mo I)的6-APA，加水25L，調節(jié)pH在8.0土0.2，得到質量濃度為40 %的6-APA混懸溶液。然后向6-APA混懸溶液中加入5Kg的青霉素酰化酶。將9.6Kg (約0.048mol)的D-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽加入15L水溶液中溶解。再在90min時間內將D-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽溶解液緩慢加入到6-APA混懸溶液中，在20 ± I °C下進行?；磻磻^程中用氨水控制?；磻猵H在7.0 ± 0.2，反應液自始至終為混懸液，用HPLC法判斷反應終點。
[0075]B.震蕩分離，控制產(chǎn)物料漿黏度在200±20mPa.s，采用過濾篩網(wǎng)為100目的振蕩篩，在20 ± 2°C、、振蕩篩的振頻為2000rpm工藝條件下對產(chǎn)物料漿進行震蕩分離，震蕩分離I小時后，得到催化酶濾渣和頭孢菌素混懸濾液。
[0076]C.產(chǎn)物精制，對頭孢菌素混懸濾液進行過濾，得到頭孢菌素濕粉濾餅，濾餅先用5L水洗滌一次，再分別用1L丙酮洗滌兩次，在40±2°C下干燥，得青霉素氨芐16.68Kg，重量收率166.8%，經(jīng)測定純度為99.9%。
[0077]實施例6
[0078]本實施例的酶催化酰化制備頭孢菌素的方法，用于制備頭孢拉定。
[0079]本實施例中，選用的原料具體如下:?；噭┻x擇D-雙氫苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽，β_內酰胺核選擇7-氨基去乙酰氧基頭孢菌素酸(7-ADCA)，催化酶選擇青霉素?；?。
[0080]具體包括以下步驟:
[0081]A.?；磻?，將酰化試劑與β_內酰胺核在催化酶的作用下進行?；磻玫疆a(chǎn)物料漿。具體過程為，在反應罐中加入60Kg(約0.2804mol)的7-ADCA，加水120L，調節(jié)pH在
8.0± 0.2，得到質量濃度為50 %的7-ADCA混懸溶液，然后向7-ADCA混懸溶液加入60Kg的青霉素?；?。將64.9Kg(約0.3197mol)的D-雙氫苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽加入到90L水中溶解。再在60min時間內將D-雙氫苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽的溶液緩慢加入到7-ADCA混懸溶液中，在20±2°C下進行酰化反應，反應過程中用氨水控制酰化反應pH在6.8±0.1，反應液自始至終為混懸液，用HPLC法判斷反應終點。
[0082]B.震蕩分離，控制產(chǎn)物料漿黏度在280±20mPa.s，采用過濾篩網(wǎng)為100目的振蕩篩，在20±2°C、振蕩篩的振頻為2800rpm工藝條件下對產(chǎn)物料漿進行震蕩分離，震蕩分離I小時后，得到催化酶濾渣和頭孢菌素混懸濾液。
[0083]C.產(chǎn)物精制，對頭孢菌素混懸濾液進行過濾，得到頭孢菌素濕粉濾餅，濾餅先用1L水洗滌一次，再分別用20L丙酮洗滌兩次，在40 ± 2 °C下干燥，得頭孢拉定90Kg，重量收率150%,經(jīng)測定純度為99.9%。
[0084]實施例7
[0085]本實施例的酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，用于制備頭孢噻肟。
[0086]本實施例中，選用的原料具體如下:?；噭┻x擇氨噻肟酸乙酯，β-內酰胺核選擇7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)，催化酶選擇青霉素酰化酶。
[0087]具體包括以下步驟:
[0088]Α.酰化反應，將酰化試劑與β_內酰胺核在催化酶的作用下進行?；磻?，得到產(chǎn)物料漿。具體過程為，在反應罐中加入I OKg (約0.037mo I)的7-ACA，加水20L，調節(jié)pH在8.0土0.2，得到質量濃度為50%的7-ACA混懸溶液，然后向7-ACA混懸溶液中加入1Kg的青霉素?；?。將10.8Kg(約0.044mol)的氨噻肟酸乙酯加入到20L水中溶解，再在90min時間內將氨噻肟酸乙酯的溶液緩慢加入到7-ACA混懸溶液中，在20 ± 2°C下進行?；磻?，反應過程中用氨水控制酰化反應PH在6.5 ±0.1，反應液自始至終為混懸液，用HPLC法判斷反應終點。
[0089]B.震蕩分離，控制產(chǎn)物料漿黏度在300±20mPa.s，采用過濾篩網(wǎng)為100目的振蕩篩，在20 ± 2°C、、振蕩篩的振頻為3000rpm工藝條件下對產(chǎn)物料漿進行震蕩分離，震蕩分離I小時后，得到催化酶濾渣和頭孢菌素混懸濾液。
[0090]C.產(chǎn)物精制，對頭孢菌素混懸濾液進行過濾，得到頭孢菌素濕粉濾餅，濾餅先用5L洗滌一次，再分別用1L丙酮洗滌兩次，在45±2°C下干燥，得頭孢噻肟14.3Kg，重量收率為143%,經(jīng)測定純度為99.9%。
【主權項】
1.一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述方法包括以下步驟， A.?；磻瑢Ⅴ；噭┡cβ-內酰胺核在催化酶的作用下進行酰化反應，得到產(chǎn)物料漿； B.震蕩分離，控制產(chǎn)物料漿黏度，采用振蕩篩，在一定工藝條件下對產(chǎn)物料漿進行震蕩分離，得到催化酶濾渣和頭孢菌素混懸濾液； C.產(chǎn)物精制，對頭孢菌素混懸濾液進行過濾，得到頭孢菌素濕粉，經(jīng)洗滌、干燥，得精制產(chǎn)物。2.根據(jù)權利要求1所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A的具體過程為，將?；噭┰谝欢〞r間內緩慢加入到含有催化酶的β-內酰胺核混懸溶液中，控制內酰胺核混懸溶液的ΡΗ，在一定溫度下進行?；磻?，反應過程中控制?；磻膒H，酰化反應一定時間后得到產(chǎn)物漿料。3.根據(jù)權利要求2所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A中，酰化試劑與β-內酰胺核的摩爾比為1.05:1?1.2:1，催化酶與照β-內酰胺核的質量比為0.3:1?2:1，β_內酰胺核混懸溶液的質量濃度為30?60%，β_內酰胺核混懸溶液的pH為6.5?8.5，?；磻猵H為6.0?7.2，?；磻獪囟葹?5?25°C，?；噭┑募恿蠒r間為30?60mino4.根據(jù)權利要求3所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A的?；磻^程中，通過氨水控制?；磻猵H，用HPLC法判斷反應終點。5.根據(jù)權利要求3所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A中，酰化試劑為D-苯甘氨酸酯、D-苯甘氨酸酯鹽、D-苯甘氨酸酯的衍生物、D-苯甘氨酸酯的衍生物鹽、氨噻肟酸酯、氨噻肟酸酯鹽的其中一種。6.根據(jù)權利要求3所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A中，β-內酰胺核為青霉素酸衍生物、頭孢菌素酸衍生物的其中一種。7.根據(jù)權利要求3所述的一種酶催化酰化制備頭孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟A中，催化酶為青霉素?；浮?.根據(jù)權利要求1所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟B中，產(chǎn)物漿料黏度控制在10?400mPa.s，振蕩篩的過濾篩網(wǎng)80?120目，振蕩篩的振頻為1000?3000rpmo9.根據(jù)權利要求1所述的一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，其特征在于:所述步驟C中，洗滌頭孢菌素濕粉的溶劑為水、丙酮、乙醇的其中一種或幾種，干燥溫度為30?50°C。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種酶催化?；苽漕^孢菌素的方法，包括：A.?；磻?，將?；噭┡cβ-內酰胺核在催化酶的作用下進行?；磻?，得到產(chǎn)物料漿；B.震蕩分離，控制產(chǎn)物料漿黏度，采用振蕩篩，在一定工藝條件下對產(chǎn)物料漿進行震蕩分離，得到催化酶濾渣和頭孢菌素混懸濾液；C.產(chǎn)物精制，對頭孢菌素混懸濾液進行過濾，得到頭孢菌素濕粉，經(jīng)洗滌、干燥，得精制產(chǎn)物。本發(fā)明通過優(yōu)化工藝流程及工藝參數(shù)，解決了現(xiàn)有工藝存在的酶分離困難、制備成本高，環(huán)境污染嚴重等問題，在夠保證產(chǎn)品質量的同時，簡化了工藝流程、提高了分離效率和生產(chǎn)效率、降低了生產(chǎn)成本。
【IPC分類】C12P35/04
【公開號】CN105603037
【申請?zhí)枴緾N201510981431
【發(fā)明人】張軍立, 段志鋼, 張鎖慶, 劉倩, 臧飛, 王新輝, 穆軍明, 崔克嬌, 段素英
【申請人】華北制藥河北華民藥業(yè)有限責任公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2015年12月24日