本發(fā)明主要涉及果蔬檢測領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法。
背景技術(shù)：
多菌靈又名棉萎靈，為高效低毒內(nèi)吸性殺蟲劑，有內(nèi)吸治療和保護(hù)作用，是一種廣譜殺菌劑，對多種作物由真菌引起的病害有防治效果，廣泛用于果樹、蔬菜、糧棉和林木病害的防治，尤其對子囊菌綱的某病原菌和半知菌類引起的病害有較好的防效。目前，大型農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場農(nóng)殘快速檢測試劑盒只針對果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的快速檢測。因此，需發(fā)明一種快速準(zhǔn)確檢測多菌靈的方法迫在眉睫。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為克服目前不能快速準(zhǔn)確檢測果蔬中多菌靈農(nóng)藥殘留的缺點(diǎn)，本發(fā)明提供了一種快速定性定量檢測果蔬中多菌靈農(nóng)藥殘留的方法。
本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法包括以下步驟：
(1)樣品處理：將待測果蔬按4分法切碎后置于食品攪拌機(jī)中攪拌成漿糊狀；
(2)振蕩：用電子天平稱取攪拌成漿糊狀后的樣品10g加入到50ml的離心管中，然后在所述離心管中加入5g無水氯化鈉，再在所述離心管中加入25ml乙腈，蓋上所述離心管蓋子，最后把所述離心管固定在振蕩搖床振蕩20min；
(3)離心：把振蕩后的所述離心管固定到離心機(jī)里進(jìn)行離心處理；
(4)濃縮：從所述離心管里吸取5ml乙腈提取液放入到氮吹管中，在氮吹儀作用下把所述乙腈提取液吹至近干；
(5)凈化：往吹至近干的氮吹管中加入5ml0.1mol/l鹽酸在漩渦混合器的作用下溶解殘?jiān)?min后，分2次待過柱：將mcx小柱依次用3ml甲醇、3ml水預(yù)洗；待液面到達(dá)填料表面時(shí)，迅速加入提取液，再用3ml水、3ml甲醇淋洗，不收集；最后用3ml5％氨水-甲醇溶液洗脫，擠干、收集；
(6)定容：在氮吹儀作用下吹至近干后，加入1ml流動(dòng)相后漩渦混合,把溶解的液體過0.2μm濾膜過濾處理；
(7)色譜分析：過濾后的液體在超高效液相色譜儀的色譜條件下進(jìn)行色譜分析，根據(jù)色譜分析軟件可計(jì)算出果蔬中多菌靈的含量。
優(yōu)選地，在所述第(2)步振蕩過程中，在所述離心管中加入陶瓷均質(zhì)子。
優(yōu)選地，在所述第(3)步離心過程中，設(shè)定的離心參數(shù)為離心轉(zhuǎn)速：5000r/min；時(shí)間：5min。
優(yōu)選地，在所述第(4)步濃縮過程中，所述氮吹儀設(shè)置的溫度為50℃。
優(yōu)選地，在所述第(6)步定容過程中，所述流動(dòng)相的參數(shù)為甲醇：水(v/v)＝60:40。
優(yōu)選地，在所述第(7)步色譜分析過程中，所述超高效液相色譜儀包括熒光檢測器和紫外檢測器，所述熒光檢測器與所述紫外檢測器串聯(lián)同時(shí)進(jìn)行分析，其以所述熒光檢測器為主，所述紫外檢測器為輔助定性。
優(yōu)選地，在所述第(7)步色譜分析過程中，所述超高效液相色譜儀的參數(shù)為色譜柱：agilenteclipseplusrrhd1.8μm2.1×50mm；流動(dòng)相為甲醇：水(v/v)＝60:40；流速：0.2ml/min；檢測波長：紫外286nm，熒光激發(fā)波長286nm、發(fā)射波長315nm；進(jìn)樣量：10μl。
優(yōu)選地，一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法測定的果蔬中多菌靈含量最低檢出限為0.004mg/kg；多菌靈含量定量限為0.020mg/kg。
優(yōu)選地，在所述第(6)步定容過程中，所述氮吹儀設(shè)置的溫度為50℃。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法采用超高效液相色譜儀節(jié)約了試劑，減少有機(jī)試劑對環(huán)境的污染；同時(shí)具有樣品前處理操作簡單、準(zhǔn)確性高和快速等特點(diǎn)，較高的靈敏度和精密度滿足實(shí)際樣品檢測的需要，適用于果蔬樣品中多菌靈殘留快速、批量檢測的工作要求，可以作為常規(guī)殘留檢測方法使用。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的，技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施實(shí)例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法包括以下步驟：
(1)樣品處理：將待測果蔬按4分法切碎后置于食品攪拌機(jī)中攪拌成漿糊狀；
(2)振蕩：用電子天平稱取攪拌成漿糊狀后的樣品10g于50ml的離心管中，在所述離心管中加入陶瓷均質(zhì)子，所述陶瓷均質(zhì)子的作用是為了防止鹽結(jié)塊；然后在所述離心管中加入5g無水氯化鈉；再在所述離心管中加入25ml乙腈，蓋上所述離心管蓋子，最后把所述離心管固定在振蕩搖床振蕩20min，振蕩的作用就是使所述離心管中的試劑充分接觸提取反應(yīng)；
(3)離心：把振蕩后的所述離心管固定到離心機(jī)里進(jìn)行離心處理，同時(shí)設(shè)定離心參數(shù)為離心轉(zhuǎn)速：5000r/min，時(shí)間：5min，離心的作用是使乙腈和水分層；
(4)濃縮：從所述離心管里吸取5ml乙腈提取液放入到氮吹管中，在設(shè)置為50℃氮吹儀作用下把所述乙腈提取液吹至近干；
(5)凈化：往吹至近干的氮吹管中加入5ml0.1mol/l鹽酸在漩渦混合器的作用下溶解殘?jiān)?min后，分2次待過柱：將mcx小柱依次用3ml甲醇、3ml水預(yù)洗，待液面到達(dá)填料表面時(shí)，迅速加入鹽酸溶解液，再用3ml水、3ml甲醇淋洗，不收集。最后用3ml5％氨水-甲醇溶液洗脫，擠干、收集；
(6)定容：在設(shè)置為50℃氮吹儀作用下吹至近干后，加入1ml流動(dòng)相為甲醇:水(v/v)＝60:40后漩渦混合,把溶解的液體過0.2μm濾膜過濾處理；
(7)色譜分析：過濾后的液體在超高效液相色譜儀的色譜條件下進(jìn)行色譜分析，根據(jù)色譜分析軟件可計(jì)算出果蔬中多菌靈的含量；所述超高效液相色譜儀包括熒光檢測器和紫外檢測器,所述熒光檢測器與所述紫外檢測器串聯(lián)同時(shí)進(jìn)行分析，其以所述熒光檢測器為主，所述紫外檢測器為輔助定性，雙檢測器獨(dú)立檢測提高了檢測準(zhǔn)確性，減少了假陽性的誤檢。所述超高效液相色譜儀的參數(shù)為色譜柱：agilenteclipseplusrrhd1.8μm2.1×50mm；流動(dòng)相為甲醇：水(v/v)＝60:40；流速：0.2ml/min；檢測波長：紫外286nm，熒光激發(fā)波長286nm、發(fā)射波長315nm進(jìn)樣量：10μl。
通過以上步驟方法測定的果蔬中多菌靈含量，多菌靈含量最低檢出限為0.004mg/kg，多菌靈含量定量限為0.020mg/kg。
本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法采用超高效液相色譜儀配合紫外-熒光檢測器進(jìn)行分析，以熒光檢測器為主，紫外檢測器為輔助定性，雙檢測器獨(dú)立檢測提高了檢測準(zhǔn)確性，減少了假陽性的誤檢。色譜柱采用了小內(nèi)徑柱，提高柱效能更好的分離色譜峰，縮短了檢測分析時(shí)間，多菌靈保留時(shí)間為紫外2.572min、熒光2.260min，大大提高檢測工作效率。本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法流動(dòng)相流速0.2ml/min，節(jié)約試劑，減少有機(jī)試劑對環(huán)境的污染，通過簡化樣品前處理過程、選擇合適的固相萃取小柱及流動(dòng)相，以達(dá)到回收率高、檢出限低的要求，本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法具有操作簡單、重復(fù)性好的特點(diǎn)，紫外-熒光檢測器響應(yīng)值高，定性、定量準(zhǔn)確，滿足批量樣品檢測的工作要求。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法通過溶劑提取、樣品凈化等前處理方法建立了超高效液相色譜法測定果蔬中多菌靈農(nóng)藥殘留。本發(fā)明一種檢測果蔬多菌靈農(nóng)藥殘留的方法采用超高效液相色譜儀節(jié)約了試劑，減少有機(jī)試劑對環(huán)境的污染；同時(shí)具有樣品前處理操作簡單、準(zhǔn)確性高和快速等特點(diǎn)，較高的靈敏度和精密度滿足實(shí)際樣品檢測的需要，適用于果蔬樣品中多菌靈殘留快速、批量檢測的工作要求，可以作為常規(guī)殘留檢測方法使用。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原則之內(nèi)所作的任何修改，等同替換和改進(jìn)等均應(yīng)包含本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。