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      一個(gè)影響山羊早期生長(zhǎng)的分子標(biāo)記、檢測(cè)方法及其應(yīng)用與流程

      文檔序號(hào):12109151閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.一個(gè)影響山羊早期生長(zhǎng)性狀的分子標(biāo)記,其特征在于所述分子標(biāo)記位于山羊MC4R基因502位點(diǎn),且具有A/G多態(tài)性,AA型山羊早期體重高于GG型山羊早期體重。

      2.權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記在山羊分子育種中的應(yīng)用。

      3.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的引物對(duì),其特征在于上游引物P1如序列表中SEQ ID NO:1所示,下游引物P2如序列表中SEQ ID NO:2所示。

      4.權(quán)利要求3所述的引物對(duì)在對(duì)山羊分子育種中的應(yīng)用。

      5.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包含PCR擴(kuò)增山羊基因組中含有權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的一段序列,對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,判讀MC4R基因502位點(diǎn)的A/G多態(tài)性。

      6.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的方法,其特征在于包括利用權(quán)利要求3所述的引物對(duì)PCR擴(kuò)增山羊基因組中含有權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記的一段序列,利用BseJI限制性內(nèi)切酶對(duì)所述的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切、電泳分型,獲得513bp、245bp兩個(gè)片段的定義為AA型,獲得758bp、513bp、245bp三個(gè)片段的定義為AG型,獲得758bp片段的定義為GG型。

      7.一種早期篩選快速生長(zhǎng)山羊品系的方法,其特征在于包括檢測(cè)山羊MC4R基因502位點(diǎn)的多態(tài)性,選擇AA型個(gè)體留種。

      8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于包括以下步驟:

      1)提取山羊基因組DNA;

      2)利用權(quán)利要求3所述的引物對(duì)PCR擴(kuò)增MC4R基因序列,得到758bp擴(kuò)增產(chǎn)物;

      3)利用BseJI限制性內(nèi)切酶對(duì)所述的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切、電泳分型,獲得513bp、245bp兩個(gè)片段的定義為AA型,獲得758bp、513bp、245bp三個(gè)片段的定義為AG型,獲得758bp片段的定義為GG型;

      4)選擇AA型個(gè)體留種。

      9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)總體系為20μL,模板DNA 10-100ng,5U/μL Taq聚合酶0.2μL,10mM的dNTP0.4μL,引物P1和P2各6pmol,25mM的MgCl21.2μL,10×緩沖液2μL,加滅菌雙蒸水至20μL;所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min;94℃變性30s,54-58℃退火30s,72℃延伸50s,35個(gè)循環(huán);72℃延伸5min。

      10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于:所述酶切的反應(yīng)體系為10-16μL,PCR產(chǎn)物3-5μL,10U/μL BseJI酶0.2-0.5μL,10×緩沖液1.0-1.6μL,補(bǔ)充滅菌雙蒸水至10-16μL;37℃酶切3-5h。

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