專利名稱：全氟辛酸人工完全抗原的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid，PF0A)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。
背景技術：
全氟辛酸(PFOA)是一種重要的含氟表面活性劑，主要用于聚合物添加劑、潤滑劑、滅火劑、殺蟲劑等。由于全氟辛酸的化學惰性及其廣泛的生產(chǎn)和使用，已造成嚴重的環(huán)境累積和污染，成為繼有機氯農(nóng)藥、二惡英之后日益引起重視的新型持久性有機污染物。研究表明，全氟辛酸是具有中等毒性的肝致癌物，可增加人類患癌癥的風險，此外，全氟辛酸還具有胚胎毒性和潛在的神經(jīng)毒性，而且生物蓄積性強，具有引起生物體脂肪代謝紊亂、能量代謝障礙、誘導過氧化產(chǎn)物作用及胚胎毒性等多種毒性。調(diào)查表明，職業(yè)性PFOA暴露人群、一般人群和野生動物體內(nèi)以及環(huán)境中，均廣泛存在著以PFOA為主的PFCs污染。因此， 對于環(huán)境中全氟辛酸的檢測是非常重要的。目前國內(nèi)的研究多集中于利用了固相萃取與高效液相色譜.質(zhì)譜(HPLCMQ聯(lián)用的方法同時檢測生物體內(nèi)和水中的PF0A。但樣品預處理煩瑣，操作復雜，儀器昂貴，很難達到快速、簡便的現(xiàn)場檢測要求。如果能夠采用金標免疫或酶聯(lián)免疫的方法，則可達到快速、靈敏并能現(xiàn)場檢測PFOA的需要。為了建立其免疫分析的方法，首先必須得到全氟辛酸的抗體。全氟辛酸分子結(jié)構(gòu)簡單，分子量小，屬于半抗原，不能直接免疫制取抗體，必須首先將其與載體蛋白偶聯(lián)制備出它的完全抗原，才能誘發(fā)動物產(chǎn)生抗體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于尋求適當?shù)脑噭?，用簡單、實用的方法合成出全氟辛酸的完全抗原，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供基礎。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及一種全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid, PF0A)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛酸的羧酸基團，可以將全氟辛酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上；連接臂的類型或者長度的選擇取決于由此抗原產(chǎn)生的抗體的活性，制備全氟辛酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白 (BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。 MALDI-T0F-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上全氟辛酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
具體實施例方式實施例1
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及一種全氟辛酸(Perfluorooctanoicacid, PF0A)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛酸的羧酸基團，將全氟辛酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備全氟辛酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。MALDI-TOF-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上全氟辛酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)jp 清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，可以將全氟辛酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上；連接臂的類型或者長度的選擇取決于由此抗原產(chǎn)生的抗體的活性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，能夠?qū)⑷了徭溄拥捷d體蛋白上的方法和試劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，反應溫度在-100°C-100°C之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，反應時間在1分鐘-200小時之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，全氟辛酸的用量為載體蛋白的 0. 001-2000摩爾當量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種全氟辛酸(Perfluorooctanoic acid，PFOA)人工完全抗原的制備方法，屬于有機化學及免疫學技術范疇。利用全氟辛酸的羧酸基團，將全氟辛酸直接或者通過適當長度的連接臂鏈接到載體蛋白上，制備全氟辛酸的完全抗原。載體蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血蘭蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-TOF-MS質(zhì)譜確定載體蛋白上全氟辛酸的數(shù)量。本方法操作簡單，無需特別的儀器設備，成本低廉，為以后篩選出它的特異性抗體和建立免疫分析方法提供了基礎。
文檔編號C07K14/77GK102276713SQ20101020276
公開日2011年12月14日 申請日期2010年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月10日
發(fā)明者孫艷靈, 杜宇國, 魏國華 申請人:中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心