唑并[l，2-a]吡啶-6-基）乙酸?.將⑶_2_(叔丁氧 基）-2- (2- (4-氯-5- (4-氟芐基）-1H-咪唑-2-基）-5- (4, 4-二甲基哌啶-1-基）-7-甲 基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基）乙酸-甲酯（40 mg，0? 067 mmol, 1當量）、TsOH -水合 物（15 mg, 0.081 mmol, 1.2 當量）和 10%Pd/C (14 mg, 0.013 mmol, 0.2 當量）在 MeOH (1.3 mL)中的溶液在氫氣艙下攪拌6天。將反應物穿過硅藻土過濾，用MeOH洗脫。在真 空中濃縮濾液。將粗制的咪唑溶解于MeOH (1 mL)和水（數(shù)滴）中。加入LiOH -水合物 (84 mg，2.01 mmol，30當量），并將反應物在60°C加熱2 h。冷卻至環(huán)境溫度后，將反應 物過濾并用以下條件通過制備型LC/MS純化：柱：XBridge C18, 19 x mm, 5-ym顆粒；流 動相A :含有10-mM乙酸銨的5:95乙腈：水；流動相B :含有10-mM乙酸銨的95:5乙腈： 水；梯度：40-100%B歷時20分鐘，然后在100%B保持5-分鐘；流速：20 mL/min，得到產(chǎn)物 (4.4 mg, 11%)〇^ NMR (500 MHz, DMSO-^) 8 8. 03 - 7.91 (m, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 7.16 - 7.04 (m, 3H), 6.79 - 6.70 (m, 1H), 5.62 - 5.43 (m, 1H), 3.89 - 3.84 (m, 2H), 3.67 - 3.52 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.63 - 1.34 (m, 4H), 1.14 (s, 9H), 1.12 (br. s.，3H), 1.03 (s, 3H);LCMS (ESI, M+l): 548.4。
[0099] 中間體14
襲基-務供基《-7-供廢波7￥彥：在隊氣氛下，將3N的甲基溴化鎂在乙醚中的 溶液（1. 67 mL，5. 02 mmol)逐滴加入冷卻的（_25°C ) 4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁 酯（4g，20. 08 mmol)在乙醚（20 mL)中的溶液。將反應混合物溫熱至室溫，并攪拌2 h。然 后將它冷卻至〇°C，并通過加入飽和氯化銨水溶液進行淬滅。加入另外20 mL乙醚，并將混 合物在分液漏斗中分離。將有機相放在一邊，并將水相用另外20 mL乙醚萃取。將合并的乙 醚萃取物經(jīng)MgS04干燥、過濾并蒸發(fā)，得到油，然后將其通過biotage純化，用0-50%Et0Ac/ 己烷洗脫，得到作為無色油的4-羥基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯（4. 30 g，18. 0 mmol， 90%)。蟲 NMR (400MHz，CDC13) S 3. 84 - 3. 65 (m，2H)，3. 34 - 3. 18 (m，2H)，2. 59 -2.39 (m，1H)，1.61 - 1.53 (m，4H)，1.50 - 1.45 (m，9H)，1.32 - 1.27 (m，3H)〇
[0100] 中間體15
4-(烯丙氧基）-4-甲基哌啶-l-甲酸叔丁醋?.在努基-A~巧基乘巧酸叔丁酯（4.30 g, 20.0 mmol)在DMF (50 mL)中的混合物中加入NaH (60重量％) (1.60 g，39.9 mmol)。然后將混合物在室溫攪拌2h。在此時，歷時5 min緩慢地加入烯丙基溴 (8. 64 mL，100 mmol)。將反應混合物在室溫攪拌3h。然后將它冷卻至0°C，并用飽和氯 化銨水溶液淬滅。將反應混合物用乙醚萃取。將有機相經(jīng)MgS0 4干燥、過濾并濃縮，得到無 色油，然后將其通過biotage純化，用0-25%Et0Ac/己燒洗脫，分離出3. 1 g (61%)作為無 色油的4-(烯丙氧基）-4_甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯。^NMR (500 MHz，CDC13) S 6. 02 -5.90 (m, 1H), 5.32 (dd, J=17. 2, 1. 7 Hz, 1H), 5.16 (dd, J=10.4, 1.4 Hz, 1H), 3.94 - 3.88 (m, 2H), 3.73 (br. s. , 2H), 3.19 (br. s. , 2H), 1.78 (d, J=13. 1 Hz, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 11H), 1.21 (s, 3H)〇
[0101] 中間體16
廣琢氧基」-務供基?窗眾盡盤：將4-(烯丙氧基）-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁 酯（3. 10 g, 12. 1 mmol)和 4N HC1/二噁烷（15 mL, 60. 0 mmol)的混合物在室溫攪拌 3h。 然后將它在真空中濃縮，得到2.2 g (95%)作為淺棕色固體的4-(烯丙氧基）-4_甲基哌啶 鹽酸鹽。1H NMR (500 MHz, CD30D) S 6.02 - 5.92 (m，1H)，5.33 (dd，J=17.2，1.7 Hz, 1H), 5.15 (dd, J=10.6, 1.7 Hz, 1H), 3.96 (dt, J=5. 1, 1.6 Hz, 2H), 3.23 -3.18 (m, 4H), 2.06 (dd, J=15. 3, 2.5 Hz, 2H), 1.77 - 1.69 (m, 2H), 1.31 - 1.28 (s，3H)。通過將HC1鹽與Na2C03水溶液一起攪拌并用DCM萃取，得到游離堿（棕色固體）。
[0102] 中間體17
6_氨基-2-氯-4-甲基煙酸叔丁酯。將2, 6-二氯-4-甲基煙酸叔丁酯（10. 5 g，40. 1 mmol, 1 當量）、Pd2(dba)3 (1. 84 g, 2. 01 mmol, 0? 05 當量）、4, 5_雙（二苯基勝）_9, 9_二 甲基氧雜蒽（xantphos)(2.32 g, 4.01 mmol, 0? 1當量）和Cs2C03在二噁燒（通過用氮氣 在其中鼓泡10 min進行除氧）中制衆(zhòng)，并加入。加入二苯甲酮亞胺（8.0 mL, 48. 1 mmol, 1.2當量），并將混合物在90°C加熱1 h。冷卻至環(huán)境溫度后，將反應物用EtOAc稀釋，并用 水洗滌、干燥（Na2S04)，并在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物溶解于MeOH (200 mL)和NaOAc (9.87， 120 mmol,當量）中，并加入鹽酸羥胺（5.57 g，80 mmol, 2當量）。30 min以后，將反應 物加入1 N NaOH中，并用DCM (x2)萃取。將合并的DCM萃取物干燥（Na2S04)并在真空中濃 縮。將粗廣物通過快速柱色譜法（0 _30%Et0Ac/己燒）純化，得到6-氨基_2_氯_4_甲基煙 酸叔丁酯（7.5 g, 77%)。4 NMR (400 MHz, CDC13) S 6.22 (d, /= 0.8 Hz, 1H), 4.58 (br. s.，2H), 2.27 (d, /= 0.8 Hz, 3H), 1.60 (s, 9H);LCMS (ESI, M+l): 243.1。
[0103] 中間體18
5_氯-7-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2, 6-二甲酸6-叔丁酯2-乙酯。將6-氨 基-2-氯-4-甲基煙酸叔丁酯（9. 4 g, 38. 7 mmol, 1當量）和溴代丙酮酸乙酯（6. 5 mL, 46.5 mmol，1.2當量）在EtOH (194 mL)中的溶液加熱至回流保持2 h。冷卻至環(huán)境溫度 后，在真空中濃縮溶液。將殘余物在乙醚中研磨并過濾，得到作為奶油色固體的產(chǎn)物（11.4 g，70%)。LCMS (ESI, M+1): 339.1。
[0104] 中間體19
5-氯-2-(乙氧基羰基）-7-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-甲酸。將5-氯-7-甲基咪 唑并[1，2-a]吡啶-2, 6-二甲酸6-叔丁酯2-乙酯（11. 4 g，27. 2 mmol, 1當量）用TFA (100 mL)處理并攪拌2 h。結(jié)束后，將反應物在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物在乙醚中研磨并過 濾，得到作為奶油色固體的產(chǎn)物（10. 8 g，100%)。LCMS (ESI, M+1): 283. 1。
[0105] 中間體20
5-氯-6-(2-甲氧基-2-氧代乙?；?7_甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-甲酸乙酯。向 5-氯_2_(乙氧基羰基）-7_甲基咪唑并[l，2-a]吡啶-6-甲酸（0.46g，1.623，1當量） 和1_(氰基甲基）四氫-1H-噻吩-1-鑰，溴化物鹽（0? 47 g，2. 27 mmol，1. 4當量）在 DCM (16 mL)中的漿中加入 DIPEA (1.13 mL, 6.49 mmol, 4 當量），然后加入 HATU (0.86 g，2. 27 mmol，1.4當量）。2 h以后，加入更多的1-(氰基甲基）四氫-1H-噻吩-1-鑰， 溴化物鹽（0. 20 g)和DIPEA (0. 5 mL)。攪拌18 h以后，將反應物加入飽和NaHCCVK溶液， 并用DCM (x2)萃取。將合并的DCM萃取物干燥（Na2S04)并在真空中濃縮。將粗制的硫葉立 德溶解于MeOH (16 mL)中，并加入過一硫酸氫鉀復合鹽（2.4 g，3. 90 mmol, 2. 4當量）在 水（5 mL)中的溶液。2天后，加入更多的過一硫酸氫鉀復合鹽（2.4 g, 3. 90 mmol, 2. 4當 量）。6 h后，將反應物小心地加入飽和NaHC03水溶液，并用DCM (x3)萃取。將合并的DCM 萃取物干燥（Na2S04)并在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物通過快速柱色譜法（20-100%Et0Ac/己烷） 純化，得到作為粘稠黃色油的產(chǎn)物（0.40，76%)。^NMR (500 MHz，CDC13) S 8.37 (d， /= 0.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 4.51 (q, / = 7. 2 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 2.40 (d, /= 1.1 Hz, 3H), 1.47 (t, /= 7.2 Hz, 3H) ;LCMS (ESI, M+l): 325.05。
[0106] 中間體21
5_(4-(烯丙氧基）-4-甲基哌啶-1-基）-6-(2-甲氧基-2-氧代乙?；?7-甲基咪禮# M之-"尬穿-之__Z磨：將5-氯-6-(2-甲氧基-2-氧代乙酰基）-7-甲基咪唑 并[1,2-a]吡啶-2-甲酸乙酯（0.75 g, 2.31 mmol, 1當量）、4_稀丙氧基-4-甲基哌啶， HC1 (0.66 g，3.46 mmol, 1.5 當量）和 DIPEA (1.21 mL, 6.93 mmol, 3 當量）在 DMF (11.5 mL)中的溶液攪拌1 h。然后將反應物加入飽和NaHCCVK溶液中，并用EtOAc (x2) 萃取。將合并的EtOAc萃取物干燥（Na2S04)并在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠快速色 譜法（0_100%Et0Ac [2%TEA]/己烷）純化，得到產(chǎn)物（0.85 g, 83%)。LCMS (ESI, M+1): 444. 25 〇
[0107] 中間體22
(S)-5-(4-(烯丙氧基）-4_甲基哌啶-1-基）-6-(1_羥基-2-甲氧基-2-氧代乙 基）-7_甲基咪唑并[l，2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯?.向5-(4-(烯丙氧基）-4-甲基哌 啶-1-基）-6_(2_甲氧基-2-氧代乙?；?7_甲基咪唑并[l，2-a]吡啶-2-甲酸乙酯（0. 86 g，1.94 mmol，1當量）在甲苯（19 mL)中的攪拌黃色溶液中加入（R)-1-甲基-3, 3-二苯 基六氫啦略并[1，2-c] [1，3, 2]氧雜氮雜硼雜環(huán)戊二稀/甲苯（0. 54 g, 1. 94 mmol, 1當 量）。將反應物冷卻至-40°C (乙腈/干冰浴），并歷時10 min加入50%兒茶酚硼烷在甲苯 (0.93 mL，3.88 mmol，2當量）中的溶液。將反應混合物在-15°C攪拌2 h。結(jié)束后，將 反應物用EtOAc (30 mL)和飽和NaHC03 (10 mL)稀釋。將混合物劇烈攪拌30 min。將有 機相用飽和NaHC03水溶液（2 X 5 mL)洗滌，干燥（Na2S04)，并在真空中濃縮。將粗產(chǎn)物通 過硅膠色譜法（0-10%Me0H/DCM)純化，得到作為灰白色固體的期望產(chǎn)物（0. 86 g，100%)。 LCMS (ESI, M+1): 446.25。
[0108] 中間體23
(S)-5-(4-(烯丙氧基）-4_甲基m哫-1-基）-6-(1-(叔」氧基）-2-甲氧基-2-氧 代乙基）-7-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-甲酸-乙酯二畀基歌 啶-1-基）-6-(1-羥基-2-甲氧基-2-氧代乙基）-7-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-甲酸-乙 酯（1.3 g, 3.22 mmol, 1當量）懸浮于DCM (3 mL)和乙酸叔丁酯（10 mL)中。穿過密封 的橡膠塞，向該混合物中加入70%HC104 (0 . 831 mL，9. 67 mmol, 3當量）。2 h以后，LCMS 指示約60%轉(zhuǎn)化率。將反應物用1 N NaOH洗滌，干燥（Na2S04)，并在真空中濃縮。將粗產(chǎn) 物通過硅膠快速色譜法（0-100%Et0Ac [2%TEA]/己烷）純化，得到產(chǎn)物（0. 68 g，46%)。4 NMR (400 MHz, CDC13) S 8.22 (d，/= 0.8 Hz, 1H)，7.31 (s，1H)，6.02 (s，1H)， 4.47 (q, /= 7. 2 Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.60 (td, /= 11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.49 (td,J=11.5, 2.6 Hz, 1H), 3.10 (dt,J=11.9, 3.5 Hz, 1H), 2.95 - 2.86 (m, 1H), 2.44 (d, /= 1.0 Hz, 3H), 1.73 - 1.48 (m, 7H), 1.45 (t, / = 7.0 Hz, 4H), 1.24 (s, 10H), 1.15 (s, 3H), 1.08 (s, 3H);LCMS (ESI, M+l): 502.35。
[0109] 中間體24
(5)-5-(4-(烯丙氧基）-4-甲基哌啶-1-基）-6-(1-(叔丁氧基）-2-甲氧基-2-氧 代乙基）-7-甲基咪唑并[l，2-a]吡啶-2-甲酸鈉鹽.M 偽W擊MW巧基 哌啶-1-基）-6-(1-(叔丁氧基）-2_甲氧基-2-氧代乙基）-7_甲基咪唑并[l，2-a]吡 啶-2-甲酸-乙酯（450 mg，0.923 mmol, 1當量）溶解在MeOH (9 mL)中。向該溶液 中加入1