一種靈芝果酒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種靈芝果酒及其制備方法，該工藝涉及生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】，以玉米、小麥和大米為主要原料采用固體發(fā)酵技術(shù)和釀酒工藝制得靈芝酒。玉米和小麥浸泡，使含水率達(dá)到40～80%，滅菌后接入5～30%靈芝種子液，用保鮮膜密封發(fā)酵，加入30~70%靈芝發(fā)酵物重量的大米煮成的米飯，和大米重量1~5%的酒曲，2~5倍的水，經(jīng)過10~30℃，10~50天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。該酒酒精度8~30%，靈芝三萜含量50～500mg/L，蛋白質(zhì)60～500mg/L，還原糖<2.0%，多糖100~800mg/L，色質(zhì)米黃色至褐色。該靈芝果酒，具有保護(hù)肝臟和抗氧化等功效。
【專利說明】一種靈芝果酒及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】，特指利用大米、玉米、小麥為主要原料，以靈芝為菌種，采用固體發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)靈芝果酒的方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]靈芝XGanoderma又稱紅芝、木靈芝、靈芝草,在分類學(xué)上屬于真菌界、擔(dān)子菌亞門、多孔菌目、多孔菌科、靈芝屬。靈芝是一種非常珍貴的藥用真菌，是中國醫(yī)藥寶庫中的精品。靈芝自古以來就有“仙草”之稱，不但可以治療多種疾病，而且具有滋補強體、扶正固本、有利于機體保持或恢復(fù)穩(wěn)態(tài)等功效，備受人們青睞。靈芝菌蓋木栓質(zhì)，腎形，紅褐、紅紫、或者暗紫色，具有漆狀光澤，有換裝棱紋和輻射狀皺紋，大小和形態(tài)變化很大。菌柄側(cè)生，極少偏生，長于菌蓋直徑，紅褐色，有光澤。靈芝喜高溫高濕，強散射光，通氣良好的環(huán)境,多生長在闊葉樹的木樁旁、枯樹根和倒木上,夏秋雨季后生長旺盛。靈芝性溫,味甘，具有益精氣，強筋骨等藥用功能。人工培植的靈芝約50~60天子實體成熟。公元前300年左右的《禮記》，記載有“食所加庶，羞有芝柄”。公元前239年《呂氏春秋》有這樣的記載“和之美者，越駱之菌”?？梢娢覈淖嫦群茉缇烷_始服食靈芝。關(guān)于靈芝，很多古代文獻(xiàn)也提及它可以作為一種食品服用。陶弘景曾指出:“凡得芝草，便正爾食之，無余節(jié)度，故皆不云服法也?！崩顣r珍亦指出:“昔四酷采芝，群仙服食，則芝亦菌屬可食者，故移入菜部”。這些都是在我國歷史上靈芝藥食兩用的記載。
[0003]靈芝具有生理活性的成分主要有生物堿類、多糖類、氨基酸、三萜類、有機鍺微量元素及核苷酸類。靈芝能治療神經(jīng)衰弱、支氣管哮喘、頭暈、失眠和心悸等疾病，對腎盂腎炎、胃病、十二指腸潰瘍、高血壓、慢性肝炎、冠心病、白血球減少、高血清膽固醇以及癌癥有不同程度的療效，且無副作用。
[0004]國內(nèi)關(guān)于靈芝酒有部分研究和報道，已經(jīng)申請發(fā)明專利二十多項，這些專利基本上采用浸泡、用靈芝提取液勾兌或者液體發(fā)酵為主獲得的靈芝酒。如李中、何金興公開了用紅靈芝或紅靈芝提取液，甜靈芝或用包`覆劑除苦味的紅靈芝提取液、甜靈芝提取液、甜菊糖和用水、白糖、檸檬酸煉成的糖漿按勾兌酒基得到靈芝酒(專利號92107554.5);鄧鳳翔公開了將靈芝等補藥用酒進(jìn)行多次浸提后，再用水煎煮，將浸泡用的酒和煎煮汁混合制得補養(yǎng)酒液，再經(jīng)調(diào)制過濾、貯存得到具有美容、養(yǎng)生、保健功效的靈芝酒(93117937.8);馮選凹介紹了用優(yōu)質(zhì)高粱酒作基酒，并配有靈芝提取液，將靈芝子實體置于加入了靈芝提取液的高粱酒中進(jìn)行泡制得到靈芝酒的方法(94106761.0);田希文公開了利用紅高梁、糯米、靈芝菌絲體及酵母混合發(fā)酵得到靈芝酒的方法(93111978.2)等等，用這些方法獲得靈芝酒成本較高、生產(chǎn)周期長或者產(chǎn)生較多的廢水污染。嚴(yán)重制約著靈芝酒的發(fā)展。
[0005]固態(tài)發(fā)酵是微生物在沒有或基本沒有游離水的固態(tài)基質(zhì)上的發(fā)酵方式，固態(tài)基質(zhì)中氣、液、固三相并存，即多孔性的固態(tài)基質(zhì)中含有水和水不溶性物質(zhì)同。水分活度低，基質(zhì)水不溶性高，微生物易生長，酶活力高，酶系豐富；由于發(fā)酵過程中沒有或有少量的自由水，因此基質(zhì)抑制或者產(chǎn)物抑制現(xiàn)象很少發(fā)生，因此代謝產(chǎn)物濃度較高；發(fā)酵過程粗放，不需嚴(yán)格無菌條件；設(shè)備構(gòu)造簡單、投資少、能耗低、易操作；后處理簡便、污染少，基本無廢水排放。
[0006]因此本專利采用固態(tài)發(fā)酵技術(shù)，以玉米和小麥為基質(zhì)繁殖靈芝菌絲體獲得含有靈芝多糖和靈芝三萜的發(fā)酵物，該發(fā)酵物與大米米飯、酒曲混合制得靈芝酒，該靈芝酒由于含有靈芝三萜和靈芝多糖等活性物質(zhì)，因此該酒具有保肝、抗氧化、增強肌體免疫之功效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供的是一種靈芝果酒的釀制技術(shù)，以小麥、玉米和大米為主要原料，利用靈芝采用固體好氧發(fā)酵技術(shù)，酒精發(fā)酵技術(shù)相結(jié)合，經(jīng)過兩次菌種發(fā)酵獲得的發(fā)酵液，該發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。
[0008]靈芝果酒，該酒該酒酒精度8-30% (質(zhì)量/體積m/V)，靈芝三萜含量50_500mg/L，蛋白質(zhì)60-500mg/L，還原糖〈2.0%，靈芝多糖100_800mg/L。
[0009]本發(fā)明的目的在于提供一種靈芝果酒的制備方法，按下述步驟制備得到:
(1)液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20~100克，黃豆餅粉10~50克，玉米漿10~50克，麩皮10~60克，磷酸二氫鉀0.06~0.6克，硫酸鎂0.05~0.5克，水1000mL,分裝250mL三角瓶，每瓶40~150mL，100~130°C滅菌10~60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種，在轉(zhuǎn)速60~180轉(zhuǎn)/分鐘，溫度22~33°C培養(yǎng)5~10天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
(2)液體擴(kuò)大培養(yǎng)菌種的制備:根據(jù)種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20~100克，黃豆餅粉10~50克，玉米漿10~50克，麩皮10~60克，磷酸二氫鉀0.06~0.6克，硫酸鎂0.05~0.5克，豆油2~7克，水1000mL ;液體深層培養(yǎng)培養(yǎng)基按罐體積50~80%轉(zhuǎn)入種子罐，經(jīng)過100~120°C滅菌，冷卻至室溫，以3~10% (體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22~33°C， 罐壓0.03~0.08兆帕，攪拌轉(zhuǎn)速60~250轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1:0.3~1:1.2 (v/v/m)培養(yǎng)3~8天，制得靈芝液體深層培養(yǎng)菌種；
(3)靈芝固態(tài)發(fā)酵:玉米和小麥按照1:0.5~4 (重量/重量)的比例混合均勻，用水浸泡使含水率達(dá)到40~80%(重量百分含量)，110~150°C滅菌10~60分鐘，冷卻到室溫后，以5~20% (體積與重量比)接種量接入靈芝的液體深層培養(yǎng)的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22~33°C，濕度55~90%培養(yǎng)5~20天獲得靈芝發(fā)酵物；
(4)靈芝果酒的釀造:稱取靈芝發(fā)酵物重量，按30- 70% (重量比)稱取大米，加與大米等重量的水煮成米飯，冷卻后與靈芝發(fā)酵物、大米重量的I~5%的酒曲，大米重量2 — 5倍的水，混合均與，經(jīng)過10 - 30°C,10~50天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。用該工藝生產(chǎn)的靈芝果酒，其特征在于色質(zhì)米黃色至褐色，具有濃郁的果香味和靈芝發(fā)酵的特有香味。
[0010]許多研究都已研究證明靈芝三萜具有保護(hù)肝臟功能(Su CH, Lain麗，ChanMH.Hepato-protective trit erpenoids from Ganoderma Tsugae Murri11.MushroomBiology and Mushroom Products.Hongkong: The Chinese University Press, 1993，275~283;王明宇，林志彬:靈芝三萜類成分在體內(nèi)外對小鼠免疫性肝損傷的影響.中國藥學(xué)雜志2000，35(12)，809-812)，靈芝多糖能夠抗氧化(張志軍；李淑芳；魏雪生；陳曉明.靈芝多糖體外抗氧化活性的研究；楊紅梅；王黎；陳潔；李宜培；裴瑞；.靈芝多糖肽對Alzheimer樣大鼠海馬超微結(jié)構(gòu)和抗氧化能力的影響.中國老年學(xué)雜志，2009, 29(18):2351-2353)，因此本發(fā)明提供的靈芝果酒具有保護(hù)肝臟和抗氧化等功效?！揪唧w實施方式】
[0011]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步闡述:
其中所述的靈芝果酒功能性成分按下列方法測定:
蛋白質(zhì)含量測定采用考馬斯亮藍(lán)(陳建勛、王曉峰:植物生理學(xué)實驗指導(dǎo).實驗19 --考馬斯亮藍(lán)G-250法測定蛋白質(zhì)含量.華南理工大學(xué)出版社p54~55);靈芝三萜測定采用紫外分光光度法(王翔飛，潘旭東，劉雯霞，等.黃花瓦松中總?cè)瞥煞值暮康臏y定.中國民族民間醫(yī)藥，2009，18(10):11)。多糖含量的測定采用硫酸一苯酚法(趙陽楠，常繼東.苯酚硫酸法和間接碘量法測定靈芝多糖含量比較[J].食用菌，2007，(3): 58-61.)，還原糖含量測定采用3，5 —二硝基水楊酸法。
[0012]本發(fā)明中實施例1~3中所使用的靈芝菌種為可以購買到的任意一種靈芝菌種，包括:赤芝、紫芝、樹舌等多種靈芝菌種。玉米漿為市售任意廠家生產(chǎn)，但是其蛋白質(zhì)含量不低于37%。所采用的酒曲為黃酒酒曲或白酒酒曲的任意一種酒曲；靈芝斜面菌種采用PDA培養(yǎng)基制備。1000mLPDA培養(yǎng)基含200g馬鈴薯提取液(去皮馬鈴薯切成碎片、1000mL蒸餾水煮沸30分鐘，八層紗布過濾，濾液定容至1000mL,濾液即為馬鈴薯提取液)加入蔗糖20g、瓊脂20g，煮沸待瓊脂完全溶化后分裝試管，塞上棉塞，121°C滅菌，制成斜面。無菌接種靈芝菌種，30°C培養(yǎng)7天，4V冷藏待用。
[0013]實施例1
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20克，黃豆餅粉50克，玉米漿50克，麩皮60克，磷酸二氫鉀0.6克，硫酸鎂0. 5克，水1000mL,分裝250mL三角瓶，每瓶40mL，100°C滅菌60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma在轉(zhuǎn)速60轉(zhuǎn)/分鐘,溫度22°C培養(yǎng)10
天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
液體擴(kuò)大培養(yǎng)菌種的制備:根據(jù)種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖100克，黃豆餅粉10克，玉米漿10克，麩皮10克，磷酸二氫鉀0.6克，硫酸鎂0.5克，豆油7克，水1000mL ;液體深層培養(yǎng)培養(yǎng)基按罐體積50%轉(zhuǎn)入種子罐，經(jīng)過100°C滅菌，冷卻至室溫，以10% (體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22°C，罐壓0.03兆帕，攪拌轉(zhuǎn)速70轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1:0.3v/v/m培養(yǎng)8天,制得靈芝液體深層培養(yǎng)菌種；
靈芝固態(tài)發(fā)酵:玉米與小麥按1:0.5 (重量比)混合均勻，用水浸泡使含水率達(dá)到45%，110°C滅菌60分鐘，冷卻到室溫后，以20% (體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養(yǎng)的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度32°C，濕度90%培養(yǎng)20天獲得靈芝發(fā)酵發(fā)酵物；
靈芝果酒的釀造:稱取靈芝發(fā)酵物重量，按30% (重量比)稱取大米，加與大米等重量的水煮成米飯，冷卻后與靈芝發(fā)酵物、大米重量的1.5%的酒曲，大米重量2倍的水，混合均與，經(jīng)過10°C，50天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。用該工藝生產(chǎn)的靈芝果酒，其特征在于色質(zhì)米黃色，具有濃郁的果香味和靈芝發(fā)酵的特有香味。
[0014]實施例2
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖60克，黃豆餅粉30克，玉米漿30克，麩皮30克，磷酸二氫鉀0.3克，硫酸鎂0.3克，水1000mL,分裝250mL三角瓶，每瓶80mL，115°C滅菌40分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma在轉(zhuǎn)速120轉(zhuǎn)/分鐘,溫度28°C培養(yǎng)7天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
液體擴(kuò)大培養(yǎng)菌種的制備:根據(jù)種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖60克，黃豆餅粉25克，玉米漿31克，麩皮30克，磷酸二氫鉀0.25克，硫酸鎂0.25克，豆油4.1克，水1000mL ；液體深層培養(yǎng)培養(yǎng)基按罐體積60%轉(zhuǎn)入種子罐，經(jīng)過115°C滅菌，冷卻至室溫，以6% (體積t匕)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度27°C，罐壓0.05兆帕，攪拌轉(zhuǎn)速120轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1:0.8v/v/m培養(yǎng)5天，制得靈芝液體深層培養(yǎng)菌種；
靈芝固態(tài)發(fā)酵:玉米與小麥按1:2 (重量比)混合均勻，用水浸泡使含水率達(dá)到60%，130°C滅菌30分鐘，冷卻到室溫后，以10% (體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養(yǎng)的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度60°C，濕度85%培養(yǎng)10天獲得靈芝發(fā)酵物；
靈芝果酒的釀造:稱取靈芝發(fā)酵物重量，按50% (重量比)稱取大米，加與大米等重量的水煮成米飯，冷卻后與靈芝發(fā)酵物、大米重量的3%的酒曲，大米重量3倍的水，混合均與，經(jīng)過20°C，25天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。用該工藝生產(chǎn)的靈芝果酒，其特征在于色質(zhì)淺褐色，具有濃郁的果香味和靈芝發(fā)酵的特有香味。
[0015]實施例3
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖100克，黃豆餅粉10克，玉米漿10克，麩皮10克，磷酸二氫鉀0.06克，硫酸鎂0.05克，水1000mL,分裝250mL三角瓶，每瓶140mL, 128°C滅菌55分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma Iucidum)，在轉(zhuǎn)速180轉(zhuǎn)/分鐘,溫度33°C培養(yǎng)5天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
'液體擴(kuò)大培養(yǎng)菌種的制備:根據(jù)種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20克，黃豆餅粉45克，玉米漿45克，麩皮60克，磷酸二氫鉀0.06克，硫酸鎂0.05克，豆油2克，水1000mL ;液體深層培養(yǎng)培養(yǎng)基按罐體積80%轉(zhuǎn)入種子罐，經(jīng)過120°C滅菌，冷卻至室溫，以3%(體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度33°C，罐壓0.08兆帕，攪拌轉(zhuǎn)速250轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1:1.lv/v/m培養(yǎng)8天，制得靈芝液體深層培養(yǎng)菌種；
靈芝固態(tài)發(fā)酵:玉米與小麥按1:3.5 (重量比)混合均勻，用水浸泡使含水率達(dá)到75%，150°C滅菌10分鐘，冷卻到室溫后，以5% (體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養(yǎng)的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22 °C，濕度60%培養(yǎng)5天獲得靈芝發(fā)酵發(fā)酵物；
靈芝果果酒的釀造:稱取靈芝發(fā)酵物重量，按70% (重量比)稱取大米，加與大米等重量的水煮成米飯，冷卻后與靈芝發(fā)酵物以及大米重量的5%的酒曲，大米重量5倍的水，混合均與，經(jīng)過30°C，10天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。用該工藝生產(chǎn)的靈芝果酒，其特征在于色質(zhì)褐色，具有濃郁的果香味和靈芝發(fā)酵的特有香味。
[0016]實施例1、實施例2和實施例3的測定結(jié)果顯示在表1 表1:實施例1成分分析表
項目I實施例1 I實施例2 I實施例3~~
【權(quán)利要求】
1.靈芝果酒，其特征在于該酒該酒酒精度質(zhì)量與體積比計8-30%，靈芝三萜含量50-500mg/L，蛋白質(zhì) 60_500mg/L，還原糖〈2.0%，靈芝多糖 100_800mg/。
2.權(quán)利要求1所述的靈芝果酒的制備方法，其特征在于按下述步驟制備得到: (1)液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20~100克，黃豆餅粉10~50克，玉米漿10~50克，麩皮10~60克，磷酸二氫鉀0.06~0.6克，硫酸鎂0.05~0.5克，水1000mL,按照體積比16~60%分裝三角瓶，100~130°C滅菌10~60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種，在轉(zhuǎn)速60~180轉(zhuǎn)/分鐘，溫度22~33°C培養(yǎng)5~10天，制得靈芝液體搖瓶菌種； (2)液體擴(kuò)大培養(yǎng)菌種的制備:根據(jù)種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20~100克，黃豆餅粉10~50克，玉米漿10~50克，麩皮10~60克，磷酸二氫鉀0.06~0.6克，硫酸鎂0.05~0.5克，豆油2~7克，水1000mL ;液體深層培養(yǎng)培養(yǎng)基按罐體積50~80%轉(zhuǎn)入種子罐，經(jīng)過100~120°C滅菌，冷卻至室溫，以體積比3~10%接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22~33°C，罐壓0.03~0.08兆帕，攪拌轉(zhuǎn)速60~250轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1:.0.3~1:1.2 (v/v/m)培養(yǎng)3~8天，制得靈芝液體深層培養(yǎng)菌種； (3)靈芝固態(tài)發(fā)酵:玉米和小麥按照重量比1:0.5~4的比例混合均勻，用水浸泡使含水率達(dá)到重量百分含量40~80%，110~150°C滅菌10~60分鐘，冷卻到室溫后，以體積與重量比5~20%的接種量接入靈芝的液體深層培養(yǎng)的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22~33°C，濕度55~90%培養(yǎng)5~20天獲得靈芝發(fā)酵物； (4)靈芝果酒的釀造:稱取靈芝發(fā)酵物重量，按重量比30- 70%稱取大米，加與大米等重量的水煮成米飯，冷卻后與靈芝發(fā)酵物、大米重量的1~5%的酒曲，大米重量2 — 5倍的水，混合均與，經(jīng)過10 - 30°C，10~50天發(fā)酵，發(fā)酵液經(jīng)過過濾、勾兌獲得靈芝果酒。
【文檔編號】C12G3/02GK103695226SQ201210366382
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日:2012年9月27日
【發(fā)明者】張志才, 張才九, 任曉峰, 謝德中 申請人:江蘇大學(xué)