專利名稱：光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物，其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有骨生成促進(jìn)活性、骨吸收抑制活性和其他活性的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物，和含有其作為活性成分的骨疾病預(yù)防或治療藥物。
骨疾病是一種涉及由骨量減少超過(guò)某一程度引起的某些癥狀或傾向的病理狀態(tài)或疾病。骨質(zhì)疏松(一種骨疾病)的主要癥狀是脊柱后凸，和背腰骨、椎骨體、股骨頸、橈骨下端、肋骨、肱骨上端和其他部位的骨折。在健康的骨組織中，骨破壞持續(xù)發(fā)生，在骨形成和吸收之間有良好的平衡；成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞分別在骨形成和吸收中起關(guān)鍵作用。破壞它們之間的平衡造成骨量減少。傳統(tǒng)的骨吸收抑制劑如雌激素、降鈣素和雙膦酸鹽已用于預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松。但由于治療對(duì)象的限制或療效不確切，這些骨吸收抑制劑在某些情況下不能取得滿意的效果。
另一方面，本發(fā)明者已發(fā)現(xiàn)具有優(yōu)異的骨吸收抑制活性的含硫雜環(huán)化合物，即由通式(A)或(B)代表的化合物或其鹽(日本未市查專利公開(kāi)232880/1991和364179/1992)。 其中A環(huán)為可被取代的苯環(huán)；R代表氫原子或可被取代的烴基；B代表可被酯化或酰胺化的羧基；X代表-CH(OH)-或-CO-；k代表0或1，k’和n代表0、1或2。
已描述了這種化合物的一個(gè)實(shí)例，即式(C)代表的化合物 需要開(kāi)發(fā)具有臨床藥學(xué)(特別是口服制劑)的改進(jìn)特性(穩(wěn)定性、可吸收性、生物利用度等)的預(yù)防或治療藥物。
為了開(kāi)發(fā)臨床上更有用的、直接作用于骨、抑制骨吸收和促進(jìn)骨形成的藥物，本發(fā)明者進(jìn)行了深入研究，第一次合成了式(I)代表的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物 其中R代表低級(jí)烷基；R1和R2獨(dú)立地代表低級(jí)烷基，或一起代表低級(jí)亞烷基；發(fā)現(xiàn)這些化合物是式(A)或(B)代表的化合物中具有意外的臨床很好活性的化合物，有極佳的骨生成促進(jìn)活性和口服可吸收性。例如，式(I)的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物的口服可吸收性比式(C)化合物更好?；谶@一發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明者進(jìn)行了進(jìn)一步研究并完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明涉及(1)式(I)的光學(xué)活性化合物 其中R代表低級(jí)烷基；R1和R2獨(dú)立地代表低級(jí)烷基，或一起代表低級(jí)亞烷基，(2)根據(jù)上述(1)的化合物，其中R、R1和R2獨(dú)立地為C1-4烷基，(3)根據(jù)上述(1)的化合物，其為(2 R，4 S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺，(4)式(I)光學(xué)活性化合物的制備方法 其中R代表低級(jí)烷基；R1和R2獨(dú)立地代表低級(jí)烷基，或一起代表低級(jí)亞烷基，其中式(II)光學(xué)活性化合物或其羧基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽 其中R同上所定義，與式(III)化合物或其氨基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽反應(yīng) 其中R1和R2同上所定義，(5)式(II)的光學(xué)活性化合物或其羧基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽 其中R代表低級(jí)烷基，(6)含有以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物的骨生成促進(jìn)劑，(7)根據(jù)以上(6)的骨生成促進(jìn)劑，它是口服可吸收的，(8)含有以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物的骨疾病預(yù)防或治療藥物，(9)含有以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物的骨折愈合促進(jìn)劑，(10)一種促進(jìn)哺乳動(dòng)物骨生成的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物，(11)一種預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物骨疾病的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的以上(1)的式(1)光學(xué)活化合物，
(12)一種促進(jìn)哺乳動(dòng)物骨折愈合的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的以上(1)的式(1)光學(xué)活性化合物，(13)以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物在制備骨生成促進(jìn)劑中的用途，(14)以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物在制備骨疾病治療或預(yù)防藥物中的用途，(15)以上(1)的式(I)光學(xué)活性化合物在制備骨折愈合促進(jìn)劑中的用途。
對(duì)于以上結(jié)構(gòu)式，R、R1或R2代表的低級(jí)烷基的實(shí)例為具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基和己基。R1和R2可一起代表低級(jí)亞烷基，此時(shí) (n代表2到4的整數(shù))。
優(yōu)選地，R、R1和R2各自為具有1-4個(gè)碳原子的烷基，如甲基或乙基。
本發(fā)明的化合物(I)，即(2R，4S)構(gòu)型的光學(xué)活性化合物，優(yōu)選基本不含(2S，4R)構(gòu)型的化合物，具有近100％的光學(xué)純度。
式(I)化合物中，優(yōu)選(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺等。
通過(guò)式(II)代表的光學(xué)活性化合物或其羧基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽與式(III)代表的光學(xué)活性化合物或其氨基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽反應(yīng)，制備化合物(I)。
其氨基處具有反應(yīng)活性的式(III)化合物的優(yōu)選衍生物包括式(III)化合物與羰基化合物如醛(如乙醛)或酮(如丙酮)反應(yīng)形成的Schiff’s堿型的氨基或烯氨形式互變異構(gòu)體；式(III)化合物與甲硅烷基化合物如二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、單(三甲基甲硅烷基)乙酰胺或二(三甲基甲硅烷基)脲反應(yīng)形成的甲硅烷基衍生物；和式(III)化合物與三氯化磷或光氣反應(yīng)生成的衍生物。
其羧基處具有反應(yīng)活性的式(II)化合物的優(yōu)選衍生物包括酰鹵、酸酐、活化酰胺和活化酯，所有這些都按常規(guī)方法獲得。更具體地講，這種優(yōu)選的反應(yīng)活性衍生物包括酰氯；酸疊氮化物；混合酸酐如與取代磷酸如二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二芐基磷酸或鹵代磷酸，或與二烷基亞磷酸、亞硫酸、硫代硫酸或硫酸，或與磺酸如甲磺酸，或與脂肪羧酸如乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、新戊酸、戊酸、異戊酸或三氯乙酸，或與芳香羧酸如苯甲酸形成的混合酸酐；對(duì)稱酸酐；與咪唑、4-取代咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑形成的活化酰胺；活化酯如氰基甲基酯、甲氧基甲基酯、二甲基亞氨基甲基酯、乙烯基酯、炔丙基酯、對(duì)硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰苯基酯、苯基偶氮苯基酯、苯硫基酯、對(duì)硝基苯基酯、對(duì)甲苯硫基酯、羧基甲硫基酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯和8-喹啉硫基酯；和與N-羥基化合物如N，N-二甲基羥基胺、1-羥基-2-(1H)-吡啶酮，N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、1-羥基-1H-苯并三唑和N-羥基-5-降冰片烷-2，3-二甲酰胺的酯。這些反應(yīng)活性衍生物可根據(jù)所用式(II)化合物的種類任意選擇。
化合物(II)或(III)的反應(yīng)活性衍生物的優(yōu)選鹽包括與堿的鹽，例如堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽，銨鹽，和有機(jī)堿鹽如三甲胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、二環(huán)己基胺鹽和N，N-二芐基-乙二胺鹽。
該反應(yīng)一般在常規(guī)溶劑中進(jìn)行，例如水，醇如甲醇或乙醇，丙酮，二惡烷，乙腈，氯仿，二氯甲烷，二氯乙烷，四氫呋喃，乙酸乙酯，N，N-二甲基甲酰胺或吡啶，但也可以在任何其他有機(jī)溶劑中進(jìn)行，只要它不干擾反應(yīng)。這些溶劑可與水混合使用。當(dāng)使用游離形式的式(II)或(III)化合物或其鹽時(shí)，該反應(yīng)優(yōu)選在常規(guī)縮合劑存在下進(jìn)行，例如N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺；N-環(huán)己基-N’-嗎啉代乙基碳化二亞胺；N-環(huán)己基-N’-(4-二乙氨基己基)碳化二亞胺；N，N’-二乙基碳化二亞胺；N，N’-二異丙基碳化二亞胺；N-乙基-N’-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺；N，N’-羰基二(2-甲基咪唑)；五亞甲基乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；二苯基乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亞磷酸三烷酯；多聚磷酸乙酯；多聚磷酸異丙酯；氧氯化磷；二苯基磷?；B氮；亞硫酰氯；草酰氯；鹵代甲酸低級(jí)烷基酯如氯代甲酸乙酯或氯代甲酸異丙酯；三苯膦；2-乙基-7-羥基苯并異噁唑鎓鹽，2-乙基-5-(間磺基苯基)異噁唑鎓氫氧化物分子內(nèi)鹽；N-羥基苯并三唑；1-(對(duì)氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；或N，N’-二甲基甲酰胺與亞硫酰氯、光氣、氯代甲酸三氯甲基酯、氧氯化磷或其它反應(yīng)制備的所謂Vilsmeier’s試劑。還優(yōu)選在N-羥基苯并三唑或N-羥基-5-降冰片烷-內(nèi)-2，3-二甲酰胺存在下使用縮合劑如N，N’-二環(huán)己基碳化二亞胺。該反應(yīng)也可以在無(wú)機(jī)或有機(jī)堿存在下進(jìn)行，例如堿金屬碳酸氫鹽、三(低級(jí))烷基胺、吡啶、N-(低級(jí))烷基嗎啉或N，N-二(低級(jí))烷基芐基胺。雖然反應(yīng)溫度不受限制，但該反應(yīng)一般在冷卻到加熱條件下(-10到120℃)進(jìn)行。反應(yīng)時(shí)間一般為0.5到100小時(shí)，優(yōu)選約1至50小時(shí)。
這樣得到的化合物(I)可通過(guò)已知的分離純化方法分離和純化，例如濃縮、減壓濃縮、溶劑萃取、結(jié)晶、重結(jié)晶、拆分和層析。
例如通過(guò)拆分日本未市查專利公開(kāi)346179/1992中公開(kāi)的化合物(II)的外消旋物可產(chǎn)生起始化合物(II)。具體講，通過(guò)制備化合物(II)的外消旋物與光學(xué)活性堿(如光學(xué)活性α-甲基芐基胺、番木鱉堿、奎寧、辛可寧)的鹽，利用所形成的非對(duì)映異構(gòu)體之間的溶解度差異重復(fù)進(jìn)行分部結(jié)晶得到純的微溶鹽，然后進(jìn)行酸處理，從而制得光學(xué)活性化合物。另一方法是，通過(guò)用光學(xué)活性醇(如光學(xué)活性乳酸甲酯、扁桃酸甲酯)酯化化合物(II)的外消旋物，利用非對(duì)映異構(gòu)體之間的物理性質(zhì)差異，從形成的非對(duì)映異構(gòu)體酯中制備一種純異構(gòu)體，然后進(jìn)行水解，從而制得光學(xué)活性化合物?？蓪⒈景l(fā)明目標(biāo)化合物-化合物(I)-制成固態(tài)制劑如片劑、膠囊、顆粒和粉劑，或液態(tài)制劑如糖漿和注射制劑，如與藥學(xué)上可接受載體用常規(guī)方法配制，可口服或非口服給藥?；衔?I)的含量一般為整個(gè)制劑重量的約0.01到95％，優(yōu)選約0.1到20％?；衔?I)優(yōu)選以口服制劑使用。
藥學(xué)上可接受載體是一般用作藥用物質(zhì)的各種有機(jī)或無(wú)機(jī)載體物質(zhì)，包括用于固態(tài)制劑的賦形劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑和崩解劑，和用于液態(tài)制劑的溶劑、助溶劑、懸浮劑、等滲調(diào)節(jié)劑、緩沖劑和局部麻醉劑。需要時(shí)可使用其他藥物添加劑如防腐劑、擾氧基、著色劑和甜味劑。優(yōu)選的賦形劑包括乳糖、蔗糖、D-甘露糖、淀粉、結(jié)晶纖維素和輕硅酸酐。優(yōu)選的潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石和硅膠。優(yōu)選的粘合劑包括結(jié)晶纖維素、蔗糖、D-甘露糖、葡萄糖、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮。優(yōu)選的崩解劑包括淀粉、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和羧甲基淀粉鈉。優(yōu)選的溶劑包括注射用水、乙醇、丙二醇、聚氧乙烯二醇、芝麻油和玉米油。優(yōu)選的助溶劑包括聚乙二醇、丙二醇、D-甘露糖、苯甲酸芐酯、乙醇、三氨基甲烷、膽固醇、三乙醇胺、碳酸鈉和檸檬酸鈉。優(yōu)選的懸浮劑包括表面活性劑如硬脂基三乙醇胺、月桂基硫酸鈉、月桂基氨基丙酸、卵磷脂、苯扎氯胺、芐索氯胺和甘油單硬脂酸酯；和親水聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、和羥丙基纖維素。優(yōu)選的等滲調(diào)節(jié)劑包括氯化鈉、甘油和D-甘露糖。優(yōu)選的緩沖劑包括磷酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽和檸檬酸鹽緩沖溶液。優(yōu)選的局部麻醉劑包括苯甲醇。優(yōu)選的防腐劑包括對(duì)羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯甲醇、苯乙醇、脫氫乙酸和山梨酸。優(yōu)選的抗氧基包括亞硫酸和抗壞血酸。
因?yàn)橥ㄊ?I)代表的化合物具有強(qiáng)骨吸收抑制活性和骨生成促進(jìn)活性、具有更好的與臨床應(yīng)用相關(guān)的特性如穩(wěn)定性、可吸收性和生物利用度，它可用作骨生成促進(jìn)劑用于預(yù)防或治療各種哺乳動(dòng)物(如人、大鼠、小鼠、貓、狗、兔、牛、豬)骨疾病，如骨質(zhì)疏松和骨折。本發(fā)明化合物(I)的毒性低，可安全使用。例如，當(dāng)以500mg/kg/天的劑量將化合物(I)口服給予大鼠2周，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)異常。當(dāng)口服給藥時(shí)，化合物(I)的可吸收性比相應(yīng)的外消旋化合物優(yōu)越，因此可用于口服給藥制劑。
更具體講，本發(fā)明涉及的通式(I)代表的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物具有極好的堿性磷酸酶誘導(dǎo)活性，因此顯示極佳的骨生成促進(jìn)作用，可作為藥物用于預(yù)防或治療骨代謝疾病，包括骨質(zhì)疏松。含有本發(fā)明具有這種活性的化合物(1)的任何骨生成促進(jìn)劑，可用丁治療骨折、骨缺陷、和骨疾病如矯正外科領(lǐng)域的骨關(guān)節(jié)炎和牙周疾病。這種促進(jìn)劑還可望在牙科領(lǐng)域中有效，用于修復(fù)山牙周炎引起的牙周組織缺陷、穩(wěn)定人工牙根、嵴形成和腭裂修復(fù)等。
當(dāng)用作骨質(zhì)疏松預(yù)防和治療藥時(shí)，根據(jù)病人狀態(tài)和體重及給藥方法，通式(I)代表的化合物作為活性成分(I)口服給藥時(shí)，對(duì)每個(gè)成人(體重50kg)以日劑量5-1000mg、優(yōu)選30-600mg給藥，每天1-3次。
本發(fā)明的化合物(I)可與其他骨吸收抑制劑和骨生成促進(jìn)劑聯(lián)合使用，如維生素D類(如1α-基維生素D3、1α，25-二羥基維生素D3、Flocalcitriol、Secalciferol等)，降鈣素(如鰻降鈣素、鮭降鈣素、豬降鈣素、Avicatonin等)，二膦酸衍生物(如羥乙二膦酸鹽、Cimadronate，Alendronate，Tiludronate，Risedronate，Clodronate，YH-529等)，性激素相關(guān)化合物(如替勃龍、雌二醇、Osaterone，雷洛昔芬、屈洛昔芬、奧美洛昔芬、他莫昔芬、米非司酮等)，異丙氧黃酮，維生素K2(如四烯甲萘醌)，氟化鈉和PTH衍生物(如PTH(1-34)，PTH(1-84)，PTH(1-36)等)。
通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)實(shí)施例、參考實(shí)施例和實(shí)施例將更詳細(xì)地描述本發(fā)明，但這些實(shí)施例并不限制本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1骨生成促進(jìn)作用用從正常大鼠股骨髓制備的基質(zhì)細(xì)胞測(cè)定骨生成指數(shù)堿性磷酸酶活性。具體講，用Maniatopoulos等[Cell Tissue Research，Vol.254，p.317(1988)]的方法從7周齡雄性Sprague-Dawley大鼠的股骨髓制備基質(zhì)細(xì)胞，在含有地塞米松(10-7M)和β-甘油磷酸(10-2M)的α-MEM溶液(最小基礎(chǔ)培養(yǎng)基)中培養(yǎng)以得到礦化骨樣組織。一周后向連片生長(zhǎng)的細(xì)胞中加入實(shí)驗(yàn)化合物(10-6M或10-5M)，在上述培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)10-14天。用磷酸鹽緩沖液洗滌后，細(xì)胞用0.2％ Nonidet P-40勻化并以3000rpm離心10分鐘。用Lowry等[Journal of Biological Chemistry，Vol.207，p.19(1954)]的方法檢測(cè)上清液的堿性磷酸酶活性。所得值以平均值±SE的形式列于表1中。表1化合物 濃度(M) 堿性磷酸酶活性(nmol對(duì)硝基苯酚/分/孔)對(duì)照 未加 113.7±8.1實(shí)施例1中所得化合物10-51635.5±169.7**實(shí)施例1中所得化合物10-6682.5±123.2**與對(duì)照相比*p＜0.05；**p＜0.01從表1可以看出本發(fā)明的通式(1)代表的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物具有良好的堿性磷酸酶誘導(dǎo)活性，因而顯示良好的骨生成促進(jìn)作用，可作為藥物預(yù)防或治療包括骨質(zhì)疏松的骨代謝疾病。
參考實(shí)施例1將(2R，4S)-(-)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-α-甲氧羰基芐基酯(4.18g)、乙酸(45ml)和濃鹽酸(30ml)的混合物在回流下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物傾入水中(800ml)；過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，溶于乙酸乙酯(150ml)中。乙酸乙酯層用水洗滌，用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余的結(jié)晶，用己烷洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，得到(2R，4S)-(-)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(1.62g，59％)。無(wú)色針狀。熔點(diǎn)194-195℃。旋光[α]D(23℃)-210.8(c＝0.50，CH3OH)。參考實(shí)施例2將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(12.59g)于二氯甲烷(200ml)中的溶液加到(±)-反-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(15.34g)和(R)-(-)-扁桃酸甲酯(18.19)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(200ml)中的溶液中，然后于0℃加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)(3.34g)?；旌衔镉?℃攪拌1小時(shí)，于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余的結(jié)晶，用乙醚-己烷洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶兩次，得到(2R，4S)-(-)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-α-甲氧羰基芐基酯(4.09g，17％)。無(wú)色針狀。熔點(diǎn)140-141℃。旋光[α]D(23℃)-244.2°(c＝0.50，CHCl3)。實(shí)施例1(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺 將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.39g)于二氯甲烷中的溶液加入(2R，4S)-(-)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.47g)和4-氨基芐基膦酸二乙酯(0.41g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(7ml)中的0℃溶液中，然后加入1-羥基苯并三唑(HOBt)(0.28)?；旌衔镉?℃攪拌1小時(shí)，于室溫(25℃)攪拌15小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余的結(jié)晶，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，再在甲醇-己烷中重結(jié)晶，得到(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺(0.37g，44％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)181-182℃。旋光[α]D(23℃)-197.4°(c＝0.50，CHCl3)。
實(shí)施例2
(2R，4S)-(-)-N-[4-(二甲氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺 將1-羥基苯并三唑(HOBt)(0.51g)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.69g)加入到(2R，4S)-(-)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.84g)和4-氨基芐基膦酸二甲酯(0.65g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(10ml)中的0℃溶液中。該混合物于0℃攪拌1小時(shí)，于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯-四氫呋喃(3∶1)萃取。乙酸乙酯層用1N HCl、水、飽相碳酸氫鈉溶液洗滌，并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑。過(guò)濾收集殘余的固體，然后在乙醇-己烷中重結(jié)晶，得到(2R，4S)-(-)-N-[4-(二甲氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺(0.92g，64％)。無(wú)色針晶。熔點(diǎn)198-199℃。旋光[α]D(23℃)-198.8°(c＝0.50，CHCl3)。
實(shí)施例3(2R，4S)-(-)-N-[4-(四亞甲基二氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺 按實(shí)施例2的相同步驟，制備了(2R，4S)-(-)-N-[4-(四亞甲基二氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)139-140℃。旋光[α]D(23)-176.2°(c＝0.50，CHCl3)。制劑實(shí)施例例如可用下列配方制備含式(I)光學(xué)活性化合物作為活性成分的骨生成促進(jìn)劑1.膠囊(1)(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺10mg(2)乳糖 90mg(3)微晶纖維素70mg(4)硬脂酸鎂 10mg共計(jì) 180mg/膠囊將成分(1)、(2)和(3)及成分(4)的一半混合并制粒。向這些顆粒中加入成分(4)的剩余部分，將整個(gè)混合物裝入明膠膠囊中。2.片劑(1)(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷?；谆?苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺10mg(2)乳糖 35mg(3)玉米淀粉 150mg(4)微晶纖維素30mg(5)硬脂酸鎂 5mg共計(jì) 230mg/片將成分(1)、(2)和(3)及成分(4)的三分之二和成分(5)的一半混合并制粒。向這些顆粒中加入成分(4)和(5)的剩余部分，將整個(gè)混合物壓制成片。3.注射制劑(1)(2R，4S)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺 10mg(2)肌醇100mg(3)苯甲醇 20mg共計(jì) 130mg/安瓿將成分(1)、(2)和(3)溶于注射用蒸餾水中，終體積2ml，將此溶液裝入安瓿中。整個(gè)操作在無(wú)菌條件下進(jìn)行。參考實(shí)施例3向(±)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(27.5g)于氯仿(200ml)中的懸液中加入(S)-(-)-α-甲基芐基胺(14.1g)。于室溫?cái)嚢?0分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)混合物。形成的殘余物溶于乙酸乙酯(200ml)中，于室溫靜置2小時(shí)。過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，然后在氯仿-乙酸乙酯中重結(jié)晶，再在氯仿-己烷中重結(jié)晶，得到(-)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸的(S)-(-)-α-甲基芐基胺鹽(15.5g，37％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)162-163℃。旋光[α]D(23℃)-43°(c＝0.50，CHCl3)。參考實(shí)施例4向(±)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(35.0g)于氯仿(300ml)中的懸液中加入(R)-(+)-α-甲基芐基胺(17.9g)。于室溫?cái)嚢?0分鐘后，減壓濃縮反應(yīng)混合物。形成的殘余物溶于乙酸乙酯(200ml)中，于室溫靜置2小時(shí)。過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，然后在氯仿-乙酸乙酯中重結(jié)晶，再在氯仿-己烷中重結(jié)晶，得到(+)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸的(R)-(+)-α-甲基芐基胺鹽(17.9g，34％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)162-163℃。旋光[α]D(23℃)+42.2°(c＝0.51，CHCl3)。參考實(shí)施例5向(-)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸的(S)-(-)-α-甲基芐基胺鹽于乙酸乙酯(100ml)中的懸液中加入2N鹽酸(100ml)。室溫?cái)嚢璐嘶旌衔?0分鐘后，收集乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用水洗滌并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑，在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，得到(-)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(9.1g，95％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)177-178℃。旋光[α]D(23℃)-135.0°(c＝0.50，CHCl3)。
參考實(shí)施例6向(+)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸的(R)-(+)-α-甲基芐基胺鹽(8.0g)于乙酸乙酯(100ml)中的懸液中加入2N鹽酸(50ml)。室溫?cái)嚢璐嘶旌衔?0分鐘后，收集乙酸乙酯層。乙酸乙酯層用水洗滌并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑，在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，得到(+)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(4.55g，86％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)177-178℃。旋光[α]D(23℃)+136.0°(c＝0.50，CHCl3)。
參考實(shí)施例7將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(4.89g)在二氯甲烷(80ml)中的溶液加至(±)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(6.0g)和(R)-(+)-乳酸甲酯(4.43g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(80ml)中的0℃溶液中，然后加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)(1.3g)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，在于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，減壓濃縮。向殘余物中加入乙酸乙酯(500ml)和水(500ml)，然后收集有機(jī)層。用水洗滌有機(jī)層并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余固體并用乙醚洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶2次，得到(2R)-(-)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-1-甲氧羰基乙基酯(2.2g，28％)。無(wú)色針狀。熔點(diǎn)161-162℃。旋光[α]D(16℃)-194.1°(c＝0.50，CHCl3)。濃縮上述固體的濾液，過(guò)濾收集形成的結(jié)晶并用乙醚-己烷洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶2次，得到(2S)-(+)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-1-甲氧羰基乙基酯(1.6g，20％)。無(wú)色片狀。熔點(diǎn)121-122℃。旋光[α]D(16℃)+234.3°(c＝0.50，CHCl3)。參考實(shí)施例8將(2R)-(-)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-、5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-1-甲氧羰基乙基酯(0.5g)、乙酸(2.5ml)和濃鹽酸(2.5ml)的混合物于回流溫度下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物傾入水(50ml)中；過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，相繼用水、乙醇和乙醚洗滌，得到(2R)-(-)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.2g，53％)。無(wú)色粉末。熔點(diǎn)223-224℃。旋光[α]D(23℃)-190.0°(c＝0.50，DMSO)。參考實(shí)施例9將(2S)-(+)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(R)-1-甲氧羰基乙基酯(0.7g)、乙酸(3.5ml)和濃鹽酸(3.5ml)的混合物于回流溫度下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物傾入水(70ml)中；過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，相繼用水、乙醇和乙醚洗滌，得到(2S)-(+)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.3g，56％)。無(wú)色粉末。熔點(diǎn)223-224℃。旋光[α]D(22℃)+196.7°(c＝0.50，DMSO)。參考實(shí)施例10將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(12.5g)在二氯甲烷(200ml)中的溶液加至(±)-反-1，2，4，5-四氫-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(15.34g)和(S)-(+)-扁桃酸甲酯(18.19g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(200m1)中的0℃溶液中，然后加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)(3.34g)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，再于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余的結(jié)晶，并用乙醚-己烷洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶2次，得到(2S，4R)-(+)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(S)-α-甲氧羰基芐基酯(4.57g，19％)。無(wú)色針狀。熔點(diǎn)141-142℃。旋光[α]D(23℃)+239.7°(c＝0.50，CHCl3)。參考實(shí)施例11將(2S，4R)-(+)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸的(S)-α-甲氧羰基芐基酯(4.37g)、乙酸(45ml)和濃鹽酸(30ml)的混合物于回流溫度下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物傾入水(800ml)中；過(guò)濾收集形成的結(jié)晶，并溶于乙酸乙酯(150ml)。乙酸乙酯層用水洗滌并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余結(jié)晶并用己烷洗滌，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，得到(2S，4R)-(+)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(1.38g，48％)。無(wú)色針晶。熔點(diǎn)192-193℃。旋光[α]D(23℃)+212.9°(c＝0.50，CH3OH)。參考實(shí)施例12將(-)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(8.6g)溶于四氫呋喃(100ml)后，加入草酰氯(5.0g)，然后加入N，N-二甲基甲酰胺(1滴)。于室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于二氯甲烷(30ml)，并在冰冷卻下向此溶液中滴加4-氨基芐基膦酸二乙酯(8.8g)、碳酸氫鈉(10.0g)和二氯甲烷(100ml)的混合物。在冰冷卻下攪拌30分鐘后，用水洗滌反應(yīng)混合物并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑，在氯仿-己烷中重結(jié)晶，得到(-)-N-[4-(二乙氧基磷?；谆?苯基]-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-甲酰胺(15.4g，92％)。無(wú)色針晶。熔點(diǎn)175-176℃。旋光[α]D(23℃)-152.0°(c＝0.10，CH3OH)。
參考實(shí)施例13將(+)-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-羧酸(8.4g)溶于四氫呋喃(100ml)后，加入草酰氯(5.0g)，然后加入N，N-二甲基甲酰胺(1滴)。于室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物溶于二氯甲烷(30ml)，并在冰冷卻下向此溶液中滴加4-氨基芐基膦酸二乙酯(8.6g)、碳酸氫鈉(8.0g)和二氯甲烷(100ml)的混合物。在冰冷卻下攪拌30分鐘后，用水洗滌反應(yīng)混合物并干燥(硫酸鎂)，然后蒸去溶劑，在氯仿-己烷中重結(jié)晶，得到(+)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-3，4-二氫-6，7-二甲基-4-氧代-1H-2-苯并硫代吡喃-1-甲酰胺(15.8g，96％)。無(wú)色針晶。熔點(diǎn)175-176℃。旋光[α]D(23℃)+155.0°(c＝1.0，CH3OH)。
參考實(shí)施例14將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.149g)在二氯甲烷(3ml)中的溶液加至(R)-(-)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.183g)和4-氨基芐基膦酸二乙酯(0.158g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(3ml)中的0℃溶液中，然后加入1-羥基苯并三唑(HOBt)(0.109g)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，再于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；殘余物用乙醇-異丙基醚處理，并過(guò)濾除去固體。濃縮濾液，殘余油進(jìn)行硅膠柱層析。從用乙酸乙酯-氯仿-甲醇(15∶15∶1，V/V)洗脫的流份得到(2R)-(-)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺(0.136g，41％)。無(wú)色無(wú)定形固體。熔點(diǎn)96-98℃。旋光[α]D(23℃)-155.0°(c＝0.50，CHCl3)。
參考實(shí)施例15將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.228g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液加至(S)-(+)-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.28g)和4-氨基芐基膦酸二乙酯(0.241g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(5ml)中的0℃溶液中，然后加入1-羥基苯并三唑(HOBt)(0.167g)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，再于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；殘余物用乙醇-異丙基醚處理，并過(guò)濾除去固體。濃縮濾液，殘余油進(jìn)行硅膠柱層析。從用乙酸乙酯-氯仿-甲醇(15∶15∶1，V/V)洗脫的流份得到(2S)-(+)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-7，8-二甲氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺(0.202g，40％)。無(wú)色無(wú)定形固體。熔點(diǎn)97-99℃。旋光[α]D(23℃)+155.3°(c＝0.50，CHCl3)。參考實(shí)施例16將1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(0.69g)在二氯甲烷(12ml)中的溶液加至(2S，4R)-(+)-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-羧酸(0.84g)和4-氨基芐基膦酸二乙酯(0.73g)于N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(12ml)中的0℃溶液中，然后加入1-羥基苯并三唑(HOBt)(0.51g)。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，再于室溫?cái)嚢?5小時(shí)，然后將其傾入水中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用水洗滌并用硫酸鎂干燥，然后蒸去溶劑；過(guò)濾收集殘余結(jié)晶，然后在乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，再在甲醇-己烷中重結(jié)晶，得到(2S，4R)-(+)-N-[4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-4-甲基-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺(0.62g，41％)。無(wú)色棱晶。熔點(diǎn)183-184℃。旋光[α]D(23℃)+190.5°(c＝0.50，CHCl3)。
工業(yè)應(yīng)用本發(fā)明化合物(I)顯示良好的骨生成促進(jìn)作用，可用作骨疾病(包括骨質(zhì)疏松的骨代謝疾病、骨折、骨缺陷、和諸如骨關(guān)節(jié)炎的矯形外科領(lǐng)域骨疾病)的預(yù)防或治療藥物；它還在牙科領(lǐng)域?qū)ρ乐芙M織缺陷的修復(fù)、人工牙根的穩(wěn)定化、嵴形成和腭裂修復(fù)等有用。
權(quán)利要求
1.式(I)的光學(xué)活性化合物 其中R代表低級(jí)烷基；R1和R2獨(dú)立地代表低級(jí)烷基，或一起代表低級(jí)亞烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R、R1和R2獨(dú)立地代表C1-4烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其為(2R，4S)-(-)-N-4-(二乙氧基磷酰基甲基)苯基]-1，2，4，5-四氫-7，8-亞甲二氧基-5-氧代-3-苯并硫雜庚英-2-甲酰胺。
4.式(I)光學(xué)活性化合物的制備方法 其中R代表低級(jí)烷基；R1和R2獨(dú)立地代表低級(jí)烷基，或一起代表低級(jí)亞烷基，其中式(II)光學(xué)活性化合物或其羧基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽 其中R同上所定義，與式(III)化合物或其氨基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽反應(yīng) 其中R1和R2同上所定義。
5.式(II)光學(xué)活性化合物或其羧基處的反應(yīng)活性衍生物或鹽 其中R代表低級(jí)烷基。
6.含有權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物的骨生成促進(jìn)劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的骨生成促進(jìn)劑，它是口服可吸收的。
8.含有權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物的骨疾病預(yù)防或治療藥物。
9.含有權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物的骨折愈合促進(jìn)劑。
10.一種促進(jìn)哺乳動(dòng)物骨生成的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物。
11.一種預(yù)防或治療哺乳動(dòng)物骨疾病的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的權(quán)利要求1的式(1)光學(xué)活性化合物。
12.一種促進(jìn)哺乳動(dòng)物骨折愈合的方法，它包括給予需要治療的所述哺乳動(dòng)物有效量的權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物。
13.權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物在制備骨生成促進(jìn)劑中的用途。
14.權(quán)利要求1的式(I)光學(xué)活性化合物在制備骨疾病治療或預(yù)防藥中的用途。
15.權(quán)利要求1的式(1)光學(xué)活性化合物在制備骨折愈合促進(jìn)劑中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及上式代表的光學(xué)活性苯并硫雜庚英衍生物，其中R代表低級(jí)烷基；R
文檔編號(hào)C07D327/10GK1131669SQ9512171
公開(kāi)日1996年9月25日 申請(qǐng)日期1995年12月28日 優(yōu)先權(quán)日1994年12月28日
發(fā)明者左右田隆, 武富滋久, 小田恒夫 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社