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      在CHO細(xì)胞中rhIL?12表達(dá)系統(tǒng)的構(gòu)建方法與流程

      文檔序號:11145301閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種改造過的重組人白細(xì)胞介素-12基因,其特征在于:經(jīng)過優(yōu)化的p35亞基的編碼序列如 SEQ ID NO.1所示;經(jīng)過優(yōu)化的p40亞基的編碼序列如 SEQ ID NO.2所示。

      2.一種重組人白細(xì)胞介素-12的真核表達(dá)載體,其特征在于:將如權(quán)利要求1所述的兩段基因裝載到該表達(dá)載體上。

      3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的表達(dá)載體,其特征在于:SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2基因序列分別由各自的帶有SV40增強(qiáng)子元件的CMV啟動子控制。

      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的表達(dá)載體,其特征在于:p35亞基的編碼序列與啟動子之間有一段可以增加表達(dá)效率的內(nèi)含子片段。

      5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一種所述的表達(dá)載體,其特征在于:p35表達(dá)單元的結(jié)構(gòu)為:SV40增強(qiáng)子-CMV啟動子-可以增加表達(dá)效率的內(nèi)含子片段- SEQ ID NO.1,p40表達(dá)單元的結(jié)構(gòu)為:SV40增強(qiáng)子-CMV啟動子- SEQ ID NO.2。

      6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的表達(dá)載體,其特征在于:可以增加表達(dá)效率的內(nèi)含子片段為玉米adh1基因內(nèi)含子片段adh1 intron。

      7.一種高效表達(dá)重組人白細(xì)胞介素-12真核細(xì)胞株,其特征在于:將如權(quán)利要求2-6任一種所述的表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化入CHO細(xì)胞系制備獲得,或者所述細(xì)胞用權(quán)利要求1所述的核酸序列轉(zhuǎn)染。

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