一種熱帶假絲酵母dk2菌株及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物紡織技術(shù)領(lǐng)域，特別設(shè)及一種熱帶假絲酵母DK2菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 假死酵母菌是一種腐物寄生菌，廣泛存在于自然界，可從水果、蔬菜、乳制品、±壤 中分罔出。
[0003] 在麻的初加工中，需要通過(guò)一種嫗麻過(guò)程來(lái)預(yù)先處理部分膠質(zhì)（主要是果膠和半 纖維素）。嫗麻過(guò)程實(shí)際上應(yīng)用了傳統(tǒng)的微生物技術(shù)，它是通過(guò)微生物和酶的協(xié)同作用緩慢 地去除附著在纖維表面非纖維素膠質(zhì)的過(guò)程。嫗麻過(guò)程對(duì)麻纖維質(zhì)量影響很大，常用的嫗 麻方式有雨露嫗麻和酶法嫗麻。
[0004] 此外，紡織加工中，必須進(jìn)一步經(jīng)過(guò)煮煉脫膠，即去除果膠、半纖維素和木質(zhì)素等 非纖維素物質(zhì)（統(tǒng)稱為膠質(zhì)），才能獲得用于輕紡的纖維，實(shí)現(xiàn)其使用價(jià)值。目前，麻行業(yè)常 用的煮練方法主要是化學(xué)方法和酶法脫膠，化學(xué)脫膠工藝耗能大，設(shè)備損耗大，且排放的廢 水無(wú)法循環(huán)利用，污染問(wèn)題嚴(yán)重。酶法脫膠就是將脫膠菌培養(yǎng)到菌生長(zhǎng)的衰老期后進(jìn)行過(guò) 濾或離屯、等處理，再用得到的粗酶液浸潰原麻。粗酶液可W將麻纖維中的果膠、半纖維素、 木質(zhì)素等物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單的低分子物質(zhì)，從而完成麻纖維的脫膠過(guò)程。酶法脫膠工藝 無(wú)需專用設(shè)備，快速高效，無(wú)污染，生產(chǎn)的精干麻質(zhì)量好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種熱帶假絲酵母DK2菌株及其應(yīng)用，該菌株 生長(zhǎng)周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維質(zhì)量好，處理環(huán)境溫和，耐熱性能 好，無(wú)環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)；能夠直接用于亞麻、黃麻、紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖 維分散率高，脫膠效率高。
[0006] 本發(fā)明的一種熱帶假絲酵母DK2菌株，其ITS序列如SEQ ID NO: 1所示。
[0007] 根據(jù)ITS測(cè)序Blast及聚類分析結(jié)果，該菌與熱帶假絲酵母菌相似性為99 %，結(jié)合 生理生化試驗(yàn)結(jié)果和鏡檢分析，命名此菌株為熱帶假絲酵母（Candida tropicalis)DK2菌 株。ITS測(cè)序中，所采用的正向引物為；ITSU5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')、反向引物為IT S4 (5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')，均為國(guó)際通用引物，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限 公司合成。
[000引本發(fā)明所采用的熱帶假絲酵母（Candida tropicalis)DK2菌株，保藏單位名稱； CGMCC中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中屯、，保藏地址；北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西 路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，保藏號(hào)為CGMCC NO. 10186,保藏日期為2014年12 月15日。建議分類命名為；熱帶假絲酵母（Candida tropicalis)。
[0009] 本發(fā)明的一種熱帶假絲酵母DK2菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于嫗麻制備亞麻、黃 麻、紅麻或竹纖維。
[0010] 所述具體嫗麻工藝包括：
[001U (1)熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[001引 似在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟（1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400巧111，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時(shí)；
[0013] (3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng) 基，在轉(zhuǎn)速2(K)r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24小時(shí)得到發(fā)酵菌液；
[0014] (4)準(zhǔn)備嫗麻池；
[0015] (5)將制備的發(fā)酵菌液使用噴淋法噴灑到亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維上做嫗麻 處理，嫗麻后制得供紡織制品用亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維，嫗麻條件為自然溫度，pH自然； 噴淋法的工藝具體為每48小時(shí)向嫗麻區(qū)域噴灑菌液8ml。
[0016] 所述步驟（1)中的凍存緩沖液每100ml的配方為；磯酸二氨鐘0.1 g，磯酸氨二鐘 0. 02g，巧樣酸鋼0. 06g，^;：水合硫酸儀0. 03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。
[0017] 所述步驟（3)中的亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng)基配方為；亞麻、黃麻、 紅麻原麻或竹纖維25g，W亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維的質(zhì)量為基準(zhǔn)，氯化鐘的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為1%，磯酸氨二鐘的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%，硫酸儀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%，硫酸亞鐵的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0. 02%，硫酸錠的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，補(bǔ)水至5000ml定容。
[001引本發(fā)明的一種熱帶假絲酵母DK2菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于對(duì)亞麻、黃麻、紅麻 或竹紗線的煮練。
[0019] 所述煮練工藝包括：
[0020] (1)熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0021] 似在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟（1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400巧111，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時(shí)；
[0022] (3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng)基，在 轉(zhuǎn)速20化/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時(shí)得到發(fā)酵菌液；
[0023] (4)將滅菌后的亞麻、黃麻、紅麻或竹紗線與步驟（3)所得的發(fā)酵菌液按質(zhì)量比1 ; 20混合，在40~50°C，200~40化pm搖床中煮練1-4天，隨后除去煮練液，沸煮，沖洗W去 除細(xì)菌，停止煮練。
[0024] 本發(fā)明的一種熱帶假絲酵母DK2菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于對(duì)亞麻、黃麻、紅麻 原麻或竹織物的脫膠。
[0025] 所述脫膠工藝包括：
[0026] (1)熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0027] (2)在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟（1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400巧111，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時(shí)；
[002引 （3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹織物發(fā)酵培養(yǎng) 基，在轉(zhuǎn)速2(K)r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時(shí)得到發(fā)酵菌液；
[0029] (4)將滅菌后的亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹織物與步驟（3)所得的發(fā)酵菌液按質(zhì)量 比1 ;20混合，在40~50°C，200~400巧m搖床中脫膠1-4天，隨后除去脫膠液，沸煮，沖洗 W去除細(xì)菌，停止脫膠。
[0030] 所述的亞麻纖維可W用作服裝面料、裝飾織物、桌布、床上用品和汽車用品等產(chǎn)業(yè) 用品。
[0031] 所述的黃、紅麻纖維可W用作麻袋、麻布、造紙、繩索、織地毯和窗簾等紡織用品。
[0032] 所述的竹纖維可W用作夾克衫、休閑服、西裝套服等服裝面料、涼席、床單和毛巾、 窗簾、圍巾和浴巾、或醫(yī)療護(hù)理用品等。
[00扣]有益效果
[0034] (1)本發(fā)明能夠直接用于亞麻、黃麻、紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分 散率高，脫膠效率高；本發(fā)明的菌株生長(zhǎng)周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維 質(zhì)量好，處理環(huán)境溫和，耐熱性能好，無(wú)環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)；
[0035] (2)本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等特點(diǎn)，利用該體系進(jìn)行亞麻、黃麻、 紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分散率高，脫膠效率高，纖維柔軟，精干麻質(zhì)量好 等優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說(shuō)明】
[0036] 圖1和圖2均為本發(fā)明菌株顯微鏡染色照片（油鏡）。
【具體實(shí)施方式】
[0037] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，該些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可W對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，該些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定 的范圍。
[00測(cè) 實(shí)施例1
[0039] 麻纖維和竹纖維嫗麻或煮練菌種的篩選方法：
[0040] (1)嫗麻基地獲取腐爛麻及其泥上，將腐爛麻及其泥上與PDA培養(yǎng)基按照Ig ;20ml 比例置于PDA培養(yǎng)基中，富集培養(yǎng)10天。然后取0.1 mlPDA培養(yǎng)物涂布于分離培養(yǎng)基中， 30°C靜置培養(yǎng)1-4天，獲得野生型生物處理優(yōu)質(zhì)菌株。
[004U (2)將步驟（1)中得到的菌株接種到PDA培養(yǎng)基中，30°C培養(yǎng)72h。添加凍存緩沖 液，存于-80°C。
[00創(chuàng)所述步驟（l)PDA培養(yǎng)基配方為：馬鈴馨200g，葡萄糖20g，瓊脂15g，蒸饋水 lOOOmL'pH 自然。
[0043] 所述步驟（2)凍存緩沖液每100ml的配方：磯酸二氨鐘0.1 g，磯酸氨二鐘0. 02g， 巧樣酸鋼0. 06g，^;：水合硫酸儀0. 03徑，甘油121111，加水定容至10〇1111，制得。
[0044] 該菌株在瓊脂平板上呈現(xiàn)出大片圓形的白色或奶油色的菌落。
[0045] 實(shí)施例2
[0046] 利用熱帶假絲酵母DK2菌株制備漆酶的方法：
[0047] (1)熱帶假絲酵母DK2菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0048] 0)在滅菌冷卻后的50ml PDA培養(yǎng)基中，接入步驟（1)所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速 200