專利名稱：一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬菌株分離的制備領(lǐng)域，特別是涉及一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法。
背景技術(shù)：
蠶絲精練的目的是去除原料中的大部分絲膠、油脂和雜質(zhì)等，充分發(fā)揮蠶絲纖維固有 的光澤和手感，同時盡量保持蠶絲原有的物理機械性能。精練的質(zhì)量直接影響倒后續(xù)工序 能否正常進行、產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)劣及生產(chǎn)成本的高低，精練方法的不同影響到工人的勞動強 度、勞動環(huán)境及對環(huán)境的污染。
目前，蠶絲生產(chǎn)中常用的精練方法有皂堿法和生物酶法。皂堿法是傳統(tǒng)的精練方法， 采用化學(xué)藥劑促使蠶絲脫膠除油，速度快、產(chǎn)量高，但對纖維損傷大，且污染環(huán)境嚴重。 生物酶法就是用生物酶制劑直接作用于蠶絲原料，使其脫膠除油，可提高勞動生產(chǎn)率、減 少環(huán)境污染，對纖維損傷也小，但現(xiàn)有的生物酶制劑成本高，可選品種少，不適于工廠大 批量生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，本發(fā)明篩選 出的菌株可直接作用于蠶絲精練脫膠，能有效提高精練質(zhì)量，減少精練時間，提高勞動生 產(chǎn)率，減少環(huán)境污染，降低生產(chǎn)成本，該分離方法效果明顯、易觀察、操作簡便。
本發(fā)明的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，包括
(1) 待分離樣品的準備采集絹紡原料腐化練練液或絹紡廠土樣；
(2) 脫膠菌株的初歩篩選采用高蛋白培養(yǎng)基平板法，將培養(yǎng)基A和樣品液在平板
上涂布接種、培養(yǎng)，得到產(chǎn)生透明圈的菌落，將菌落接種于牛肉膏蛋白胨斜面上37'C恒溫
培養(yǎng)ld，于冰箱中1 1(TC保存；
(3) 脫膠菌株的復(fù)篩將上述菌種接種于裝有培養(yǎng)基B的三角瓶，置于搖床上培養(yǎng)， 得到作用于蠶絲而使原料殘膠率為最低的菌種，即為脫膠菌種；
(4) 將分離出的脫膠菌株接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上37'C恒溫培養(yǎng)ld，于冰 箱中1 1(TC保存。
所述的培養(yǎng)基A配方為可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g, KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 l,0g，瓊脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水lOOOmL;所述的培養(yǎng)基B配方為蠶絲原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 L0 10.0g， NaCl L0 5.0g， pH6.0 8.0，水lOOOmL;
所述的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g, NaCl 1.0 6.0g，瓊脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL;
所述步驟(2)中的平板涂布接種的接種量為0.05 0.2mL，接種溫度30 45°C ，培養(yǎng) 時間1 3d;
所述步驟(3)中的搖床轉(zhuǎn)速為100 300r/min，培養(yǎng)溫度為30 45°C，培養(yǎng)時間l
5d;
所述的培養(yǎng)基A，培養(yǎng)基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分別在滅菌鍋內(nèi)滅菌20 30min，滅菌鍋壓力為0.7 1.2Kg/cm2。 有益效果
(1) 本發(fā)明篩選出的菌株可直接作用于蠶絲精練脫膠，能有效提高精練質(zhì)量，減少
精練時間，提高勞動生產(chǎn)率，減少環(huán)境污染，降低生產(chǎn)成本；
(2) 該分離方法效果明顯、易觀察、操作簡便。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例，進一歩闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而 不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
實施例1
(1) 待分離樣品的準備采集絹紡原料腐化24h后的液體，供分離脫膠菌株用
(2) 脫膠菌株的初步篩選脫膠菌株的篩選方法用高蛋白平板涂布分離法，將培養(yǎng)
皿及培養(yǎng)基A分別于1Kg/cn^滅菌20min，滅菌后倒平板，采用涂布法接種，接種量為 O.lmL， 37°C，培養(yǎng)l 3d,得到五種形態(tài)的脫膠菌的菌落；
培養(yǎng)基A配方為可溶性淀粉8.0g，酵母高3.0g，酪蛋白6.0g， KH2PO41.0g， MgS04 0.2g，瓊脂20.0g， pH7.0，水lOOOmL;
(3) 脫膠菌株的復(fù)篩將搖瓶及培養(yǎng)基B分別于lKg/cr^滅菌20min，然后接種，再 將接種好的搖瓶置于搖床上培養(yǎng)，溫度37。C,轉(zhuǎn)速200r/min，培養(yǎng)72h后取出，測定原料的殘膠率，得到殘膠率最低的菌株，
培養(yǎng)基B配方為蠶絲原料lO.Og， K2HPO41.0g， KH2PO44.0g, NaC12.0g， pH7.0， 水lOOOmL;
(4)通過上述方法得到優(yōu)勢脫膠菌株。
實施例2
(1) 待分離樣品的準備采集絹紡廠土樣lg，加入無菌水99mL，振蕩稀釋后供分離 脫膠菌用；
(2) 脫膠菌株的初歩篩選脫膠菌株的篩選方法用高蛋白平板涂布分離法，將培養(yǎng) 皿及培養(yǎng)基A分別于1Kg/ci^滅菌20min，滅菌后倒平板，采用涂布法接種，接種量為 0.2mL， 39°C，培養(yǎng)3 5d。得到四種形態(tài)的脫膠菌的菌落；
培養(yǎng)基A配方為可溶性淀粉10.0g，酵母高5.0g,酪蛋白10.0g， KH2P04 2.0g， MgS04 0.5g，瓊脂18.0g， pH8.0，水1000mL;
G)脫膠菌株的復(fù)篩將搖瓶及培養(yǎng)基B分別于lKg/cn^滅菌20min，然后接種，再 將接種好的搖瓶置于搖床上培養(yǎng)，溫度39。C,轉(zhuǎn)速220r/min，培養(yǎng)84h后取出，測定原 料的殘膠率，得到殘膠率最低的菌株；
培養(yǎng)基B配方為蠶絲原料25.0g， K2HPO42.0g， KH2PO46.0g， NaCl l.Og， pH8.0， 水濯OmL;
(4)通過上述方法得到優(yōu)勢脫膠菌株。
權(quán)利要求
1. 一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，包括(1)待分離樣品的準備采集絹紡原料腐化練練液或絹紡廠土樣；(2)脫膠菌株的初步篩選采用高蛋白培養(yǎng)基平板法，將培養(yǎng)基A和樣品液在平板上涂布接種、培養(yǎng)，得到產(chǎn)生透明圈的菌落，將菌落接種于牛肉膏蛋白胨斜面上37℃恒溫培養(yǎng)1d，于冰箱中1～10℃保存；(3)脫膠菌株的復(fù)篩將上述菌種接種于裝有培養(yǎng)基B的三角瓶，置于搖床上培養(yǎng)，得到作用于蠶絲而使原料殘膠率為最低的菌種，即為脫膠菌種；(4)將分離出的脫膠菌株接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上37℃恒溫培養(yǎng)1d，于冰箱中1～10℃保存。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述的培養(yǎng)基A配方為可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g， KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 1.0g，瓊脂15.0 20.0g, pH6.0 9.0，水1000mL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述的培養(yǎng) 基B配方為蠶絲原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 1.0 10.0g， NaCl 1.0 5.0g， pH6.0 8.0，水1000mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g，NaCl 1.0 6.0g，瓊脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述步驟(2) 中的平板涂布接種的接種量為0.05 0.2mL，接種溫度30 45r，培養(yǎng)時間1 3d。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述步驟(3) 中的搖床轉(zhuǎn)速為100~300r/min,培養(yǎng)溫度為30 45°C，培養(yǎng)時間l 5d。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，其特征在于所述的培養(yǎng) 基A,培養(yǎng)基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分別在滅菌鍋內(nèi)滅菌20 30min，滅菌鍋壓 力為0.7 1.2Kg/cm2。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種蠶絲精練用脫膠菌株的分離方法，包括(1)待分離樣品的準備采集絹紡原料腐化練練液或絹紡廠土樣；(2)脫膠菌株的初步篩選采用高蛋白培養(yǎng)基平板法，將培養(yǎng)基A和樣品液在平板上涂布接種、培養(yǎng)，得到產(chǎn)生透明圈的菌落，將菌落接種于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；(3)脫膠菌株的復(fù)篩將上述菌種接種于裝有培養(yǎng)基B的三角瓶，置于搖床上培養(yǎng)，得到作用于蠶絲而使原料殘膠率為最低的菌種，即為脫膠菌種；(4)將分離出的脫膠菌株接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上，于冰箱中1～10℃保存。本發(fā)明篩選出的菌株可直接作用于蠶絲精練脫膠，精練時間短，環(huán)境污染少，生產(chǎn)成本低，該分離方法效果明顯、易觀察、操作簡便。
文檔編號C12N1/00GK101412964SQ200810203499
公開日2009年4月22日 申請日期2008年11月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月27日
發(fā)明者勞繼紅, 單世寶, 李東梅, 楊雪霞 申請人:東華大學(xué)