專利名稱：首烏在制備治療脂肪肝病藥物中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及首烏的制備方法，主要是涉及治療脂肪肝藥物的制備方法。
背景技術：
首烏為傳統(tǒng)中藥材，具有潤腸通便、補肝腎、益精血、烏須發(fā)，強筋骨。用于腸燥便秘、血虛萎黃、眩暈耳鳴、須發(fā)早白、腰膝酸軟、肢體麻木和高脂血癥等病，并用于多種復發(fā)制劑與湯劑中。目前尚無單味首烏藥材制成的首烏制劑，更無治療脂肪肝藥物療效。采用該技術制備的首烏制劑，具有治療脂肪肝的療效。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是采用新的系統(tǒng)的制劑方法，制備一種可用于治療脂肪肝的藥物。
為了解決上述技術問題，本發(fā)明通過以下技術方案實現(xiàn)首烏制劑由首烏藥材與其他輔料制備而成。其中首烏藥材在投料前先粉碎成粗粉(通過8～20目)；先制備中間產品首烏苷粗提物，制備步驟如下1)首烏藥材粗粉1000克，加30％-70％乙醇6-10倍量，回流0.5-1小時，過濾；第二次再加倍30％-70％乙醇6-8倍量，回流0.5-1小時，合并回流液，過濾，得濾液。
2)取濾液回收乙醇后，減壓(溫度為55～70℃，真空度為0.07～0.09Mpa)濃縮，得濃縮液。
3)取濃縮液，上D101型樹脂柱，用20％-50％乙醇洗脫，真空干燥(溫度為55～70℃，真空度為0.07～0.09Mpa)成粉末，得提取物。
該首烏苷粗提物可為含生藥量為16-25g/g或含首烏苷為51-62％的干燥粉末。
粉末可用制劑常規(guī)方法制備顆粒劑、膠囊劑、片劑等中藥口服制劑。
濃縮液可用制劑常規(guī)方法制備口服液。方法為加防腐劑、矯味劑、調PH值為5.5～7.0，即得口服液。
采用該工藝制備的首烏制劑，口服膠囊劑曾進行藥理實驗驗證，具有治療脂肪肝的作用。其他口服劑型因與膠囊劑無實質上的工藝改變，故有效成分未受損失，作用應與口服膠囊劑相當。
具體實施例方式
1.對技術方案中所述制備方法涉及的多個因素進行了實驗，以作為本技術方案詳?shù)年U述。
1.1藥材粉碎細度對提取的影響表1 首烏藥材粉碎細度對提取的影響

1.2首烏提取工藝正交試驗表2 因素水平表

表3 正交試驗結果


實驗結果九個樣品的二苯乙烯苷含量測定結果見表3。
根據(jù)藥材的浸膏得率和浸膏中二苯乙烯苷含量，按照極差分析和溶劑成本等因素綜合考慮，確定采用50％乙醇，分別10倍、8倍提取回流二次，每次時間為45min。
1.3首烏苷(二苯乙烯苷)的純化表4 不同大孔樹脂首烏苷殘余濃度及比吸附量情況

根據(jù)殘余濃度、比吸附量和解吸率等綜合考慮，DM301、HPD100、D101(衍)型樹脂均可選用，以D101(衍)型樹脂為優(yōu)。
1.3.2粗提物純化表4 純化物中二苯乙烯苷含量

結論選D101樹脂柱，用40％、70％乙醇洗脫，結果以40％乙醇洗脫得到的提取物中二苯乙烯苷含量最高。故選擇D101樹脂柱，用8-10倍量40％乙醇洗脫的工藝是合適的。
2.首烏在制劑中的應用2.1制備固體制劑實施例將1.2g/ml濃縮液10kg噴霧干燥，得650g首烏苷粗提物粉末。
處方1 粉末500g，預膠化淀粉250g，制成顆粒，得顆粒劑。
處方2 取處方1中的顆粒，套膠囊，得膠囊劑。
處方3 取處方1中的顆粒500g，加硬脂酸鎂10g，壓片，得片劑。
2.2制備液體制劑實施例取1.0g/ml的濃縮液，選不同的矯味劑和不同的防腐劑，制備口服液，結果均符合制劑要求，見表5。
表5 口服液制劑觀察表

3.首烏膠囊(首烏苷粗提物)主要藥效學研究結果3.1對CCl4致小鼠脂肪肝的影響ICR雄性小鼠60只，30±2g，隨機分成6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(易善復)。連續(xù)灌胃給藥7天，第8天造模，24小時后處死取肝臟。取肝組織0.5g，高鐵-硫酸顯色法測肝TC、乙酰丙酮顯色法測肝TG，進行t檢驗，結果見表6；余下肝組織用10％甲醛固定，進行病理切片觀察。
表6 SW對CCl4致小鼠脂肪肝的影響(X±SD)

與正常組比較△P＜0.05，△△P＜0.01，△△△P＜0.001與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001(下同)結果，模型組的肝TC、TG升高，與正常組比較均有顯著差異(P＜0.001)；而SW各劑量均能不同程度地降低肝TC、TG，與模型組比較有顯著差異(P＜0.05)。表明SW具有抗CCl4致小鼠脂肪肝的作用。
3.2對地塞米松致小鼠脂肪肝的影響ICR雌性小鼠60只，30±2g，隨機分6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(易善復)、正常組，每組10只。每日灌胃給藥加造模(除正常組)，連續(xù)8天。禁食12小時后處死。取肝組織0.5g，異丙醇抽提，高鐵-硫酸顯色法測肝TC、乙酰丙酮顯色法測肝TG，進行t檢驗，結果見表7；余下肝組織用10％甲醛固定，做病理切片。
表7 SW對地塞米松致小鼠脂肪肝的影響(X±SD)

結果，模型組的肝TC、TG升高，與正常組比較均有顯著差異(P＜0.001)；而SW高、中、低三個劑量，均能不同程度地降低肝TC、TG，與模型組比較均有顯著差異(P＜0.001-0.01)。表明SW具有抗地塞米松致小鼠脂肪肝的作用。
3.3對高脂致小鼠脂肪肝的影響ICR雄性小鼠60只，30±2g，隨機分成6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(舒降之)、正常組。每日灌胃給藥加造模(除正常組)，連續(xù)5天。禁食12小時后處死，取肝組織0.5g，異丙醇抽提，高鐵-硫酸顯色法測肝TC、乙酰丙酮顯色法測肝TG，進行t檢驗，結果見表8；余下肝組織用10％甲醛固定，做病理切片。
結果，模型組肝TC、TG均有顯著提高，與正常組比較有顯著差異(P＜0.001-0.05)；SW高、中、低三個劑量，均能不同程度地降低肝TC、TG，與模型組比較有顯著差異(P＜0.001-0.05)。表明SW具有明顯的抗高脂小鼠脂肪肝作用。
表8 SW對高脂致小鼠脂肪肝的影響(X±SD)

3.4對酒精合并高脂致小鼠脂肪肝的影響ICR雄性小鼠60只，30±2g，隨機分成6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(舒降之)、正常組。每日灌胃給藥加造模(除正常組)，連續(xù)2周。禁食12小時后取血，處死取肝臟。測肝TC、肝TG和血TC、TG，進行t檢驗，結果見表9；余下肝組織用10％甲醛固定，做病理切片。
結果，模型組的肝TC、TG升高，與正常組比較均有顯著差異(P＜0.05)；而SW高、中、低劑量組均能不同程度的降低肝TC、TG，低劑量組能降低血TC，與模型組比較有顯著差異(P＜0.01)。表明SW具有抗酒精合并高脂脂肪肝的作用。
表9 SW對酒精合并高脂致小鼠脂肪肝的影響(X±SD)

3.5對酒精致大鼠脂肪肝的影響SD大鼠72只，180±20g，雌雄各半，隨機分成6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(易善復)、正常組。每日灌胃給藥加造模(除正常組)，連續(xù)2個月。禁食12小時后取血，處死取肝臟。取肝組織0.5g，異丙醇抽提，測肝TC、TG、血TC、TG，比色法測定肝T-SOD、MDA和血T-SOD、MDA，進行t檢驗，結果見表10、11；余下肝組織用10％甲醛固定，做病理切片。
表10 SW對酒精致大鼠脂肪肝的影響(X±SD)

表11 SW對酒精致大鼠脂肪肝血液指標的影響(X±SD)

表11結果顯示，模型組的肝TC、TG和MDA均升高，SOD則下降，與正常組比較肝TC、MDA有顯著性差異(P＜0.001-0.01)；而SW高、中、低三個劑量，對肝TC、TG和血MDA均有不同程度的降低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.001-0.05)。
3.6對乙硫氨酸致大鼠脂肪肝的影響取SD大鼠60只，雌雄各半，體重為280±30g，隨機分成6組SW高、中、低劑量組、模型組、陽性組(易善復)、正常組。每日灌胃給藥加造模(除正常組)，連續(xù)20天。禁食12小時，處死取肝臟。取肝組織0.5g，異丙醇抽提，高鐵-硫酸顯色法測肝TC、乙酰丙酮顯色法測肝TG，測血中GPT和TG，進行t檢驗，結果見表12；余下肝組織用10％甲醛固定，做病理切片。
表12 SW對乙硫氨酸致SD大鼠脂肪肝的影響(X±SD)

結果，模型組的血GTP升高，與正常組比較均有顯著差異(P＜0.001)；而SW各劑量組均能降低血GTP，與模型組比較有顯著性(P＜0.001)。表明SW具有一定的抗乙硫氨酸致脂脂肪肝的作用。
權利要求
1.一種首烏制劑，其特征是該制劑由首烏藥材與其他輔料組成。
2.權利要求1所述的首烏制劑，其中首烏藥材經(jīng)粉碎成8-20目粉末處理。
3.權利要求1中的首烏制劑，其制備中間體首烏苷粗提物的方法由以下步驟組成(1)首烏藥材粗粉加乙醇回流提取二次，過濾，得濾液。(2)濾液回收乙醇至無醇味，并濃縮得濃縮液1。(3)濃縮液1采用大孔樹脂分離，得到洗脫液。(4)洗脫液回收乙醇至無醇味，并濃縮得濃縮液2。(5)濃縮液2真空干燥得首烏苷粗提物粉末。
4.權利要求3的步驟(1)中所述的加乙醇回流提取的方法為第一次加6-10倍量30-70％乙醇回流提取30-60分鐘，過濾；第二次再加6-8倍量30-70％乙醇回流提取30-60分鐘。
5.權利要求3的步驟(2)所述的濃縮過程為減壓濃縮，濃縮溫度55～70℃，真空度為0.07～0.09Mpa，濃縮液液含生藥可為量為0.25～0.50g/l或相對密度為1.01～1.06。
6.權利要求3的步驟(3)所述的大孔樹脂可為D101、DM301、HPD100，洗脫劑為20％～70％乙醇，用量為8-10倍。
7.權利要求3的步驟(4)所述的回收乙醇和濃縮過程均為減壓進行，溫度55～70℃，真空度為0.07～0.09Mpa，濃縮液含生藥可為量為1.5～2.5g/ml或相對密度為1.05～1.25。
8.權利要求3的步驟(5)所述的真空干燥條件為，溫度55～70℃，真空度為0.07～0.09Mpa，干燥粉末含生藥可為量為15～25g/g，含首烏苷為50～70％。
9.首烏苷粗提物粉末，可應用于用常規(guī)方法制備膠囊劑、顆粒劑、片劑。
10.權利要求3的步驟(2)所述的濃縮液，加調味劑以及防腐劑，調節(jié)PH值為5.5～7.0；精濾，灌裝，滅菌，得口服液。
11.權利要求6和7所述的首烏制劑可應用于制備治療脂肪肝藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥首烏制劑的制備方法。本發(fā)明通過首烏的粉碎，制成粉末，再經(jīng)過提取、濃縮、分離、干燥，得到首烏苷粗提物，再制成口服制劑。該制劑方法可在制備治療脂肪肝藥物過程中應用。
文檔編號A61P1/00GK1672719SQ20041002956
公開日2005年9月28日 申請日期2004年3月24日 優(yōu)先權日2004年3月24日
發(fā)明者呂圭源 申請人:呂圭源, 浙江中醫(yī)學院