利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域；和 (c)IgG2 鉸鏈。
38. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域；和 (c) 異亮氨酸拉鏈。
39. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c)G4S結(jié)構(gòu)域；和 (d)IgG2 鉸鏈。
40. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c)G4S結(jié)構(gòu)域；和 (d) 異亮氨酸拉鏈。
41. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (d)IgG2鉸鏈；和 (d)結(jié)構(gòu)域連接。
42. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c) 結(jié)構(gòu)域連接；和 (d)IgG2 鉸鏈。
43. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a)Fab結(jié)構(gòu)域； (c)Fc結(jié)構(gòu)域； (d) 異亮氨酸拉鏈；和 (e)結(jié)構(gòu)域連接。
44. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a)Fab結(jié)構(gòu)域； (c)Fc結(jié)構(gòu)域； (d) 結(jié)構(gòu)域連接；和 (e) 異亮氨酸拉鏈。
45. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域；和 (c)GPP結(jié)構(gòu)域。
46. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c)GPP結(jié)構(gòu)域；和 (d)IgG2 鉸鏈。
47. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c) IgG2鉸鏈；和 (d)GPP結(jié)構(gòu)域。
48. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c)GPP結(jié)構(gòu)域；和 (d) 異亮氨酸拉鏈。
49. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體從氨基到羧基末端包含： (a) Fab結(jié)構(gòu)域； (b)Fc結(jié)構(gòu)域； (c) 異亮氨酸拉鏈；和 (d)GPP結(jié)構(gòu)域。
50. 如權(quán)利要求35-49中任一項(xiàng)所述的斯塔都體，其中所述Fc結(jié)構(gòu)域是IgGlFc結(jié)構(gòu) 域。
51. 如權(quán)利要求50所述的斯塔都體，其中所述IgGlFc結(jié)構(gòu)域包含IgGl鉸鏈、IgGl CH2 和IgGlCH3。
52. 如權(quán)利要求35-49中任一項(xiàng)所述的斯塔都體，其中所述Fc結(jié)構(gòu)域包含IgG2鉸鏈。
53. 如權(quán)利要求52所述的斯塔都體，其中所述Fc結(jié)構(gòu)域包含IgG2鉸鏈、IgGlCH2和 IgGlCH3〇
54. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)GFR具有特異性。
55. 如權(quán)利要求54所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與SEQID NO: 31具有至少80%同源性。
56. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)ER2/neu具有特異性。
57. 如權(quán)利要求56所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與SEQID NO: 34具有至少80%同源性。
58. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)D20具有特異性。
59. 如權(quán)利要求58所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與SEQID NO: 36具有至少80%同源性。
60. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述兩個(gè)或更多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域能夠結(jié)合FcyR。
61. 如權(quán)利要求60所述的斯塔都體，其中所述FcyR是FcyRllla。
62. -種調(diào)節(jié)受試者的免疫反應(yīng)的方法，其包括向所述受試者施用有效量的如權(quán)利要 求1所述的斯塔都體。
63. -種治療有需要的受試者的炎性疾病、自身免疫疾病、傳染病或癌癥的方法，其包 括向所述受試者施用有效量的如權(quán)利要求1所述的斯塔都體。
64. 如權(quán)利要求62或63所述的方法，其中所述受試者是人。
65. 如權(quán)利要求62或63所述的方法，其中所述斯塔都體經(jīng)靜脈內(nèi)、經(jīng)皮下、經(jīng)口、經(jīng)鼻、 經(jīng)腹膜內(nèi)、經(jīng)舌下、經(jīng)頰、經(jīng)皮、通過(guò)皮下或皮下植入或經(jīng)肌內(nèi)施用于所述受試者。
66. 如權(quán)利要求65所述的方法，其中所述斯塔都體以約0. 5mg/Kg至約50mg/Kg的劑量 經(jīng)靜脈內(nèi)施用。
67. 如權(quán)利要求63所述的方法，其中所述受試者患有癌癥。
68. 如權(quán)利要求67所述的方法，其中所述癌癥選自結(jié)腸直腸癌、頭頸癌、纖維肉瘤、粘 液肉瘤、脂肪肉瘤、軟骨肉瘤、成骨肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管 內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵 巢癌、前列腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、基底細(xì)胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、 囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞瘤、膽管癌、絨毛膜癌、精原細(xì)胞瘤、胚胎癌、威 爾姆氏腫瘤、宮頸癌、睪丸腫瘤、肺癌、小細(xì)胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細(xì)胞 瘤、髓母細(xì)胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、血管母細(xì)胞瘤、聽(tīng)神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì) 瘤、腦膜瘤、黑素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、沃爾 登斯特倫巨球蛋白血癥、骨髓增生異常病、重鏈病、神經(jīng)內(nèi)分泌瘤和神經(jīng)鞘瘤。
69. 如權(quán)利要求63所述的方法，其中所述受試者患有自身免疫疾病或炎性疾病，且其 中所述自身免疫疾病或炎性疾病選自特發(fā)性血小板減少性紫癜、格-巴二氏綜合癥、重癥 肌無(wú)力、多發(fā)性硬化、視神經(jīng)炎、川崎病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、異位性皮炎、動(dòng) 脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈病、心肌病、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、移植物抗宿 主病和1型糖尿病。
70. 如權(quán)利要求63所述的方法，其中所述受試者患有傳染病，且其中所述傳染病選自 念珠菌病，念珠菌血癥，曲霉病，鏈球菌性肺炎，鏈球菌性皮膚和口咽病狀，革蘭氏陰性膿毒 病，肺結(jié)核，單核細(xì)胞增多癥，流感，由呼吸道合胞病毒、人免疫缺陷病毒引起的呼吸系統(tǒng)疾 病，乙型肝炎，丙型肝炎，瘧疾，血吸蟲(chóng)病，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌疾病、耐萬(wàn)古霉素腸 球菌疾病、耐碳青霉烯型和產(chǎn)碳青霉烯酶型腸桿菌科疾病，分枝桿菌病和錐蟲(chóng)病。
71. 如權(quán)利要求62或63所述的方法，其中所述斯塔都體是在施用一種或多種額外藥物 和/或治療劑之前、期間或之后施用。
72. 如權(quán)利要求2所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞毒性與在除分隔 兩個(gè)或更多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域以外的位置上含有一個(gè)或多個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所 增強(qiáng)。
73. 如權(quán)利要求3所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞毒性與在除所述 IgGlFc區(qū)的羧基端以外的位置上含有一個(gè)或多個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所增 強(qiáng)。
74. 如權(quán)利要求7所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞殺傷與含有一個(gè) 多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所增強(qiáng)。
75. 如權(quán)利要求8所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞殺傷與含有兩個(gè) 多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所增強(qiáng)，所述兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域不是異亮氨酸拉鏈和IgG2 鉸鏈。
76. 如權(quán)利要求72或73所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由ADCC介導(dǎo)。
77. 如權(quán)利要求72或73所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由CDC介導(dǎo)。
78. 如權(quán)利要求72或73所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由DC介導(dǎo)。
79. -種斯塔都體，其包含F(xiàn)ab結(jié)構(gòu)域；兩個(gè)或更多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域；和兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu) 域，其中所述兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域分隔所述兩個(gè)或更多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域，其中所述斯塔都體所顯 示的細(xì)胞殺傷與含有一個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所增強(qiáng)。
80. 如權(quán)利要求79所述的斯塔都體，其中所述兩個(gè)或更多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)是 IgGlFc結(jié)構(gòu)域。
81. -種斯塔都體，其包含F(xiàn)ab結(jié)構(gòu)域；一個(gè)或多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域；和兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域， 其中所述兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域位于Fc區(qū)的羧基端上，且其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞殺 傷與含有一個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域的斯塔都體相比有所增強(qiáng)。
82. 如權(quán)利要求81所述的斯塔都體，其中所述一個(gè)或多個(gè)Fc結(jié)構(gòu)域中的至少一個(gè)是 IgGlFc結(jié)構(gòu)域。
83. 如權(quán)利要求79或81所述的斯塔都體，其中所述兩個(gè)多聚化結(jié)構(gòu)域是異亮氨酸拉鏈 和IgG2鉸鏈。
84. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的細(xì)胞殺傷與對(duì)相同抗 原具有特異性的單克隆抗體相比有所增強(qiáng)。
85. 如權(quán)利要求84所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由ADCC介導(dǎo)。
86. 如權(quán)利要求84所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由CDC介導(dǎo)。
87. 如權(quán)利要求84所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由DC介導(dǎo)。
88. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的對(duì)細(xì)胞增殖的抑制與 對(duì)相同抗原具有特異性的單克隆抗體相比有所增強(qiáng)。
89. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體還包含一個(gè)或多個(gè)危險(xiǎn)信號(hào)。
90. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述危險(xiǎn)信號(hào)選自⑶40-L、TNF-a、IL-1 0、 IFN-a、細(xì)胞內(nèi)核苷酸ATP或UTP、未甲基化長(zhǎng)CpG序列、熱休克蛋白、反應(yīng)性氧中間體、 血管活性腸肽、金屬蛋白酶9、硫酸類肝素的降解產(chǎn)物、透明質(zhì)酸的小分解產(chǎn)物、LDL衍生 的磷脂、LOX-1、尿酸、高迀移率族蛋白1、炎性體、IL-1a;S100蛋白；肝癌衍生生長(zhǎng)因子、 IL-1a;高濃度的腺苷5' -三磷酸酶、0 -D-吡喃葡萄糖基神經(jīng)酰胺、IL-33、諸如金納米顆 粒的納米顆粒和F-肌動(dòng)蛋白。
91. 如權(quán)利要求62或63所述的方法，其包括施用如權(quán)利要求89所述的斯塔都體。
92. 如權(quán)利要求62或63所述的方法，其還包括在治療之前、期間或之后施用包含危險(xiǎn) 信號(hào)的額外斯塔都體。
93. 如權(quán)利要求18所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)GFR具有特異性。
94. 如權(quán)利要求93所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO: 31具有 至少80%同源性。
95. 如權(quán)利要求18所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)er2/neu具有特異性。
96. 如權(quán)利要求95所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO: 34具有 至少80%同源性。
97. 如權(quán)利要求18所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)D20具有特異性。
98. 如權(quán)利要求97所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO: 36具有 至少80%同源性。
99. 如權(quán)利要求35所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)GFR具有特異性。
100. 如權(quán)利要求99所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO: 31具 有至少80%同源性。
101. 如權(quán)利要求35所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)er2/neu具有特異性。
102. 如權(quán)利要求101所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO:34具 有至少80%同源性。
103. 如權(quán)利要求35所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)D20具有特異性。
104. 如權(quán)利要求103所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDNO: 36具 有至少80%同源性。
105. -種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 35具有至少80%同源性的氨基酸序列。
106. 如權(quán)利要求105所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO: 35具有至少 95%同源性。
107. 如權(quán)利要求106所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO:35。
108. -種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 33具有至少80%同源性的氨基酸序列。
109. 如權(quán)利要求108所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO: 33具有至少 95%同源性。
110. 如權(quán)利要求109所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO:33。
111. 一種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 37具有至少80%同源性的氨基酸序列。
112. 如權(quán)利要求111所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO: 37具有至少 95%同源性。
113. 如權(quán)利要求112所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO:37。
114. 一種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 66具有至少80%同源性的氨基酸序列。
115. 如權(quán)利要求114所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDN0:66具有至少 95%同源性。
116. 如權(quán)利要求115所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDN0:66。
117. -種斯塔都體，其具有與SEQIDN0:91具有至少80%同源性的氨基酸序列。
118. 如權(quán)利要求117所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO:91具有至少 95%同源性。
119. 如權(quán)利要求118所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO:91。
120. -種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 70具有至少80%同源性的氨基酸序列。
121. 如權(quán)利要求120所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDN0:70具有至少 95%同源性。
122. 如權(quán)利要求121所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO:70。
123. -種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 76具有至少80%同源性的氨基酸序列。
124. 如權(quán)利要求123所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO: 76具有至少 95%同源性。
125. 如權(quán)利要求124所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDNO: 76。
126. -種斯塔都體，其具有與SEQIDNO: 87具有至少80%同源性的氨基酸序列。
127. 如權(quán)利要求126所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列與SEQIDNO:87具有至少 95%同源性。
128. 如權(quán)利要求127所述的斯塔都體，其中所述氨基酸序列是SEQIDN0:87。
129. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)NF超家族成員具有特異 性。
130. 如權(quán)利要求129所述的斯塔都體，其中所述TNF超家族成員選自TNF、淋巴毒素 (LT)、淋巴毒素 0(LT0 )、0X40 配體、CD40 配體、CD95、CD27 配體、CD30 配體、4-1BB配體、 TRAIL、TRANCE、TWEAK、APRIL、Blys、LIGHT、TL1A、GITR配體、EDA-A1 和EDA-A2。
131. 如權(quán)利要求130所述的斯塔都體，其中所述TNF超家族成員是TNF。
132. 如權(quán)利要求131所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列與SEQID NO: 67具有至少80%同源性。
133. 如權(quán)利要求18所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)NF具有特異性。
134. 如權(quán)利要求133所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDN0:67具 有至少80%同源性。
135. 如權(quán)利要求35所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)NF具有特異性。
136. 如權(quán)利要求135所述的斯塔都體，其中所述Fab的氨基酸序列與SEQIDN0:67具 有至少80%同源性。
137. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述Fab結(jié)構(gòu)域?qū)?xì)胞因子具有特異性。
138. 如權(quán)利要求137所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞因子選自IL-2、IL-8和IL-17。
139. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的補(bǔ)體結(jié)合與對(duì)相同抗 原具有特異性的單克隆抗體相比有所增強(qiáng)。
140. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體所顯示的補(bǔ)體結(jié)合與具有相同 Fab的單克隆抗體相比有所增強(qiáng)。
141. 如權(quán)利要求139或140所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體的補(bǔ)體結(jié)合EC50值與 對(duì)相同抗原具有特異性的單克隆抗體相比低至少10倍。
142. 如權(quán)利要求139或140所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體的補(bǔ)體結(jié)合EC50值與 對(duì)相同抗原具有特異性的單克隆抗體相比低至少20倍。
143. 如權(quán)利要求1所述的斯塔都體，其中所述斯塔都體展現(xiàn)細(xì)胞殺傷，且其中細(xì)胞殺 傷的量取決于所述Fab而變化。
144. 如權(quán)利要求143所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由ADCC介導(dǎo)。
145. 如權(quán)利要求143所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由CDC介導(dǎo)。
146. 如權(quán)利要求143所述的斯塔都體，其中所述細(xì)胞殺傷由DC介導(dǎo)。
147. -種組合物，其包含多聚化斯塔都體，其中所述斯塔都體選自如權(quán)利要求18-30 中任一項(xiàng)所述的斯塔都體。
148. 如權(quán)利要求147所述的組合物，其包含至少2種、至少3種、至少4種、至少5種或 至少6種斯塔都體。
【專利摘要】本發(fā)明涉及被稱為斯塔都體的生物學(xué)活性蛋白質(zhì)。所述斯塔都體具有產(chǎn)生斯塔都體多聚體的兩個(gè)或更多個(gè)結(jié)構(gòu)域。所述斯塔都體具有抗原結(jié)合能力和結(jié)合Fc受體(FcR)的能力，并且可用于治療和預(yù)防疾病。
【IPC分類】C07K19-00, A61K39-395, C07K16-46
【公開(kāi)號(hào)】CN104718223
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380053362
【發(fā)明人】D.布洛克, H.奧爾森
【申請(qǐng)人】格利克尼克股份有限公司
【公開(kāi)日】2015年6月17日
【申請(qǐng)日】2013年8月20日
【公告號(hào)】CA2882296A1, EP2885320A2, US20140072582, WO2014031646A2, WO2014031646A3