專利名稱：藏邊大黃提取物和以該提取物為活性成分的藥物組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種天然植物的提取物，以該提取物為活性成分的藥物組合物以及它們在制備降脂及減肥藥物中的應用。
背景技術：
高血脂病及肥胖癥，已成為現(xiàn)代生活中威脅人們健康的重要疾病。高血脂病患者在冠心病、高血壓、糖尿病等方面的發(fā)病率遠高于普通人群。肥胖除了給患者帶來生活上的不便外，肥胖者在心腦血管疾病及高血壓、高血脂、糖尿病、心臟病等方面的發(fā)病率高于普通人群。目前臨床常用的降血脂藥物“他汀”類雖有較好的療效，但長期服用會帶來一定的副作用。普通的中藥副作用雖小，但作用較弱，效果不明顯。現(xiàn)在的中藥減肥產(chǎn)品多為復方制劑，且大多有腹瀉的副作用。
藏邊大黃在西藏地區(qū)為常用藥，載于《藏藥志》中，藏藥名“曲扎”。西藏將藏邊大黃用以治療胃腸炎癥，外用止血、療瘡、消炎。治中毒性發(fā)熱、臟器發(fā)熱、膽熱病、實熱便秘、濕熱黃疸等。云南民間認為本品能清熱解毒，止血生肌。主治肺熱咳嗽、咽喉腫痛、大便下血、癰腫瘡毒、外傷出血。水煎服或生吃及泡酒服，亦可搗爛外包患處。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的旨在提供一種降脂、減肥效果顯著，用于治療肥胖癥時不用控制飲食、不腹瀉的由天然植物藏邊大黃提取的提取物和以該提取物為活性成分的藥物組合物。
本發(fā)明所述的藏邊大黃提取物，為藏邊大黃的水提取物或有機溶劑提取物，系以藏邊大黃為原料，由水、有機溶劑為溶媒進行提取，回收溶媒而得到的干膏。
在上述的提取方法中，有機溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯等常規(guī)有機溶劑；提取方法為熱回流、冷浸、水提醇沉，醇提水沉、提取過柱等常規(guī)提取方法。
本發(fā)明所述的藏邊大黃為蓼科大黃屬波葉組植物藏邊大黃Rheum emodiWall。分布于我國西藏和云南，青海和四川也有，生長于海拔約3000～4000米。印度大黃亦為此種。云南叫牛尾七、白牛尾七、大巖七。秋末莖葉枯黃或初春發(fā)芽前采挖。
本發(fā)明的藥物組合物含有治療有效量的藏邊大黃提取物為活性成分，以及含有一種或多種藥學上可接受的載體。
本發(fā)明的提取物和藥物組合物可用于制備治療高血脂癥和肥胖癥的藥物。
上述的藥學上可接受的載體是指藥學領域常規(guī)的藥物載體。
本發(fā)明的藥物組合物可按已知方法制成片劑、軟膠囊、硬膠囊、顆粒劑或口服液體制劑、水針劑、緩釋、控釋劑等制劑。例如使活性成分與一種或多種載體混合，然后將其制成所需的劑型。
本發(fā)明的藥物組合物含有重量比為10％-99.5％的藏邊大黃提取物。
本發(fā)明組合物的施用量可根據(jù)用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療的疾病的類型和嚴重程度等變化，其日劑量可以是200mg-800mg。
本發(fā)明所述提取物用于治療高血脂癥和肥胖癥效果顯著，治療肥胖癥時不用控制飲食，不腹瀉，不脫水，不反彈。
本發(fā)明所述藏邊大黃提取物毒性實驗
溶劑1％西黃蓍膠，配制將藏邊大黃提取物精確稱取后，加1％西黃蓍膠配成250mg/ml的混懸液。
動物昆明種小鼠，性別雌雄各半，體重18-20g，來源上海醫(yī)工院工業(yè)研究所動物房提供，合格證號滬動合格證字第107號。
飼養(yǎng)動物飼養(yǎng)于正壓凈化通風動物房內，溫度25±2℃，自由進食與飲水。
實驗方法將動物按體重均勻分組，每雌雄各10只。劑量為10g/kg。動物實驗前禁食4小時。對照組給予同劑量1％西黃蓍膠。給藥后連續(xù)觀察動物反應，對死亡動物進行解剖觀察各主要臟器情況，存活動物在第7天進行解剖。將各劑量組動物死亡數(shù)用衛(wèi)生部新藥統(tǒng)計程序中bliss法計算出雌雄動物二個性別的LD50(95％可信度)值。
實驗結果動物7天中無死亡，經(jīng)解剖觀察各主要臟器未見明顯異常。因此藏邊大黃提取物的LD50大于10g/kg。
LD50大于5g/kg為無毒類物質。藏邊大黃提取物的LD50大于10g/kg。屬完全無毒性物質。
降脂實驗1、試驗材料1.1、受試樣品名稱提取物含量35％性狀褐色粉末狀固體溶劑1％西黃蓍膠溶液配制方法1％西黃蓍膠溶液將提取物配制成濃度為2.5、5.0、10.0和25.0mg/ml的混懸液1.2、對照樣品
1.2.1、對照樣品1名稱吉非羅齊膠囊提供單位上海三維制藥有限公司批號20010102規(guī)格0.3g/粒配制將膠囊內容物稱重后用1％西黃蓍膠溶液配制成28.8mg/ml混懸液1.2.2、對照樣品2名稱舒降之(辛伐他汀)片提供單位杭州默沙東制藥有限公司批號01105規(guī)格20mg/片配制將片劑研磨成粉末后用1％西黃蓍膠溶液配制成0.48mg/ml混懸液2、其他試劑膽固醇，上海源聚生物技術有限公司，批號020814甲基硫氧嘧啶，＞98％，新醫(yī)學衛(wèi)生應用研究所，批號9406223、試驗儀器VL-1微型離心機，上海船廠機械分廠日立7150型全自動血液生化分析儀，日本日立公司4、試驗動物動物品系SD大鼠提供單位中科院動物房合格證號中科動管第005號體重180～200g性別雄性每組動物數(shù)10只5、試驗方法取SD大鼠分組，每組10只，設正常組(喂普通全營養(yǎng)飼料)和高脂飼料組。造模方法用普通飼料加豬油20％、膽固醇4％、甲基硫氧嘧啶0.2％喂養(yǎng)4周。第3周眼角采血，10000rpm離心5分鐘分離血清，用自動生化分析儀測定血清甘油三酯(TG)、血清總膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Ch)和低高密度脂蛋白膽固醇(LDL-Ch)，并計算出HDL-Ch和LDL-Ch的比值(HDL/LDL)，證實高脂模型形成后開始給藥。模型組給賦形劑；提取物設4個劑量組25、50、100和250mg/kg；吉非羅齊膠囊288mg/kg組和辛伐他汀4.8mg/kg組?？诜o藥，體積為1ml/100g體重，每天給藥1次，連續(xù)給藥14天，第15天動物用水合氯醛麻醉，腹主動脈采血，按以上方法分離血清，測定TG、CHO、HDL-Ch和LDL-Ch。分別計算給藥前、后血清各脂質的平均值和標準差，并計算出各動物給藥前后的差值，以給藥后的改變值與模型對照組的變化值進行比較，用t測驗進行差異顯著性的統(tǒng)計檢驗，P＜0.05表示差異顯著，P＜0.01表示差異非常顯著。解剖后從主動脈根部取主動脈1.5～2cm，沿背側縱行切開，10％福爾馬林固定，蘇丹III染色，染色后脂質浸潤區(qū)及斑塊呈現(xiàn)深紅色，在解剖鏡下觀察動脈內壁斑塊形成情況，并根據(jù)以下標準進行病變分級，并計算各組的平均得分。
分級 病變0 膜表面光滑，無紅色斑塊0.5內膜有廣泛紅色染色區(qū)，但無凸出表面斑塊1 有明顯凸起斑塊，面積小于1mm22 斑塊面積1～3mm23 斑塊面積＞3mm24 塊覆蓋覆蓋和融合6、試驗結果6.1、 對血清脂質的影響6.1.1、對血清甘油三酯的影響造模后，血清脂質各指標均有明顯變化，模型組TG較正常組升高約2.2倍，CHO和LDL也明顯增加，HDL增加程度明顯較LDL增加值小，故HDL/LDL比值明顯降低，各給藥組給藥前血清脂質指標與正常組也有顯著至非常顯著的差異。各給藥組與模型組比較，沒有明顯差異。表明本試驗的造模是成功的。
給藥2周后，提取物25～250mg/kg口服后大鼠血清甘油三酯顯示隨劑量增加而減少，但僅100和250mg/kg劑量時較模型對照明顯降低。吉非羅齊288mg/kg及辛伐他汀4.8mg/kg也顯示明顯降低TG的作用。
6.1.2、對血清總膽固醇的影響給藥2周后，提取物25～250mg/kg口服后大鼠血清總膽固醇顯示隨劑量增加而減少，但僅在100和250mg/kg劑量時較模型對照明顯降低。吉非羅齊288mg/kg及辛伐他汀4.8mg/kg也顯示明顯降低CHO的作用。
6.1.3、對血清高、低密度脂蛋白-膽固醇的影響造模后，高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-Ch)和低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-Ch)水平均顯著升高，但低密度脂蛋白-膽固醇水平升高較高密度脂蛋白-膽固醇升高更明顯，故HDL/LDL比值顯著降低。
給藥2周后，提取物25～250mg/kg口服后大鼠血清HDL-Ch顯示隨劑量增加而增加，但僅250mg/kg劑量時較模型對照明顯增加。吉非羅齊288mg/kg非常顯著升高HDL-Ch，辛伐他汀4.8mg/kg也顯示明顯增加HDL-Ch的作用。100和250mg/kg提取物的LDL-Ch顯著下降。吉非羅齊和辛伐他汀也顯著降低LDL-Ch。
提取物50～250mg/kg顯著提高HDL/LDL比值。吉非羅齊和辛伐他汀均非常顯著升高HDL/LDL比值。
試驗結果表明，提取物有明顯的治療高脂飲食加甲基硫氧嘧啶誘發(fā)的大鼠高脂血癥?？擅黠@降低血清甘油三酯、總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇含量，增加高密度密度脂蛋白膽固醇含量及高/低密度脂蛋白比值。
6.2、對動脈內壁斑塊形成的影響大鼠喂飼高脂飼料1個月，動脈內有明顯粥樣斑塊形成，受試樣品醇提物口服2周后，動脈內斑塊有減少趨勢，高劑量與模型組比較有明顯差異。吉非羅齊和辛伐他汀也明顯減少動脈內粥樣斑塊的形成。
8、結論試驗樣品醇提物口服對大鼠高脂飲食引起的高脂血癥有明顯的與劑量相關的治療作用，對動脈內粥樣斑塊也有明顯的消退作用。試驗結果提示，提取物具有明顯的降血脂作用。
人體自身對照減肥實驗將藏邊大黃提取物制成硬膠囊，每粒含藏邊大黃提取物100mg，每天服兩次，每次一粒。
服前體重(kg)服用天數(shù)服后體重(kg) 減重(kg)853576982357577835708863576108335749由以上實驗可見，服用一個減肥周期35天后，受試者體重明顯減輕。
具體實施例方式
實施例1、a、提取將藏邊大黃干燥，粉碎。加入90％乙醇冷浸，第一次24小時，第二次12小時，第三次8小時，每隔4小時強制循環(huán)一次，合并提取液，回收酒精，得藏邊大黃提取物。
b、制劑取藏邊大黃提取物100g，粉碎，過50目篩。取150g藥用淀粉，制粒，將淀粉粒與藥粉混合，過20目篩，干燥，20目篩整粒，裝膠囊即得，共1000粒。
實施例2、a、提取將藏邊大黃干燥，粉碎，按8倍量體積加入90％乙醇進行熱回流提取。共提三次。合并提取液，回收乙醇。將回收干膏加水熱溶，離心過濾，回收成干膏，即得藏邊大黃提取物。
b、制劑準確稱取1000g藏邊大黃提取物，干燥，粉碎，過50目篩。準確稱取1000g藥用淀粉。將藥用淀粉于80℃干燥4小時，將藥粉與藥用淀粉混合制粒。按粒重的0.5％稱取硬脂酸鎂，將硬脂酸鎂加入干顆粒中，混合，過20目篩。壓片。共得10000片。每片重200mg。
實施例3、a、提取將藏邊大黃干燥，粉碎，按8倍量體積加入蒸餾水進行熱回流提取，共提三次，合并提取液，適當濃縮。將濃縮液過大孔樹脂柱，用水洗脫，TLC檢測。將過柱液回收，得提取物。
b、制劑取藏邊大黃提取物100g，蔗糖粉150g，糊精150g，混合，過14目篩制粒，干燥，過14目篩整粒。分裝，共得1000包，每包含干顆粒0.4g。以上實施例所得不同劑型，經(jīng)臨床試驗，均有明顯的效果。
本發(fā)明不限于上述實施例。
實施例1醇提一、將藏邊大黃干燥，粉碎；二、按藏邊大黃的8倍量體積，加入藥用酒精，熱回流提取，共三次，合并提取液，回收乙醇，即得藏邊大黃提取物。
實施例2水提一、將藏邊大黃干燥，粉碎；二、按8倍量體積加入蒸餾水進行熱回流提取，共提三次，合并提取液，將提取液回收成于膏，即得藏邊大黃提取物。
實施例3提取、過柱法將藏邊大黃干燥，粉碎，按8倍量體積加入蒸餾水進行熱回流提取，共提三次，合并提取液，適當濃縮。將濃縮液過大孔樹脂柱，用水洗脫，TLC檢測。將過柱液回收，得提取物。
權利要求
1.一種藏邊大黃提取物，其特征在于藏邊大黃提取物為藏邊大黃的水提取物或有機溶劑提取物，系以藏邊大黃為原料，由水、有機溶劑為溶媒進行提取，回收溶媒而得到的干膏。
2.用于制備治療高血脂癥和肥胖癥的藥物組合物，其中有治療有效量的權利要求1的提取物和藥學上可接受的載體。
3.權利要求1的提取物在制備治療高血脂癥和肥胖癥的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藏邊大黃提取物，為藏邊大黃的水提取物或有機溶劑提取物，系以藏邊大黃為原料，由水、有機溶劑為溶媒進行提取，合并提取液，回收溶媒而制得。本發(fā)明還涉及以該化合物為活性成分的藥物組合物，以及本發(fā)明所述的提取物和藥物組合物在治療高血脂癥和肥胖癥的藥物中的應用。
文檔編號A61K9/06GK1506090SQ02153088
公開日2004年6月23日 申請日期2002年12月6日 優(yōu)先權日2002年12月6日
發(fā)明者李玉峰 申請人:李玉峰