1.一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述試劑盒由尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照緩沖液、尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體A包被的酶標(biāo)板、辣根過氧化物酶標(biāo)記的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體B溶液和輔助試劑組成；所述輔助試劑為底物溶液、顯色液、反應(yīng)終止液和清洗緩沖液；所述底物溶液為含質(zhì)量濃度3％過氧化氫和0.1mg/L的焦磷酸二氫鈉的磷酸-檸檬酸緩沖液，pH7.4；所述反應(yīng)終止液為2mol/L硫酸水溶液。
2.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體A源自雜交瘤細(xì)胞株Zj/2D8，所述尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體B源自雜交瘤細(xì)胞株1E7。
3.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述對(duì)照緩沖液為pH7.4、20mmol/L的PBS緩沖液。
4.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述顯色液為0.1mg/ml四甲基聯(lián)苯胺的甲醇溶液；所述清洗緩沖液為含質(zhì)量濃度0.05％Tween-20的pH7.4、20mmol/L的PBS緩沖液。
5.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)品用pH7.4、20mmol/L的PBS緩沖液配制成0.05ng/ml，0.1ng/ml，0.25ng/ml，0.5ng/ml，1ng/ml，5ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
6.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體A包被的酶標(biāo)板制備方法為：將尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體A用0.05M、pH 9.6碳酸鹽緩沖液稀釋200倍體積后加入酶標(biāo)板各孔，每孔100μl，25℃下吸附過夜，用含質(zhì)量濃度0.05％Tween-20的0.02M、pH 9.6磷酸鹽緩沖液洗板，再用封閉液封閉過夜，甩干后晾干，即獲得單克隆抗體包被酶標(biāo)板；所述封閉液為含2g/L的BSA、0.1g/L蔗糖的20mmol/L的PBS緩沖液，pH值為9.6。
7.如權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述辣根過氧化物酶標(biāo)記的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體B溶液是將辣根過氧化物酶標(biāo)記的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體B用含0.2mg/L PEG200的pH 8.5、20mmol/L PBS緩沖液配制成0.5mg/L溶液。
8.如權(quán)利要求1-7之一所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，其特征在于所述試劑盒組成：尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體包被酶標(biāo)板，96孔；辣根過氧化物酶標(biāo)記的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體溶液1瓶，5ml/瓶；對(duì)照緩沖液1瓶，5ml/瓶；尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)品1瓶，5ml/瓶；底物溶液1瓶，5ml/瓶；顯色液1瓶，5ml/瓶；反應(yīng)終止液1瓶，5ml/瓶；清洗緩沖液(10×濃縮)1瓶，50ml/瓶。
9.一種權(quán)利要求1所述酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述應(yīng)用為：在尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體A包被酶標(biāo)板的微孔中加入50μl待測(cè)樣品，37℃水浴保溫1小時(shí)，清洗緩沖液洗板操作3次，加入100μl辣根過氧化物酶標(biāo)記的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶單克隆抗體B溶液，37℃水浴保溫1小時(shí)，清洗緩沖液重復(fù)洗板操作3次；再依次加入底物溶液，顯色液各50μl，37℃水浴保溫30分鐘，然后加入50μl反應(yīng)終止液，結(jié)束反應(yīng)；用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定OD值，同樣條件下以對(duì)照緩沖液代替待測(cè)樣品作為空白對(duì)照，以pH7.4、20mmol/L的PBS緩沖液配制的0.05ng/ml、0.1ng/ml、0.25ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml和5ng/ml的尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶標(biāo)準(zhǔn)品溶液分別代替待測(cè)樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)；計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸系數(shù)R2，當(dāng)R2>0.99時(shí)，本次測(cè)定有效；計(jì)算待測(cè)樣品與空白對(duì)照的OD值比值，當(dāng)比值大于2時(shí)，檢測(cè)結(jié)果陽性，說明待測(cè)樣品中含有尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶，當(dāng)比值小于等于2時(shí)為陰性結(jié)果；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得待測(cè)樣品中尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶含量。