專利名稱：用作一氧化氮合酶抑制劑的脒基化合物及其鹽的制作方法
本申請要求2000年3月24日提交的美國臨時(shí)專利申請第60/191,923號的優(yōu)先權(quán)益，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用作一氧化氮合酶抑制劑的脒基化合物。
相關(guān)技術(shù)自20世紀(jì)80年代初期以來，就已知乙酰膽堿引起的血管舒張依賴于血管內(nèi)皮?，F(xiàn)已知為一氧化氮(NO)的內(nèi)皮細(xì)胞舒血管因子(EDRF)在血管內(nèi)皮中通過一氧化氮合酶(NOS)產(chǎn)生。對作為血管舒張藥的NO活性的深入了解已有100多年。此外，NO是衍生自亞硝酸異戊酯、硝酸甘油和其它硝基血管舒張劑的活性物質(zhì)(species)。作為NO的EDRF的鑒定與合成NO所經(jīng)歷的生物化學(xué)途徑的發(fā)現(xiàn)一致，通過該途徑，使用酶NO合酶，由氨基酸L-精氨酸合成NO。
一氧化氮是可溶性的鳥苷酸環(huán)化酶的內(nèi)生的刺激物。除內(nèi)皮依賴的舒張外，NO還涉及大量的生物作用，包括吞噬細(xì)胞的細(xì)胞毒性和中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的細(xì)胞與細(xì)胞間的通信。
至少有如下三種類型的NO合酶(i)位于內(nèi)皮的、組成性Ca++/鈣調(diào)蛋白依賴酶，它對受體或物理刺激作出反應(yīng)而釋放NO。
(ii)位于大腦的、組成性Ca++/鈣調(diào)蛋白依賴酶，它對受體或物理刺激作出反應(yīng)而釋放NO。
(iii)在血管平滑肌、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及大量的其它細(xì)胞被內(nèi)毒素和細(xì)胞因子激活后誘導(dǎo)的不依賴于Ca++的酶，一旦被表達(dá)，這種可誘導(dǎo)的一氧化氮合酶(此后為“iNOS”)在長時(shí)期內(nèi)連續(xù)地產(chǎn)生NO。
由兩種組成酶各自釋放的NO如經(jīng)受幾種生理學(xué)響應(yīng)的轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理般作用。由誘導(dǎo)酶產(chǎn)生的NO為對腫瘤細(xì)胞和侵入微生物的細(xì)胞毒性分子。也顯示過量NO的產(chǎn)生的副作用，尤其是病理血管舒張和組織損傷，可大部分由iNOS合成的NO所引起。
越來越多的證據(jù)表明，NO可能涉及到因某種疾病如關(guān)節(jié)炎引起的軟骨變性，并且還知道在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎中，NO合酶增多。
所提出的用于治療的部分NO合酶抑制劑是非選擇性的；它們抑制組成性和誘導(dǎo)性NO合酶。這類非選擇性NO合酶抑制劑的使用需極為小心，以避免對組成性NO合酶的過分抑制的潛在的嚴(yán)重后果，包括高血壓和可能的血栓形成和組織損傷。特別是在用L-NMMA治療中毒性休克時(shí)，建議在整個(gè)療程中必須對患者進(jìn)行連續(xù)地血壓監(jiān)測。因此，非選擇性NO合酶抑制劑的具有治療功用的前提是要采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施，NO合酶抑制劑是有選擇性的，在這個(gè)意義上說，它們對誘導(dǎo)性NO合酶的抑制遠(yuǎn)大于對組成性NO合酶的同工型的抑制，因而甚至具有更大的治療益處且更易于使用(S.Moncada and Higgs，E.FASEB J.，9，1319-1330，1995)。
以下各公布公開了抑制一氧化氮合成并優(yōu)先抑制誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的同工型的化合物PCT專利申請?zhí)朩O96/35677、PCT專利申請?zhí)朩O96/33175、PCT專利申請?zhí)朩O96/15120、PCT專利申請?zhí)朩O95/11014、PCT專利申請?zhí)朩O95/11231、PCT專利申請?zhí)朩O99/46240、
PCT專利申請?zhí)朩O95/24382、PCT專利申請?zhí)朩O94/12165、PCT專利申請?zhí)朩O94/14780、PCT專利申請?zhí)朩O93/13055、PCT專利申請?zhí)朩O99/62875、歐洲專利號EP0446699A1、美國專利第5,132,453號、美國專利第5,684,008號、美國專利第5,830,917號、美國專利第5,854,251號、美國專利第5,863,931號、美國專利第5,919,787號、美國專利第5,945,408號、美國專利第5,981,511號。
PCT專利申請?zhí)朩O95/25717公開了某些用于抑制誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的脒基衍生物。
PCT專利申請?zhí)朩O99/62875公開了用于抑制誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的其它的脒基衍生物。
發(fā)明概述在人體軟骨外植體試驗(yàn)，一種用于骨關(guān)節(jié)炎的模型中，己發(fā)現(xiàn)有作為iNOS抑制劑的非常有效的優(yōu)點(diǎn)的化合物。同時(shí)，本發(fā)明化合物令人驚喜地不能滲透試驗(yàn)系統(tǒng)中的某些非-靶器官，與WO95/25717的化合物相比時(shí)尤其如此。在靶器官(軟骨)和其它器官之間的預(yù)期選擇方面的驚人區(qū)別是本發(fā)明化合物的未曾料到的優(yōu)點(diǎn)。
從廣義上說，本發(fā)明涉及新的化合物、藥用組合物和用所述化合物和組合物抑制或調(diào)節(jié)一氧化氮合成的方法，該方法包括對對需要此種抑制或調(diào)節(jié)的患者給予可優(yōu)先抑制或調(diào)節(jié)誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的同工型超過組成性一氧化氮合酶的同工型的化合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是在需要降低一氧化氮水平的患者中降低一氧化氮的水平。本發(fā)明化合物具有有用的一氧化氮合酶抑制活性，并預(yù)期可用于其中一氧化氮合成或過分合成為部分病因的疾病或病癥的治療或預(yù)防。
在一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種化合物或其鹽，該化合物具有對應(yīng)于式1的結(jié)構(gòu) 其中X選自-S-、-S(O)-和-S(O)2-；R2選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C1-C5烷氧基-C1烷基和C1-C5烷硫基-C1烷基；至于R3和R8R8選自-OR14和-N(R15)(R16)；且R3選自-H、-OH、-C(O)-R17、O和-C(O)-S-R19；或R8為-N(R20)-而R3為-C(O)-，其中R8和R3與它們所連結(jié)的原子一起形成環(huán)；或R8為-O-，而R3為-C(R21)(R22)-，其中R8和R3與它們所連結(jié)的原子一起形成環(huán)；如果R3為-C(R21)(R22)-，則R4為-C(O)-O-R23；否則R4為-H；R1、R5、R6和R7獨(dú)立地選自-H、鹵素、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；R9和R10獨(dú)立地選自-H、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；至于R11和R12R11選自-H、-OH、-C(O)-O-R24及-C(O)-S-R25；而R12選自-H、-OH、-C(O)-O-R26和-C(O)-S-R27；或R11為-O-，而R12為-C(O)-，其中R11和R12與它們所連結(jié)的原子一起形成環(huán)；或R11為-C(O)-，而R12為-O-，其中R11和R12與它們所連結(jié)的原子一起形成環(huán)；和R13為C1烷基；R14選自-H和C1-C6烷基；其中當(dāng)R14為C1-C6烷基時(shí)，R14任選被一個(gè)或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代；至于R15與R16R15選自-H、烷基和烷氧基；而R16選自-H、-OH、烷基、烷氧基、-C(O)-R27a、-C(O)-O-R28和-C(O)-S-R29；其中當(dāng)R15和R16獨(dú)立地為烷基或烷氧基時(shí)，R15和R16獨(dú)立地任選被一個(gè)或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的其團(tuán)所取代；或R15為-H；而R16選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基；R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R27a、R28和R29獨(dú)立地選自-H和烷基，所述烷基任選被一個(gè)或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代；且當(dāng)R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R27a、R28和R29中的任一個(gè)獨(dú)立地為選自烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)時(shí)，該基團(tuán)任選被一個(gè)或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代。
另一實(shí)施方案提供了治療或預(yù)防與炎癥相關(guān)的疾病的方法，所述的方法包括用與炎癥有關(guān)的疾病的治療或預(yù)防量的本發(fā)明化合物治療有此需要的患者。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種制備式1化合物的方法，其中所述方法包括用具有對應(yīng)于式23結(jié)構(gòu)的乙亞氨酸烷基酯(alkyl acetimidate) 其中的R31為C1-C6烷基，處理具有對應(yīng)于式22的結(jié)構(gòu)的二胺化合物或其鹽 。如需要，所述處理可在酸或堿的存在下，優(yōu)選在堿的存在下進(jìn)行。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了一種制備具有對應(yīng)于式22的結(jié)構(gòu)的二胺化合物或其鹽的方法 其中R30選自-H、-OH、-C(O)-R17、-C(O)-O-R18和-C(O)-S-R19，其它取代基定義如上，其中的方法包括處理具有對應(yīng)于式24結(jié)構(gòu)的被護(hù)二胺化合物或其鹽 其中的R33選自-H和保護(hù)的氨基；R32為保護(hù)的氨基；和R14選自-H和C1-C6烷基；其中當(dāng)R14為C1-C6烷基時(shí)，R14任選被一個(gè)或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代；其中的處理用去保護(hù)試劑進(jìn)行，從而生成所述的二胺化合物。
發(fā)明詳述除了別的以外，式1化合物將用于治療患者的炎癥或治療其它一氧化氮合酶誘發(fā)的疾病，如，作為治療疼痛和頭痛的鎮(zhèn)痛劑，或作為治療發(fā)熱的退熱藥。例如，本發(fā)明的化合物將用來治療關(guān)節(jié)炎，包括但不限于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎關(guān)節(jié)病、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、幼年關(guān)節(jié)炎、急性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腸病性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎和化膿性關(guān)節(jié)炎。其中本發(fā)明的化合物將提供在抑制L-精氨酸產(chǎn)生NO方面的優(yōu)點(diǎn)的病癥包括關(guān)節(jié)炎病癥。
本發(fā)明的化合物將進(jìn)一步用于治療哮喘、支氣管炎、月經(jīng)痙攣(如，痛經(jīng))、早產(chǎn)、腱炎、粘液囊炎、與皮膚有關(guān)的病癥如銀屑病、濕疹、灼傷、曬斑、皮炎、胰腺炎、肝炎和術(shù)后炎癥包括眼外科手術(shù)如白內(nèi)障手術(shù)和屈光手術(shù)后的炎癥。本發(fā)明的化合物也可用于治療胃腸道疾病如炎性腸道疾病、節(jié)段性回腸炎、胃炎、過敏性大腸綜合征和潰瘍性結(jié)腸炎。本發(fā)明的化合物將用于預(yù)防或治療癌癥，如結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、膀胱癌、頸癌和皮膚癌。本發(fā)明的化合物將用于治療炎癥和組織損傷，這類病有血管病、偏頭痛、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈外膜炎、甲狀腺炎、再生障礙性貧血、霍奇金氏病、sclerodoma、風(fēng)濕熱、I型糖尿病、神經(jīng)肌連接病(meuromusculanjunction)包括重癥肌無力、白質(zhì)病包括多發(fā)性硬化、類肉瘤病、腎病綜合征、貝赫切特綜合征、多肌炎、齦炎、腎炎、過敏、損傷后腫脹、心肌缺血等。本發(fā)明化合物也可用于治療眼病，如青光眼、視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜病變、眼色素層炎、眼畏光癥及與眼組織急性損傷相關(guān)的炎癥和疼痛。本發(fā)明化合物的用途中特別重要的是治療青光眼，尤其是由一氧化氮的產(chǎn)生引起的青光眼的癥狀，如一氧化氮介導(dǎo)的神經(jīng)損傷。本發(fā)明化合物也可用于治療肺炎，如與病毒感染和囊性纖維化有關(guān)的肺炎。本發(fā)明化合物還可用于治療某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如皮質(zhì)性癡呆(cortical dementias)包括阿爾茨海默氏病及由中風(fēng)、局部缺血和創(chuàng)傷引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷。本發(fā)明的化合物可用作如治療關(guān)節(jié)炎的消炎藥，同時(shí)具有極小有害副作用的額外益處。這些化合物也用于治療變應(yīng)性鼻炎、呼吸窘迫綜合征、內(nèi)毒素性休克綜合征和動(dòng)脈粥樣硬化。所述化合物還可用于治療疼痛，但不限于術(shù)后疼痛、牙痛、肌肉痛及癌癥引起的疼痛。所述化合物將用于預(yù)防癡呆如阿爾茨海默氏病。
除用作人體治療外，這些化合物也可用于家養(yǎng)的陪伴動(dòng)物、外來動(dòng)物和農(nóng)畜，包括哺乳動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物等的獸醫(yī)治療。更優(yōu)選的動(dòng)物包括馬、狗和貓。
本發(fā)明化合物也可，例如與類固醇、NSAIDs、COX-2選擇性抑制劑、5-脂氧合酶抑制劑、LTB4拮抗劑和LTA4水解酶抑制劑一起用于聯(lián)合治療，部分或完全地代替其它常規(guī)消炎治療。
其中本發(fā)明化合物將提供抑制NO的抑制作用的優(yōu)點(diǎn)的其它病癥包括心血管局部缺血、糖尿病(I型或II型)，充血性心力衰竭、心肌炎、動(dòng)脈粥樣硬化、偏頭痛、青光眼、主動(dòng)脈瘤、反流性食管炎、腹瀉、過敏性大腸綜合征、囊性纖維化、肺氣腫、哮喘、支氣管擴(kuò)張、痛覺過敏(異常性疼痛)、腦局部缺血(雙病灶缺血、血栓性中風(fēng)和整體性缺血(如，繼發(fā)性心博停止)、多發(fā)性硬化和其它由NO引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如帕金森氏病。其中NO抑制可能是有用的其它神經(jīng)變性疾病包括神經(jīng)變性或神經(jīng)壞死，這些疾病有缺氧、低血糖、癲癇及在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)創(chuàng)傷的情況(如脊髓和頭部創(chuàng)傷)、高壓氧驚厥和中毒、癡呆如早老性癡呆和與AIDS相關(guān)的癡呆、惡病質(zhì)、西德納姆舞蹈病、亨廷頓氏舞蹈病、肌萎縮側(cè)索硬化、科爾薩科夫病、與大腦血管疾病有關(guān)的癡愚、睡眠障礙、精神分裂癥、抑郁癥、與經(jīng)前期綜合征(PMS)有關(guān)的抑郁癥或其它癥狀、焦慮癥和敗血癥性休克。
本發(fā)明化合物也可用于治療疼痛包括軀體原(感受傷害的或神經(jīng)病的)疼痛，包括急性與慢性疼痛。一氧化氮抑制劑可用于包括以普通NSAID或類阿片鎮(zhèn)痛藥傳統(tǒng)給藥的神經(jīng)病疼痛在內(nèi)的任何病癥。
可用本發(fā)明化合物有利地治療的其它疾病或病癥還包括對長期需要阿片鎮(zhèn)痛藥的患者的鴉片制劑耐受性及用苯并二氮雜類的患者的苯并二氮雜類耐受性，和其它成癮的行為，如尼古丁癮、酒精中毒和進(jìn)食障礙的治療或預(yù)防。本發(fā)明的化合物和方法也可用于藥物戒斷綜合征狀的治療或預(yù)防，如鴉片癮、酒癮或煙癮的戒斷癥狀的治療或預(yù)防。當(dāng)與抗菌藥或抗病毒藥聯(lián)合治療時(shí)，本發(fā)明的化合物還可用于預(yù)防組織損傷。
本發(fā)明的化合物還可用于抑制L-精氨酸產(chǎn)生NO，包括與由許多種藥劑誘發(fā)的膿毒性和/或毒性出血性休克有關(guān)的系統(tǒng)性低血壓；用細(xì)胞因子如TNF、IL-1和IL-2的治療；和移植治療中，作為短期免疫抑制的輔藥。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物治療和預(yù)防瘤形成的用途。可用本發(fā)明的化合物和方法治療或預(yù)防的瘤形成包括腦癌、骨癌、白血病、淋巴瘤、上皮細(xì)胞衍生的瘤形成(上皮癌)如基底細(xì)胞癌、腺癌、胃腸癌如唇癌、口腔癌、食管癌、小腸癌和胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌和皮膚癌，如扁平細(xì)胞和基底細(xì)胞癌、前列腺癌、腎細(xì)胞癌及其它影響全身上皮細(xì)胞的已知癌癥。優(yōu)選的瘤形成選自胃腸癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、宮頸癌、肺癌、乳腺癌和皮膚癌，如扁平細(xì)胞和基底細(xì)胞癌。本發(fā)明化合物和方法也可用于治療射療法引起的纖維化。本發(fā)明化合物和方法可用來治療患有腺瘤性息肉的患者，包括患家族腺瘤性息肉病(FAP)的患者。另外，本發(fā)明化合物和方法可用于預(yù)防有FAP風(fēng)險(xiǎn)的患者形成息肉。
本發(fā)明化合物與另一種抗腫瘤藥的聯(lián)合治療，將通過減少用于療效所需的而引起副作用的藥物的治療劑量，或通過直接減少引起副作用的藥物產(chǎn)生的毒副作用的癥狀，產(chǎn)生協(xié)同作用或者降低與化療有關(guān)的毒副作用。
本發(fā)明的化合物還可用作放射治療的輔助劑，以減少副作用或增加效果。在本發(fā)明中，可與本發(fā)明的化合物聯(lián)合的另一藥物包括能抑制酶環(huán)加氧酶-2(“COX-2”)的任何治療藥物。優(yōu)選此種COX-2抑制劑相對酶環(huán)加氧酶-1(“COX-1”)而言選擇性地抑制COX-2。這種COX-2抑制劑稱作“COX-2選擇性抑制劑”。更優(yōu)選地，在體外試驗(yàn)中，本發(fā)明的化合物可與COX-2選擇性抑制劑聯(lián)合治療，其中的COX-2選擇性抑制劑以相對于對COX-1的抑制至少10∶1，更優(yōu)選地至少30∶1，甚至更優(yōu)選至少50∶1的比例選擇性地抑制COX-2。用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合治療的COX-2選擇性抑制劑包括celecoxib，valdecoxib，deracoxib，etoricoxib，rofecoxib，ABT-963(2-(3，4-二氟苯基)-4-(3-羥基-3-甲基-1-丁氧基)-5-[4-(甲磺酰)苯基-3(2H)-噠嗪酮；描述于PCT專利申請?zhí)朩O00/24719)，或美洛昔康。本發(fā)明的化合物也可有利地用于與COX-2選擇性抑制劑如parecoxib的前藥的聯(lián)合治療。
例如，可從下表中選擇能用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合的另一化療藥，所述表并非包羅一切，且是且非限定性的α-二氟甲基鳥氨酸(DFMO)、5-FU-血纖維蛋白原、acanthifolicacid、氨基噻二唑、布喹那鈉、卡莫氟、Ciba-Geigy CGP-30694、環(huán)戊基胞嘧啶、磷酸硬脂酸阿糖胞苷、阿糖胞苷軛合物、Lilly DATHF、Merrel Dow DDFC、dezaguanine、雙脫氧胞苷、雙脫氧鳥苷、didox、Yoshitomi DMDC、去氧氟尿苷、Wellcome EHNA、Merck & Co.EX-015、法扎拉濱、氟尿苷、磷酸氟達(dá)拉濱、5-氟尿嘧啶、N-(2’-呋喃烷基(furanidyl)-5-氟尿嘧啶)、Daiichi Seiyaku FO-152、異丙基pyrrolizine、Lilly LY-188011、Lilly LY-264618、methobenzaprim、氨甲蝶呤、Wellcome MZPES、norspermidine、NCI NSC-127716、NCINSC-264880、NCI NSC-39661、NCI NSC-612567、Warner-LambertPALA、噴司他丁、吡曲克辛、普卡霉素、Asahi Chemical PL-AC、TakedaTAC-788、硫鳥嘌呤、噻唑呋林、Erbamont TIF、三甲曲沙、酪氨酸激酶抑制劑、酪氨酸蛋白酶抑制劑、Taiho UFT、uricytin、Shionogi254-s、氧代-磷酰胺類似物、altretamine、阿那昔酮、BoehringerMannheim BBR-2207、bestrabucil、布度鈦、Wakunaga CA-102、carboplatin、亞硝基脲氮芥、Chinoin-139、Chinoin-153、苯丁酸氮芥、順鉑、環(huán)磷酰胺、American Cyanamid CL-286558、Sanofi CY-233、cyplatate、Degussa D-19-384、Sumimoto DACHP(Myr)2、二苯基螺甲基二氯乙基胺(diphenylspiromustine)、二鉑細(xì)胞抑制劑、Erba司他霉素衍生物、Chugai DWA-2114R、ITI E09、依莫司汀、ErbamontFCE-24517、雌莫司汀磷酸鈉、fotemustine、Unimed G-6-M、ChinoinGYKI-17230、hepsul-fam、異環(huán)磷酰胺、iproplatin、洛莫司汀、馬磷酰胺、二溴衛(wèi)矛醇、Nippon Kayaku NK-121、NCI NSC-264395、NCINSC-342215、奧沙利鉑、Upjohn PCNU、松龍苯芥、Proter PTT-119、雷莫司汀、司莫司汀、SmithKline SK&F-101772、Yakult Honsha SN-22、螺莫司汀、Tanabe Seiyaku TA-077、?；悄就　⑻婺虬?、替羅昔隆、tetraplatin、trimelamol、Taiho 4181-A、阿柔比星、放線菌素D、actinoplanone、Erbamont ADR-456、aeroplysinin衍生物、Ajinomoto AN-201-II、Ajinomoto AN-3、Nippon Soda茴香霉素、蒽環(huán)類藥、阿齊諾霉素-A、bisucaberin、Bristol-Myers BL-6859、Bristol-Myers BMY-25067、Bristol-Myers BMY-25551、Bristol-MyersBMY-26605、Bristol-Myers BMY-27557、Bristol-Myers BMY-28438、硫酸博萊霉素、薯司他丁-1、Taiho C-1027、刺孢霉素、chromoximycin、放線菌素D、柔紅霉素、Kyowa Hakko DC-102、Kyowa Hakko DC-79、Kyowa Hakko DC-88A、Kyowa Hakko DC89-A1、Kyowa HakkoDC92-B、ditrisarubicin B、Shionogi DOB-41、多柔比星、多柔比星-纖維蛋白原、elsamicin-A、表柔吡星、erbstatin、依索比星、esperamicin-A1、esperamicin-A1b、Erbamont FCE-21954、FuiisawaFK-973、福司曲星、Fujisawa FR-900482、滑行菌素、gregatin-A、grincamycin、除莠霉素、去甲氧基柔紅霉素、隱陡頭菌素、kazusamycin、kesarirhodins、Kyowa Hakko KM-5539、Kirin BreweryKRN-8602、Kyowa Hakko KT-5432、Kyowa Hakko KT-5594、KyowaHakko KT-6149、American Cyanamid LL-D49194、Meiji SeikaME2303、美諾立爾、絲裂霉素、米托蒽醌、SmithKline M-TAG、neoenactin、日本Kayaku NK-313、日本Kayaku NKT-01、SRIInternational NSC-357704、噁溶菌素、oxaunomycin、peplomycin、pilatin、吡柔比星、porothramycin、pyrindamycin A、Tobishi RA-I、雷帕霉素、rhizoxin、羅多比星、sibanomicin、siwenmycin、SumitomoSM-5887、Snow Brand SN-706、Snow Brand SN-07、sorangicin-A、司帕霉素、SS Pharmaceutical SS-21020、SS Pharmaceutical SS-7313B、SS Pharmaceutical SS-9816B、司替霉素B、Taiho 4181-2、他利霉素、Takeda TAN-868A、terpentecin、thrazine、tricrozarin A、Upjohn U-73975、Kyowa Hakko UCN-10028A、Fujisawa WF-3405、YoshitomiY-25024佐柔比星、α-胡蘿卜素、α-二氟甲基-精氨酸、阿維A、BiotecAD-5、Kyorin AHC-52、解熱樹堿、氨萘非特、amphethinile、安吖啶、Angiostat、ankinomycin、antineoplaston A10、antineoplaston A2、antineoplaston A3、antineoplaston A5、antineoplaston AS2-1、HenkelAPD、阿非迪霉素甘氨酸鹽、天冬酰胺酶、Avarol、巴卡林、batracyline、苯氟倫、benzotript、Ipsen-Beaufour BIM-23015、比生群，Bristo-MyersBMY-40481、Vestar boron-10、bromofosfamide、Wellcome BW-502、Wellcome BW-773、苯丁賴脯酸亞胺、鹽酸carmethizole、AjinomotoCDAF、chlorsulfaquinoxalone、Chemex CHX-2053、Chemex CHX-100、Warner-Lambert CI-921、Warner-Lambert CI-937、Warner-Lambert CI-941、Warner-Lambert CI-958、克蘭氟脲、claviridenone、ICN化合物1259、ICN化合物4711、Contracan、Yakult Honsha CPT-11、crisnatol、curaderm、松胞菌素B、阿糖胞苷、cytocytin、Merz D-609、馬來酸DABIS、達(dá)卡巴嗪、達(dá)替氯銨、didemnin-B、二血卟啉醚(dihaematoporphyrin ether)、二氫侖派隆、地那林、偏端霉素、ToyoPharmar DM-341、Toyo Pharmar DM-75、Daiichi Seiyaku DN-9693、elliprabin、醋酸elliptinium、Tsumura EPMTC、麥角異胺、依托泊甙、依曲替酯、芬維A胺、Fujisawa FR-57704、硝酸鎵、genkwadaphnin、Chugai GLA-43、Glaxo GR-63178、grifolan NMF-5N、十六烷基磷酸膽堿、Green Cross HO-221、高三尖杉酯堿、羥基脲、BTGICRF-187、伊莫福新、異谷氨酸、異維甲酸、Otsuka JI-36、Ramot K-477、OtsuakK-76COONa、Kureha Chemical K-AM、MECT Corp KI-8110、AmericanCyanamid L-623、白細(xì)胞調(diào)節(jié)素、氯尼達(dá)明、Lundbeck LU-23-112、Lilly LY-186641、NCI(US)MAP、marycin、Merrel Dow MDL-27048、Medco MEDR-340、merbarone、部花青衍生物、甲基苯胺基吖啶、Molecular Genetics MGI-136、minactivin、mitonafide、米托喹酮、莫哌達(dá)醇、莫維A胺、Zenyaku Kogyo MST-16、N-(視黃?；?氨基酸、Nisshin Flour Milling N-021、N-?；?脫氫丙氨酸、那法扎瓊、TaishoNCU-190、諾考達(dá)唑衍生物、精氨酸血紅素、NCI NSC-145813、NCINSC-361456、NCI NSC-604782、NCI NSC-95580、奧曲肽、OnoONO-112、oquizanocine、Akzo Org-10172、pancratistatin、帕折普汀、Warner-Lambert PD-111707、Warner-Lambert PD-115934、Warner-Lambert PD-131141、Pierre Fabre PE-1001、ICRT肽D、匹羅沙群、多血卟啉、polypreic acid、Efamol卟啉、probimane、丙卡巴肼、丙谷胺、Invitron蛋白酶連接蛋白I，Tobishi RA-700、雷佐生、SapporoBreweries RBS、限制酶素-P(restrictin-P)、retelliptine、視黃酸、Rhone-Poulenc RP-49532、Rhone-Poulenc RP-56976、SmithKlineSK&F-104864、Sumitomo SM-108、Kuraray SMANCS、SeaPharmSP-10094、苯丙醇胺酯(spatol)、螺環(huán)丙烷衍生物、螺鍺、Unimed、SSPharmaceutical SS-554、止血醇二酮(strypoldinone)、止血醇二酮(Stypoldione)、Suntory SUN 0237、Suntory SUN 2071、超氧化物歧化酶、Toyama T-506、Toyama T-680、紫杉酚、Teijin TET-0303、替尼泊苷、thaliblastine、Eastman Kyowa TJB-29、tocotrienol、Topostin、Teijin TT-82、Kyowa Hakko UCN-01、Kyowa Hakko UCN-1028、ukrain、Eastman Kodak USB-006、硫酸長春花堿、長春新堿、長春地辛、vinestramide、長春瑞賓、長春曲醇、長春利定、withanolides、Yamanouchi YM-534、uroguanylin、combretastatin、dolastatin、去甲氧基柔紅霉素、表柔吡星、雌莫司汀、環(huán)磷酰胺、9-氨基-2-(S)-喜樹堿、托泊替堪、伊立替康(Camptosar)、依西美坦、6-D-色氨酸高那瑞林(tryptorelin)或一種Ω-3脂肪酸。
可用于與本發(fā)明的化合物聯(lián)合治療的放射保護(hù)劑的實(shí)例包括AD-5、adchnon、氨磷汀類似物、detox、地美司鈉、1-102、MM-159、N-?；?去氫丙氨酸、TGF-Genentech、噻丙莫德、氨磷汀、WR-151327、FUT-187、經(jīng)皮酮洛芬、萘丁美酮、超氧化物歧化酶(Chiron)及超氧化物歧化酶Enzon。
本發(fā)明的化合物也可用于治療或預(yù)防與血管生成相關(guān)的疾病或病癥，如，瘤的生長、轉(zhuǎn)移、黃斑變性和動(dòng)脈粥樣硬化。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明也提供治療或預(yù)防眼病或眼疾如青光眼的聯(lián)合治療。例如，本發(fā)明的化合物將有利地用于與降低患青光眼的患者的眼內(nèi)壓的藥物一起聯(lián)合治療。這類眼內(nèi)壓降低藥物包括但不限于拉坦前列素、travoprost、bimatoprost或?yàn)踔Z前列醇。本發(fā)明的化合物加上一種降眼內(nèi)壓藥物的聯(lián)合治療將是有效的，因?yàn)檎J(rèn)為它們各自通過不同的機(jī)理發(fā)揮其作用。
在本發(fā)明的另一聯(lián)合治療中，本發(fā)明的化合物可用于與抗高脂血藥物或降膽固醇藥物如benzothiepine或苯并硫氮雜(benzothiazepine)抗高脂血藥一起的聯(lián)合治療。用于本發(fā)明的聯(lián)合治療的benzothiepine抗高脂血藥的實(shí)例可在美國專利第5,994,391號中找到，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。某些苯并硫氮雜抗高脂血藥描述于WO93/16055。另外，用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合的抗高脂血藥物或降膽固醇藥物可為HMG Co-A還原酶抑制劑。用于本發(fā)明的聯(lián)合治療的HMG Co-A還原酶抑制劑的實(shí)例分別包括苯氟雷司、氟伐他汀、洛伐他汀、provastatin、辛伐他汀、atorvastatin、cerivastatin、bervastatin、ZD-9720(描述于PCT專利申請?zhí)柼朩O97/06802)、ZD-4522(CAS第147098-20-2號對于鈣鹽；CAS第147098-18-8號對鈉鹽；描述于歐洲專利第EP 521471號)、BMS 180431(CAS第129829-03-4號)或NK-104(CAS第141750-63-2號)。本發(fā)明化合物加上抗高脂血藥物或降膽固醇藥物的聯(lián)合治療可用于，例如，降低在血管中形成動(dòng)脈粥樣硬化損害的危險(xiǎn)。例如，動(dòng)脈粥樣硬化損害往往最初發(fā)生于血管中的炎癥位置上。已確認(rèn)抗高脂血藥物或降膽固醇藥物通過降低血液中的脂水平來減少形成動(dòng)脈粥樣硬化損害的危險(xiǎn)。本發(fā)明不限于單一作用機(jī)理，一方面相信本發(fā)明化合物的聯(lián)合將共同通過例如降低血脂水平從而減少血管中的炎癥，提供了對動(dòng)脈粥樣硬化損害的更有效的控制。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可用于與其它化合物或藥物聯(lián)合治療中樞神經(jīng)病癥或疾病如偏頭痛。例如，所述化合物可用于與咖啡因、5-HT-1B/1D激動(dòng)劑(例如，triptan如舒馬曲坦、naratriptan、zolmitriptan、rizatriptan、almortriptan或frovatriptan)、多巴胺D4拮抗劑(如，sonepiprazole)、阿斯匹林、醋氨酚、布洛芬、吲哚美辛、甲氧萘丙酸鈉、甲異辛烯胺、氯醛比林、布他比妥、麥角生物堿(如麥角異胺、二氫麥角異胺、溴隱亭、麥角新堿或甲基麥角新堿)、三環(huán)抗抑郁藥(如，阿米替林或去甲替林)、5-羥色胺能拮抗劑(如，二甲麥角新堿或賽庚啶)、β-andrenergic拮抗劑(如，普萘洛爾、噻嗎洛爾、阿替洛爾、納多洛爾或美托洛爾)或單胺氧化酶抑制劑(如，苯乙肼或異卡波肼)一起聯(lián)合治療。
另一實(shí)施方案提供本發(fā)明的化合物與類阿片化合物一起的聯(lián)合治療?？捎糜谠撀?lián)合治療的類阿片化合物包括但不限于嗎啡、美沙酮、氫化嗎啡酮、羥嗎啡酮、左嗎喃、烯丙左嗎喃、可待因、二氫可待因、二氫羥基可待因、噴他佐辛、氫可酮、氧可酮、納美芬、埃托菲、左嗎喃、芬太尼、舒芬太尼、DAMGO、丁啡喃、丁丙諾啡、納洛酮、納曲酮、CTOP、二丙諾啡、β-funaltrexanine、naloxonazine、烯丙嗎啡、噴他佐辛、納布啡、納洛酮、苯甲酰腙、布馬佐辛、乙基酮基環(huán)吖辛因、U50,488、U69,593、螺朵林、nor-binaltorphimine、naltrindole、DPDPE、[D-la2，glu4]deltorphin、DSLET、蛋氨酸-腦啡肽、亮氨酸-腦啡肽、β-內(nèi)啡肽、強(qiáng)啡肽A、強(qiáng)啡肽B及α-新內(nèi)啡肽。本發(fā)明與一種類鴉片化合物的聯(lián)合的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明的化合物可減少類鴉片化合物的劑量，因而降低類鴉片副作用如類鴉片成癮的危險(xiǎn)。
術(shù)語“烷基”，單獨(dú)或結(jié)合使用，指優(yōu)選含1-約10個(gè)碳原子，更優(yōu)選含1-約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的無環(huán)烷基?！巴榛币舶ê?-約7個(gè)碳原子，優(yōu)選3-5個(gè)碳原子的環(huán)烷基。所述烷基可任選地被如下定義的基團(tuán)所取代。這類基團(tuán)的實(shí)例包括甲基、乙基、氯代乙基、羥基乙基、正丙基、異丙基、正丁基、氰基丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、氨基戊基、異戊基、己基、辛基等。
術(shù)語“鏈烯基”指直鏈或支鏈的不飽和無環(huán)烴基，它至少含一個(gè)雙鍵。這類基團(tuán)含2-約6個(gè)碳原子，優(yōu)選2-約4個(gè)碳原子，更優(yōu)選地2-約3個(gè)碳原子。所述的鏈烯基可任選被如下定義的基團(tuán)所取代。適用的鏈烯基實(shí)例包括丙烯基、2-氯代丙烯基、丁烯-1-基、異丁烯基、戊烯-1-基、2-甲基丁烯-1-基、3-甲基丁烯-1-基、己烯-1-基、3-羥基己烯-1-基、庚烯-1-基和辛烯-1-基等。
術(shù)語“炔基”指直鏈或支鏈的不飽和無環(huán)烴基，它含一個(gè)或多個(gè)三鍵，這類基團(tuán)含2-約6個(gè)碳原子，優(yōu)選2-約4個(gè)碳原子，更優(yōu)選2-約3個(gè)碳原子。所述的炔基可任選被如下定義的基團(tuán)所取代。適用的炔基的實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、羥基丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基、4-甲氧基戊炔-2-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔-1-基、己炔-2-基、己炔-3-基、3，3-二甲基丁炔-1-基等。
術(shù)語“烷氧基”包括直鏈或支鏈的、各具1-約6個(gè)碳原子，優(yōu)選1-3個(gè)碳原子的含氧基團(tuán)，如甲氧基。術(shù)語“烷氧基烷基”也包括含有連接于烷基的一個(gè)或多個(gè)烷氧基的烷基，即，形成單烷氧基烷基和雙烷氧基烷基。這類基團(tuán)的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔丁氧基烷基。“烷氧基”可進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)鹵原子如氟、氯或溴所取代，得到“鹵代烷氧基”。這類基團(tuán)的實(shí)例包括氟代甲氧基、氯代甲氧基、三氟代甲氧基、二氟代甲氧基、三氟代乙氧基、氟代乙氧基、四氟代乙氧基、五氟代乙氧基和氟代丙氧基。
術(shù)語“烷硫基”包括含有連接于二價(jià)硫原子的1-約6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基的基團(tuán)?！暗图壨榱蚧钡囊粋€(gè)實(shí)例為甲硫基(CH3-S-)。
術(shù)語“烷硫基烷基”包括連接于烷基的烷硫基。這類基團(tuán)的實(shí)例包括甲硫基甲基。
術(shù)語“鹵代基”指鹵素如氟、氯、溴或碘原子。
術(shù)語“雜環(huán)基”指飽和或不飽和的單或多環(huán)的碳環(huán)，其中的一個(gè)或多個(gè)碳原子被N、S、P或O所取代。例如，它包括下列結(jié)構(gòu) 或 其中Z、Z1、Z2或Z3為C、S、P、O或N，前提是Z、Z1、Z2或Z3之一不是碳，但當(dāng)通過雙鍵連接于另一個(gè)Z原子時(shí)，或當(dāng)連接于另一個(gè)O或S原子時(shí)，它不是O或S。此外，只有當(dāng)Z、Z1、Z2或Z3各自為C時(shí)，任選的取代基被理解為連接于Z、Z1、Z2或Z3上。術(shù)語“雜環(huán)基”也包括完全飽和的環(huán)結(jié)構(gòu)如哌嗪基、二噁烷基、四氫呋喃基、環(huán)氧乙烷基、吖丙啶基、嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、噻唑烷基及其它。術(shù)語“雜環(huán)基”也包括部分不飽和環(huán)結(jié)構(gòu)如二氫呋喃基、吡唑啉基、咪唑啉基、吡咯啉基、苯并二氫吡喃基、二氫苯硫基及其它。
術(shù)語“雜芳基”指完全不飽和的雜環(huán)基。
在“雜環(huán)基”或“雜芳基”中，連接于所述分子的連接點(diǎn)可在環(huán)上的雜原子上或其它地方。
術(shù)語“環(huán)烷基”指單或多環(huán)碳環(huán)，其中的各環(huán)含3-約7個(gè)碳原子，優(yōu)選3-約5個(gè)碳原子。實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)烯基和環(huán)庚基。術(shù)語“環(huán)烷基”另外包括螺系統(tǒng)，其中的環(huán)烷基環(huán)有與benzothiepine的7-元雜環(huán)共有的碳環(huán)原子。
術(shù)語“氧代基”指帶有雙鍵的氧。
術(shù)語“烷氧基”指包括連接于氧原子的烷基的基團(tuán)，如甲氧基。更優(yōu)選的烷氧基是有1-約10個(gè)碳原子“低級烷氧基”。更優(yōu)選的烷氧基具有1-約6個(gè)碳原子。這類基團(tuán)的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。
術(shù)語“芳基”指完全不飽和的單或多環(huán)的碳環(huán)，包括但不限于取代或未取代的苯基、萘基或蒽基。
術(shù)語“聯(lián)合治療”指用兩種或多種治療藥物治療本公開所述的的病癥或疾病，例如，動(dòng)脈粥樣硬化、疼痛、炎癥、偏頭痛、瘤形成、與血管生成相關(guān)的病狀或疾病等。這類給藥包括基本同時(shí)地以這些醫(yī)治藥物，例如以具有固定比例的活性成分的單一膠囊或以每個(gè)含活性成分的多個(gè)獨(dú)立的膠囊聯(lián)合給藥。此外，這類給藥也包括各種類型的治療藥物以順序的方式使用。不論哪種情況，所述治療方法都會(huì)為治療本文所述的病癥或疾病提供有益的藥物聯(lián)合使用的效果。
短語“治療有效的”意指使聯(lián)合治療中的各活性成分的聯(lián)合用量達(dá)到要求。所述聯(lián)合用量將達(dá)到減少或消除高脂血癥的目標(biāo)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種化合物或其鹽，所述化合物具有對應(yīng)于式1的結(jié)構(gòu) 在式1結(jié)構(gòu)中，X選自-S-、-S(O)-和-S(O)2-。X優(yōu)選為-S-。R2選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C1-C5烷氧基-C1烷基和C1-C5烷硫基-C1烷基，其中的這些基團(tuán)各任選被一個(gè)或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代。R2優(yōu)選為被選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代的C1-C6烷基。至于R3和R8，R8選自-OR14和-N(R15)(R16)，而R3選自-H、-OH、-C(O)-R17、-C(O)-O-R18和-C(O)-S-R19；或R8為-N(R20)-而R3為-C(O)-，其中R3和R8與它們所連接的原子一起形成環(huán)；或R8為-O-，而R3為-C(R21)(R22)-，其中R3和R8和與它們所連接的原子一起形成環(huán)。如果R3為-C(R21)(R22)-，則R4為-C(O)-O-R23；否則，R4為-H。R1、R5、R6和R7獨(dú)立地選自-H、鹵素、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基。R9和R10獨(dú)立地選自-H、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；至于R11和R12，R11選自-H、-OH、-C(O)-O-R24和-C(O)-S-R25，而R12選自-H、-OH、-C(O)-O-R26和-C(O)-S-R27；或R11為-O-，而R12為-C(O)-，其中R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)；或R11為-C(O)-，而R12為-O-，其中的R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)。R13為C1烷基。R14選自-H和C1-C6烷基，其中當(dāng)R14為C1-C6烷基時(shí)，R14任選被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代。至于R15和R16，R15選自-H、烷基和烷氧基，而R16選自-H、-OH、烷基、烷氧基、-C(O)-R27a、-C(O)-O-R28和-C(O)-S-R29；其中，當(dāng)R15和R16獨(dú)立為烷基或烷氧基時(shí)，R15和R16獨(dú)立地任選被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)所取代；或R15為-H；而R16選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基。R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R27a、R28和R29獨(dú)立地選自-H和烷基，它任選被一個(gè)或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代；當(dāng)R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24、R25、R26、R27、R27a、R28和R29中的任一個(gè)獨(dú)立為選自烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)時(shí)，那么，該基團(tuán)任選地被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代。
在一優(yōu)選實(shí)施方案中，R8為-OH。當(dāng)R8為-OH，X優(yōu)選為S。在另一實(shí)施方案中，R1、R5、R6、R7、R9和R10獨(dú)立選自-H和C1-C3烷基。R5、R6、R7、R9、R10各優(yōu)選為H。R13可為各種基團(tuán)，如氟代甲基或甲基。R1可為任選地被選自-OH和鹵素的取代基所取代的C1-C6烷基；R1優(yōu)選為任選被鹵素取代的C1烷基；更優(yōu)選地，R1選自氟代甲基、羥基甲基和甲基。在一重要實(shí)施方案中，R1可為甲基。另外，R1可為氟代甲基。R1的另一選擇是羥基甲基。在另一實(shí)施方案中，R2為被一個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基任選取代的C1-C6烷基。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R2為被鹵素任選取代的C1烷基。例如，R2可為甲基。另外，R2可為氟代甲基。在又一個(gè)實(shí)施例中，R2可為羥基甲基。在另一個(gè)實(shí)施例中，R2可為甲氧基甲基。
在本發(fā)明的化合物中，R3、R4、R11和R12各優(yōu)選為-H。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選R1、R5、R6、R7、R9和R10獨(dú)立地選自-H和C1-C3烷基。R5、R6、R7、R9、R10各優(yōu)選為-H。在這個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，例如，R13可為氟代甲基或在另一個(gè)實(shí)施例中R13可為甲基。在這些實(shí)施例的優(yōu)選化合物中，R2為被選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所任選取代的C1-C6烷基。R2優(yōu)選為被鹵素任選取代的C1烷基。在一個(gè)這樣的實(shí)施例中，R2為氟代甲基。在另一個(gè)實(shí)施例中，R2為甲基?；蛘撸琑2可為羥基甲基。另一選擇是R2可為甲氧基甲基。
當(dāng)R13為甲基時(shí)，R1可為，例如，-H或被選自-OH和鹵素的取代基任選取代的C1-C6烷基。在一優(yōu)選實(shí)施方案中R1為-H?；蛘?，R1可為被選自-OH和鹵素的取代基任選取代的C1-C6烷基。例如，R1可為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、戊基異構(gòu)體或己基異構(gòu)體。例如，R1可為乙基?；蛘?，R1可為被選自-OH和鹵素的取代基任選取代的C1烷基；例如，R1可為甲基?；蛘撸琑1可為氟代甲基。在另一種選擇中，R1可為羥基甲基。
在另一實(shí)施方案中，R8可為-OR14。R14如上所定義。R14優(yōu)選為任選被一或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代的C1-C6烷基；R14更優(yōu)選為C1-C3烷基；R14甚至更優(yōu)選為甲基。在化合物1的另一實(shí)施方案中，R8可為-N(R15)(R16)，其中R15和R16的定義如上。在又一實(shí)施方案中，R8可為-N(R20)-，而R3可為-C(O)-，其中R8和R3與它們所連接的原子一起形成環(huán)。在另一實(shí)施方案中，R8可為-O-，而R3可為-C(R21)(R22)-，其中R8和R3與它們所連接的原子一起形成環(huán)。
在式1化合物中，R11可選自-OH、-C(O)-O-R24和-C(O)-S-R25。R11優(yōu)選為-OH。在另一實(shí)施方案中，當(dāng)R11為-OH時(shí)，R12為-H。
然而，本發(fā)明也提供了有用的式1化合物，其中R11為-O-，而R12為-C(O)-，其中R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)。在另一個(gè)有用的實(shí)施方案中，R11為-C(O)-，而R12為-O-，其中R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)?；蛘?，R12可選自-OH、-C(O)-O-R26和-C(O)-S-R27。在這種選擇中，R11優(yōu)選為-H。
本發(fā)明也提供式1化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。例如，這種藥學(xué)上可接受的鹽可以是這樣的鹽，其中本發(fā)明的化合物為帶至少一種陰離子抗衡離子的陽離子形式。用于本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽的陰離子抗衡離子的實(shí)例包括鹵化物、羧酸鹽、磺酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、樹脂-結(jié)合的陰離子、氧化物或硝酸鹽。當(dāng)陰離子抗衡離子為鹵化物時(shí)，例如，它可以是氟化物、氯化物、溴化物或碘化物。鹵化物抗衡離子優(yōu)選為氯化物。當(dāng)陰離子抗衡離子為羧酸鹽時(shí)(即含羧酸官能團(tuán)的化合物的陰離子形式)，所述羧酸鹽抗衡離子可廣泛變化。例如，所述羧酸鹽抗衡離子可為甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、三氟乙酸鹽、琥珀酸鹽、水楊酸鹽、DL-天冬氨酸鹽、D-天冬氨酸鹽、L-天冬氨酸鹽、DL-谷氨酸鹽、D-谷氨酸鹽、L-谷氨酸鹽、甘油酸鹽、琥珀酸鹽、steric、DL-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、L-酒石酸鹽、(±)扁桃酸鹽、(R)-(-)-扁桃酸鹽、(S)-(+)-扁桃酸鹽、檸檬酸鹽、粘酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、苯甲酸鹽、DL-蘋果酸鹽、D-蘋果酸鹽、L-蘋果酸鹽、半蘋果酸鹽、1-全剛烷乙酸鹽、1-全剛烷羧酸鹽、黃安酸鹽、磺基乙酸鹽、(±)-乳酸鹽、L-(+)-乳酸鹽、D-(-)-乳酸鹽、撲酸鹽、D-α-半乳糖醛酸鹽、甘油酸鹽、DL-抗壞血酸鹽、D-抗壞血酸鹽、L-抗壞血酸鹽、DL-胱氨酸鹽、D-胱氨酸鹽、L-胱氨酸鹽、DL-高胱氨酸鹽、D-高胱氨酸鹽、L-高胱氨酸鹽、DL-半胱氨酸鹽、D-半胱氨酸鹽、L-半胱氨酸鹽、(4S)-羥基-L-脯氨酸、環(huán)丙烷-1，1-二羧酸鹽、2，2-二甲基丙二酸鹽、方形酸鹽、酪氨酸陰離子、脯氨酸陰離子、富馬酸鹽、1-羥基-2萘甲酸鹽、膦?；宜猁}、碳酸鹽、碳酸氫鹽、3-膦?；猁}、DL-焦谷氨酸鹽、D-焦谷氨酸鹽或L-焦谷氨酸鹽?；蛘?，陰離子抗衡離子可為磺酸鹽。例如，磺酸鹽抗衡離子可為甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、三氟甲基磺酸鹽、乙磺酸鹽、(±)-樟腦磺酸鹽、萘磺酸鹽、1R-(-)-樟腦磺酸鹽、1S-(+)-樟腦磺酸鹽、2-基磺酸鹽、1，5-萘二磺酸鹽、1，2-乙烷二磺酸鹽、1，3-丙烷二磺酸鹽、3-(N-嗎啉代)丙烷磺酸鹽、聯(lián)苯基磺酸鹽、羥乙磺酸鹽或1-羥基-2-萘磺酸鹽。在另一實(shí)施方案中，所述陰離子抗衡離子可為硫酸鹽。用于本發(fā)明硫酸鹽的實(shí)例包括但不限于硫酸鹽、硫酸氫鉀、硫酸氫鈉和硫酸。陰離子抗衡離子可為氨基磺酸鹽。當(dāng)陰離子抗衡離子為磷酸鹽時(shí)，它可為例如磷酸鹽、磷酸二氫鹽、磷酸氫鉀、磷酸二鉀、磷酸鉀、磷酸氫鈉、磷酸二鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鈣、磷酸鈣、磷酸氫鈣、三代磷酸鈣(Ca3(PO4)2)或六氟代磷酸鹽。陰離子抗衡離子可為膦酸鹽。例如，膦酸鹽抗衡離子可為乙烯基膦酸鹽、2-羧基乙基膦酸鹽或苯基膦酸鹽?；蛘?，所述陰離子抗衡離子可為硝酸鹽。所述鹽也可得自所述化合物與氧化物如氧化鋅的加成反應(yīng)。
如需要，所述陰離子抗衡離子可接合于聚合樹脂上。換句話說，陰離子抗衡離子可為樹脂-結(jié)合的陰離子。例如，所述的樹脂-結(jié)合的陰離子可為聚丙烯酸鹽樹脂，其中的樹脂含陰離子的羥酸鹽基團(tuán)。用于本發(fā)明的鹽的聚丙烯酸鹽樹脂的一個(gè)實(shí)例為Bio-Rex 70(Bio-Rad生產(chǎn))。在一個(gè)可選擇的實(shí)例中，樹脂-結(jié)合的陰離子可為磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)共聚物樹脂。用作本發(fā)明的陰離子抗衡離子的磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)共聚物樹脂的非限定性實(shí)例包括AmberliteIPR-69(Rohm&Haas)或Dowex 50WX4-400(Dow)。如需要，所述的聚丙烯酸酯樹脂或磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂可與交聯(lián)劑如二乙烯基苯交聯(lián)。
在另一實(shí)施方案中，式1化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可為這樣的鹽，其中本發(fā)明的化合物為具有至少一個(gè)陽離子抗衡離子的陰離子形式。例如，所述陽離子抗衡離子可為銨陽離子、堿金屬陽離子、堿土金屬陽離子、過渡金屬陽離子或樹脂-結(jié)合的陽離子。當(dāng)陽離子抗衡離子為銨離子時(shí)，它可被取代或不被取代。例如，銨陽離子可為烷基銨陽離子或雙-、三或四烷基銨陽離子。另外，所述銨陽離子可為芳基銨陽離子或二、三或四芳基銨陽離子。所述的銨陽離子可含烷基和芳基兩種基團(tuán)。銨陽離子可為芳族的，例如，吡啶鎓陽離子。其它官能團(tuán)也以銨陽離子形式出現(xiàn)。例如，所述銨陽離子可為銨、甲銨、二甲銨、三甲銨、四甲銨、乙醇銨、二環(huán)己銨、胍鎓或乙二銨陽離子。或者，陽離子抗衡離子可為堿金屬陽離子如鋰陽離子、鈉陽離子、鉀陽離子或銫陽離子。在另一種選擇中，所述的陽離子抗衡離子可為堿土金屬陽離子如鈹陽離子、鎂陽離子或鈣陽離子。如需要，所述的陽離子可為過渡金屬陽離子如鋅陽離子。
如需要，所述陽離子抗衡離子可結(jié)合于聚合樹脂上。換句話說，陰離子抗衡離子可為樹脂-結(jié)合的陽離子。例如，所述的樹脂-結(jié)合的陽離子可為陽離子官能化聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂。用于本發(fā)明的陽離子官能化聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂的實(shí)例是Bio-Rex-5(Bio-Rad)，一種銨官能化樹脂。在另一選擇中，所述的樹脂-結(jié)合的陽離子可為陽離子官能化聚丙烯酸酯樹脂如胺化的聚丙烯酸酯樹脂。用作本發(fā)明的陽離子抗衡離子的胺化聚丙烯酸酯樹脂的一個(gè)實(shí)例為AG-4-XR(Bio-Rad)。
在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案中，式1化合物可以以兩性離子的形式出現(xiàn)。換句話說，所述化合物在其分子內(nèi)可既含陽離子部位又含陰離子部位。這樣的兩性離子形式可以以沒有分離的抗衡離子存在或它可以同時(shí)以陽離子抗衡離子和陰離子抗衡離子存在。
另一實(shí)施方案提供與炎癥相關(guān)的疾病的治療或預(yù)防的方法，其中所述方法包括用治療或預(yù)防與炎癥相關(guān)的疾病的量的本發(fā)明化合物或鹽治療有此需要的患者。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種制備式21化合物或其鹽的方法 其中X選自-S-、-S(O)-和-S(O)2-。R2選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C1-C5烷氧基-C1烷基和C1-C5烷硫基-C1烷基；R30選自-H、-OH、-C(O)-R17、-C(O)-O-R18和-C(O)-S-R19；R1、R5、R6和R7獨(dú)立地選自-H、鹵素、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；R9和R10獨(dú)立地選自-H、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；至于R11和R12R11選自-H、-OH、-C(O)-O-R24和-C(O)-S-R25，而R12選自-H、-OH、-C(O)-O-R26和-C(O)-S-R27；或R11為-O-，而R12為-C(O)-，其中的R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)；或R11為-C(O)-，而R12為-O-，其中R11和R12與它們所連接的原子一起形成環(huán)；R13為C1烷基；R17、R18、R19、R24、R25、R26、R27和R27a獨(dú)立選自-H和烷基，該烷基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)任選取代；當(dāng)R1、R2、R4、R5、R6、R7、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R24、R25、R26、R27和R27a中的任一個(gè)獨(dú)立為選自烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)，那么，該基團(tuán)任選地被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代。制備化合物21的所述方法包括用具有對應(yīng)于式23結(jié)構(gòu)的乙亞氨酸烷基酯(或其鹽) 處理具有對應(yīng)于式22結(jié)構(gòu)的二胺化合物(或其鹽) 在式23中，R31為C1-C6烷基。R11優(yōu)選選自-H和-OH。例如，R11可為-H?；蛘?，R11可為-OH。當(dāng)R11為-H或-OH時(shí)，R13優(yōu)選為甲基或鹵代甲基。更優(yōu)選R13為甲基。同樣，當(dāng)R11為-H或-OH時(shí)，R31優(yōu)選為C1-C3烷基，更優(yōu)選為乙基。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，用乙亞氨酸烷基酯處理二胺化合物可在堿的存在下進(jìn)行。例如，所述堿可為肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物、金屬醇鹽、胺、羥基胺、金屬氫化物、金屬氨化物絡(luò)合物或堿性樹脂。當(dāng)所述堿為堿性樹脂時(shí)，它可為例如聚合物-結(jié)合的二氮雜雙環(huán)[4.4.0]癸-2-烯樹脂。例如，所述堿性樹脂可具有攜帶連接于共聚物的二氮雜雙環(huán)[4.4.0]癸-2-烯的聚(苯乙烯二乙烯苯)共聚物主鏈。當(dāng)所述堿為胺時(shí)，它基本為任何取代或未取代的胺。例如，所述胺可為1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯；1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷；或1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯。當(dāng)所述堿為堿金屬氫氧化物時(shí)，它可為，例如，氫氧化鉀或氫氧化鈉。當(dāng)所述堿為金屬氫化物時(shí)，它可為，例如氫化鈉、氫化鉀或氫化鈣。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，提供一種制備具有對應(yīng)于式22結(jié)構(gòu)的二胺化合物(或其鹽)的方法，其中所述方法包括處理具有對應(yīng)于式24結(jié)構(gòu)的保護(hù)的二胺化合物(或其鹽) 其中R33選自-NH2和保護(hù)的氨基；R32為保護(hù)的氨基；和R14選自-H和C1-C6烷基；其中當(dāng)R14為C1-C6烷基時(shí)，R14任選地被一或多個(gè)選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基的基團(tuán)所取代；其中的處理用去保護(hù)劑進(jìn)行，從而制備出所述的二胺化合物。用于本發(fā)明的保護(hù)的氨基在性質(zhì)上是廣泛變化的。Theodora W.Greene和Peter G.M.Wuts(有機(jī)合成的保護(hù)基團(tuán)，第3版.，John Wiley & Sons，New York，1999，第494-653頁)描述了本發(fā)明使用的對R32或R33的大量保護(hù)的氨基。例如，R32或R33可各為或同為4-氯代芐基亞氨基。當(dāng)R33為4-氯代芐基亞氨基時(shí)，優(yōu)選R32為-NH2。在另一實(shí)施方案中，R32或R33可各為或同為叔丁氧基羰基氨基。當(dāng)R33為叔丁氧基羰基氨基時(shí)，R32優(yōu)選為-NH2。在另一實(shí)施方案中，R32或R33可各為或同為N-苯二甲酰亞氨基。當(dāng)R33為N-苯二甲酰亞氨基時(shí)，優(yōu)選R32為-NH2。在另一實(shí)施方案中，R32或R33可各為或同為芐氧基羰基氨基。在本發(fā)明的一優(yōu)選實(shí)施方案中，保護(hù)的氨基為醛與相關(guān)的氨基作用生成席夫堿的反應(yīng)所產(chǎn)生的的任何這樣的基團(tuán)。大量的去保護(hù)劑可有利地用于本發(fā)明以促進(jìn)24轉(zhuǎn)化為22。Greene和Wuts描述了許多這類去保護(hù)劑(見上文)。例如，當(dāng)保護(hù)的氨基為4-氯代芐基亞氨基或叔-丁氧基羰基氨基時(shí)，所述的去保護(hù)劑優(yōu)選為酸。部分有用的酸去保護(hù)劑包括但不限于氫氯酸、氫溴酸、硫酸、三氟乙酸、磷酸(phosphoric acid，phosphorus acid)和乙酸。在另一實(shí)施例中，當(dāng)R32或R33為N-苯二甲酰亞氨基時(shí)，所述的去保護(hù)劑既可為酸也可為堿。當(dāng)對N-苯二甲酰亞氨基的去保護(hù)劑為堿時(shí)，所述堿可為例如肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物、金屬醇鹽、胺、羥胺和金屬氨化物絡(luò)合物。當(dāng)對N-苯二甲酰亞氨基的去保護(hù)劑為酸時(shí)，所述酸可為例如氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、磷酸(phosphoric acid，phosphorus acid)或乙酸。優(yōu)選在水的存在下用去保護(hù)劑處理化合物24。
在所述反應(yīng)中，R14優(yōu)選為-H。R33優(yōu)選為-NH2，或其鹽。R2優(yōu)選為甲基。在另一優(yōu)選實(shí)施方案中，R1、R5、R6、R7、R9和R10各為-H。一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案為其中R33為叔-丁氧基羰基氨基的實(shí)施方案。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，化合物24(或其鹽)有對應(yīng)于式25的結(jié)構(gòu) 其中括弧中的R指相對于羧酸官能團(tuán)的α位碳在R絕對構(gòu)型內(nèi)。換言之，化合物25為R-對映體或其鹽。
本發(fā)明也提供一種制備保護(hù)的二胺化合物24(或其鹽)的方法，其中所述方法包括用具有式27結(jié)構(gòu)的保護(hù)的氨基乙基烷基化化合物 其中的R34為親核取代的離去基團(tuán)，處理具有式26結(jié)構(gòu)的硫氫化合物 從而形成保護(hù)的二胺化合物。該反應(yīng)優(yōu)選在堿的存在下進(jìn)行。例如，所述堿可為肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物、金屬醇鹽、胺、羥胺和金屬氨化物絡(luò)合物。所述堿優(yōu)選為堿金屬氫氧化物，所述堿更優(yōu)選為氫氧化鉀或氫氧化鈉。式27結(jié)構(gòu)中的R34可在寬范圍內(nèi)變化，并可基本上代表任何親核的離去基團(tuán)，該基團(tuán)生成藥學(xué)上可接受的陰離子或者可被轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的陰離子的陰離子。也就是說，(R34)-為藥學(xué)上可接受的陰離子或可被轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的陰離子的陰離子。例如，R34可為氯代基、溴代基、碘代基、甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽或三氟甲磺酸鹽。R34優(yōu)選為氯代基、溴代基或碘代基，R34更優(yōu)選為溴。在本反應(yīng)中，R33優(yōu)選為-NH2。在本反應(yīng)中R2可為被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基任選取代的C1-C6烷基。R2優(yōu)選為被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基任選取代的C1-C3烷基，更優(yōu)選地，R2為C1-C3烷基。例如，R2可有利地為甲基。在另一實(shí)施方案中，R5的R6各自可為-H。在又一實(shí)施方案中，R1和R7可獨(dú)立地選自H和被一或多個(gè)鹵素任選取代的C1-C6烷基；優(yōu)選R1和R7各為-H。在本發(fā)明中，優(yōu)選R32可選自4-氯代芐基亞氨基、叔丁氧基羰基氨基和N-苯二甲酰亞氨基，更優(yōu)選R32為叔丁氧基羰基氨基。
本發(fā)明還提供一種制備具有式28結(jié)構(gòu)的硫氫化合物的方法 其中的R2、R5和R6定義如上，所述方法包括在水解條件下處理具有式29結(jié)構(gòu)的噻唑烷化合物或其鹽 其中R35為選自-H和C1-C6烷基的基團(tuán)；從而生成硫氫化合物。所述水解條件優(yōu)選包括在水的存在下用酸接觸噻唑烷化合物。優(yōu)選地，所述酸選自氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、磷酸(phosphoric acid，phosphorus acid)和乙酸。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，R5和R6各為-H。在另一實(shí)施方案中，化合物29的R2為被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基任選取代的C1-C6烷基。R2優(yōu)選為被一或多個(gè)選自烷氧基和鹵素的取代基任選取代的C1-C3烷基，更優(yōu)選R2為C1-C3烷基。例如，R2可為甲基。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，化合物29的R35為甲基。
本發(fā)明也提供一種制備具有式30結(jié)構(gòu)的甲基噻唑烷化合物(或其藥學(xué)上可接受的鹽) 的方法，其中R36為C1-C6烷基；所述方法包括在甲基化條件下處理一可脫質(zhì)子化的具有式31結(jié)構(gòu)的噻唑烷化合物 從而生成甲基噻唑烷化合物。優(yōu)選地，甲基化條件包括用堿或甲基化劑處理可脫質(zhì)子化的噻唑烷化合物。所述堿的性質(zhì)可在寬的范圍內(nèi)變化。例如，所述堿可為金屬氫氧化物、金屬醇鹽、金屬氫化物和金屬氨化物絡(luò)合物。所述堿優(yōu)選為金屬氨化物絡(luò)合物。用作本發(fā)明的堿的部分金屬氨化物絡(luò)合物包括但不限于六甲基二硅疊氮化鋰(hexamethyldisilazide)、六甲基二硅疊氮化鈉、六甲基二硅疊氮化物鉀、二異丙基氨化鋰、二異丙基氨化鈉、二異丙基氨化鉀、氨化鈉、氨化鋰、氨化鉀、二乙基氨化鈉、二乙基氨化鋰、二乙基氨化鉀、甲基鋰、叔丁基鋰、仲丁基鋰、甲基鈉、叔丁基鈉、仲丁基鈉和甲基鎂化溴。在所述甲基化反應(yīng)中，R36可為C1-C3烷基；例如R36可為甲基。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種制備可脫質(zhì)子化的噻唑烷化合物31的方法，其中所述方法包括在稠合條件下用新戊醛接觸半胱氨酸C1-C6烷基酯，從而生成可去質(zhì)子化的噻唑烷化合物。優(yōu)選的稠合條件包括在堿存在下進(jìn)行接觸。所述堿可在大范圍內(nèi)變化。例如，所述堿可為但不限于肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物、金屬烷基堿、金屬醇鹽、胺、羥胺和金屬氨化物絡(luò)合物。當(dāng)所述堿為金屬氨化物絡(luò)合物時(shí)，它可為，例如雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰。在所述稠合反應(yīng)中，R36優(yōu)選為C1-C3烷基，R36更優(yōu)選為甲基。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供一種制備具有式32結(jié)構(gòu)的α-氨基酸化合物(或其鹽、對映體或外消旋體)的方法 其中R2選自C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基、C1-C5烷氧基-C1烷基和C1-C5烷硫基-C1烷基；R1、R5、R6和R7獨(dú)立地選自-H、鹵素、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；R9和R10獨(dú)立地選自-H、C1-C6烷基、C2-C6鏈烯基、C2-C6炔基和C1-C5烷氧基-C1烷基；且當(dāng)R1、R2、R5、R6、R7、R9和R10中的任何一個(gè)獨(dú)立為選自烷基、鏈烯基和炔基的基團(tuán)時(shí)，則所述的基團(tuán)任選被一或多個(gè)選自-OH、烷氧基和鹵素的取代基所取代；其中所述方法包括在水解條件下處理具有式33結(jié)構(gòu)的乙內(nèi)酰脲化合物(或其鹽、對映體，或外消旋體) 從而生成所述的α氨基酸化合物。例如，所述的水解條件可包括使乙內(nèi)酰脲與酸接觸以產(chǎn)生酸的水解產(chǎn)物。用于所述水解反應(yīng)的酸包括，例如，氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、三氟乙酸或磷酸。α氨基酸化合物32的制備方法可進(jìn)一步包括用離子交換樹脂處理所述酸的水解產(chǎn)物?；蛘?，所述水解條件可包括使乙內(nèi)酰脲化合物與堿接觸以產(chǎn)生堿的水解產(chǎn)物。用于所述堿水解的堿包括但不限于肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物或金屬醇鹽。無論是堿催化的(mediated)還是酸催化的水解，都優(yōu)選化合物33結(jié)構(gòu)中的R1、R5、R6和R7各為-H。也優(yōu)選R9和R10各為-H。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述α-氨基酸化合物(或其鹽、對映體或外消旋體)具有式34的結(jié)構(gòu) 本發(fā)明還提供一種制備具有式35結(jié)構(gòu)的乙內(nèi)酰脲化合物(或其鹽、對映體或外消旋體)的方法 其中R1、R2、R5、R6、R7、R9和R10定義如上，其中所述方法包括在碳酸銨來源和水的存在下，用氰化物源接觸具有式36結(jié)構(gòu)的α-硫代酮化合物 從而生成乙內(nèi)酰脲化合物。所述氰化物源可為例如，氰化氫或金屬氰化物鹽。當(dāng)所述的氰化物源為金屬氰化物鹽時(shí)，所述鹽優(yōu)選為氰化鈉、氰化鉀或氰化鋰。更優(yōu)選金屬氰化物鹽為氰化鈉。對于在所述生成乙內(nèi)酰脲的反應(yīng)中的化合物36，R1、R5、R6和R7各優(yōu)選為-H。更優(yōu)選R9和R10各為-H。制備化合物35的方法可進(jìn)一步包括手性分離步驟。當(dāng)制備化合物35的方法還包括手性分離步驟時(shí)，那么所述的乙內(nèi)酰脲化合物產(chǎn)物優(yōu)選具有化合物33(或其鹽或?qū)τ丑w)的結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明也提供一種制備α-硫代酮化合物36的方法，其中所述方法包括在堿的存在下用碳酸二叔丁基酯接觸具有式37結(jié)構(gòu)的氨基硫醇化合物 以生成中間體混合物；再使該中間體混合物與具有式38結(jié)構(gòu)的α-氯代酮化合物 接觸從而生成α-硫代酮化合物。在所述反應(yīng)中的堿可在大范圍內(nèi)變化。例如，所述堿可為但不限于肼、金屬硫化物、金屬氫氧化物、金屬醇鹽、胺、羥胺和金屬氨化物絡(luò)合物。所述堿優(yōu)選為金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化鋰。在所述反應(yīng)中，R1、R5、R6和R7各優(yōu)選為-H。更優(yōu)選R9和R10各為-H。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”包括普通用來形成堿金屬鹽和形成游離酸或游離堿的加成鹽的鹽。所述鹽的性質(zhì)不是決定性的，只要它是藥學(xué)上可接受的。由于藥學(xué)上可接受的鹽相對于相應(yīng)的母體或中性化合物而言有更大的水溶性，它們特別用作本發(fā)明的方法的產(chǎn)物。這類鹽必須有藥學(xué)上可接受的陰離子或陽離子。適用的本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可由無機(jī)酸或有機(jī)酸制備。這類無機(jī)酸的實(shí)例有氫氯酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。合適的有機(jī)酸包括來自脂肪族、環(huán)脂肪族、芳族、芳基脂肪族、雜環(huán)類、羧酸類和磺酸類有機(jī)酸，它們的實(shí)例有甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、glucoronic、馬來酸、富馬酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、鄰氨基苯甲酸、甲磺酸、水楊酸、對-羥基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、撲酸(pamonic)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、磺胺酸、硬脂酸、環(huán)己基氨基磺酸、藻酸(algenic)、半乳糖醛酸。適用的本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的堿加成鹽包括由鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅制得的金屬鹽或由N，N’-二芐基乙二胺、膽堿、氯代普魯卡因、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)和普魯卡因制得的有機(jī)鹽。可能的話，適用的本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽包括衍生自無機(jī)酸，例如，氫氯酸、氫溴酸、硼酸、氟代硼酸、磷酸、偏磷酸、硝酸、碳酸(包括碳酸鹽和碳酸氫鹽陰離子)、磺酸和硫酸，和有機(jī)酸，例如，乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、乙醇酸、isothionic、乳酸、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、三氟甲磺酸、琥珀酸、甲苯磺酸、酒石酸和三氟乙酸的鹽。適用的藥學(xué)上可接受的堿鹽包括銨鹽、堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽，及堿土金屬鹽如鎂鹽和鈣鹽。通過將適當(dāng)?shù)乃峄驂A分別與所述化合物的共軛堿或共軛酸反應(yīng)，用常規(guī)方法可由本發(fā)明化合物的相應(yīng)的共軛堿或共軛酸制備所有的這些鹽。另一種藥學(xué)上可接受的鹽為樹脂-結(jié)合的鹽。
雖然本發(fā)明的化合物有可能作為原料化學(xué)品給藥，但優(yōu)選使它們作為藥用組合物存在。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供一種包括本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物，及其一種或多種藥學(xué)上可接受的載體和任選的一或多種其它治療成分的藥用組合物。就可與制劑中的其它成分相適配而言，所述載體必須是可接受的并對其接受者無害。
所述制劑包括適于口服、不經(jīng)腸(包括皮下的、真皮內(nèi)的、肌內(nèi)的、靜脈內(nèi)的和關(guān)節(jié)內(nèi)的)、直腸的和局部的(包括皮膚的、頰的、舌下的和眼內(nèi)的)給藥的那些制劑，盡管最適合的途徑可能取決于例如接受者的病癥和疾病。所述制劑可常規(guī)地以單位劑型存在并可通過制藥領(lǐng)域所熟知的任何方法制備。所有方法都包括將本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物與構(gòu)成一種或多種輔助成分的載體混合的步驟。一般說來，通過均一地和緊密地將所述活性成分與液體載體或細(xì)分的固體載體或兩者混合，如需要再將所述產(chǎn)物成型為需要的制劑來制備所述制劑。
適用于口服給藥的本發(fā)明制劑可作為各含有預(yù)定量的活性成分的分散單位如膠囊、扁囊劑或片劑存在；作為粉劑或顆粒劑；作為含水液體液或非水液體中的溶液或懸液；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑的形式存在。所述活性成分也可作為大丸藥團(tuán)(bolus)、干藥糖劑或糊劑存在。
可通過任選與一種或多種輔助成分一起進(jìn)行壓制或模壓制備片劑。通過在合適的設(shè)備內(nèi)壓制任選與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、潤滑劑、表面活性劑或分散劑混合的呈自由流動(dòng)形式如粉末或顆粒的活性成分可制備壓制片劑。通過在合適的設(shè)備內(nèi)對用惰性液體稀釋劑濕潤的粉末狀化合物的混合物進(jìn)行模壓或制備模壓片劑?？扇芜x地對所述片劑包衣或刻痕，以及可配制為以使其中的活性成分緩慢或控制釋放。
不經(jīng)腸給藥的制劑包括含水和不含水的無菌注射液，它可含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和令所述制劑與要給予的接受者的血液等滲的溶質(zhì)；及含水和不含水的可能包括懸浮劑和增稠劑的無菌懸液。所述制劑可裝于單位劑量或多單位劑量容器，例如，密封的安瓿和小瓶中，也可貯存于冷凍干燥(凍干)條件下，臨用前僅需加入無菌液體載體，例如，鹽水、注射用水即可?？捎汕笆龇N類的無菌粉末、顆粒和片劑制備用前臨時(shí)配制的注射液和懸液。
用于直腸給藥的制劑可作為帶普通載體如可可油或聚乙二醇的栓劑存在。
用于口腔局部給藥，例如，頰下或舌下給藥的制劑，包括在矯味基質(zhì)如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠中含有活性成分的錠劑，及在諸如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠的基質(zhì)中含有活性成分的軟錠劑。
優(yōu)選的單位劑量制劑是那些含有如下所述的有效劑量或其適當(dāng)?shù)姆謩┝康乃龌钚猿煞帧?br> 應(yīng)該理解除了上面特別介紹的成分外，本發(fā)明的所述制劑可包括與所述制劑類型有關(guān)的本領(lǐng)域的其它常規(guī)試劑，例如，適于口服給藥的制劑可包括矯味劑。
本發(fā)明的化合物可以以每天0.001-2500mg/kg的劑量口服或經(jīng)注射給藥。成人的劑量范圍一般為0.005mg-10g/天。以分散單位提供的片劑或其它形式可便利地含有一定量的本發(fā)明化合物，即它在這樣的劑量下或作為同樣劑量的多個(gè)分劑量，如含有5mg-500mg，通常約10mg-200mg的單位是有效的。
式1化合物優(yōu)選口服或經(jīng)注射(靜脈或皮下)給藥。給予患者的化合物的準(zhǔn)確量應(yīng)是主治醫(yī)師的責(zé)任。然而，所用劑量將取決于大量的因素，包括患者的年齡和性別，要治療的準(zhǔn)確疾病及其嚴(yán)重性。給藥途徑也隨疾病及其嚴(yán)重性而變化。
本發(fā)明的化合物可以互變異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體或立體異構(gòu)體形式存在。本發(fā)明考慮了所有這類化合物，包括順式-和反式-幾何異構(gòu)體，E-和Z-幾何異構(gòu)體，R-和S-對映體、非對映體、d-異構(gòu)體、l-異構(gòu)體、其外消旋混合物及其其它混合物，這些都屬于本發(fā)明的范圍。這類互變異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體或立體異構(gòu)體形式的藥學(xué)上可接受的鹽也包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
術(shù)語“順式”和“反式”指的是幾何異構(gòu)現(xiàn)象的形式，其中通過雙鍵連接的兩個(gè)碳原子各有兩個(gè)在雙鍵同側(cè)(順式)或在雙鍵對側(cè)(反式)的高級(hight ranking)基團(tuán)。有些所述化合物含鏈烯基，并意欲包括順式和反式或“E”和“Z”的幾何形式。
有些所述化合物含一個(gè)或多個(gè)立體中心，并對各所述的立體中心而言，意欲包括R、S及R和S形式的混合物。
在進(jìn)行本發(fā)明中，下列總的合成過程是有用的。
流程1a 流程1b R＝烷基或烷氧基烷基(i)戊烷與迪安-斯達(dá)克榻分水器；(ii)HCO2Na，Ac2O，HCO2H；(iii)LiN[(CH3)3Si]2，DMPU，THF，-78℃；(iv)RI或R-SO3CF3；(v)6N HCl，回流2天。
流程1c R＝烷基或烷氧基烷基(i)NaH，NMP，Boc-NHCH2CH2Br；(ii)1NHCl；(iii)乙亞氨酸乙酯；(iv)離子交換流程2
流程3 R＝烷基(i)氯代甲酸芐酯，苯；(ii)甲苯磺酰氯，三乙胺；(iii)2-甲基-L-半胱氨酸-HCl，NaH，NMP；(iv))6NHCl回流；(v)乙亞氨酸乙酯，NaOH；(vi)離子交換。
流程4 R＝烷基(i)KHF2，nBu4NH2F3；(ii)甲苯磺酰氯，三乙胺；(iii)2-甲基-L-半胱氨酸-HCl，NaH，NMP；(iv)6NHCl，回流；(v)乙亞氨酸乙酯，NaOH；(vi)離子交換。
流程5 R＝烷基或烷氧基烷基(i)CH3OH，HCl；(ii)4-氯代苯甲醛，(CH3CH2)3N，CH3CN，MgSO4；(iii)NaN[(CH3)3Si]2，-78℃；(iv)RI；(v)HCl；(vi)乙亞氨酸乙酯，堿；(vii)離子交換。
流程6 (i)HBr(合成1971 646-7，J Chem Soc 1961 3448-52)；(ii)K2Cr2O7；(iii)Boc-NHCH2CH2SH，NaOH，甲苯；(iv)NaCN，(NH4)2CO3，EtOH；(v)手性分離；(vi)48％ HBr；(vii)乙亞氨酸乙酯堿；(viii)HCl。
流程7 流程8 i)NaOH；ii)乙腈，回流過夜；iii)碳酸二乙酯，叔丁醇鉀；iv)1，2-二溴代乙烷，DMF；v)NaOH，α-甲基半胱氨酸酯下列結(jié)構(gòu)為本發(fā)明提供的許多化合物的示例。這里提供的實(shí)例不打算用來限制，本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)本公開會(huì)認(rèn)識到本發(fā)明包括許多可選擇的結(jié)構(gòu)。
下列化合物是本發(fā)明包括的其它化合物實(shí)例或是用于制備本發(fā)明的化合物。
(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-羧酸甲酯、(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-甲基-4-羧酸甲酯、S-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸鹽、(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇、(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇甲苯磺酸鹽、S-[(1R)-2-(芐氧基羰基氨基)-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸鹽、S-(1R)-2-氨基-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽、S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸，甲酯、
N-[(4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯苯基)亞甲基]氨基]乙基]-L-半胱氨酸，甲酯、N-[(4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯苯基)亞甲基]氨基]乙基]-2-甲基-D/L-半胱氨酸，甲酯。
提供下列實(shí)施例用來說明本發(fā)明而不是要限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，下列制備方法的條件和過程的改變可用來制備這些化合物。
實(shí)施例1 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽實(shí)施例-1A)(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-羧酸甲酯參見Jeanguenat和Seebach，.J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，2291(1991)和Pattenden等.Tetrahedron，49，2131(1993)伴隨著用迪安-斯達(dá)克榻分水器(Dean-Stark trap)不斷除去水，使(R)-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽(8.58g，50mmol)、新戊醛(8.61g，100mmol)和三乙胺(5.57g，55mmol)于戊烷(800ml)中回流。過濾并蒸發(fā)該混合物。將生成物噻唑烷(9.15g，45mmol)和甲酸鈉(3.37g，49.5mmol)于甲酸(68ml)中攪拌再于0-5℃用1小時(shí)滴加乙酐(13ml，138mmol)來處理。將所述溶液加熱到室溫并徹夜攪拌。蒸發(fā)溶劑并用含水的5％NaHCO3中和殘余物再用乙醚(3次)萃取。干燥合并的有機(jī)層(無水MgSO4)、過濾并蒸發(fā)得到從己烷-乙醚中結(jié)晶的白色晶體的標(biāo)題化合物(8.65g)(總收率80％，8∶1構(gòu)象異構(gòu)體混合物)。1H NMR(CDCl3)δ主要構(gòu)象異構(gòu)體1.04(s，9H)，3.29(d，1H)，3.31(d，1H)，3.78(s，3H)，4.75(s，1H)，4.90(t，1H)，8.36(s，1H)。MSm/z(電霧化)232(M+H)+(100％)，204(10)164(24)。實(shí)施例-1B)(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-甲基-4-羧酸甲酯于-78℃、N2下，將DMPU(25ml)加入實(shí)例-1A的產(chǎn)物(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲酰基-4-羧酸甲酯(8.65g，37.4mmol)的無水四氫呋喃(130ml)溶液中，并攪拌所述混合物5分鐘。加入四氫呋喃中的1M雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰(37.5ml)，再攪拌該混合物30分鐘。加入甲基碘化物(5.84g，41.1mmol)后，將該混合物維持在-78℃4小時(shí)，然后在不斷攪拌下加熱到室溫。真空蒸發(fā)溶劑，再加入鹽水和乙酸乙酯。用EtOAc萃取該水相三次，再用10％KHSO4、水和鹽水洗滌合并的有機(jī)層。然后干燥(無水MgSO4)、過濾并減壓汽提所有溶劑。硅膠層析殘余的油，用1-10％EtOAc/己烷洗脫，得到標(biāo)題化合物(5.78g，63％，2.4∶1構(gòu)象異構(gòu)體混合物)。1H NMR(CDCl3)δ主要的構(gòu)象異構(gòu)體1.08(s，9H)，1.77(s，3H)，2.72(d，1H)，3.31(d，1H)，3.77(s，3H)，4.63(s，1H)，8.27(s，1H)。次要的構(gòu)象異構(gòu)體，0.97(s，9H)，1.79(s，3H)，2.84(d，1H)，3.63(d，1H)，3.81(s，3H)，5.29(s，1H)，8.40(s，1H)；MS m/z(電霧化)246(M+H)+(100％)，188(55)160(95)。在DaicelChemical Industries Chiracel OAS柱中的保留時(shí)間16.5分鐘，10-40％IPA己烷0-25分鐘，＞95％ ee。實(shí)施例-1C)(2R)2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽在N2下，將實(shí)施例-1B的產(chǎn)物(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-甲基-4-羧酸甲酯(5.7g，23.2mmol)與6N HCl(100ml)一同攪拌并劇烈回流2天。冷卻該溶液，用EtOAc洗滌并蒸發(fā)得到淡黃色粉末狀產(chǎn)物(2R)2-甲基-半胱氨酸鹽酸鹽(3.79g，95％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s，3H)2.82(t，1H)，2.96(bs，2H)，8.48(s，3H)。MS m/z(電霧化)136[M+H+]。實(shí)施例-1D)S-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸鹽將氫化鈉(2.6g，60％在礦物油中，65mmol)加入烘箱-干燥的、真空冷卻過的、裝有無氧1-甲基-2-吡咯烷酮(5ml)的RB燒瓶中。將該混合物冷卻到-10℃并在N2下攪拌。分批加入溶于無氧1-甲基-2-吡咯烷酮(25ml)中的實(shí)施例-1C的產(chǎn)物2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽(3.6g，21.0mmol)。全部H2停止釋放后，于-10℃，加入溶于無氧1-甲基-2-吡咯烷酮(15ml)中的2-[(1，1-二甲基乙氧基羰基)-氨基]乙基溴(4.94g，21mmol)。再攪拌該反應(yīng)物4小時(shí)，加熱到室溫。用1N HCl中和所述溶液，再通過真空蒸發(fā)除去1-甲基-2-吡咯烷酮。采用0.05％含水三氟乙酸溶液中的1-20％乙腈的反相層析得到標(biāo)題化合物(5.9g)，經(jīng)凍干適當(dāng)?shù)牧鞣只厥铡?H NMR(DMSO-d6/D2O)δ1.31(s，9H)，1.39(s，3H)，2.55(m，2H)，2.78(d，1H)，3.04(d，1H)，3.06(t，2H)。對C11H22N2O4S的HRMS計(jì)算值279.1375(M+H+)，實(shí)測值279.1379。實(shí)施例-1E)S-(2-氨基乙基)-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽將實(shí)施例-1D的產(chǎn)物S-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸鹽(5.5g，14.0mmol)溶于1N HCl(100ml)中并在氮?dú)?、室溫下攪拌過夜。凍干除去所述溶液得到目標(biāo)物S-(2-氨基乙基)-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽，1H NMR(DMSO-d6/D2O)δ1.43(s，3H)，2.72(m，2H)，2.85(d，1H)，2.95(t，2H)，3.07(d，1H)。M/z[M+H+]179。
將實(shí)施例-1E的產(chǎn)物溶于H2O中，用1N NaOH將pH調(diào)節(jié)到10，再加入乙亞氨酸乙脂鹽酸鹽(1.73g，14.0mmol)。攪拌反應(yīng)物15-30分鐘，將pH值提高到10，重復(fù)該過程三次。用HCl將pH調(diào)節(jié)到3，再將該溶液裝入洗滌過的DOWEX 50WX4-200柱中。用H2O和0.25MNH4OH洗滌該柱，接著用0.5M NH4OH洗滌。將0.5M NH4OH的洗液部分立即冷凍、合并及凍干，得到一種油，再將其溶于1N HCl并蒸發(fā)得到白色固體的標(biāo)題化合物(2.7g)。1H NMR(DMSO-d6/D2O)δ1.17(s，3H)，2.08(s，3H)，2.52(d，1H)，2.68(m，2H)，2.94(d，1H)，3.23(t，2H)。對C8H18N3O2S的HRMS計(jì)算值220.1120[M+H+]，實(shí)測值220.1133。
實(shí)施例2 2-[[[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]硫代]甲基]-O-甲基-D-絲氨酸，二鹽酸鹽用于本實(shí)施例的步驟和方法與實(shí)施例1的那些步驟和方法相同，除了用甲氧基甲基碘代替實(shí)施例-1B步驟中的甲基碘外。這些方法產(chǎn)生為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(2.7g)。1H NMR (D2O)δ 2.06(s，3H)，2.70(m，3H)，3.05(d，1H)，3.23(s，3H)，3.32(t，2H)，3.46(d，1H)，3.62(d，1H)。對C9H20N3O3S的HRMS計(jì)算值250.1225[M+H+]，實(shí)測值250.1228。
實(shí)施例3 S-[(1R)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽實(shí)施例-3A(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇O℃下，用20分鐘時(shí)間，向(S)-1-氨基-2-丙醇(9.76g，130mmol)的無水苯(60ml)溶液中緩慢、分批加入無水苯(120ml)中的氯代甲酸芐基酯(10.23g，60mmol)，同時(shí)在氮?dú)夥諊聞×覕嚢?。?℃攪拌所述混合物1小時(shí)，再將其加熱到室溫并再攪拌2小時(shí)。在有機(jī)層經(jīng)無水MgSO4干燥前用水(兩次)和鹽水(兩次)洗滌該混合物。蒸發(fā)所有溶劑得到油狀的標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3)δ1.22(d，3H)，2.40(bs，1H)，3.07(m，1H)，3.37(m，1H)，3.94(m，1H)，5.16(s，2H)，5.27(m，1H)，7.38(m，5H)。MS m/z(電霧化)232[M+23]+(100％)，166(96)。實(shí)施例-3B)(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇甲苯磺酸鹽于0℃下，用20分鐘時(shí)間，向?qū)嵤├?3A的產(chǎn)物(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇(9.74g，46.7mmol)和三乙胺(7.27g，72mmol)的二氯甲烷(60ml)溶液中緩慢、分批加入在二氯甲烷(18ml)中的甲苯黃酰氯(9.15g，48mmol)，同時(shí)在氮?dú)庀聞×覕嚢?。將該混合物加熱到室溫并再在氮?dú)庀聰嚢?6小時(shí)。在經(jīng)無水MgSO4干燥前用1N HCl、水、5％NaHCO3溶液、水和鹽水洗滌該有機(jī)層。蒸發(fā)全部溶劑得到白色固體，使它通過過含有乙酸乙酯/己烷(1∶4)的二氧化硅柱，以除去過量的甲苯磺酰氯，然后用乙酸乙酯/己烷(1∶3)洗脫，得到白色晶狀的標(biāo)題產(chǎn)物。將這些物質(zhì)在乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶得到白色針狀物(10.8g)。1HNMR(CDCl3)δ1.22(d，3H)，2.39(s，3H)，3.20(m，1H)，3.43(dd，1H)，4.66(m，1H)，5.02(m，1H)，5.04(ABq，2H)，7.34(m，7H)，7.77(d，2H)。MS m/z(電霧化)386[M+23]+(100％)，320(66)。在RegisTechnologies Inc.Perkle Covalent(R，R)β-GEM1 HPLC柱中測定所述產(chǎn)物，用流動(dòng)相異丙醇/己烷和10％異丙醇梯度液5分鐘，然后10-40％異丙醇25分鐘，使用紫外線和Laser Polarimetry檢測器。保留時(shí)間主要峰值22.2分鐘，＞98％ee。實(shí)施例-3C)S-[(1R)-2-(芐氧基羰基氨基)-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸酯將溶于無氧1-甲基-2-吡咯烷酮(5ml)中的實(shí)施例-1C的產(chǎn)物2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽(1g，6.5mmol)加至經(jīng)烘箱-干燥的、用N2吹洗過的圓底燒瓶中，再將系統(tǒng)冷卻到0℃。加入氫化鈉(0.86g，60％在礦物油中，20.1mmol)，于0℃下攪拌該混合物15分鐘。用10分鐘加入溶于無氧1-甲基-2-吡咯烷酮(10ml)中的實(shí)施例-3B產(chǎn)物(2S)-1-[(N-芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇甲苯磺酸鹽(2.5g，7mmol)的溶液。于0℃15分鐘后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4.5小時(shí)。再用1N HCl酸化該溶液至pH 4，通過真空蒸發(fā)除去1-甲基-2-吡咯烷酮。反相層析，用在0.05％三氟乙酸水溶液中的20-40％乙腈洗脫，得到經(jīng)凍干回收的標(biāo)題化合物(0.57g)。1H NMR(H2O，400MHz)δ1.0(d，3H)，1.4(s，3H)，2.6(m，2H)，2.8(m，1H)，3.1(m，2H)，3.6(s，1H)，5.0(ABq，2H)，7.3(m，5H)。MS m/z(電霧化)327[M+H+](100％)，238(20)，224(10)和100(25)。實(shí)施例-3D)S-[(1R)-2-氨基-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽將實(shí)施例-3C的產(chǎn)物S-[(1R)-2-(芐氧基羰基氨基)-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸三氟乙酸鹽(0.5g，1.14mmol)溶于6N HCl中并回流1.5小時(shí)。再將該混合物冷卻到室溫，用EtOAc萃取。真空濃縮水層得到標(biāo)題產(chǎn)物(2R，5R)-S-(1-氨基-2-丙基)-2-甲基-半胱氨酸鹽酸鹽(0.29g)，該產(chǎn)物無需進(jìn)一步提純而使用。1H NMR(H2O，400MHz)δ1.2(m，3H)，1.4(m，3H)，2.7(m，1H)，2.8-3.2(m，2)，3.4(m，1H)，(有些源于旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式的雙峰)。MS m/z(電霧化)193[M+H+](61％)，176(53)，142(34)，134(100)和102(10)。
將實(shí)施例-3D的產(chǎn)物S-[(1R)-2-氨基-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽(0.2g，0.76mmol)溶解于2ml H2O中，用1N NaOH將pH調(diào)節(jié)至10.0，用10分鐘分四批加入乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽(0.38g，3mmol)，如需要用1N NaOH將pH調(diào)節(jié)至10.0。1小時(shí)后，用1N HCl將pH調(diào)至3。將該溶液裝入水洗過的DOWEX 50WX4-200柱中。用H2O和0.5N NH4OH洗滌該柱。合并堿性流分并真空濃縮至干。用1NHCl酸化殘余物并濃縮得到實(shí)施例3的標(biāo)題化合物(49mg)。1H NMR(H2O，400MHz)δ1.3-1.0(m，3H)，1.5(m，3H)，2.1-1.8(m，3H)，3.4-2.6(m，5H)，3.6(m，1H)(觀察到旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)。MSm/z(電霧化)234[M+H+](100％)，176(10)和134(10)。
實(shí)施例4 S-[(1S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽此處所用步驟和方法與實(shí)施例3中的相同，除用(R)-1-氨基-2-丙醇代替步驟實(shí)施例-3A中的(S)-1-氨基-2-丙醇外，得到所述目標(biāo)物質(zhì)S-[(1S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-甲基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽。1H NMR(H2O，400MHz)δ 3.6(m，1H)，3.4-2.6(m，5H)，2.1-1.8(m，3H)，1.5(m，3H)和1.3-1.0(m，3H)。對C9H19N3O2S[M+H+]的HRMS計(jì)算值234.1276的，實(shí)測值234.1286。
實(shí)施例5 S-(1R/S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-乙基乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽用于此合成的步驟和方法與實(shí)施例3的相同，除用(R/S)-1-氨基-2-丁醇代替步驟實(shí)施例-3A中的(S)-1-氨基-2-丙醇外。
實(shí)施例6 S-[(1S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-(氟代甲基)乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽在催化劑正Bu4NH2F3存在下，用氟氫化鉀(potassium hydrogendifluoride)處理2-[(2R)-環(huán)氧乙烷基甲基]-1H-異吲哚-1，3-二酮(G.Alexander等.Tetrahedron Asymmetry，7，1641-8，1996)的樣品得到2-[(2R)-3-氟-2-羥丙基]-1H-異吲哚-1，3-二酮。在該合成中所用的步驟和方法與實(shí)施例3的相同，除用2-[(2R)-3-氟-2-羥丙基]-1H-異吲哚-1，3-二酮代替步驟實(shí)施例-3B中的(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇外，制備標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例7 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-乙基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽用于本合成的步驟與方法與實(shí)施例1的步驟與方法相同，除用三氟甲磺酸乙酯代替實(shí)施例-1B中的甲基碘外。采用反相層析，用水中10-40％乙腈梯度液，提純標(biāo)題產(chǎn)物(20％得率)。1H NMR(D2O)δ0.83(t，3H)，1.80(m，2H)，2.08(s，3H)，2.68(m，1H)，2.78(m，1H)，2.83(m，1H)，3.11(m，1H)，3.36(t，2H)。對C9H20N3O2S的HRMS計(jì)算值234.1276[M+H+]，實(shí)測值234.1284。
實(shí)施例8 S-[(1R)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-甲基乙基]-2-乙基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽在該合成中所用的步驟和方法與實(shí)施例1相同，除用三氟甲磺酸乙酯代替實(shí)施例-1B中的甲基碘外。這樣制得的2-乙基-L-半胱氨酸鹽酸鹽如實(shí)施例3C-3E的步驟和方法中所述處理得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例9 S-[(1R/S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-乙基乙基]-2-乙基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽本合成所用的步驟和方法與實(shí)施例5所用的步驟和方法相同，除用2-乙基-L-半胱氨酸鹽酸鹽(在實(shí)施例7中制備)代替2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例10
S-(1S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-氟代甲基乙基]-2-乙基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽本合成所用的步驟和方法與實(shí)施例6所用的步驟和方法相同，除用(2R)-2-乙基半胱氨酸鹽酸鹽(在實(shí)施例7中制備)代替(2R)-2-甲基半胱氨酸鹽酸鹽外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例11 2-[[[[2-(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]硫代]甲基]-D-纈氨酸，二鹽酸鹽實(shí)施例11a)三氟甲磺酸異丙基酯在氮?dú)庀?，用乙?200ml)中的異丙基碘(16.54g，98.5mmol)處理于乙醚(300ml)中攪拌的三氟甲磺酸銀(25.25g，98.3mmol)15分鐘。攪拌該混合物10分鐘再過濾。減壓蒸餾濾液。在大氣壓力下再蒸餾該蒸餾物以除去大部分乙醚，留下無色液體狀的標(biāo)題三氟甲磺酸異丙基酯-二乙醚(84∶16重量比)的混合物(15.64g，校正后70％)。1H NMR(CDCl3O，400MHz)δ1.52(d，6H)，5.21(七重峰，1H)。
在此所用的步驟和方法與實(shí)施例1所用的相同，除用三氟甲磺酸異丙基酯代替實(shí)施例-1B中的甲基碘外。粗標(biāo)題產(chǎn)物經(jīng)反相層析提純，用在水中的10-40％乙腈的梯度洗脫液洗脫。1H NMR(H2O，400MHz)δ0.94(dd，6H)，2.04(七重峰，1H)，2.10(s，3H)，2.65，2.80(dm，2H)，2.85，3.10(dd，2H)，3.37(t，2H)。對C10H22N3O2S的HRMS計(jì)算值248.1433[M+H+]，實(shí)測值248.1450。
實(shí)施例12 2-[[[(1R)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-甲基乙基]硫代]甲基]-D-纈氨酸，二鹽酸鹽本合成所用的步驟和方法與實(shí)施例3所用的相同，除用三氟甲磺酸異丙基酯(在實(shí)施例-11A中制備)代替甲基碘外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例13 2-[[[(1R/S)-2-(1-亞氨基乙基)氨基)-1-乙基乙基]硫代]甲基]-D-纈氨酸，二鹽酸鹽本合成所用的步驟和方法與實(shí)施例5所用的那些相同，除用(2R)-2-三氟甲磺酸異丙基酯(于實(shí)施例-11A中制備)代替甲基碘外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例14
2-[[[(1S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-氟代甲基乙基]硫代]甲基]-D-纈氨酸，二鹽酸鹽本合成所用的步驟和方法與實(shí)施例6所用的相同，除用(2R)-2-三氟甲磺酸異丙基酯(于實(shí)施例-11A中制備)代替甲基碘外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例15 S-[(R/S)-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]-1-(三氟甲基)乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽用溴化1，1，1-三氟乙基鎂處理叔丁基-N-(2-氧代乙基)氨基甲酸酯得到(R/S)-1-[(1，1-二甲基乙氧基羰基)]氨基-4，4，4-三氟-2-丁醇。用于本合成的步驟和方法與實(shí)施例3所列的那些相同，除用(R/S)-1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基-4，4，4-三氟-2-丁醇代替(S)-1-[(芐氧基羰基)氨基]-2-丙醇外，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例16 S-2-(1-亞氨基乙基氨基)乙基]-2-甲基-(D/L)-半胱氨酸，雙三氟乙酸鹽實(shí)施例-16A)S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸，甲酯將10g(50mmol)S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸樣品溶解于400mL甲醇中。將無水HCl鼓泡通過該冷卻的溶液30分鐘。在室溫下攪拌過夜后，濃縮該溶液得到12.7g標(biāo)題化合物。實(shí)施例-16B)N-[(4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯代苯基)亞甲基]氨基]乙基]-L-半胱氨酸，甲酯將實(shí)施例-16A的產(chǎn)物S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸甲酯的樣品12.7g(50mmol)溶解于乙腈中。向該溶液中加入12.2g(100mmol)無水MgSO4、14g(100mmol)4-氯代苯甲醛和100mmol三乙胺。攪拌該混合物12小時(shí)，濃縮至小體積再用500mL乙酸乙酯稀釋。連續(xù)用(0.1％)NaHCO3、(2N)NaOH和鹽水溶液洗滌該有機(jī)溶液。該有機(jī)物經(jīng)干燥(無水MgSO4)、過濾和濃縮得到7.5g標(biāo)題化合物。[M+H+]＝179。實(shí)施例-16C)N-[4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯苯基)亞甲基]氨基]乙基]-2-甲基-D/L-半胱氨酸甲酯于-78℃、氮?dú)庀?，?7mmol雙(三甲基甲硅烷基)氨化鈉處理無水THF中的實(shí)施例-16B的產(chǎn)物N-[(4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯代苯基)亞甲基]氨基]乙基]-L-半胱氨酸甲酯的樣品(7.5g，17mmol)，再用2.4g(17mmol)甲基碘處理。將該溶液在-78℃保持4小時(shí)，再邊連續(xù)攪拌邊加熱到室溫。真空蒸發(fā)其溶劑并加入鹽水和乙酸乙酯。用EtOAc萃取水相三次，用10％KHSO4、水和鹽水洗滌合并的有機(jī)層，然后干燥(無水MgSO4)、過濾和蒸發(fā)得到標(biāo)題化合物。實(shí)施例-16D)S-(2-氨基乙基)-2-甲基-D/L-半胱氨酸，鹽酸鹽將實(shí)施例-16C的產(chǎn)物N-[4-氯苯基)亞甲基]-S-[2-[[(4-氯苯基)亞甲基]氨基]乙基]-2-甲基-D/L-半胱氨酸甲酯的樣品(4.37g，10mmol)與2NHCl一起徹夜攪拌和加熱(60℃)，再用乙酸乙酯洗滌該溶液三次。凍干該水溶液得到標(biāo)題化合物。
將實(shí)施例-16D的產(chǎn)物S-(2-氨基乙基)-2-甲基-D/L半胱氨酸二鹽酸鹽的樣品(2.5g，10mmol)溶解于H2O中，用1N NaOH將pH調(diào)至10。將乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽(1.24g，10.0mmol)加入該反應(yīng)混合物中。攪拌反應(yīng)物15-30分鐘，pH提高到10，重復(fù)該過程三次。用HCl溶液降低pH至4，蒸發(fā)該溶液。經(jīng)反相HPLC提純殘余物，用含0.05％三氟乙酸的H2O作為流動(dòng)相，得到實(shí)施例16的標(biāo)題產(chǎn)物。M+H＝220。
實(shí)施例17 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-氟代甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽用HF-吡啶處理表溴醇得到二鹵代醇，用K2Cr2O7將其氧化得到1-溴-3-氟代丙酮。在NaOH存在下，用(1，1-甲基乙氧基)-N-(2-硫基(sulfanyl)乙基)甲酰胺處理該產(chǎn)物得到(1，1-二甲基乙氧基)-N-[2-(3-氟-2-氧代丙硫基)乙基]甲酰胺。在回流的乙醇中通過NaCN和(NH4)2CO3將其環(huán)化成外消旋的乙內(nèi)酰脲，并用手性層析分離該對映體。用熱48％HBr溶液處理S-對映體，得到S-(2-氨基乙基)-2-氟代甲基-L-半胱氨酸二鹽酸鹽，在堿的存在下，通過用乙亞氨酸乙酯處理將其轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。
實(shí)施例18 (2R)-2-氨基-3[[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]亞硫?；鵠-2-甲基丙酸，二鹽酸鹽將3ml水中的S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽(實(shí)施例1，0.2g，0.73mmol)溶液攪拌并冷卻至0℃，以0.3ml為一份分批加入3％H2O2(0.8ml，0.73mmol)的甲酸(0.4ml，0.73mmol)溶液。移走冷浴，將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌48小時(shí)。真空濃縮該溶液、用水(10ml)稀釋并再次濃縮得到粗品砜。該殘余物經(jīng)層析(C-18反相。用含0.05％三氟乙酸的H2O的移動(dòng)相)得到純砜。用1M HCl(10ml)處理該砜并真空濃縮得到140mg標(biāo)題化合物的兩種非對映體混合物，為無色油狀的HCl鹽。1H NMR(300MHz，D2O)δ1.5(s，2H)，1.6(s，1H)，2.0(s，3H)，3.1(m，2H)，3.3(m，2H)，3.6(m，2H)。對C8H18N3O3S的HRMS計(jì)算值236.1069[M+H+]，實(shí)測值236.1024。
實(shí)施例19 (2R)-2-氨基-3[[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]磺?；鵠-2-甲基丙酸二鹽酸鹽將在2ml水中的實(shí)施例1產(chǎn)物S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽(0.15g，0.54mmol)溶液冷卻至0℃，加入3％ H2O2(1.6ml，1.46mmol)的甲酸(0.8ml，14.6mmol)溶液。移走冷浴，將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌18小時(shí)。真空濃縮該溶液、用10ml水稀釋并再次濃縮得到粗品亞砜。該殘余物用4ml水稀釋并用2.5NNaOH將pH調(diào)至9。加入丙酮(5ml)，再加入Boc2O(0.2g)，在室溫下攪拌該反應(yīng)物48小時(shí)。用1M HCl調(diào)節(jié)該反應(yīng)混合物到pH 6，再真空濃縮。層析(C-18反相；40-50％ACNH2O，0.05％ TFA)殘余物得到純Boc保護(hù)的原料。真空濃縮該流份，殘余物用1N HCl(3ml)處理1小時(shí)。濃縮該溶液得到30mg無色油狀的標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，D2O)δ4.0(d，1H)，3.7(d，1H)，3.6(t，2h)，3.5(t，2h)，2.1(s，3H)和1.5(s，3h)ppm。對C8H18N3O4S的HRMS計(jì)算值252.1018[M+H+]的，實(shí)測值252.0992。
實(shí)施例20 S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸用水洗滌在玻璃層析柱(38X 560mm)中的DOWEX 50WX4-200(250g)直到洗脫液的pH為6。將溶解于水中的實(shí)施例1的產(chǎn)物S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸二鹽酸鹽(6g)溶液放入所述柱中，用水洗至pH回到6。再用0.07M NH4OH(流速約為15ml/min)洗滌該柱，將堿性流分立即放入干冰/丙酮浴中。收集該流分并經(jīng)凍干濃縮至干得到標(biāo)題化合物。1H NMR(400MHz，DMSOd6)δ3.4(m，1H)，3.3(m，1H)，3.0(d，1H)，2.7(m，1H)，2.4(m，1H)，2.3(d，1H)，2.1(s，3H)和1.1(s，3H)。對C8H17N3O2S+0.6H2O的分析計(jì)算值C41.76，H7.97，N18.26；實(shí)測值C41.43，H7.47，N17.96，Cl痕量。
實(shí)施例21 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱胺酸，二鹽酸鹽實(shí)施例-21A)(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-羧酸甲酯 根據(jù)J.Chem.Soc.Perkin Trans.1991第2291頁和Tetrahedron 1993第2131頁所述制備標(biāo)題物質(zhì)。向裝配有回流冷凝器、迪安-斯達(dá)克榻分水器、塔頂攪拌器和熱電偶的2L RB燒瓶中加入溶于700ml甲苯中的新戊醛(23.7g，0.275mole)。開始攪拌并將L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽(45g，0.262mole)加入攪拌的溶液中。用幾分鐘向該批中加入三乙胺(29.2g，0.288moles)流。對該反應(yīng)混合物加熱至回流，再除去水。將該批加熱共3小時(shí)，冷卻并過濾。用250ml新鮮甲苯洗滌所述鹽的濾餅，合并洗液。再加入甲酸(24.1g，0.524moles)和固體甲酸鈉(19.6g，0.288moles)，再將生成的懸浮液冷卻至-5℃。向該混合物中小心加入乙酐(53.5g，0.524moles)，保持該批的溫度在5℃以下。加入后，將反應(yīng)物保持在室溫，持續(xù)攪拌18小時(shí)，在此期間沉淀出產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物過濾并再溶解于400ml EtOAc并過濾除去不溶性鈉鹽。再用200ml飽和碳酸氫鈉溶液中和該有機(jī)溶液，最終的含水層的pH接近7。分離該有機(jī)相用乙酸乙酯萃取該含水層。合并有機(jī)層并濃縮得到粗產(chǎn)物(60.2g)，為粘性油，它可慢慢結(jié)晶成白色固體。用含4％ 2-丙醇的環(huán)己烷洗滌該固體，得到41.01g純度＞99.5％的標(biāo)題產(chǎn)物，經(jīng)GC確定得率為67.8％。所需的標(biāo)題產(chǎn)物順式異構(gòu)體占98％以上。實(shí)施例-21B)(2R，4R)-2-叔丁基-1，3-噻唑啉-3-甲?；?4-甲基-4-羧酸甲酯 將無水氯化鋰(43.0g，0.102moles)與300ml二甲氧基乙烷和500mlTHF混合直至得到澄清溶液。在氮?dú)夥諊录尤雽?shí)施例-21A的產(chǎn)物(50.0g，0.216moles)的THF溶液并冷卻至-65℃。加入用45ml THF稀釋過的碘代甲烷(45.0g，0.316moles)，接著加入230ml 1.0M THF雙-三甲基三甲硅烷基氨化鋰溶液。于-65℃下攪拌該反應(yīng)物10小時(shí)。用在600ml水中的30g乙酸令該批反應(yīng)物猝滅。并用500ml乙酸乙酯萃取。用飽和碳酸氫鈉洗滌有機(jī)層并濃縮得到51.22g(96％)淺棕色固體的標(biāo)題化合物。實(shí)施例-21C)(2R)2-甲基-L-半胱氨酸鹽酸鹽 將實(shí)施例-21B的產(chǎn)物的樣品(20g，83mmoles)置于裝配有頂部攪拌器和回流冷凝器的圓底燒瓶中。向該固體中加入100ml濃鹽酸。將該反應(yīng)物緩慢加熱至于95℃7天。再用250ml甲苯處理該反應(yīng)物以除去非極性有機(jī)雜質(zhì)。然后濃縮該水溶液。得到重14g的橙色樹脂的粗標(biāo)題產(chǎn)物。將該樹脂在乙醚/二氯甲烷中研成粉并過濾得到13g淡棕色吸濕性粉末的標(biāo)題物質(zhì)。1H NMR(D2O)δ4.70(s，HDO交換)，3.08(d，1H)，2.80(d，1H)，1.48(s，3H)。實(shí)施例-21D)2-[(1，1-二甲基乙氧基羰基)-氨基]乙基溴 將3升乙酸乙酯置于裝配有頂部攪拌器、熱電偶和氮?dú)馊肟诘?L圓底燒瓶中，開始攪拌。在氮?dú)飧采w下向其中加入二碳酸二叔丁基酯(545g，2.50moles)和2-溴代乙胺氫溴酸鹽(553.7g，2.70moles)。在冰浴中該反應(yīng)物冷卻至5℃，用約半小時(shí)逐滴加入N-甲基嗎啉(273g，2.70moles)。完成加入后，將該批反應(yīng)物攪拌過夜并加熱到室溫。16小時(shí)后，通過加入1.5L去離子水使其猝滅。用稀HCl、碳酸氫鈉溶液，接著用鹽水洗滌有機(jī)層。除去干燥過的有機(jī)溶液的溶劑得到凍成淺黃色固體的油。所得標(biāo)題產(chǎn)物的總量496g(88％得率)、純度約96％。實(shí)施例-21E)S-[2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸乙酸酯 將435g甲醇裝入裝配有頂部攪拌器、熱電偶的3L燒瓶中，并保存于N2氛圍中。向該反應(yīng)燒瓶中小心加入150.0g(0.804moles)的實(shí)施例-21C的產(chǎn)物，同時(shí)攪拌至溶解。將通過溶解154.7g固體KOH于840ml脫氣甲醇中制得的KOH溶液逐滴加入該反應(yīng)溶液中，并保持溫度為20-30℃。將實(shí)施例-21C的產(chǎn)物(180.2g，0.804moles)溶解于375mL的甲醇中，再用1小時(shí)，于10-12℃將該溶液逐滴加入冷反應(yīng)混合物中。當(dāng)該反應(yīng)完成后，將該批反應(yīng)物的pH值調(diào)節(jié)至pH 5。再經(jīng)Celite墊過濾該反應(yīng)混合物，濃縮濾液得到454g褐色固體產(chǎn)物。用乙酸乙酯將該粗產(chǎn)物淤漿化得到灰白色固體299g。該粗標(biāo)題產(chǎn)物固體無需提純用于下一步驟。1H NMR作為乙酸酯(D2O)δ4.68(s，D2O交換)，3.12(m，3H)，2.68(m，3H)，1.83(s，3H)，1.42(s，3H)，1.32(s，9H)。實(shí)施例-21F)S-(2-氨基乙基)-2-甲基-L-半胱氨酸 向裝配有頂部攪拌器和氮?dú)馇鍜哐b置的圓底燒瓶中加入150ml37％鹽酸。開動(dòng)攪拌器并將150ml水加入該容器，接著加入173g實(shí)施例-21E的粗產(chǎn)物。攪拌該反應(yīng)物兩小時(shí)，濃縮該棕色澄清的溶液得到棕色漿狀的粗品標(biāo)題產(chǎn)物的二HCl鹽(約157g)。將其再溶解于200ml水中，用活性碳脫色。使該溶液通過Dowex樹脂柱，再用氫氧化銨水溶液洗脫中性的標(biāo)題產(chǎn)物，得到64％、純度約94％的這種物質(zhì)。1H NMR(D2O，300MHz)δ4.68(s，D2O交換)，2.9(m，3H)，2.6(m，3H)，1.20(s，3H)。
在圓底燒瓶中，將38g結(jié)合有三氮雜雙環(huán)[4.4.0]癸-5-烯樹脂(Fluka)的聚合物懸浮于160ml乙醇中。將40ml乙醇中的實(shí)施例21F的氨基酸產(chǎn)物(7.5g)加入該攪拌的樹脂漿中。將6.5g(53mmoles)乙亞氨酸乙酯分批加入該反應(yīng)物。在氮?dú)庀聰嚢柙摲磻?yīng)物16小時(shí)。過濾該樹脂并用100ml含10ml濃HCl的乙醇洗滌過濾器。濃縮合并的濾液得到12g淺棕色的粘性半固體的粗標(biāo)題產(chǎn)物。得率約為60-70％，標(biāo)題產(chǎn)物純度顯示為90％。用反相層析進(jìn)一步提純該標(biāo)題產(chǎn)物。1H NMR(D2O)δ4.74(s，D2O交換)3.37(t，2H)，3.08(d，1H)，2.93(d，1H)，2.74(m，2H)，2.06(s，3H)，1.48(s，3H)。
實(shí)施例22 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，二鹽酸鹽實(shí)施例-22A) N-Boc-半胱胺 用氮?dú)獯迪?L的4-頸RB燒瓶20分鐘，再相繼加入2-氨基乙硫醇鹽酸鹽(113.6g，1mol)、二碳酸二-叔丁基酯(218.3g，1mol)和500ml甲苯。用冰水浴冷卻該混合物并用氮?dú)獯祾?0分鐘。于0-11℃用約1.5小時(shí)將氫氧化鈉(2.5N，880ml，2.2mol)加入該攪拌的混合物中。完成氫氧化物的加入后，移走冷浴，將生成的反應(yīng)混合物加熱至室溫并于室溫下攪拌過夜。得到所述標(biāo)題化合物的溶液。實(shí)施例-22B) 用冰-水浴冷卻實(shí)施例-22A的產(chǎn)物溶液。于8-11℃用約50分鐘將氯代丙酮(101.8g，1.1mol)樣品加入劇烈攪拌的反應(yīng)混合物。完成氯代丙酮的加入后，移去冷卻浴，將生成的反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。分離甲苯層，用水(250ml)洗滌并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中于85℃室真空濃縮、接著用高真空濃縮，得到粗標(biāo)題化合物(225.7g，96.7％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ4.95(bs，1H)3.20(m，4H)，2.54(t，2H)，2.20(s，3H)，1.35(s，9H)。實(shí)施例-22C)[2-[[(4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基)甲基]硫代]乙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯 向裝配有頂部攪拌器、熱電偶和聯(lián)著一個(gè)空燒杯的冷凝器和堿處理器(caustic trap)的3L 4-頸RB燒瓶中依次加入實(shí)施例-22B的產(chǎn)物(70g，0.3mol)、無水乙醇(80ml)、氰化鈉(19.1g，0.39mol)、碳酸銨(43.3g，0.45mol)和水(720mol)。用塞子塞住第4個(gè)頸口。所生成的反應(yīng)混合物于67-68℃加熱6小時(shí)。接著，將幾乎澄清的棕色溶液冷卻至室溫。一旦冷卻，即開始形成固體并于室溫下將該多相混合物攪拌過夜。再于-2至2℃，用約1小時(shí)用12％鹽酸將反應(yīng)混合物酸化到pH 2。將該冷卻的反應(yīng)混合物于pH 2下再攪拌30分鐘，然后過濾。用蒸餾水(2×250ml)漂洗該燒瓶，將每次漂洗液用來洗滌固體餅狀物。該固體再用蒸餾水(2×250ml)洗滌，再風(fēng)干四天。用200ml甲苯研磨該干燥固體半小時(shí)。過濾該漿狀物。連續(xù)用甲苯(50ml)和1∶4的甲苯/己烷(100ml)漂洗該固體，再于室溫下風(fēng)干過夜得到83.1％得率的標(biāo)題化合物，熔點(diǎn)134-136℃。1H NMR(DMSOd6，400MHz)δ10.62(s，1H)，7.85(s，1H)，6.83(m，0.9H)，6.48(bs，0.1H)，3.29(s，2H)，2.99(m，2H)，2.71(s，2H)，2.95(m，2H)，1.32(s，9H)，1.24(s，3H)；13C NMR(DMSOd6，400MHz)，δ178.1，157.1，156.1，78.4，63.7，40.7，39.4，33.2，28.9，23.8。對C12H21N3O4S的分析計(jì)算值C，47.51，H，6.98；N，13.85；S，10.57。實(shí)測值C，47.76，H，6.88，N，13.77；S，10.75。實(shí)施例-22D)R和S-[2-[[(4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基)甲基]硫代]乙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯 S對映體 R對映體在Chiralpark AD柱上將實(shí)施例-22C的反應(yīng)產(chǎn)物分離成它的R和S對映體，用甲醇洗脫。先洗脫出S異構(gòu)體，接著洗脫出其R對映異構(gòu)體。兩種異構(gòu)體用于后繼轉(zhuǎn)化反應(yīng)。S對映異構(gòu)體[α]于MeOH中，25℃＝+43.0(365nm)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.49(s，9H)，2.05(s，3H)，2.65(t，2H)，2.9(q，2H，d)，3.20(m，2H)。IRλcm-1＝1772，1709。對C12H21N3O4S(式量＝303.38)的分析計(jì)算值C，47.51，H，6.98；N，13.85。實(shí)測值C，47.39，H，6.62，N，13.83。M+H＝304.R對映異構(gòu)體[α]于MeOH中，25℃＝-46.3(365nm)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.48(s，9H)，2.05(s，3H)，2.65(t，2H)，2.85(q，2H，d)，3.18(m，2H)。IRλcm-1＝1770，1711。對C12H21N3O4S(式量＝303.38)的分析計(jì)算值C，47.51，H，6.98；N，13.85。實(shí)測值C，48.15，H，7.04，N，14.37。M+H＝304。實(shí)施例-22E)S-(2-氨基乙基)-2-甲基-L-半胱氨酸 酸水解方法向裝配有蒸餾冷凝器的500ml三頸圓底燒杯中加入實(shí)施例-22D的R-異構(gòu)體產(chǎn)物(45.8g，150.9mmol)，并于室溫下邊攪拌邊用48％含水HBr(160ml)分批處理。停止釋放氣體后，用加熱罩加熱該混合物直到燒瓶溫度達(dá)到126℃，這時(shí)揮發(fā)性叔丁基溴(沸點(diǎn)72-74℃)及其后的小量含水HBr(約15ml)被蒸餾出。用回流冷凝器代替蒸餾冷凝器，將該混合物回流加熱30小時(shí)。濃縮該溶液，將殘余物溶解于水(250ml)中并裝入Dowex 50WX4-200離子交換樹脂(8.5×11cm)中，用水(2L)，再用稀釋的氫氧化胺水溶液(30mL 28-30％氫氧化銨用水稀釋到1000mL，3L)洗脫。合并、濃縮含所需產(chǎn)物的流分，并于75-80℃下真空干燥2小時(shí)，得到呈白色固體的22.1g(82％)的標(biāo)題產(chǎn)物，S-(2-氨基乙基)-2-甲基-L-半胱氨酸。質(zhì)子和C-13NMR光譜與標(biāo)題化合物一致。熔點(diǎn)157℃。1H NMR(400MHz，D2O)δ1.19(3H，s)，2.53(1H，d，J＝13.6Hz)，2.57-2.72(2H，m)，2.92(1H，d，J＝13.6Hz)，2.92(2H，t，J＝6.8Hz)；13C NMR(100MHz，D2O)δ24.7，31.3，38.9，40.9，59.6，180.7。對C6H14N2O2S+0.1H2O的分析計(jì)算值C，40.02，H，7.95；N，15.56；S，17.81。實(shí)測值C，39.93；H，7.98；N，15.38；S，17.70。堿水解方法向裝配有攪拌器的不銹鋼高壓釜中加入24.2g(0.08moles)實(shí)施例-22D的R-異構(gòu)體產(chǎn)物。用氮?dú)獯祾咴撗b置后，加入128g(0.32moles)10％苛性堿形成溶液。將該高壓釜密封并加熱到120℃保持30小時(shí)。冷卻到室溫后，將高壓釜排空得到142ml(151g)標(biāo)題化合物的鈉鹽水溶液。1H NMR(樣品經(jīng)HCl酸化并用D2O稀釋，400MHz)δ1.47(s，3H)，2.75(m，2H)，2.90(d，1H，J＝14.8Hz)，3.06(t，2H，J＝6.4Hz)，3.14(d，1H，J＝14.8Hz)；13C NMR(樣品經(jīng)HCl酸化并用D2O稀釋，100MHz)δ172.9，60.8，39.1，39.0，30.4，22.2。MS(MS/CI-LC)M+1179。
室溫下(約20℃)，在25ml單頸圓底燒瓶中，將DBU(218L；1.46mmol)和乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽(171mg；1.34mmol)溶解于乙醇(6ml)中。將實(shí)施例-22E的標(biāo)題產(chǎn)物(200mg；1.12mmol)一次性加入該溶液中。攪拌該混合物直到實(shí)施例-22E的標(biāo)題產(chǎn)物消耗完(1-2小時(shí))。用冰浴冷卻該混合物，再用6M HCl(830L)處理。1HNMR分析表明化學(xué)得率為95％摩爾或更高。蒸發(fā)其溶劑，用反相或離子交換層析提純實(shí)施例-22的標(biāo)題產(chǎn)物。
將210g溶液(含約20g堿水解反應(yīng)產(chǎn)物的實(shí)施例-22E的標(biāo)題產(chǎn)物)置于500ml三頸圓底燒瓶中。該裝置裝配有機(jī)械攪拌器、迪安-斯達(dá)克榻(Dean-Stark)裝置(20ml帶活塞)、冷凝器和溫度控制器。從該混合物中蒸餾出水(140m)。向容器中加入1-丁醇(150ml)，再將殘余水(37ml)共沸蒸餾。通過蒸餾除去另外的1-丁醇(13ml)直到容器溫度達(dá)到117℃。將該丁醇漿狀物冷卻到室溫并經(jīng)硅藻土墊(pad of celite)過濾。用1-丁醇(2×20ml)洗滌該鹽。室溫下，在500ml三頸圓底燒瓶中將DBU(21.8L；146mmol)和乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽(17.1mg；134mmol)溶解于1-丁醇(40mL)中。該裝置裝配有機(jī)械攪拌器、加料漏斗和溫度探頭。在保持容器溫度低于25℃的情況下，將實(shí)施例-22E的標(biāo)題產(chǎn)物/1-丁醇溶液置于加料漏斗中并加入到乙亞氨酸乙酯/DBU溶液中。攪拌該混合物直到初始原料消耗完(2-3小時(shí))。將濃HCl(94ml)和水(100ml)溶液放入1L三頸圓底燒瓶中并冷卻到0℃。該裝置裝配有機(jī)械攪拌器、加料漏斗和溫度探頭。將反應(yīng)混合物置于加料漏斗中。在保持容器溫度低于25℃的情況下，將該反應(yīng)混合物加入HCl水溶液中。將乙酸乙酯(100ml)加入該溶液中，并分離各層。含水層用乙酸乙酯(100ml)洗一次以上，1HNMR分析表明化學(xué)得率為95％摩爾或更高。用反相或離子交換層析提純實(shí)施例-22的標(biāo)題產(chǎn)物。1HNMR(400MHz，D2O)1.49(3H，s)，2.08(3H，s)，2.74(2H，m)，2.91(1H，d)，3.17(1H，d)，3.35(2H，t)。
實(shí)施例23 S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸甲酯，二鹽酸鹽將溶解于無水甲醇(40ml)的實(shí)施例22的產(chǎn)物(1.0g，3.42mmol)加入到裝配有磁力攪拌器和熱電偶的500ml三頸圓底燒瓶中。該反應(yīng)在氮?dú)庀卤焕鋮s到0℃。將HCl氣體鼓泡通入反應(yīng)液1分鐘。將反應(yīng)混合物加熱到室溫并持續(xù)攪拌過夜。從反應(yīng)混合物中取出樣品并濃縮。NMR和質(zhì)譜分析表示出初始原料和產(chǎn)物。汽提溶劑，將油狀殘余物再溶于無水甲醇(40ml)中，冷卻到0℃，并再次將HCl氣體鼓泡通過溶液1分鐘。將該反應(yīng)混合物加熱到室溫并攪拌過夜。從反應(yīng)混合物中取出樣品并濃縮。NMR和質(zhì)譜分析表示出初始原料和產(chǎn)物。汽提溶劑，將油狀殘余物再溶于無水甲醇(40ml)中，冷卻到0℃，并再次將HCl氣體鼓泡通過溶液1分鐘。將該反應(yīng)混合物加熱到室溫并攪拌過夜。從反應(yīng)混合物中取出樣品并濃縮。NMR和質(zhì)譜分析僅表示出所需的標(biāo)題產(chǎn)物。濃縮反應(yīng)混合物得到得率為97％的1.01g淺黃色油。在乙腈(50ml)中攪拌該反應(yīng)混合物3小時(shí)，回收到白色細(xì)粉狀的標(biāo)題產(chǎn)物484mg。質(zhì)譜分析(ZMD Waters Micromass，電霧化)，M+H在234.21HNMR(400MHz，D2O)δ1.51(s，3H)，2.09(s，3H)，2.72(t，2H)，2.97(d，1H)，3.19(d，1H)，3.36(t，2H)，3.73(s，3H).13CNMRδ18.58，21.69，30.79，37.79，41.58，54.24，60.75，165.41，171.35。對C9H19N3O2S+2HCl+0.3H2O(311.66)的分析計(jì)算值C34.68，H，6.98，N13.48，Cl22.75，S10.29。實(shí)測值C34.51，H6.99，N13.75，Cl22.75，S10.43。
實(shí)施例24 2-甲基-S-[2-(3-甲基-5-氧代-1，2，4-噁二唑-4(5H)-基)乙基]-L-半胱氨酸，單三氟乙酸鹽實(shí)施例-24A)V’-羥基乙基亞胺基酰胺(ethanimidamide) 向3L圓底燒瓶中加入乙醇(1.2L)中的羥胺鹽酸鹽(138.98g，2.0mol)，再緩慢加入乙醇鈉(136.1g，2.0mol)。保持其溫度為25-30℃。再于室溫下攪拌反應(yīng)物30分鐘。過濾出沉淀的NaCl并用乙醇(100ml)洗滌。將丙腈(112.75g，2.75mol)和濾液中的羥胺游離堿加入3L燒瓶中。然后將該混合物回流過夜。冷卻后，小心地真空除去溶劑至其原體積的50％。將反應(yīng)物置于冰浴中一小時(shí)，形成結(jié)晶，并濾出。再次小心地將濾液濃縮至其原體積的50％。將反應(yīng)物放在冰中，再次過濾分離生成的結(jié)晶得到52g(35％)的標(biāo)題產(chǎn)物。實(shí)施例-24B)3-甲基-1，2，4-噁二唑啉-5-酮鉀 向25ml圓底燒瓶中加入實(shí)施例-24A的產(chǎn)物(1g，0.013mol)、叔丁醇鉀(1.59g，0.013mol)和碳酸二乙酯(8.18ml，0.067mol)?；亓骷訜嵩摲磻?yīng)物5小時(shí)。除去溶劑，用二氯甲烷和乙醚研磨所生成的固體。在高真空下干燥該固體標(biāo)題產(chǎn)物得到1.57g(87％)。1HNMR(d6-DMSO，300MHz)δ1.69(bs，3H)。13C NMR(d6-DMSO，99MHz)δ13.26，166.54，173.99。實(shí)施例-24C)3-甲基-1-(1-溴代乙基)-2，4-噁二唑啉-5-酮 向250ml圓底燒瓶中加入實(shí)施例-24B的標(biāo)題產(chǎn)物、DMF(100ml)中的3-甲基-1，2，4-噁二唑啉-5-酮鉀(10.13g，0.0734mol)。向漿狀物中加入1，2-二溴乙烷(31.54mL，0.366mol)。在130℃下在油浴中加熱反應(yīng)物2小時(shí)。移走油浴，反應(yīng)物冷卻后，加入水(200ml)和乙酸乙酯(50ml)。收集有機(jī)物用3×100ml鹽水洗滌。有機(jī)物經(jīng)MgSO4干燥再真空濃縮得到9.1g(60％)標(biāo)題化合物。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ2.21(s，3H)，3.12(t，2H)，3.91(t，2H)。
通過鼓泡通入氮?dú)?分鐘，使在100ml圓底燒瓶中的75ml甲醇脫氧。向50ml該甲醇中加入NaOH(1.6g，0.040mol)。在NaOH完全溶解后，于45℃油浴下攪拌該懸浮液30分鐘。將生成的溶液冷卻至室溫，加入10ml脫氧的甲醇中的α-甲基半胱氨酸(1.72g，0.010mol)。室溫下攪拌該反應(yīng)物45分鐘。向該反應(yīng)物中加入10ml脫氧的甲醇中的實(shí)施例-24C的產(chǎn)物(2.07g，0.010mol)。攪拌過夜后經(jīng)質(zhì)譜分析表明反應(yīng)完成。用水(100ml)稀釋該反應(yīng)混合物再用反相層析提純得到3.0g(93％)實(shí)施例24的標(biāo)題產(chǎn)物，為其三氟乙酸鹽。M.S.M+H+(262.0)、M+Na+(282.0).1HNMR(CD3OD，300MHz)δ1.39(s，3H)，2.23(s，3H)，2.74(m，2H)，2.84(m，2H)，3.72(t，2H).
實(shí)施例25 [2-[[[(4R)-4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基]甲基]硫代]乙基](1-N-亞氨基乙基)胺將實(shí)施例-22D的產(chǎn)物[2-[[[(4R)-4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基]甲基]硫代]乙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯異構(gòu)體(2.05g，6.5mmol)溶解于25ml 4.0N HCl的二噁烷溶液中并攪拌10分鐘。加入2N HCl(5ml)后，再攪拌反應(yīng)物2小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物得到1.68g紅棕色粘合固體。將該原料溶于25ml去離子水中用2N NaOH調(diào)節(jié)pH至8.4。再在維持pH為8.4的情況下加入乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽(2.39g，0.019mol)。在pH 8.4時(shí)，于室溫下攪拌該反應(yīng)混合物一小時(shí)。通過加入適量的1N HCl將反應(yīng)混合物的pH調(diào)至3.5，并再攪拌16小時(shí)。于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮該反應(yīng)混合物得到粗產(chǎn)物，用Gilson制備性HPLC提純得到得率為70％的白色吸濕性固體的所需產(chǎn)物。Mass M+1＝245.于25℃水中[α]＝-37.6(365nm)。對C9H16N4O2S+1.0HCl+1.3H2O(式量＝304.20)的計(jì)算分析值C35.54，H 6.49，N 18.42，Cl 11.65，S 10.54。實(shí)測值C 35.83，H 6.08，N18.55，Cl 11.19，S 10.63。
實(shí)施例26 [2-[[[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基]甲基]硫代]乙基](1-N-亞氨基乙基)胺鹽酸鹽實(shí)施例-26A)(5S)-5-[[(2-氨基乙基)硫代]甲基]-5-甲基-2，4-咪唑烷二酮，一鹽酸鹽 經(jīng)用66％甲苯中的乙酸乙酯、Biotage Flash 75硅膠的層析提純實(shí)施例-22D的產(chǎn)物[2-[[[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基]甲基]硫代]乙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯異構(gòu)體(2.05g，6.5mmol)。將該原料的樣品(5.9g，16.5mmol，25℃MeOH中[α]＝+45.7，365nm)溶解于165mlTHF并用4.125ml 4.0N HCl的二噁烷溶液處理。將該反應(yīng)物于室溫下攪拌兩小時(shí)并用TLC監(jiān)測。經(jīng)用反相介質(zhì)(YMC-ODS-AQ)的層析提純游離胺產(chǎn)物得到4.8g標(biāo)題化合物。
用10％NaOH溶液調(diào)節(jié)實(shí)施例-26A的產(chǎn)物的3.5g(17.2mmol)樣品的pH至9-10。通過加入10％NaOH調(diào)節(jié)pH至9的同時(shí)，向該溶液中加入4.26g乙亞氨酸乙酯鹽酸鹽。于pH 9下攪拌2小時(shí)后，加入適量0.1N HCl將pH調(diào)至7.5。在加入0.1N HCl進(jìn)一步將pH調(diào)至4.5之前再攪拌該溶液2小時(shí)。在該溶液攪拌10小時(shí)后，減壓(11mbar)并于47℃水浴中除去水。該粗標(biāo)題產(chǎn)物經(jīng)用反相介質(zhì)(YMC-ODS-AQ)的層析得到的156mg標(biāo)題物質(zhì)。25℃水中[α]＝+54.8(365nm)。對C9H16N4O2S+1.0HCl+0.85H2O(式量＝296.09)的計(jì)算分析值C36.51，H 6.37，N 18.92，Cl 11.97，S 10.83。實(shí)測值C 36.69，H 6.32，N18.85，Cl 11.46，S 11.12。
實(shí)施例27 N-(乙氧基羰基)-S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，一鹽酸鹽將實(shí)施例1的產(chǎn)物的樣品(3.22g，0.01mol)溶于50ml去離子水中，向其中加入K2CO3(2.76g)，接著加入氯代甲酸乙酯(1.08g，0.01mol)。于25℃攪拌該反應(yīng)混合物1小時(shí)并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮得到白色固體。用HPLC提純該固體得到所需產(chǎn)物。Mass M+1＝292實(shí)施例28 S-(2-氨基乙基)-2-甲基-D-半胱氨酸二鹽酸鹽將實(shí)施例-22D的[2-[[[(4S)-4-甲基-2，5-二氧代-4-咪唑烷基)甲基]硫代]乙基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙酯產(chǎn)物的樣品(1.025g，3.25mmol)溶解于35ml濃HCl中，并在回流溫度下攪拌46小時(shí)。減壓濃縮該反應(yīng)物得到900mg紅棕色粘合固體。用反相HPLC提純該粗產(chǎn)物得到純S-(2-氨基乙基)-2-甲基-D-半胱氨酸二鹽酸鹽(800mg，98％得率)。MassM+1＝179.于25℃水中[α]＝-85.6(365nm)。對C6H14N2O2S+2HCl+1H2O+1.6NH4Cl(式量＝356.39；精確質(zhì)量178.07)的計(jì)算分析值C 20.22，H 7.35，N 14.15，Cl 35.81，S 9.00。實(shí)測值C 20.09，H 6.95，N 14.55，Cl 36.15，S9.56。
實(shí)施例29 [2-(1-亞氨基乙基氨基)乙基]-2-甲基-D-半胱氨酸鹽酸鹽將實(shí)施例28的產(chǎn)物的樣品(1.25g，0.005mol)溶于20ml去離子水中并用0.1N NaOH將pH調(diào)節(jié)至8.5-9。將pH維持在8.5，再將乙亞氨酸乙酯酯鹽酸鹽(2.39，0.019mol)加入攪拌的反應(yīng)物中。在25℃和pH8.5時(shí)攪拌該反應(yīng)物2小時(shí)。加入適量的0.1N HCl將反應(yīng)混合物的pH調(diào)至4.0。再用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將該反應(yīng)混合物濃縮，粗產(chǎn)物殘余物經(jīng)用YMC AQ柱的Gilson HPLC系統(tǒng)提純，用1.1％ AcOH/CH3CN/H2O洗脫，得到定量得率的所需產(chǎn)物。Mass M+1＝220.25℃水中[α]＝-134.5(365nm)。對C8H17N3O2S+1.2HCl+2H2O(式量299.09；精確質(zhì)量219.10)的計(jì)算分析值C 32.13，H 7.48，N 14.05，Cl 14.22，S 10.72。實(shí)測值C 32.39，H7.26，N 14.05，Cl 14.33，S 10.42。
實(shí)施例30 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，乙酸鹽將Bio-Rad AG 1×8樹脂(300g，960meqv.)，200-400目所述乙酸鹽形式在HPLC級水中淤漿化并裝入8cm直徑的柱中。在將溶解于10ml水中的37g(116mmol)實(shí)施例1的產(chǎn)物裝入該柱之前，將水排至柱頂。用1L水洗脫該物質(zhì)。減壓除水后，前200ml部分不含產(chǎn)物，但隨后的500ml得到30g白色玻璃狀固體的所需標(biāo)題產(chǎn)物。對C8H17N3O2S+CH3COOH+1.3H2O的計(jì)算分析值C 39.67，H 7.86，N13.88。實(shí)測值C 39.96，H 7.87，N 13.69。
實(shí)施例31 S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-D-半胱氨酸，乙酸鹽用實(shí)施例30的方法，將作為其一鹽酸鹽的實(shí)施例29的產(chǎn)物樣品(101mg，0.33mmol)轉(zhuǎn)化為標(biāo)題一乙酸鹽。對C8H17N3O2S.CH3COOH+0.05HCl+2.2H2O的計(jì)算分析的計(jì)算分析值C 37.41，H 8.01，N 13.2，Cl 0.56。實(shí)測值C 37.30，H 7.92，N 13.17，Cl 0.41。
實(shí)施例32 S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，一鹽酸鹽采用實(shí)施例28所述條件，使實(shí)施例1的產(chǎn)物通過反相柱制備該物質(zhì)。對C8H17N3O2S+1.05HCl+0.8H2O的計(jì)算分析值C 35.35，H 7.36，N15.44，Cl 13.65。實(shí)測值C 35.33，H 7.28，N 15.45，Cl 3.68。
實(shí)施例33S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的D-半乳糖醛酸鹽將D-半乳糖醛酸一水合物(0.21g，0.001mole)加入攪拌的10ml0.001M實(shí)施例30的乙酸鹽產(chǎn)物的溶液中。在攪拌2小時(shí)后，真空濃縮該溶液。將標(biāo)題半乳糖醛酸鹽溶解于10ml水中并凍干。
實(shí)施例34S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-D-半胱氨酸的琥珀酸鹽通過實(shí)施例33的方法，由琥珀酸和實(shí)施例31的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C8H17N3O2S+C4H6O4+1.5H2O的計(jì)算分析值C 39.55，H 7.19，N11.53。實(shí)測值C 39.24，H 6.04，N 11.41。
實(shí)施例35S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的琥珀酸鹽通過實(shí)施例33的方法，由琥珀酸和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C8H17N3O2S+C4H6O4+1.1H2O的計(jì)算分析值C 39.99，H 7.40，N12.33。實(shí)測值C 40.35，H 7.11，N 11.76。
實(shí)施例36S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的乙醇胺鹽通過實(shí)施例33的方法，由乙醇胺和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C8H17N3O2S+C2H7NO+2HCl+1.3H2O的計(jì)算分析值C 31.73，H 7.67，N 14.80，Cl 18.73。實(shí)測值C 31.41，H 7.60，N 15.00，Cl 19.12。
實(shí)施例37S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的乙二胺鹽通過實(shí)施例33的方法，由乙二胺和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C8H17N3O2S+2HCl+C2H8N2+1.2H2O的計(jì)算分析值C 32.12，H 7.92，N 18.73，Cl 18.96.。實(shí)測值C 31.90，H 9.19，N 18.08，Cl 19.11.
實(shí)施例38S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的DL-天冬氨酸鹽通過實(shí)施例33的方法，由DL-天冬氨酸和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C12H24N4O6S+1.8H2O+0.4HOAc(式量＝408.86)的計(jì)算分析值C37.60，H 7.20，N 13.70。實(shí)測值C 37.59，H 7.66，N 13.73。
實(shí)施例39S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的D-谷氨酸鹽通過實(shí)施例33的方法，由D-谷氨酸和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C13H26N4O6S+1.8H2O+0.3HOAc(式量＝416.88)的計(jì)算分析值C39.18，H 7.45，N 13.44。實(shí)測值C 39.47，H 7.52，N 13.29。
實(shí)施例40S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的檸檬酸鹽通過實(shí)施例33的方法，由檸檬酸和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C14H25N3O9S+0.5H2O+0.1HOAc+0.15EtOH(式量＝433.36)的計(jì)算分析值C 40.19，H 6.35，N 9.70。實(shí)測值C 40.32，H 5.74，N 9.58.
實(shí)施例41S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的DOWEX50WX4-400離子交換樹脂鹽用去離子水(所有用于本實(shí)驗(yàn)的水都是去離子水)洗滌DOWEX50WX4-400(3g，1.6meq/ml，4.8meq/g)直至洗液的pH為6。在室溫下干燥該樹脂1小時(shí)。將30ml水中的實(shí)施例30的產(chǎn)物(0.6g)加入DOWEX樹脂(0.2g)。于室溫下，用ORBITTM震動(dòng)器將該懸浮液震動(dòng)3小時(shí)。再汽提至干。用每次濃縮反應(yīng)混合物后加入的30ml新鮮水重復(fù)該程序三次。于室溫下將該漿狀物與最后部分的新鮮水一起震動(dòng)過夜。
反應(yīng)物汽提至干后，加入15ml水。過濾樹脂并另用15ml水洗滌三次。濃縮濾液(加入幾滴乙酸)并真空干燥，得到0.4g由1HNMR(D2O)確證的原料SC-84250。于室溫下在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上干燥己負(fù)載樹脂(loaded resin)，再真空干燥1小時(shí)，得到0.3g負(fù)載樹脂。該樹脂的樣品和未反應(yīng)的洗過的DOWEX 50WX4-400的樣品經(jīng)氮?dú)馊紵治鑫刺幚順渲慕Y(jié)果為N的百分比(％)為0％；對己負(fù)載樹脂的N的百分比(％)為9.72％。
實(shí)施例42S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的硫酸氫鉀鹽通過實(shí)施例33的方法，由0.001mole的KHSO4和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。對C8H17N3O2S+KHSO4+2H2O的計(jì)算分析值C 24.75，H 5.68，N 10.90，S 16.00。實(shí)測值C 24.54，H 5.66，N 10.73，S 16.38。
實(shí)施例43S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的硫酸氫鉀鹽通過實(shí)施例33的方法，由0.001mole的KHSO4和實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題物質(zhì)。
實(shí)施例44S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的硫酸氫鹽向?qū)嵤├?0的產(chǎn)物的攪拌的10ml溶液中加入2ml 0.505NH2SO4。攪拌2小時(shí)后，真空濃縮該溶液。使生成的鹽溶解于10ml水中并凍干。對C8H17N3O2S+0.5H2SO4+1.5H2O的計(jì)算分析值C 32.58，H 7.23，N14.75，S 16.42。實(shí)測值C 32.53，H 7.17，N 14.23，S 16.28.
實(shí)施例45S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的甘油酸鹽S-甘油酸可通過將其鈣鹽與其酸形式的Dowex 50W樹脂一起攪拌4小時(shí)來制備。過濾該樹脂并用H2O洗滌。濃縮生成的濾液并真空干燥。對C3H6O4的計(jì)算分析值C 31.31，H 6.13。實(shí)測值C 31.29，H 6.19。
用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物與0.001mole的S-甘油酸一起開始制備S-甘油酸鹽。對C11H23N3O6S+1.5H2O的計(jì)算分析值C 37.49，H 7.44，N 11.92，S9.10。實(shí)測值C 37.49，H 7.31，N 11.73，S 9.22。
實(shí)施例46S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的蘋果酸鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物與0.001mole的蘋果酸一起開始制備所述的蘋果酸鹽。對C8H17N3O2S+1.33H2O+C4H6O5的計(jì)算分析值C 38.20，H 6.85，N11.15。實(shí)測值C 38.37，H 6.51，N 11.09。
實(shí)施例47S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的半蘋果酸鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物與0.0005mole的蘋果酸一起開始制備所述的蘋果酸鹽。對C8H17N3O2S+1.75H2O+0.5C4H6O5的計(jì)算分析值C 37.92，H 7.48，N13.22。實(shí)測值C 37.92，H 7.88，N 13.03。
實(shí)施例48S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的磷酸二氫鉀鹽用實(shí)施例33中所述的方法由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。對C8H17N3O2S+KH2PO4+2.5H2O+0.66HOAc的計(jì)算分析值C 25.44，H 6.10，N 9.55。實(shí)測值C 25.27，H 5.95，N 9.80。
實(shí)施例49S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的磷酸二氫鈉鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。對C8H17N3O2S+NaH2PO4+2H2O+0.3HOAc的計(jì)算分析值C 26.26，H6.20，N 10.68。實(shí)測值C 26.57，H 6.25，N 10.72。
實(shí)施例50S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的磷酸二氫鈣鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。
對C8H17N3O2S+2NaH2PO4+2H2O的計(jì)算分析值C 19.40，H 5.09，N 8.48。實(shí)測值C 19.34，H 5.10，N 8.56。
實(shí)施例51S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的磷酸鈣鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。
對C8H17N3O2S+Ca(H2PO4)2+0.2HOAc的計(jì)算分析值C 19.96，H4.35，N 8.31。實(shí)測值C 20.14，H 5.73，N 8.80。
實(shí)施例52S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的磷酸氫鈣鹽用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。
對C8H17N3O2S+CaHPO4+2.2HCl+H2O的計(jì)算分析值C 21.18，H4.93，N 9.26。實(shí)測值C 21.20，H 5.28，N 9.37。
實(shí)施例53S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的三代磷酸鈣鹽(1.62∶1)用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。對C8H17N3O2S+Ca3(PO4)2+HOAc+3H2O的計(jì)算分析值C 14.37，H2.77，N 5.03。實(shí)測值C 14.13，H 3.01，N 4.71。
實(shí)施例54S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的三代磷酸鈣鹽(1∶1)用實(shí)施例33中所述的方法，由實(shí)施例30的產(chǎn)物制備標(biāo)題鹽。對C8H17N3O2S.Ca3(PO4)2+2.2HCl+2H2O的計(jì)算分析值C 14.88，H3.62，N 6.51。實(shí)測值C 15.09，H 3.85，N 6.23。
實(shí)施例55S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的Bio-Rex 70鹽用實(shí)施例41中所述的方法，制備實(shí)施例1的產(chǎn)物的中性形式的Bio-Rex 70鹽。未處理樹脂的結(jié)果的N的百分比(％)為0％；負(fù)載樹脂的N的百分比(％)為7.93％.
實(shí)施例56S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的IPR(amberlite)-69鹽除先用1N HCl處理該樹脂，使其轉(zhuǎn)化為H+形式外，用實(shí)施例41中所述的相同方法制備實(shí)施例1的產(chǎn)物的中性形式的IPR-69鹽。該樹脂為聚苯乙烯二乙烯基苯磺酸樹脂，即所述的Dowex-50。它是GMP質(zhì)量，但除覆蓋更寬的目尺寸。它比Dowex顏色更淺。在洗滌后和載荷所述化合物前，將該樹脂在H2O中制成漿狀并將升至頂部的細(xì)顆粒傾析出。從該反應(yīng)中回收到4.9g鹽。7.69％ N(或0.401g SC-84250/g樹脂)。
實(shí)施例57S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的IPR(安伯來特)-69鹽用實(shí)施例41中所述的相同方法及實(shí)施例56中所述的細(xì)粒的傾析制備實(shí)施例1的產(chǎn)物的中性形式的IPR-64鹽。除它為GMP質(zhì)量外，該樹脂與Bio-Rex 70相同。僅有的不同是在搖動(dòng)過夜后，將該樹脂再多搖兩次，并在其中進(jìn)行汽提。從該反應(yīng)中回收到4.3g。6.20％N(0.346g化合物/g樹脂)。
實(shí)施例58由S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的二鹽酸鹽鹽制備一鹽酸鹽 將約120mg的實(shí)施例1的產(chǎn)物溶解于3ml DMF。加入1ml氧化丙烯并攪拌。產(chǎn)物會(huì)沉淀。用乙醚洗滌。使產(chǎn)物溶解于水中并凍干。表1顯示了元素分析。
實(shí)施例59經(jīng)AgCl沉淀制備S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽的一取代鹽 將實(shí)施例58的產(chǎn)物溶解于水中，加入化學(xué)計(jì)量量的銀鹽。過濾該固體。凍干剩余的溶液。表2顯示了元素分析，其中的n代表水的摩爾數(shù)。
實(shí)施例60經(jīng)AgCl沉淀制備S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸鹽的磷酸鹽 將實(shí)施例1的產(chǎn)物溶解于水中，每摩爾實(shí)施例1的產(chǎn)物加入2摩爾Ag3PO4，并混合。濾出固體并凍干所生成的溶液。分析生成的物質(zhì)，并用H3PO4調(diào)節(jié)磷酸鹽的含量，表3表示元素的分析，其中的x代表磷酸的摩爾數(shù)。
實(shí)施例61由S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸一鹽酸鹽制備混合鹽 將實(shí)施例58的產(chǎn)物溶解于水中。加入化學(xué)計(jì)量量的試劑(R)，表4顯示了元素分析，其中的x代表R的摩爾數(shù)。
實(shí)施例62由S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸二鹽酸鹽制備混合鹽 將實(shí)施例1的產(chǎn)物溶解于水中。加入堿直到pH為6。表5顯示了元素分析。
實(shí)施例63由S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的二鹽酸鹽制備鋅鹽 將實(shí)施例1的產(chǎn)物溶解于水中。與過量氧化鋅混合。過濾并凍干所生成的溶液。表6顯示了元素分析。
實(shí)施例64由S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的中性化合物制備混合鹽。 將實(shí)施例20的產(chǎn)物的中性形式溶解于水中。與所需的試劑混合并凍干。表7顯示了元素分析，其中的x代表MA、金屬陽離子和與去相反的陰離子的摩爾數(shù)。
實(shí)施例65由S-2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸的中性化合物制備鹽下表8列出由實(shí)施例1的產(chǎn)物通過本申請所述的各種方法之一制備的鹽及其元素分析。表8說明這些鹽的元素分析，其中的D代表具有式C8H17N3O2S的S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，A代表所述酸和或抗衡離子源的經(jīng)驗(yàn)式。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
生物學(xué)數(shù)據(jù)下列試驗(yàn)的部分或全部用來證明本發(fā)明的化合物的一氧化氮合酶抑制活性，并證實(shí)有用的藥理學(xué)性質(zhì)。
一氧化氮合酶瓜氨酸試驗(yàn)可通過監(jiān)測L-[2，3-3H]-精氨酸向L-[2，3-3H]-瓜氨酸的轉(zhuǎn)化測定一氧化氮合酶(NOS)的活性(Bredt和Snyder，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，87，682-685，1990和Moore等，J.Med.Chem.，39，669-672，1996)。從人體組織提取的RNA中各克隆出人誘導(dǎo)性NOS(hiNOS)、人內(nèi)皮組成性NOS(hecNOS)和人神經(jīng)元組成性NOS(hncNOS)。人體誘導(dǎo)性NOS(hiNOS)的cDNA分離自從患潰瘍性結(jié)腸炎患者的結(jié)腸樣品提取的RNA制得的λcDNA庫。人內(nèi)皮組成性NOS(hecNOS)的cDNA分離自從人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)提取的RNA制得的λcDNA庫，人體神經(jīng)元組成性NOS(hncNOS)的cDNA分離自從尸體獲得的人小腦提取的RNA制得的λcDNA庫。用桿狀病毒媒介將重組酶表達(dá)在Sf9昆蟲細(xì)胞中(Rodi等，于The Biology of Nitric Oxide，Pt4Enzymology，Biochemistry and Immunology(一氧化氮的生物學(xué)，Pt4酶學(xué)、生物化學(xué)和免疫學(xué))；Moncada，S.，F(xiàn)eelisch，M.，Busse，R.，Higgs，E.，Eds.Portland Press Ltd.London，1995；第447-450頁)。從可溶解細(xì)胞提取物中分離出酶的活性，并用DEAE-Sepharose層析部分提純。為測量NOS活性，存在或不存在測試化合物時(shí)，將10μL的酶加入40μL 50mM Tris(pH 7.6)中，通過加入含50mM的Tris(pH 7.6)、2.0mg/mL牛的血清白蛋白、2.0mM DTT、4.0mM CaCl2、20μMFAD、100μM四氫生物蝶呤、0.4mM NADPH和含0.9μCi的L-[2，3-3H]-精氨酸的60μM L-精氨酸的50μL的反應(yīng)混合物開始反應(yīng)。本試驗(yàn)中L-精氨酸的最終濃度為30μM。對于hec NOS或hnc NOS，鈣調(diào)蛋白被包括在最終濃度40-100nM中。接著于37℃下培養(yǎng)15分鐘，通過加入400μL含10mM EGTA、100mM HEPES、pH5.5和1mML-瓜氨酸的停止緩沖液中的Dowex 50W X-8陽離子交換樹脂的懸浮液(1份樹脂，3份緩沖液)終止該反應(yīng)。混合后沉淀該樹脂，并用液體閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)算出上清液的等分部分來確定L-[2，3-3H]-谷氨酸的形成。結(jié)果作為化合物對hiNOS、hecNOS和hncNOS的IC50值報(bào)告于表1中。活體內(nèi)試驗(yàn)在口服給予或不給予一氧化氮合酶抑制劑的情況下，可對大鼠腹膜內(nèi)注射1-12.5mg/kg內(nèi)毒素(LPS)進(jìn)行處理。確定注射后5小時(shí)的血漿亞硝酸鹽/硝酸鹽水平。該結(jié)果可用于顯示一氧化氮合酶抑制劑的給藥使血漿中亞硝酸鹽/硝酸鹽水平(內(nèi)毒素誘導(dǎo)的一氧化氮的產(chǎn)生的一種可靠的指標(biāo))的上升有所降低。Raw細(xì)胞的亞硝酸鹽試驗(yàn)在LPS的存在下，將RAW 264.7細(xì)胞接種于96-孔組織培養(yǎng)板上，使生長過夜(17小時(shí))至匯合，以誘導(dǎo)NOS。留下一排3-6孔不作處理并用作非專一的本底減少的對照。從各孔中移去培養(yǎng)基，并用含2mg/ml葡萄糖的Kreb-Ringers-Hepes(25mM，pH7.4)洗孔兩次。再將細(xì)胞放在冰上，用50μL含L-精氨酸(30μM)+/-抑制劑的緩沖液培養(yǎng)1小時(shí)。通過在水浴中加熱該板至37℃ 1小時(shí)可開始該試驗(yàn)。因細(xì)胞內(nèi)iNOS產(chǎn)生的亞硝酸鹽將與時(shí)間成線性關(guān)系。可將該板放在冰上終止該細(xì)胞試驗(yàn)，取出含亞硝酸鹽的緩沖液，用以前公開的熒光定量法對亞硝酸鹽進(jìn)行分析。T.P.Misko等，Analytical Biochemistry，214，11-16(1993)。人體軟骨外植體試驗(yàn)用Dulbecco’s磷酸鹽緩沖鹽水(GibcoBRL)漂洗骨片兩次再用Dulbecco’s Modified Eagles Medium(GibcoBRL)漂洗一次，再與無酚紅的極限必需培養(yǎng)基(MEM)(GibcoBRL)一起置于陪替氏培養(yǎng)皿中。將軟骨切成重量約15-45mg的小外植體，按每孔1-2片外植體放入每孔有200-500μL培養(yǎng)基的96或48孔培養(yǎng)板中。培養(yǎng)基是一種常規(guī)的具有非L-精氨酸、非L-谷酰胺和非酚紅制備的Earle’s鹽的極限必需培養(yǎng)基(Eagle)的改良培養(yǎng)基，或一種非L-精氨酸、非胰島素、非抗壞血酸、非L-谷酰胺及非酚紅制備的無血清的Neuman和Tytell(GibcoBRL)常規(guī)改良培養(yǎng)基。在使用前用100μM L-精氨酸(Sigma)、2mM L-谷酰胺、1X HL-1補(bǔ)充液(Bio Whittaker)、50mg/ml抗壞血酸(Sigma)和150pg/ml重組人IL-1β(RD系統(tǒng))對二者進(jìn)行補(bǔ)充，以誘導(dǎo)一氧化氮合酶。再以10μL等分液加入化合物，用5％CO2于37℃培養(yǎng)外植體18-24小時(shí)。然后棄去當(dāng)?shù)呐f的上清液，用含重組人IL-1β和化合物的新鮮培養(yǎng)基替換，再培養(yǎng)20-24小時(shí)。對上清液的亞硝酸鹽進(jìn)行熒光分析(Misko等，Anal.Biochem.，214，11-16，1993)。所有樣品均按一式四份進(jìn)行。未刺激的對照物在無重組人IL-1β的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。通過繪制六個(gè)不同濃度的抑制劑對亞硝酸鹽產(chǎn)生的百分抑制率的圖來確定IC50值(表1)。
表9顯示部分本發(fā)明的化合物的生物學(xué)活性的實(shí)例。
表9.生物學(xué)活性。數(shù)值表示所有實(shí)驗(yàn)和所有研究批次的平均值。
本領(lǐng)域的技術(shù)人員可由上所述容易地確定本發(fā)明的重要特征，并在不背離其精神和范圍的情況下，可對本發(fā)明進(jìn)行各種修改和修飾以使其適用于各種用途和條件。
權(quán)利要求
1.S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物為一種藥學(xué)上可接受的鹽的形式。
3.權(quán)利要求2的藥學(xué)上可接受的鹽，它具有至少一個(gè)陰離子抗衡離子。
4.權(quán)利要求3的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子選自鹵化物、羧酸鹽、磺酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、膦酸鹽、樹脂-結(jié)合的陰離子、氧化物和硝酸鹽。
5.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為鹵化物。
6.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述鹵化物為氯。
7.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為羧酸鹽。
8.權(quán)利要求7的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述羧酸鹽選自甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、三氟乙酸鹽、琥珀酸鹽、水楊酸鹽、DL-天冬氨酸鹽、D-天冬氨酸鹽、L-天冬氨酸鹽、DL-谷氨酸鹽、D-谷氨酸鹽、L-谷氨酸鹽、甘油酸鹽、琥珀酸鹽、steric、DL-酒石酸鹽、D-酒石酸鹽、L-酒石酸鹽、(±)扁桃酸鹽、(R)-(-)扁桃酸鹽、(S)-(+)-扁桃酸鹽、檸檬酸鹽、粘酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、苯甲酸鹽、DL-蘋果酸鹽、D-蘋果酸鹽、L-蘋果酸鹽、半蘋果酸鹽、1-全剛烷乙酸鹽、1-全剛烷羧酸鹽、黃安酸鹽、磺基乙酸鹽、(±)-乳酸鹽、L-(+)-乳酸鹽、D-(-)-乳酸鹽、撲酸鹽、D-α-半乳糖醛酸鹽、甘油酸鹽、DL-胱氨酸鹽、D-胱氨酸鹽、L-胱氨酸鹽、DL-高胱氨酸鹽、D-高胱氨酸鹽、L-高胱氨酸鹽、DL-半胱氨酸鹽、D-半胱氨酸鹽、L-半胱氨酸鹽、(4S)-羥基-L-脯氨酸、環(huán)丙烷-1，1-二羧酸鹽、2，2-二甲基丙二酸鹽、方形酸鹽、酪氨酸陰離子、脯氨酸陰離子、富馬酸鹽、1-羥基-2萘甲酸鹽、膦酰基乙酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、3-膦?；猁}、DL-焦谷氨酸鹽、D-焦谷氨酸鹽和L-焦谷氨酸鹽。
9.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為磺酸鹽。
10.權(quán)利要求9的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述磺酸鹽選自甲磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、三氟甲基磺酸鹽、乙磺酸鹽、(±)-樟腦磺酸鹽、萘磺酸鹽、1R-(-)-樟腦磺酸鹽、1S-(+)-樟腦磺酸鹽、2-基磺酸鹽、1，5-萘二磺酸鹽、1，2-乙烷二磺酸鹽、1，3-丙烷二磺酸鹽、3-(N-嗎啉代)丙烷磺酸鹽、聯(lián)苯基磺酸鹽、羥乙磺酸鹽和1-羥基-2-萘磺酸鹽。
11.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為硫酸鹽。
12.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述硫酸鹽選自硫酸鹽、硫酸氫鉀、硫酸氫鈉和硫酸。
13.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為磷酸鹽。
14.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述磷酸鹽選自磷酸鹽、磷酸二氫鹽、磷酸氫鉀、磷酸二鉀、磷酸鉀、磷酸氫鈉、磷酸二鈉、磷酸鈉、磷酸二氫鈣、磷酸鈣、磷酸氫鈣、三代磷酸鈣和六氟代磷酸鹽。
15.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為膦酸鹽。
16.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述膦酸鹽選自乙烯基膦酸鹽、2-羧基乙基膦酸鹽和苯基膦酸鹽。
17.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為樹脂-結(jié)合的陰離子。
18.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述樹脂-結(jié)合的陰離子選自聚丙烯酸鹽樹脂和磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂。
19.權(quán)利要求18的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述樹脂-結(jié)合的陰離子為含聚丙烯酸鹽的樹脂。
20.權(quán)利要求19的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述樹脂-結(jié)合的陰離子為含與二乙烯基苯交聯(lián)的聚丙烯酸鹽的樹脂。
21.權(quán)利要求18的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述樹脂-結(jié)合的陰離子為含磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)的樹脂。
22.權(quán)利要求21的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述樹脂-結(jié)合的陰離子為含與二乙烯基苯交聯(lián)的磺化聚(苯乙烯二乙烯基苯)的樹脂。
23.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陰離子抗衡離子為硝酸鹽。
24.權(quán)利要求4的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述鹽含有至少一個(gè)陽離子抗衡離子。
25.權(quán)利要求24的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子選自銨陽離子、堿金屬陽離子、堿土金屬陽離子、過渡金屬陽離子和陽離子結(jié)合樹脂。
26.權(quán)利要求25的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子為銨陽離子。
27.權(quán)利要求26的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述銨陽離子選自銨、甲銨、二甲銨、三甲銨、四甲銨、乙醇銨、二環(huán)己銨、胍鎓和乙二銨陽離子。
28.權(quán)利要求25的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子為堿金屬陽離子。
29.權(quán)利要求28的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述堿金屬陽離子選自鋰陽離子、鈉陽離子、鉀陽離子和銫陽離子。
30.權(quán)利要求25的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子為堿土金屬陽離子。
31.權(quán)利要求30的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述堿土金屬陽離子選自鈹陽離子、鎂陽離子和鈣陽離子。
32.權(quán)利要求25的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子為過渡金屬陽離子。
33.權(quán)利要求32的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述過渡金屬陽離子為鋅陽離子。
34.權(quán)利要求25的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子抗衡離子為陽離子結(jié)合樹脂。
35.權(quán)利要求34的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子結(jié)合樹脂為陽離子官能化的聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂。
36.權(quán)利要求34的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子結(jié)合樹脂為胺化的聚(苯乙烯二乙烯基苯)樹脂。
37.權(quán)利要求34的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子結(jié)合樹脂為陽離子官能化的聚丙烯酸酯樹脂。
38.權(quán)利要求34的藥學(xué)上可接受的鹽，其中所述陽離子結(jié)合樹脂為胺化的聚丙烯酸酯樹脂。
39.S-[2-[(1-亞氨基乙基)氨基]乙基]-2-甲基-L-半胱氨酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及S－[2－[(1－亞氨基乙基)氨基]乙基]－2－甲基－L－半胱氨酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
文檔編號A61P29/00GK1419539SQ01807065
公開日2003年5月21日 申請日期2001年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2000年3月24日
發(fā)明者R·K·韋伯, A·K·阿瓦斯蒂, A·A·伯格馬尼斯, R·C·杜爾利, S·S·岡賽爾, T·J·哈根, A·E·哈利南, D·W·漢森, B·S·希科里, A·E·穆爾曼, B·S·皮徹勒, M·A·普羅莫, R·R·紗特曼, J·S·斯奈德, M·特里維迪, S·齊姆巴洛夫 申請人:法馬西亞公司