專利名稱：一種何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法
技術領域：
本發(fā)明主要涉及到天然植物中物質提取的技術領域，特指一種何首烏提取物二苯乙 烯苷的提取方法。
背景技術：
隨著人類社會文明的進步和現代科技的飛速發(fā)展，人類的生活條件和生存環(huán)境正不 斷發(fā)生改變，人類健康觀念和追求生存質量意識的增強，使得健康內涵不斷擴展。在人 類回歸自然的國際潮流中，世界各國均已意識到天然植物巨大的市場潛力，國際天然植 物的市場正迅速擴大。世界銀行的報告中認為2008年世界天然藥物產業(yè)將達到2000億 美元。
何首烏具有補肝腎、益精血、烏須發(fā)、壯筋骨、解毒、消痛、潤腸通便的作用。何 首烏中所含有的二苯乙烯苷類成分，被鑒定為一種植物抗毒素,是由植物在真菌感染、紫 外線照射、機械損傷等不利條件下產生的。研究發(fā)現,二苯乙烯苷具有多種生理活性與藥 用價值，已在降血脂、抗衰老、抑制腫瘤等方面顯示出功能性,這在當今日趨老齡化的社 會中凸現其重要的研究和開發(fā)價值，引起人們的廣泛關注，從而對何首烏的研究也更趨 活躍。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的問題就在于針對現有技術存在的技術問題，本發(fā)明提供一種操作 簡便、提取純度高、穩(wěn)定性好、提取效率高的何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法。
為解決上述技術問題，本發(fā)明提出的解決方案為 一種何首烏提取物二苯乙烯苷的 提取方法，其特征在于步驟為
(1) 、何首烏醇提物的制備對何首烏粗粉末采用60%的乙醇微波提取3次，旋轉薄 膜回收乙醇，得到何首烏提取濃縮液；
(2) 、采用高速逆流色譜法去除脂溶性雜質將上述何首烏提取濃縮液加水稀釋，裝 于逆流色譜儀中，用乙醚連續(xù)萃取，至乙醚色淺，將乙醚萃取過的水溶液集中，進一步 揮散乙醚液；
(3) 、利用大孔吸附樹脂純化二苯乙烯苷將所得粗品將加入適量的水混懸后，過大 孔吸附樹脂，先用少量水洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用70%濃度乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥，得二苯乙烯苷粗品；
(4)、得到二苯乙烯苷精品將上述二苯乙烯苷粗品混懸于水溶液中，再次裝于逆流 色譜儀中，用乙酸乙脂連續(xù)萃取，監(jiān)測直至乙酸乙脂提取液中無二苯乙烯苷為止，回收 乙酸乙脂至小體積，通過低溫結晶處理得到二苯乙烯苷精品。
在上述步驟中，利用HPLC法及紅外/近紅外成像系統對產品進行色譜和光譜質量監(jiān)控。
在上述步驟(4)中，利用HPLC監(jiān)測乙酸乙脂提取液中的二苯乙烯苷。 與現有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點就在于
1. 本發(fā)明何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，避免了高溫長時間的處理，采用高 速逆流萃取法進行制備，與傳統的液相色譜法比較，HSCCC對樣品的預處理要求非常低， 僅需要簡單的提取，甚至不用前處理就可得到很好的分離效果。然而，由于二苯乙烯苷 含量低，性質又不很穩(wěn)定，因此對樣品的制備通過大孔吸附樹脂前處理，使目標成分得 到適當的富集。兩次HSCCC的應用能保證二苯乙烯苷的高純度；
2. 本發(fā)明何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，采用紅外/近紅外圖像系統，對產 品進行快速的質量控制。紅外圖像蘊含極具價值的化學、物理信息，較HPLC能更快、更 準確對樣品定性，可縮短時間。
具體實施例方式
以下將結合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細說明。 本發(fā)明何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，其步驟為-
(1) 、何首烏醇提物的制備何首烏粗粉末，采用60%的乙醇微波提取3次，旋轉薄 膜回收乙醇，得到何首烏提取濃縮液。
(2) 、采用高速逆流色譜法(HSCCC)去除脂溶性雜質將上述濃縮液加水稀釋，裝 于逆流色譜儀中，乙醚連續(xù)萃取，至乙醚色淺，將乙醚萃取過的水溶液集中，進一步揮 散乙醚液。
(3) 、利用大孔吸附樹脂純化二苯乙烯苷將所得粗品將加入適量的水混懸后，過大 孔吸附樹脂，先用少量水洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用70%濃度乙醇洗脫，收集洗脫 液，減壓濃縮，冷凍干燥，得二苯乙烯苷粗品。
(4) 、得到二苯乙烯苷精品上述粗品混懸于水溶液中，再次裝于逆流色譜儀中，乙 酸乙脂連續(xù)萃取，HPLC監(jiān)測至乙酸乙脂提取液中無二苯乙烯苷為止，回收乙酸乙脂至 小體積，低溫結晶處理，得到二苯乙烯苷精品。
4在上述步驟中，采用HPLC法及紅外/近紅外成像系統對產品進行色譜和光譜質量監(jiān)控。
天然的二苯乙烯苷主要以二苯乙烯苷元側鏈結合一個單糖基的形式存在。其化學名 為2， 3， 5, 4'四羥基-二苯乙烯-2-0~e-D-葡萄糖苷。二苯乙烯苷的水溶液在高溫條件 (8CTC)下不穩(wěn)定，其含量與溫度呈負變關系。二苯乙烯苷在酸性溶液中很不穩(wěn)定。在4% 硫酸溶液中，室溫放置12 h后含量降為原來的31.67% ，而在8(TC下放置4h則檢測不 到二苯乙烯苷。其降解產物為二苯乙烯苷苷元，并進一步降解為酚類化合物。而本發(fā)明中 避免了高溫長時間的處理，采用高速逆流萃取法進行制備，與傳統的液相色譜法比較， HSCCC對樣品的預處理要求非常低，僅需要簡單的提取，甚至不用前處理就可得到很好的 分離效果。然而，由于二苯乙烯苷含量低，性質又不很穩(wěn)定，因此我們對樣品的制備通 過大孔吸附樹脂前處理，使目標成分得到適當的富集。兩次HSCCC的應用能保證二苯乙 烯苷的高純度。其中，高速逆流色譜(high-speed counter-current chromatography, HSCCC) 是近十年迅速發(fā)展起來的新型液一液分配色譜技術。它依靠聚四氟乙烯(PTFE)蛇形管 的方向性及特定的高速行星式旋轉產生的離心場作用，使無載體支持的固定相穩(wěn)定的保 留在蛇形管中。并使流動相單向、低速通過固定相。在短時間內實現樣品在互不相溶的 兩相溶劑系統中高速分配，繼而達到連續(xù)逆流萃取分離物質的目的。與其他分離手段相 比，HSCCC不用固相載體作固定相，并具有分離純度高、樣品回收率高、適用范圍廣、 可一步制備純品的優(yōu)點，既適用于小量分析，也可用于規(guī)模純化，在生物、醫(yī)藥、天然 產物化學、環(huán)境分析、食品等領域有廣泛的應用。特別是在天然產物有效成分的分離、 純化、制備方面顯示出強大的優(yōu)勢。
權利要求
1、一種何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，其特征在于步驟為(1)、何首烏醇提物的制備對何首烏粗粉末采用60％的乙醇微波提取3次，旋轉薄膜回收乙醇，得到何首烏提取濃縮液；(2)、采用高速逆流色譜法去除脂溶性雜質將上述何首烏提取濃縮液加水稀釋，裝于逆流色譜儀中，用乙醚連續(xù)萃取，至乙醚色淺，將乙醚萃取過的水溶液集中，進一步揮散乙醚液；(3)、利用大孔吸附樹脂純化二苯乙烯苷將所得粗品將加入適量的水混懸后，過大孔吸附樹脂，先用少量水洗脫至洗脫液不渾濁，棄去，再用70％濃度乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，冷凍干燥，得二苯乙烯苷粗品；(4)、得到二苯乙烯苷精品將上述二苯乙烯苷粗品混懸于水溶液中，再次裝于逆流色譜儀中，用乙酸乙脂連續(xù)萃取，監(jiān)測直至乙酸乙脂提取液中無二苯乙烯苷為止，回收乙酸乙脂至小體積，通過低溫結晶處理得到二苯乙烯苷精品。
2、 根據權利要求1所述的何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，其特征在于在上 述步驟中，利用HPLC法及紅外/近紅外成像系統對產品進行色譜和光譜質量監(jiān)控。
3、 根據權利要求1或2所述的何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，其特征在于 在上述步驟(4)中，利用HPLC監(jiān)測乙酸乙脂提取液中的二苯乙烯苷。
全文摘要
一種何首烏提取物二苯乙烯苷的提取方法，其步驟為(1)何首烏醇提物的制備對何首烏粗粉末采用60％的乙醇微波提取3次，旋轉薄膜回收乙醇，得到何首烏提取濃縮液；(2)采用高速逆流色譜法去除脂溶性雜質；(3)利用大孔吸附樹脂純化二苯乙烯苷；(4)得到二苯乙烯苷精品將上述二苯乙烯苷粗品混懸于水溶液中，再次裝于逆流色譜儀中，用乙酸乙酯連續(xù)萃取，監(jiān)測直至乙酸乙酯提取液中無二苯乙烯苷為止，回收乙酸乙酯至小體積，通過低溫結晶處理得到二苯乙烯苷精品。本發(fā)明具有操作簡便、提取純度高、穩(wěn)定性好、提取效率高等優(yōu)點。
文檔編號C07H15/18GK101560229SQ20081003109
公開日2009年10月21日 申請日期2008年4月17日 優(yōu)先權日2008年4月17日
發(fā)明者萬保春, 萬玉華, 沈小笛, 陳啟源, 睿 麻 申請人:霸王(廣州)有限公司