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      小麥γ?醇溶蛋白TaWG05、克隆及其檢測(cè)方法與流程

      文檔序號(hào):12108812閱讀:來源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.γ-醇溶蛋白TaWG05編碼基因,其特征在于,堿基序列如SEQ ID No.1所示。

      2.γ-醇溶蛋白TaWG05,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

      3.克隆權(quán)利要求1所述γ-醇溶蛋白TaWG05編碼基因的簡(jiǎn)并引物對(duì),其特征在于,PCR擴(kuò)增所述γ-醇溶蛋白TaWG05編碼基因時(shí),以小麥鄭麥004的DNA基因組為模板,利用如下簡(jiǎn)并引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增,簡(jiǎn)并引物對(duì)為:

      引物1:5’-ATGAAGATCT(C)TCA(T)TGGTCTTTGCC(T)-3’,

      引物2:5’-TCAT(C)TGTCCACCA(G)TTG(C)TAGGCG-3’。

      4.檢測(cè)權(quán)利要求1所述γ-醇溶蛋白TaWG05編碼基因用檢測(cè)標(biāo)記引物對(duì),其特征在于,所述引物對(duì)具體如下:

      引物3: 5’-TCTTCTTGGTCTTTGCCCTCC-3’,

      引物4: 5’- TTGGGTAAGTGGTTGCTGCT-3’。

      5.利用權(quán)利要求4所述檢測(cè)標(biāo)記引物對(duì)小麥中γ-醇溶蛋白TaWG05編碼基因的檢測(cè)方法,其特征在于,具體包括如下步驟:

      (1)提取待檢小麥種子RNA;

      (2)以Actin基因作為內(nèi)參基因,利用檢測(cè)標(biāo)記引物對(duì)進(jìn)行Real-time PCR擴(kuò)增;

      (3)采用2 -△△CT方法檢測(cè)目標(biāo)基因的相對(duì)表達(dá)量情況,如果目標(biāo)基因TaWG05有表達(dá),那么表明該品種的小麥種子中含有γ-醇溶蛋白TaWG05,如果沒有表達(dá),那么表明該品種的小麥種子中不含有γ-醇溶蛋白TaWG05。

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