1.一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：包括以下步驟：a）分離人間充質(zhì)干細(xì)胞，b）在間充質(zhì)干細(xì)胞中利用慢病毒穩(wěn)定過表達(dá)NR2F2基因以及小RNA干擾技術(shù)下調(diào)NR2F2基因表達(dá)，c）間充質(zhì)干細(xì)胞NR2F2基因過表達(dá)以及下調(diào)表達(dá)后3D細(xì)胞微球的培養(yǎng)，d）將人間充質(zhì)干細(xì)胞、聚乙烯乙二醇二甲基丙烯酸酯、丙烯酸酯肽和2959光引發(fā)劑以及PBS混合制備生物墨水，e）使用生物打印機(jī)在生物打印紙上打印過表達(dá)NR2F2基因的3D水凝膠軟骨組織，f）在軟骨形成培養(yǎng)基及小鼠皮下培養(yǎng)3D水凝膠軟骨組織21天以形成關(guān)節(jié)軟骨組織。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟a）中間充質(zhì)干細(xì)胞來源于22歲男性骨髓捐獻(xiàn)者，所有實(shí)驗(yàn)均使用第三代細(xì)胞。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟b）中使用轉(zhuǎn)染試劑將慢病毒pCDH-EF1-Nr2f2-T2A-GFP 或pCDH-EF1-T2A-GFP序列與pCMV-VSVG 及 pCMV-dvpr共同轉(zhuǎn)入293FT細(xì)胞中擴(kuò)增培養(yǎng)，2-3天后離心收集上清液，慢病毒使用濃度為10MOI同時給予2mg/mL嘌呤霉素，其中NR2F2基因過表達(dá)效率達(dá)到初始含量的40倍以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟b）小RNA干擾人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞NR2F2基因的表達(dá)中使用的是脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑及OMEM，RNA使用終濃度調(diào)整為10nM，其中作用時間為72小時，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到80-90%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟c）中分別將NR2F2基因過表達(dá)組及其對照組和NR2F2基因下調(diào)表達(dá)組及其對照組的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目調(diào)整為5×105個，離心機(jī)300g離心5分鐘后繼續(xù)培養(yǎng)2-3天，待球型顆粒形成后轉(zhuǎn)移至低粘附的24孔板內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)21天。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟d）中先取一定量的聚乙烯乙二醇二甲基丙烯酸酯溶于PBS中形成終濃度為10%(w/v)的溶液，然后加入丙烯酸酯肽使終濃度為1mM，最后加入光引發(fā)劑2959并調(diào)整溶液濃度為0.05%(w/v)，然后過濾除菌，將培養(yǎng)狀態(tài)良好的NR2F2基因過表達(dá)人間充質(zhì)干細(xì)胞以及對照組人間充質(zhì)干細(xì)胞在以上溶液中混合均勻，并調(diào)整細(xì)胞密度為6×106cells/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟e）中生物打印機(jī)在生物打印紙上打印構(gòu)建NR2F2基因過表達(dá)的3D水凝膠軟骨組織的具體步驟包括：生物打印機(jī)打印前準(zhǔn)備工作；將制備好的生物墨水裝入打印筆內(nèi)并用錫箔紙包??；使用打印軟件設(shè)計目標(biāo)模型及模型尺寸；在3D生物打印紙上層層打印以及同時光聚反應(yīng)構(gòu)建NR2F2基因過表達(dá)的3D水凝膠軟骨組織以及其對照組的3D水凝膠軟骨組織。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨組織分化的方法，其特征在于：所述步驟f）中將NR2F2基因過表達(dá)的3D打印軟骨組織及其對照組的3D打印軟骨組織分別轉(zhuǎn)移24孔板，在體積為1ml和10ng/mL TGFβ的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)21天，培養(yǎng)溫度均為37℃，培養(yǎng)環(huán)境為含5%(v/v) CO2的濕潤空氣，每3天更換培養(yǎng)基一次，或者將NR2F2基因過表達(dá)的3D打印軟骨組織及其對照組3D打印軟骨組織分別植入小鼠皮下繼續(xù)培養(yǎng)21天。