程度、特殊的活性劑、施用方式等的不同而在個(gè)體之間不同。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)和/或抑制患者中β-淀粉樣(1-42)肽產(chǎn)生的方法，其中所述方法包含給所述患者施用式I化合物，或包含所述化合物的可藥用組合物。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了選擇性調(diào)節(jié)和/或抑制患者中β-淀粉樣(1-42)肽的產(chǎn)生的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物、或其可藥用組合物。在另外的其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了降低患者中β-淀粉樣(1-42)肽水平的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物，或其可藥用組合物。在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于降低細(xì)胞中β-淀粉樣(1-42)肽水平的方法，包括用式I化合物接觸所述細(xì)胞。另一個(gè)實(shí)施方案提供了降低細(xì)胞中β-淀粉樣(1-42)肽水平而基本上不降低β-淀粉樣(1-40)肽水平的方法，包括用式I化合物接觸所述細(xì)胞。另一個(gè)實(shí)施方案提供了用于降低細(xì)胞中β-淀粉樣(1-42)肽水平并提高細(xì)胞中β-淀粉樣(1-37)肽和β-淀粉樣(1-39)肽的至少一種的方法，包括用式I化合物接觸所述細(xì)胞。
如本文所用，術(shù)語“降低”或“減少”是指與不施用式I化合物的β-淀粉樣肽的量相比通過施用式I化合物實(shí)現(xiàn)β-淀粉樣肽的量的相對(duì)降低。通過實(shí)施例的方法，β-淀粉樣(1-42)肽的降低是指在式I化合物存在下β-淀粉樣(1-42)肽的量比式I化合物不存在下β-淀粉樣(1-42)肽的量低。
在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于選擇性降低患者中β-淀粉樣(1-42)肽水平的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于降低患者中β-淀粉樣(1-42)肽水平且基本上不降低β-淀粉樣(1-40)肽水平的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于降低患者中β-淀粉樣(1-42)肽水平并提高β-淀粉樣(1-37)肽和β-淀粉樣(1-39)肽的至少一種的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。
本文使用的術(shù)語“增加”或“提高”，是關(guān)于β-淀粉樣肽的量，是指與不施用式I化合物(或式I化合物不與細(xì)胞接觸)下β-淀粉樣肽的量比較，通過施用式I化合物(或式I化合物與細(xì)胞接觸)實(shí)現(xiàn)β-淀粉樣肽的量的相對(duì)升高。通過實(shí)施例的方法，β-淀粉樣(1-37)肽的增加是指在式I化合物存在下β-淀粉樣(1-37)肽的量比式I化合物不存在下高。例如，提高β-淀粉樣(1-37)肽和β-淀粉樣(1-39)肽的相對(duì)量可通過β-淀粉樣(1-37)肽和β-淀粉樣(1-39)肽產(chǎn)生的增加或通過更長的β-淀粉樣肽例如β-淀粉樣(1-40)肽和/或β-淀粉樣(1-42)肽產(chǎn)生的降低。另外，應(yīng)理解本文使用的術(shù)語“增加”或“提高”是關(guān)于β-淀粉樣肽的量，是指通過施用式I化合物實(shí)現(xiàn)β-淀粉樣肽的量的絕對(duì)升高。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)該理解，當(dāng)β-淀粉樣(1-42)肽的選擇性降低是特別有利時(shí)，β-淀粉樣肽的總體比例是顯著的。在某些實(shí)施方案中，本化合物降低了β-淀粉樣(1-42)肽與β-淀粉樣(1-40)肽的總體比例。因此，本發(fā)明的另一方面提供了用于降低患者中β-淀粉樣(1-42)肽與β-淀粉樣(1-40)肽的比例的方法，包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。在某些實(shí)施方案中，β-淀粉樣(1-42)肽與β-淀粉樣(1-40)肽的比例從約0.1至約0.4的范圍降低至約0.05至0.08的范圍。
在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于降低細(xì)胞中β-淀粉樣(1-42)肽與B-淀粉樣(1-40)肽的比例的方法，包括用式I化合物與細(xì)胞接觸。在某些實(shí)施方案中，β-淀粉樣(1-42)肽與β-淀粉樣(1-40)肽的比例從約0.1至約0.4的范圍降低至約0.05至0.08的范圍。
根據(jù)一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于治療或減輕與β-淀粉樣(1-42)肽相關(guān)的障礙的嚴(yán)重程度的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。這些障礙包括神經(jīng)變性障礙諸如阿爾茨海默病、帕金森氏病、和唐氏綜合征。
在其他實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于治療或減輕患者中阿爾茨海默病的嚴(yán)重程度的方法，其中所述方法包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。
不希望被任何特別的理論束縛，相信本化合物是選擇性地降低β-淀粉樣(1-42)肽水平的γ-分泌酶的調(diào)節(jié)劑。因此，本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供了調(diào)節(jié)患者中的γ-分泌酶的方法，包括給所述患者施用式I化合物或其可藥用組合物。在某些實(shí)施方案中，本化合物是γ-分泌酶的抑制劑。所述方法用于治療或減輕任何與γ-分泌酶相關(guān)的障礙的嚴(yán)重程度。這些障礙包括但不限于神經(jīng)變性障礙，例如阿爾茨海默病。
本發(fā)明的化合物為了方便施用和劑量的均一性，優(yōu)選地以劑量單位形式制成制劑。本文使用的表達(dá)“劑量單位形式”是指適于被治療的患者的物理上不連續(xù)的活性劑單位。但是應(yīng)該理解，本發(fā)明的化合物和組合物的總?cè)沼昧繉⒏鶕?jù)主治醫(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)決定。對(duì)于任何個(gè)別的患者或有機(jī)體的具體的有效劑量水平將依包括被治療的障礙和障礙的嚴(yán)重程度、使用的具體化合物的活性、使用的具體組合物、患者的年齡、體重、健康總體情況、性別和飲食、施用時(shí)間、施用途徑、和使用的具體化合物的排泄速率、治療的持續(xù)時(shí)間、合并或巧合地與具體化合物同時(shí)使用的藥物等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域熟知的各種因素而定。本文使用的術(shù)語“患者”是指動(dòng)物，優(yōu)選為哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選為人。
實(shí)施例 使用以下描述的分離方法的黑升麻提取物，其可按BoehringerIngelheim Nutriceuticals的客戶訂單獲得。該提取物基本上與黑升麻提取物USP制劑等效，其中約50％的乙醇水溶液用于提取粉狀根，然后濃縮至近干。
如本文所用，下文的化合物編號(hào)對(duì)應(yīng)于以下的化合物 化合物1β-D-木吡喃糖苷，(3，12，16，23R，24R，25S，26S)-12-(乙?；趸?-16，2323，2624，25-三環(huán)氧-26-羥基-9，19-環(huán)羊毛甾烷-3-基。
亦稱作“黃肉楠堿”C37H56O11；分子量676.83；登記號(hào)18642-44-9。

化合物2升麻醇3-β-D-木吡喃糖苷；C35H56O9，分子量620.81；登記號(hào)27994-11-2。

化合物3升麻醇3-α-L-阿糖胞苷。C35H56O9，分子量620.81；登記號(hào)256925-92-5。

化合物424-O-乙?；仙樾麓?Acetylhydroshengmanol)3-β-D-木吡喃糖苷。C37H60O11，分子量680.87；登記號(hào)78213-32-8。

化合物524-O-乙?；仙樾麓?-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。C37H60O11，分子量680.87。

化合物624-O-乙?；仙樾麓?-β-D-木吡喃糖苷(Δ-16，17)-烯醇醚。C37H58O10，分子量662.85。

化合物724-O-乙?；仙樾麓?-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(Δ-16，17)-烯醇醚。C37H58O10，分子量662.85。

化合物824-表-24-O-乙?；仙樾麓?-β-D-木吡喃糖苷。C37H60O11，分子量680.87。

化合物924-表-24-O-乙?；仙樾麓?-β-D-木吡喃糖苷(Δ-16，17)-烯醇醚。C37H58O10，分子量662.85。

分離方案1 閃式柱色譜法 將黑升麻提取物(15.6g)在25℃下混懸在150ml的4∶1(v/v)甲醇-水混合物中。使用機(jī)械攪拌器，得到的漿液在該溫度下劇烈攪拌30min，得到棕色乳濁液。持續(xù)攪拌下向該乳濁液中加入51g硅膠(ICN silica 32-63 60)。使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀25℃下真空濃縮該混合物，直至獲得均勻的駝色-棕色粉末。該物質(zhì)使用60cm長、50mm內(nèi)徑的玻璃柱進(jìn)行硅膠(ICN silica32-63 60 A)柱色譜。
在準(zhǔn)備柱色譜時(shí)，硅膠傾入500ml的20∶1二氯甲烷-甲醇混合物中，并將得到的漿液注入玻璃柱中。將該硅膠靜置30分鐘，并用1cm厚的沙層覆蓋。接著，吸附在硅膠上的提取物傾入20∶1的二氯甲烷-甲醇混合物中，得到的漿液傾入柱頂部的沙層中。然后用以下溶劑混合物在0.4巴(氬氣)的壓力下洗脫硅膠柱 1.0ml的二氯甲烷-甲醇(20∶1)，接下來 770ml的二氯甲烷-甲醇(10∶1)，接下來 800ml的二氯甲烷-甲醇(7∶1)，接下來 550ml的二氯甲烷-甲醇(5∶1)。
收集八份200ml-級(jí)分(標(biāo)記為sat14-0至sat14-7)，接下來11份100-ml級(jí)分(標(biāo)記為sat14-8至sat14-18)。所有級(jí)分用薄層色譜(TLC)使用Bakerflex硅膠板、用5∶1二氯甲烷-甲醇溶劑混合物洗脫進(jìn)行分析。在展開后，硅膠板用茴香醛染色?；赥LC分析結(jié)果，級(jí)分sat14-9至sat14-12在25℃下真空揮干，這些級(jí)分的10-mg樣品用1H-NMR光譜、使用CD3OD作為溶劑進(jìn)行分析，分別見圖1和圖2。對(duì)在2.53ppm出現(xiàn)的寬的多重峰和4.86ppm的2.2-Hz的二重峰進(jìn)行圖譜解析，因?yàn)檫@些信號(hào)是化合物7和6的特征。這四個(gè)樣品的另外的dqf-COSY譜證實(shí)在2.53和4.86ppm的信號(hào)事實(shí)上屬于化合物7和6。從級(jí)分sat14-10的1H-NMR譜可得出結(jié)論該樣品含有最高濃度的化合物7和6，同時(shí)略小量的這些化合物可在級(jí)分sat14-9中檢測到。級(jí)分sat14-11似乎含有痕量的7和6，但是這些化合物不能在級(jí)分sat14-12中檢測到。基于這些結(jié)果，級(jí)分sat14-10被選擇用HPLC進(jìn)行進(jìn)一步的純化?；蛘撸部墒褂眉?jí)分sat14-9，以得到所需要的另外的化合物4至7。
級(jí)分sat14-10的主成分是黃肉楠堿(1)(JNP 2002，65，601-605)，是從該級(jí)分的甲醇溶液中結(jié)晶的。純黃肉楠堿是通過重結(jié)晶得到的。級(jí)分sat14-11的主成分是升麻醇β-D-木吡喃糖苷(2)和升麻醇α-L-阿糖胞苷(3)，其以大約2∶1(JNP 2000，65，905-910和1391-1397)的混合物從該級(jí)分中結(jié)晶。在C-18柱上反相HPLC分離 將級(jí)分sat14-10溶解于3.5ml的甲醇中。該溶液通過HPLC進(jìn)行分離，使用SUPELCO Discovery RP-18柱(25cm長，10mm內(nèi)徑)，AGILENT1100系列HPLC系統(tǒng)，包括自動(dòng)進(jìn)樣器和二極管陣列檢測器用于190-400nm波長的檢測。使用溶劑梯度，頭2分鐘從30％(v/v)水-甲醇溶液開始，接著線性降低水的含量在20分鐘至100％甲醇。在達(dá)100％甲醇2分鐘之后，水含量增加至30％并保持該濃度另8分鐘。為了sat14-10整個(gè)樣品的分離，需要每次進(jìn)樣35μl、100次進(jìn)樣。收集9個(gè)級(jí)分，被標(biāo)記為sat15-1至sat15-9。分別見圖3和4?；衔?至7是在級(jí)分sat15-1、15-2、15-4和15-5中洗脫出來的。級(jí)分sat15-1、15-2、15-4和15-5的1H NMR譜示于圖4a和4b。
用于6、4、和9分離的在C-8柱上的反相HPLC分離 級(jí)分sat15-5溶于1.5ml的甲醇中。該溶液用HPLC進(jìn)行分離，使用SUPELCO supelcosil LC-8柱(25cm長，10mm內(nèi)徑)，和上文描述的AGILENT 1100系列HPLC系統(tǒng)。使用溶劑梯度，頭2分鐘從40％(v/v)水-甲醇溶液開始，接著線性降低水的含量在20分鐘至100％甲醇。在達(dá)100％甲醇的2分鐘之后，水含量增加至40％并保持該濃度另8分鐘。為了sat15-5整個(gè)樣品的分離，需要每次進(jìn)樣30μl、50次進(jìn)樣。收集5個(gè)級(jí)分，被標(biāo)記為sat16-1至sat16-5(圖5)?；衔?是在級(jí)分sat16-3中洗脫出來的，而化合物4是級(jí)分sat16-1中洗脫出來的。小量的純9是從級(jí)分15-5中獲得的。圖6顯示了得到的9.8mg的98％純6組分的1H NMR譜。用于8的分離的在C-8柱上的反相HPLC分離 將級(jí)分sat15-8溶于0.65ml的甲醇中。溶液用HPLC進(jìn)行分離，使用SUPELCO supelcosil LC-8柱(25cm長，10mm內(nèi)徑)，和上文描述的AGILENT 1100系列HPLC系統(tǒng)。使用溶劑梯度，頭2分鐘從40％(v/v)水-甲醇溶液開始，接著線性降低水的含量在20分鐘至100％甲醇。在達(dá)100％甲醇2分鐘之后，水含量增加至40％并保持該濃度另8分鐘。收集7個(gè)級(jí)分，標(biāo)記為sat18-1至sat18-7?；衔?在級(jí)分sat18-6中洗脫出來。包括NOESY譜的NMR-譜解析顯示在甲醇溶液中化合物8與相應(yīng)的酮互變。稀甲醇溶液含約4％的酮和96％的半縮醛形式。
用于7和5的分離的在C-8柱上的反相HPLC分離 級(jí)分sat15-2溶于0.5ml的甲醇中。溶液用HPLC進(jìn)行分離，使用SUPELCO supelcosil LC-8柱(25cm長，10mm內(nèi)徑)，和上文描述的AGILENT 1100系列HPLC系統(tǒng)。使用溶劑梯度，頭2分鐘從40％(v/v)水-甲醇溶液開始，接著線性降低水的含量在20分鐘至100％甲醇。在達(dá)100％甲醇的2分鐘之后，水含量增加至40％并保持該濃度另8分鐘。收集5個(gè)級(jí)分，標(biāo)記為sat19-3至sat19-7。在級(jí)分sat19-7中獲得純化合物7，而純化合物5是在級(jí)分sat19-5中獲得的。分離方案2 建立了另一套用于分離化合物6的如下的分離/純化方案。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到在分離化合物6的同時(shí)，本發(fā)明的其他化合物通過本方法可富集和/或分離。分離方法的摘要描繪于圖7。
該純化方案使用以下設(shè)備 (a)帶二極管陣列檢測器(DAD)的Hitachi HPLC系統(tǒng) (b)Nova PrepTM 8000半制備型HPLC，帶遠(yuǎn)程PC控制器，使用LCReSponderTM應(yīng)用軟件 (c)Hitachi UV檢測器L-7400 (d)Sedex 55蒸發(fā)光散射(ELSD)檢測器 (e)75L Biotage硅膠柱(KP-Sil；P/N FKO-1107-19073；批號(hào)027075L) (f)75L Biotage C18柱(Bakerbond，40μ) (g)75S Biotage C18柱(Vydac，40μ) (h)分析型HPLC柱Phenomenex Luna C18，3μ，4.6×100mm (i)半制備型HPLC柱Phenomenex Luna C8 HPLC柱，20×250mm (j)半制備型HPLC柱YMC AQ C18 HPLC柱，21.2×250mm；和 (k)制備型HPLC柱ES工業(yè)型C18制備型HPLC柱，5×25cm。
用于測定化合物6的純度的分析方法如下 柱Phenomenex Luna C18，3μ，4.6×100mm 流動(dòng)相等度洗脫，組成為A.35％乙腈；B.30％含0.05％醋酸的超純水；和C.35％MeOH 流速1mL/min 檢測205、230nm，DAD；和ELSD 運(yùn)行時(shí)間8min 柱溫32℃。
該方法用于分析提取物、級(jí)分、和最終產(chǎn)物。
化合物6在這些條件下在約5.5分鐘洗脫出來。
50g的粗黑升麻提取物(″BCE″)在Biotage硅膠柱(7.5×30cm)上分離。在裝樣后，柱子用5％MeOH/DCM(10L)和10％MeOH/DCM(5L)洗脫，并收集了500ml級(jí)分。流速是150-200ml/min。HPLC(UV 230nm)顯示化合物6存在于級(jí)分23(2.6g)和24(2.3g)中。選擇級(jí)分23(F23)用于在半制備型C8柱上的進(jìn)一步純化。
進(jìn)行10批試驗(yàn)獲得約10mg的化合物6。溶在0.3ml的MeOH中的50mg的F23上樣于Phenomenex Luna C-8(21.2×250mm，10μ，100A)半制備型柱上。柱子以9.9mL/min的流速用70％MeOH-H2O洗脫，用UV在205nm下監(jiān)控。分別收集在半制備型HPLC痕量圖(圖8)中顯示的35min和38min下洗脫的峰。
將從10批試驗(yàn)中收集到的35min的級(jí)分合并，并在室溫下?lián)]去溶劑。得到的固體在冷凍干燥機(jī)上干燥得到10.3mg的化合物6(2609-165-7)。產(chǎn)物2609-165-7的HPLC(圖9)呈現(xiàn)出保留時(shí)間(RT)4.5min的極性雜質(zhì)峰(11.3％)，盡管每個(gè)級(jí)分的HPLC顯示僅一個(gè)主峰(圖10)。顯然化合物6在過程中緩慢轉(zhuǎn)化成極性更強(qiáng)的化合物了。發(fā)現(xiàn)的更強(qiáng)極性的化合物是化合物6的脫乙?；苌铮?yàn)閺脑趍/z 643顯示強(qiáng)的[M+Na]+峰的SSI-MS(圖11)和在4.5min的分離雜質(zhì)的乙?；谆膯畏迦笔У馁|(zhì)子NMR(圖12)中顯見。
化合物6的幾個(gè)穩(wěn)定性試驗(yàn)表明在略堿性的MeOH溶液中發(fā)生了脫乙酰化。但是，在略酸性的溶液中穩(wěn)定。因此，2609-165-7在Luna C8柱上用70％的MeOH/30％含0.05％AcOH的水作為洗脫劑再處理得到3.4mg的化合物6(2609-172-11)。2609-172-11的HPLC色譜圖示于圖13。質(zhì)子NMR(在CD3OD中)和SSI-MS示于圖14和15。
在另一方法中，250g的黑升麻提取物(BCE)用1250mL的MeOH在燒杯中室溫?cái)嚢?hr。不是所有的固體均溶解，但濾液的HPLC分析表明在開始的提取物中的所有的化合物6溶解了(～250mg)。雖然如此在5L的圓底燒瓶中加入了750g的硅膠(ICN，60-200μ)至未過濾的混合物中。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上借助真空除去MeOH得到稱重1100的有9％殘留甲醇的干燥粉末。
在硅膠制備物上干燥的BCE分成四份，每份約270g?；旌衔锷蠘佑赟IM，首先用500-600mL的二氯甲烷洗滌以除去非極性物質(zhì)和殘留的甲醇。SIM與75L的硅膠柱(KP-Sil；P/N FKO-1107-19073；批號(hào)027075L；7.5×25cm或1750mL)連接。主柱以60psi被徑向加壓。體系用丙酮以流速100mL/min洗脫，并收集500-1000mL的級(jí)分。在化合物6洗脫后，柱子用1.0L的MeOH清洗，并用2L的丙酮再平衡。觀察到化合物6主要在級(jí)分3(1000mL)在約900-1000mL的丙酮已從柱洗脫出級(jí)分1和2之后。頭4批試驗(yàn)得到約224mg的化合物6。第二批用于硅膠Biotage的起始材料從100g的BCE和500mL的MeOH和300g的硅膠制備。兩批另外的Biotage(5和6)與用此起始材料的頭四批相似得到另外93mg的化合物6。合并來自6批的產(chǎn)物池并在減壓下?lián)]發(fā)至干燥固體。
從硅膠Biotage得到的干燥固體(90g)溶于720mL的MeOH，480mL的H2O在攪拌下緩慢加入。一些暗的焦油狀固體沉淀出來，并被過濾除去。霧狀濾液加至75L(7.5×25cm)Bakerbond 60、40μBiotage C18柱上。在裝樣后，試驗(yàn)無化合物6，柱子用5L的60％(v/v)MeOH/H2O清洗，接著用4L 70％MeOH/H2O清洗，然后用4L 80％MeOH/H2O洗脫化合物6。在用2L MeOH洗脫柱后。整個(gè)過程流速約60mL/min，且MeOH/H2O流動(dòng)相含0.05％醋酸以防止化合物6的降解。產(chǎn)物池(4L)減壓濃縮直至基本上所有的MeOH被除去，并在布氏漏斗上收集得到的沉淀的固體，在室溫下借助高真空進(jìn)行干燥。
焦油狀固體通過過濾從第一次大規(guī)模C18填料制備物中除去，并包含約32mg的化合物6溶解于來自大規(guī)模試驗(yàn)的2L MeOH清洗液中，其包含約22mg的化合物6?；旌衔飺]至1L并與0.67L的水混合。一些焦油狀固體沉淀出來，被收集在濾器上，溶解于200mL的MeOH中，并與134mL的水混合。同樣過濾該混合物以除去少量的焦油，該濾液與第一次的濾液合并，并上樣于75S(7.5×9.0cm；400mL)Vydac 300，40μ BiotageC18柱。柱子用1L 60％MeOH/H2O和2L 70％MeOH/H2O清洗，并用1L 80％MeOH/H2O(流動(dòng)相亦包含0.05％醋酸)洗脫。蒸發(fā)該產(chǎn)物池并與大規(guī)模Biotage試驗(yàn)相似過濾收集固體。
第一批得自C18 Biotage柱的產(chǎn)物池(16.69g)與70mL MeOH混合。將混合物超聲，沉淀過濾除去。濾液進(jìn)行色譜處理(5批，每批14mL)，ESIndustries Chromegabond WR C18柱，流速177mL/min，使用70％MeOH/30％含0.05％醋酸的水作為洗脫劑。合并每批的6-14min的級(jí)分，并蒸發(fā)除去MeOH。離心收集除去MeOH后的沉淀，并冷凍干燥得到6.6g干燥的固體2609-173-16(化合物6，3.2％)。
第二批來自C18 Biotage柱的產(chǎn)物池(4.3g)用相似的方法處理得到2.0g干燥的固體2609-173-27(化合物6，3.06％)。合并2609-173-16和2609-176-27得到8.6g的2609-174-6。
2609-174-6(400mg)溶于1.3mL含0.1％AcOH的MeOH中。溶液上樣于Phenomenex Luna C8柱，用68％MeOH/32％含0.05％AcOH的水以24mL/min的流速洗脫。
基于分析型HPLC，合并每批試驗(yàn)的15.8至19.8分鐘的級(jí)分(總計(jì)22批)，蒸發(fā)除去MeOH，冷凍干燥至干得到2609-174-28(1.4g含12.6％的化合物6)。2609-174-28用于YMC-AQ C18柱上最終的化合物6的分離?？傆?jì)進(jìn)行28批試驗(yàn)。
2609-174-28(50mg)溶于0.25mL含0.1％AcOH的MeOH中。溶液注入YMC AQ C18柱。柱子用70％MeOH/30％含0.05％醋酸以9.9mL/min洗脫?；诜治鲂虷PLC特性，合并、蒸發(fā)、并凍干28次試驗(yàn)的一般在48.4-50.4分鐘的所選擇的級(jí)分，得到化合物6(2609-176-30，85mg)。
同樣合并剛剛在48.4min前收集的且主要包含化合物6的級(jí)分，并干燥得到2609-176-35(50mg)。2609-176-35用相同的柱和流動(dòng)相再處理(3次)得到另一批號(hào)的化合物6，其與2609-176-30合并得到有～95％色譜純度的102mg的產(chǎn)物(2609-177-10)?；衔?(2609-176-10)的HPLC色譜圖(UV205、230nm，和ELSD)及質(zhì)子NMR譜分別示于圖16、17、18、和19。2609-176-10的質(zhì)子NMR與化合物6的標(biāo)準(zhǔn)樣品一致?；衔?的SSI-MS(圖20)在m/z 685顯示強(qiáng)的[M+Na]+峰，與化合物6的分子式C37H58O10一致。
生物學(xué)分析 A.分析測定式I化合物抑制Aβ-42的能力 本發(fā)明的化合物和包含所述化合物的提取物可作為β淀粉樣(1-42)肽的抑制劑進(jìn)行體外或體內(nèi)分析。這類分析方法詳細(xì)描述于美國專利6,649,196中，本文整體引用作為參考。
根據(jù)基于細(xì)胞的試驗(yàn)以與US6,649,196中描述的基本上相同的方法，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物可選擇性地降低β淀粉樣(1-42)肽。
B.分析測定式I化合物影響總Aβ的比率的能力 體外分析本發(fā)明化合物以測定其對(duì)β淀粉樣(1-42)肽的總比率的影響，使用與Wang等人在J.Biol.Chem.1996，5031894-31902，可溶性β淀粉樣蛋白質(zhì)在培養(yǎng)細(xì)胞基質(zhì)中的特性中描述的基本上相似的方案，本文整體引用這篇文章作為參考。該分析使用免疫沉淀和質(zhì)譜(IP-MS)定量測定β淀粉樣蛋白質(zhì)。使用化合物6作為例證，發(fā)現(xiàn)該化合物降低了β淀粉樣(1-42)肽，同時(shí)增加了β淀粉樣(1-37)肽和β淀粉樣(1-39)肽。這些結(jié)果描繪于圖21中。
按照Wang等人描述的方法亦在7W細(xì)胞(APPwt)和7PA2細(xì)胞(APPV717F)中測定了化合物6。APP717突變提高了β淀粉樣(1-42)肽的相對(duì)量。在該分析中，顯示化合物6降低了β淀粉樣(1-42)肽同時(shí)提高了β淀粉樣(1-39)肽。這些結(jié)果描繪于圖22中。
盡管我們描述了本發(fā)明大量的實(shí)施方案，顯然我們的基本實(shí)施例可作改動(dòng)并提供出使用本發(fā)明的化合物和方法的其他實(shí)施方案。因此，應(yīng)該理解本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求限定而不被通過實(shí)施例表示的具體實(shí)施方案所限定。
權(quán)利要求
1.式I化合物或其可藥用的鹽
其中
環(huán)A、環(huán)B、環(huán)C、環(huán)D、和環(huán)E的每一個(gè)獨(dú)立地是飽和的、部分不飽和的或芳香的；
G是S、CH2、NR、或O；
R1和R2彼此獨(dú)立地是鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、或適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2，或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)；
每個(gè)R獨(dú)立地是氫，任選取代的C1-6脂族基，或具有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的任選取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)，其中
在相同氮原子上的兩個(gè)R任選地與所述氮原子一起形成有1-4個(gè)獨(dú)立選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)；
n是0-2；
R3、R4、R7、和R8彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2；
m是0-2；
R5是T-C(R’)3、T-C(R’)2C(R”)3、R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)OR、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)SR、SO2R、OSO2R、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2，或
當(dāng)R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3時(shí)，則R5上的R6和R’基團(tuán)任選地合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的3-8元飽和的、部分不飽和的或芳環(huán)；
每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的、C1-6亞烷基鏈其中T的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換；
每個(gè)R’和R”獨(dú)立地選自R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(CO)N(R)2、或O(CO)N(R)2；
R6是鹵素、R、OR、SR、SO2R、OSO2R、N(R)2、NR(CO)R、NR(CO)(CO)R、NR(CO)N(R)2、NR(CO)OR、(CO)OR、O(CO)R、(C O)N(R)2、或O(C O)N(R)2；
R9和R9’是彼此獨(dú)立地選自鹵素、R、OR、SR、或N(R)2，或R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-7元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)；
Q是價(jià)鍵或任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的C1-6亞烷基鏈，其中Q的最多兩個(gè)亞甲基單位任選地且獨(dú)立地被-O-、-N(R)-、-S-、-C(O)-、-S(O)-、或-S(O)2-替換；且
R10是R、適當(dāng)保護(hù)的羥基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的巰基基團(tuán)、適當(dāng)保護(hù)的氨基基團(tuán)、有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的任選取代的3-8元飽和的、部分不飽和的、或芳香單環(huán)、任選取代的有0-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的8-10元飽和的、部分不飽和的、或芳香雙環(huán)、可檢測部分、聚合物殘基、肽、或含糖或糖樣部分，
條件是所述化合物不是
，或。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
G是O；且
R1和R2彼此獨(dú)立地是R或OR。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2彼此獨(dú)立地是R，其中R是氫或任選取代的C1-6脂族基。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2合在一起形成有0-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧或硫的雜原子的3-6元飽和的、部分不飽和的、或芳環(huán)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3；
每個(gè)T獨(dú)立地是價(jià)鍵或直鏈或支鏈的C1-4亞烷基鏈，其中T的一個(gè)亞甲基單位任選地被-O-、-N(R)-或-S-替換；且每個(gè)R’和R”獨(dú)立地為R、OR、OC(O)R、SR或N(R)2。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中R5是T-C(R’)3或T-C(R’)2C(R”)3，且R5上的R6和R’基團(tuán)合在一起形成有1-2個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧、或硫的雜原子的5-7元飽和環(huán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中所述的化合物為式IIa或IIb
或
8.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中
Q是任選取代的直鏈或支鏈、飽和的或不飽和的C1-2亞烷基鏈，其中Q的最多一個(gè)亞甲基單位任選地被-O-、-N(R)-或-S-替換；且
R10是糖苷。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的化合物，其中Q為-O-且R10為阿拉伯吡喃糖苷和木吡喃糖苷。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物為式I-a或其可藥用鹽
11.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物為式I-b或I-c或其可藥用鹽
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物為式II或II-a或其可藥用鹽
13.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物為式IV或其可藥用鹽
14.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中所述的化合物為式IV-a或IV-b或其可藥用鹽
15.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中R1和R2合在一起形成3-6元飽和的碳環(huán)且R7為-OH。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物選自
17.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中所述的化合物選自
18.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中所述的化合物基本上沒有存在于黑升麻根的其他化合物。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的化合物，其中所述的化合物基本上沒有類葉升麻醇、乙?；惾~升麻醇、26-脫氧類葉升麻醇、升麻醇、黃肉楠堿、26-脫氧黃肉楠堿、和升麻苷中的一種或多種。
20.組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體、輔劑或基質(zhì)。
21.組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求18的化合物和可藥用載體、輔劑或基質(zhì)。
22.黑升麻根的提取物，其中所述提取物至少含約10％重量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的提取物，其中所述提取物含從約10％至約50％重量的根據(jù)權(quán)利要求1的化合物。
24.在患者中抑制β-淀粉樣肽產(chǎn)生的方法，其中所述的方法包括給所述的患者施用根據(jù)權(quán)利要求20的組合物。
26.在患者中抑制β-淀粉樣(1-42)肽產(chǎn)生的方法，其中所述的方法包括給所述的患者施用根據(jù)權(quán)利要求21的組合物。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中β-淀粉樣(1-42)肽水平得到降低且β-淀粉樣(1-40)肽水平基本上沒有降低。
28.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中β-淀粉樣(1-37)肽和β-淀粉樣(1-39)肽中的至少一種水平得到提高。
29.治療或減輕與β-淀粉樣(1-42)肽相關(guān)的障礙的嚴(yán)重程度的方法，其中所述方法包括給患者施用根據(jù)權(quán)利要求20的組合物。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中所述的障礙為阿爾茨海默病、帕金森氏病、和唐氏綜合征。
31.在患者中降低β-淀粉樣(1-42)肽水平的方法，其中所述的方法包括給所述的患者施用根據(jù)權(quán)利要求20的組合物。
32.在細(xì)胞中降低β-淀粉樣(1-42)肽水平的方法，包括用根據(jù)權(quán)利要求1的化合物接觸所述的細(xì)胞。
全文摘要
如本文所述，本發(fā)明提供了用于治療神經(jīng)變性障礙或減輕其嚴(yán)重性的化合物。本發(fā)明亦提供了治療這類障礙或減輕其嚴(yán)重性的方法，其中所述方法包括給患者施用本發(fā)明的化合物、或其組合物。所述方法用于治療例如阿爾茨海默病或減輕嚴(yán)重性。
文檔編號(hào)C07J53/00GK101223185SQ200680025878
公開日2008年7月16日 申請(qǐng)日期2006年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月17日
發(fā)明者M·A·芬德斯, K·帕爾, F·施羅德 申請(qǐng)人:薩托里醫(yī)藥公司