人免疫缺陷病毒復(fù)制的抑制劑的制作方法
【專利說明】人免疫缺陷病毒復(fù)制的抑制劑
[0001] 相關(guān)申請的交叉引用 本申請要求2013年3月13日提交的美國臨時專利申請系列號61/780, 179的優(yōu)先權(quán)， 其通過引用整體并入。
【背景技術(shù)】
[0002] 本公開內(nèi)容一般地涉及用于治療人免疫缺陷病毒（HIV)感染的化合物、組合物和 方法。本公開內(nèi)容提供了新穎的HIV抑制劑、含有這樣的化合物的藥物組合物、和在HIV感 染的治療中使用這些化合物的方法。
[0003] 人免疫缺陷病毒（HIV)已被鑒定為引起獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS)的病原，所 述AIDS是一種致命性疾病，其特征是免疫系統(tǒng)的破壞和不能抵抗危及生命的機(jī)會性感染。 最近的統(tǒng)計指示，全球多達(dá)3330萬人感染該病毒（對于Global AIDS Epidemic 2010的 UNAIDS Report)。除了大量已被感染的個體外，該病毒繼續(xù)播散。1998年的估計指出，僅該 年就有接近600萬新感染者。在該年，有大約250萬例死亡與HIV和AIDS有關(guān)。
[0004] 目前有許多抗病毒藥物可用來抵抗感染。基于這些藥物靶向的病毒蛋白和它們的 作用模式，可以將這些藥物分類。具體而言，沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋、奈非那韋、阿扎 那韋、達(dá)蘆那韋、氨普那韋、呋山那韋、洛匹那韋和替拉那韋是HIV表達(dá)的天冬氨酰蛋白酶 的競爭性抑制劑。齊多夫定、去輕肌苷、司他夫定、拉米夫定、扎西他濱、恩曲他濱、替諾福韋 和阿巴卡韋是核苷（酸）逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，它們作為底物模仿物以停止病毒cDNA合成。非 核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑奈韋拉平、地拉韋啶、依法韋侖和依曲韋林通過非競爭性的（或無競 爭性的）機(jī)制抑制病毒cDNA的合成。恩夫韋肽和馬拉韋羅抑制病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。還已 經(jīng)批準(zhǔn)HIV整合酶抑制劑拉替拉韋（MK-0518，Isentress?)用于有治療經(jīng)歷的患者，顯然， 這類抑制劑作為含有不同種類的HIV抑制劑的組合方案的組成部分是非常有效的。
[0005] 單獨(dú)使用的這些藥物可有效地減少病毒復(fù)制：但是，該效果只是暫時的，因?yàn)椴?毒容易產(chǎn)生對所有已知的用作單一療法的藥劑的耐藥性。另一方面，已經(jīng)在許多患者中證 實(shí)聯(lián)合治療非常有效地減少病毒和抑制耐藥性產(chǎn)生。在廣泛可得到聯(lián)合治療的美國，HIV 相關(guān)的死亡的數(shù)量已經(jīng)急劇下降（Palella, F. J. ; Delany, K. M. ; Moorman, A. C.; Loveless, M. 0. ; Furher，J. ; Satten，G. A. ; Aschman，D. J. ; Holmberg，S. D.N. Engl.J.Med.1998,338,853-860) 〇
[0006] 不幸的是，并不是所有的患者都具有響應(yīng)性，并且這種治療對大量的患者無效。事 實(shí)上，初步研究提示，抑制組合中的至少一種藥物最終對大約30-50%的患者無效。在大多 數(shù)情況下，治療無效由病毒耐藥性的產(chǎn)生造成。病毒耐藥性又由感染過程中HIV-1的復(fù)制 速率以及與病毒聚合酶有關(guān)的相對較高病毒突變率和HIV感染的個體不能堅持施用他們 的處方藥物造成。顯然，需要新抗病毒劑，優(yōu)選地其具有針對病毒的活性，所述病毒已經(jīng)耐 受目前批準(zhǔn)的藥物。其它重要的因素包括改善的安全性和比許多目前批準(zhǔn)的藥物更方便的 定量施用方案。
[0007] 已經(jīng)公開了抑制HIV復(fù)制的化合物。參見W02007131350、W02009062285、 W02009062288、 W02009062289、 W02009062308、 W02010130034、 W02010130842、 TO2011015641、TO2011076765、TO2012003497、TO2012003498、TO2012033735、TO2012065963 和 TO2012066442。
[0008] 本發(fā)明提供了技術(shù)優(yōu)點(diǎn)，例如，所述化合物是新的且可用于治療HIV。此外，所述化 合物提供了藥學(xué)用途的優(yōu)點(diǎn)，例如，關(guān)于它們的作用機(jī)理、結(jié)合、抑制效力、靶標(biāo)選擇性、溶 解度、安全性或者生物利用度中的一種或多種。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明包括式I的化合物(包括藥學(xué)上可接受的鹽)、它們的藥物組合物以及它們 在抑制HIV整合酶和治療被HIV或AIDS感染的患者中的用途。
[0010] 本發(fā)明的一個方面是式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中：
R1 是-C0N(R 7) (Rs)、-NHS0R7或（R 7)Ar2 R2是氛或烷基； R3是氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高嗎啉基， 且被〇_3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、稀 基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基； 或者R3是環(huán)烷基、環(huán)烯基、色滿基、噁嗪基或二氫吡喃并喹啉基，且被0-3個取代基取 代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、燒氧 基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基； R4是烷基或鹵代烷基； R5是氫或烷基； R6是氛或烷基； R7是（Ar 4烷基； R8是氛或烷基； Ar1是被0-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵素、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧 基、鹵代烷氧基和稀氧基；且 Ar2是吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、異噁唑基、異噻唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、 三唑基、噁二唑基或噻二唑基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、氰基、烷基、 鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基和稀氧基。
[0011] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1是-CONGO (R s) ;R2是氫或烷基；R3是氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌 嗪基或高嗎啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷 基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基；或R3是環(huán)烷基、環(huán) 烯基、色滿基、噁嗪基或二氫吡喃并喹啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、 烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和 苯基；R 4是烷基或鹵代烷基；R5是氫或烷基；R6是氫或烷基；R 7是（Ar 4烷基；R8是氫或烷 基；且Ar1是被0-3個取代基取代的苯基，所述取代基選自鹵素、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧 基、鹵代烷氧基和稀氧基。
[0012] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R1是-CONGO (R s) ;R2是氫；R3是氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或 高嗎啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧 基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基；或R 3是環(huán)烷基、環(huán)烯基、色 滿基、噁嗪基或二氫吡喃并喹啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵 代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基；R 4 是烷基或鹵代烷基；R5是烷基；R6是氫；R7是（Ar 4烷基；R8是氫；且Ar 1是被0-3個取代基 取代的苯基，所述取代基選自鹵素、氛基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基和稀氧基。
[0013] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R2是氫，R4是烷基，R 5是烷基，且R 6是 氫。
[0014] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R3是氮雜環(huán)丁基、吡咯烷基、哌啶基、 哌嗪基、嗎啉基、高哌啶基、高哌嗪基或高嗎啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自 鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀 氧基和苯基。
[0015] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R3是被0-3個取代基取代的哌啶基， 所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、 鹵代烷氧基、稀氧基和苯基。
[0016] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R3是環(huán)烷基、環(huán)烯基、色滿基、噁嗪基 或二氫吡喃并喹啉基，且被0-3個取代基取代，所述取代基選自鹵素、烷基、鹵代烷基、羥基 烷基、烷氧基烷基、烯基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、鹵代烷氧基、稀氧基和苯基。
[0017] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R4是烷基。
[0018] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R5是烷基。
[0019] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物，其中R7是（Ar ^(^且R8是氫。
[0020] 對于式I的化合物，可變?nèi)〈?包括R1、R2、R3、R4、R 5、R6、R7、R8、Ar1和Ar 2)的任 何例子的范圍可以獨(dú)立于可變?nèi)〈娜魏纹渌拥姆秶鷣硎褂?。這樣，本發(fā)明包括不 同方面的組合。
[0021] 除非另有說明，這些術(shù)語具有下述含義。"烷基"是指由1-6個碳組成的直鏈或支 鏈烷基。"烯基"是指具有至少一個雙鍵的、由2-6個碳組成的直鏈或支鏈烷基。"亞烷基" 是指由1-6個碳組成的直鏈或支鏈二價烷基。"亞烯基"是指由2-6個碳組成的、含有至少 一個雙鍵的直鏈或支鏈二價烯烴基。"環(huán)烷基"是指由3-7個碳組成的單環(huán)系。具有取代的 烷基部分的"羥基烷基"、"烷氧基"和其它術(shù)語包括其烷基部分由1-6個碳原子組成的直鏈 和支鏈異構(gòu)體。"鹵代"包括氟代、氯代、溴代和碘代。"鹵代"包括在用鹵代定義的取代基 (例如，"鹵代烷基"和"鹵代烷氧基"、"鹵代苯基"、"鹵代苯氧基"）中從單鹵代至全鹵代的所 有鹵代異構(gòu)體。"芳基"包括碳環(huán)和雜環(huán)芳族取代基。通過化學(xué)繪圖圖解成鍵合在多環(huán)系 (例如二環(huán)系）的可變位置處的取代基意圖鍵合至它們被繪制成所連接的環(huán)。帶括號的和 帶多層括號的術(shù)語意圖為本領(lǐng)域技術(shù)人員澄清鍵合關(guān)系。例如，諸如（(R)烷基）的術(shù)語是 指被取代基R進(jìn)一步取代的烷基取代基。
[0022] 本發(fā)明包括所述化合物的所有藥學(xué)上可接受的鹽形式。藥學(xué)上可接受的鹽是這樣 的鹽：其中抗衡離子不會對化合物的生理活性或毒性顯著地做出貢獻(xiàn)且由此起藥理學(xué)上等 價物的作用。這些鹽可以根據(jù)常規(guī)有機(jī)技術(shù)采用商購可得的試劑來制備。一些陰離子鹽 形式包括乙酸鹽、醋硬脂酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物、氯化物、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖醛酸 鹽（glucouronate)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氫碘酸鹽、碘化物、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽、硝 酸鹽、撲酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和昔萘酸鹽（xinofoate)。 一些陽離子鹽形式包括銨、錯、節(jié)星青霉素、祕、媽、膽堿、二乙胺、二乙醇胺、鋰、鎂、葡甲胺、 4-苯基環(huán)己胺、哌嗪、鉀、鈉、氨丁三醇和鋅。
[0023] 本發(fā)明的一些化合物以立體異構(gòu)形式存在。本發(fā)明包括所述化合物的所有立體異 構(gòu)形式，包括對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體。制備和分離立體異構(gòu)體的方法是本領(lǐng)域已知的。 本發(fā)明包括所述化合物的所有互變異構(gòu)形式。本發(fā)明包括阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體。
[0024] 本發(fā)明意圖包括在本發(fā)明化合物中出現(xiàn)的原子的所有同位素。同位素包括具有相 同原子數(shù)但不同質(zhì)量數(shù)的那些原子。作為一般性的例子而不是限制，氫的同位素包括氘和 氚。碳的同位素包括 13c和14C。通常通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)，或通過類似于 本文描述的那些的方法，使用適當(dāng)?shù)耐凰貥?biāo)記的試劑代替否則會采用的未標(biāo)記的試劑， 可以制備同位素標(biāo)記的本發(fā)明的化合物。這樣的化合物可以具有多種潛在用途，例如在生 物學(xué)活性的確定中作為標(biāo)準(zhǔn)品和試劑。在穩(wěn)定同位素的情況下，這樣的化合物可能具有有 利地調(diào)節(jié)生物學(xué)、藥理學(xué)或者藥物動力學(xué)性質(zhì)的潛力。
[0025]牛物學(xué)方法 龍"#你##構(gòu)建重組NL-Rluc病毒，其中來自NL4-3的nef基因的一部分被 你wiWa螢光素酶基因替換。通過共轉(zhuǎn)染兩種質(zhì)粒pNLRLuc和pVSVenv，制備NL-RLuc病毒。 pNLRLuc含有克隆進(jìn)pUC18的/Vyll位點(diǎn)處的NL-Rluc DNA，而pVSVenv含有連接到LTR啟動 子的VSVG蛋白的基因。根據(jù)生產(chǎn)商，用得自Invitrogen (Carlsbad, CA)的LipofectAMINE PLUS試劑盒，以1:3的pNLRLuc與pVSVenv的比例在293T細(xì)胞中進(jìn)行轉(zhuǎn)染，并且將產(chǎn)生的 假型病毒在MT-2細(xì)胞中滴定（titered)。對于敏感性分析，在有化合物存在下使用滴定的 病毒感染MT-2細(xì)胞，且在溫育5天以后，處理細(xì)胞，并通過表達(dá)的螢光素酶的量定量病毒生 長。這會提供一種簡單且容易的定量病毒生長程度并從而定量試驗(yàn)化合物的抗病毒活性的 方法。使用得自Promega (Madison, WI)的Dual Luciferase試劑盒，定量螢光素酶。
[0026] 通過在有化合物的系列稀釋物存在下溫育，確定病毒對化合物的敏感性。通過使 用指數(shù)形式的中間效應(yīng)方程式，計算50%有效濃度（EC50)，其中（Fa) = 1/[1+ (ED50/藥 物濃度）m] (Johnson VA, Byington RT. Infectivity Assay. InTechniques in HIV TfesearcA. Aldovini A, Walker BD編? 71-76. New York: Stockton Press. 1990)。在3 種血清條件（10%FBS、15mg/ml人血清白蛋白/10%FBS或40%人血清/5%FBS)下評價化合物 的抗病毒活性，使用得自至少2個實(shí)驗(yàn)的結(jié)果計算EC 5。值。結(jié)果顯示在表1中。等于A的 活性表示具有EC5。彡100 nM的化合物，而B和C表示具有EC 5。在100 nM至luM之間（B) 或EC5Q>luM (C)的化合物。
[0027]表1.
[0028] 藥物組合物和伸用方法
本發(fā)明的化合物抑制HIV復(fù)制。因此，本發(fā)明的另一個方面是一種用于治療人患者中 的HIV感染的方法，所述方法包括：與藥學(xué)上可接受的載體一起施用治療有效量的式I的化 合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
[0029] 本發(fā)明的另一個方面是式I的化合物在藥物制備中的用途，所述藥物用于治療 AIDS或HIV感染。
[0030] 本發(fā)明的另一個方面是一種用于治療人患者中的HIV感染的方法，所述方法包 括：施用治療有效量的式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及治療有效量的至少一種用 于治療AIDS或HIV感染的其它藥劑，所述其它藥劑選自：核苷HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷 HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、HIV融合抑制劑、HIV附著抑制劑、CCR5抑制劑、 CXCR4抑制劑、HIV出芽或成熟抑制劑和H